Study on Effect of Imperatorin from Radix Angelicae Dahurica on Washed Platelet Aggretation

目的:观察白芷提取物欧前胡素对洗涤血小板的影响.方法:分别以ADP和凝血酶诱导血小板聚集,考察欧前胡素对血小板聚集的影响.结果:欧前胡素有极显著降低对ADP和凝血酶诱导的血小板聚集率和聚集曲线斜率的作用(P＜0.01).通过比较凝血酶诱导的聚集曲线,给药组与空白对照组有显著性差异,说明欧前胡素对血小板的第二相聚集反应有抑制作用.结论:欧前胡素有抑制血小板聚集的作用,并对血小板释放和花生四烯酸代谢有影响.     

罗勒水提取物对ADP、凝血酶诱导的大鼠血小板聚集的影响

目的:探讨罗勒水提取物对二磷酸腺苷(ADP)、凝血酶诱导的大鼠血小板聚集的影响。方法:60只Wistar大鼠随机分为6组:生理盐水组、8.8mg/kg阿司匹林组、4.7mg/kg丹参滴丸组及200、300、500mg/kg罗勒水提取物3个剂量组,采用比浊法测定各组大鼠ADP、凝血酶诱导的血小板聚集率和抑制率。结果:与生理盐水组相比,罗勒水提取物3个剂量对ADP和凝血酶诱导的血小板聚集有明显的抑制作用(P均<0.05),作用强度与阿司匹林相似,与丹参滴丸组相比差异无统计学意义(P>0.05),其中200、300、500mg/kg罗勒水提取物对ADP、凝血酶诱导的大鼠血小板聚集率分别为42.93%、53.81%、60.16%、60.43%和55.34%、59.41%。结论:罗勒水提取物对ADP、凝水酶诱导的大鼠血小板聚集具有抑制作用。     

丹参粉针剂对ADP、胶原和凝血酶诱导的血小板聚集的影响

目的观察丹参粉针对ADP、胶原和凝血酶诱导的血小板聚集的影响,以间接证明丹参粉针对心肌缺血的作用,为临床治疗心血管疾病提供理论依据。方法 50只大白鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、高、中、低剂量组,给药30min后,麻醉取血,制备富血小板血浆(PRP)及贫血小板血浆(PPP)。在血管中加入0.45mLPRP,37℃温孵3min后,分别加入50μL的ADP、50?l胶原(含50mg)及50μL凝血酶。然后用血小板聚集仪和血凝测试仪记录聚集曲线,并记录5min内最大聚集百分率。用血小板最大聚集率表示血小板最大聚集程度。血小板聚集抑制率(IRPA)=(对照组血小板聚集率-实验组血小板聚集率)/对照组血小板聚集率×100。结果丹参粉针对ADP、胶原和凝血酶诱导的血小板聚集有显著影响。结论丹参粉针改善心肌缺血,作用显著。     

灯盏乙素对血栓形成及血小板聚集的影响

目的研究灯盏乙素对血栓形成及血小板聚集的影响.方法采用电刺激大鼠颈动脉血栓模型评价灯盏乙素对血栓形成的影响;应用Born比浊法测定灯盏乙素体内外对兔血小板聚集功能的影响.结果灯盏乙素对电刺激大鼠颈动脉引起的血栓形成具有明显的对抗作用;灯盏乙素体外显著抑制AA和ADP和PAF诱导的兔血小板聚集,其半数抑制浓度(m ed ium inh ib itory concentration,IC50)分别为70.5、39.8和97.7mg/L;灯盏乙素静脉注射也能明显降低AA和ADP、PAF诱导的兔血小板聚集率,且呈剂量-效应关系.结论灯盏乙素有明显的抗血栓形成作用,其机制与其抗血小板聚集作用密切相关.     

苯并芘对血小板聚集和P-选择素表达的影响

目的:通过比较苯并芘对ADP、胶原和凝血酶三种刺激剂诱导血小板聚集和P-选择素表达的影响,探讨苯并芘对血小板活化的作用。方法:抽取健康志愿者静脉血液20 ml,采用聚集仪检测血小板在苯并芘和不同刺激剂下的聚集率,并用流式细胞仪检测血小板表面P-选择素的表达情况。结果:10μmol/L、1μmol/L和0.1μmol/L苯并芘均不能引起血小板聚集,经10μmol/L苯并芘孵育血小板后,在胶原和凝血酶的刺激下也不能增强血小板的聚集。但是,经苯并芘孵育后的血小板在ADP的刺激下聚集率达到(80±10)%,与未经苯并芘孵育的血小板相比差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测P-选择素的表达结果显示苯并芘孵育后的血小板能在ADP诱导下P-选择素表达增强(P<0.01),而凝血酶则不能引起该改变。结论:苯并芘刺激ADP诱导的血小板聚集和P-选择素表达增强很大程度上是通过ADP介导的信号通路。     

腺苷二磷酸在凝血酶信号传递过程中的作用

目的比较腺苷二磷酸（ADP）在两类凝血酶受体活化过程中对血小板聚集率以及血小板膜表面活化标记物表达的影响,探讨ADP在凝血酶信号传递机制中的作用。方法分别以凝血酶受体（PAR）活化肽PAR1-AP与PAR4-AP诱导血小板活化,观测腺苷三磷酸双磷酸酶（Apyrase,ADP抑制剂）ⅤⅡ作用过程中血小板聚集以及血小板膜表面糖蛋白（GP）Ib与P-选择素的改变。结果两类凝血酶受体都能诱导血小板活化,产生完全的聚集波,血小板膜GPIb则呈现先进行性减少后逐渐回升的可逆性变化,P-选择素水平持续升高。ApyraseⅤⅡ作用后,PAR1-AP诱导的血小板聚集反应受到部分抑制,而PAR4-AP诱导的血小板聚集反应未有明显改变。ApyraseVⅡ加速PAR1途径GPIb回复细胞表面,对PAR4途径中GPIb的改变则没有显著影响。两种活化途径中P-选择素的表达都不受ApyraseVⅡ的影响。结论ADP在凝血酶信号传递过程中发挥重要作用,其中PAR1途径与ADP参与密切相关．     

癌胚抗原相关细胞黏附分子源性多肽KM17对血小板活化作用的研究

目的 探讨癌胚抗原相关细胞黏附分子（CEACAM1）源性多肽KM17对血小板聚集、释放、黏附功能的影响。方法 采用血小板聚集仪观察多肽KM17对凝血酶、胶原、花生四烯酸（AA）、二磷酸腺苷（ADP）等激动剂诱导的血小板聚集的影响;流式细胞术观察多肽KM17对ADP激活血小板后P-选择素释放的影响;显微镜下观察多肽KM17对血小板静态黏附于胶原基质的影响。结果 多肽KM17能显著促进ADP诱导的血小板聚集且呈剂量依赖（P <0.05）,而对AA、胶原及凝血酶诱导的血小板聚集差异均无统计学意义（P>0.05）;此外,多肽KM17对ADP激活血小板后P-选择素释放及血小板静态黏附于胶原基质的差异也无统计学意义（P>0.05）。结论 多肽KM17可明显促进ADP诱导的血小板聚集,但对ADP活化血小板后P-选择素释放及血小板静态黏附于胶原基质未见明显作用。     

川芎嗪对ADP诱导血小板聚集的影响

<正> 北京制药工业研究所应用比浊法已证实,川芎嗪在体外具有抑制ADP引起的血小板聚集,并对已聚集的血小板有解聚作用。本文则以ADP诱导血小板电泳减缓试验和用显微镜观察的ADP诱导血小板聚集试验,进一步阐明川芎嗪对ADP诱导血小板聚集的作用。为此,我们观察了川芎嗪在体外对25例正常人ADP诱导血小板电泳减缓率的影响,并与阿斯匹林和潘生丁作了比较,同时还观察了川芎嗪对ADP诱导血小板聚集率的影响。现将结果报告如下:     

毛葡萄叶水提物抑制血小板聚集的初步研究

目的探讨毛葡萄叶水提物（Gx）对血小板聚集的影响。方法分离健康人的血小板,与不同生药浓度的Gx于37℃孵育10 min后,检测胶原（collagen）和凝血酶（thrombin）诱导的人血小板聚集的变化。小鼠腹腔注射Gx后,分离小鼠血小板,检测二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集的变化。结果 Gx对2μg/ml collagen诱导的血小板聚集有显著抑制作用（P〈0.05）,且呈现Gx的剂量依赖性（P〈0.05）;只有0.01 mg/ml的Gx对0.1 U/mlthrombin诱导的血小板聚集有抑制作用,且不呈现Gx的剂量依赖性。同时,Gx可抑制ADP诱导的腹腔注射Gx的小鼠血小板聚集,且呈现ADP剂量依赖性。结论 Gx具有明显抗血小板聚集作用,为开发抗血栓药物提供了实验依据。     

冠心舒通胶囊的抗血小板聚集及抗动脉收缩作用

[目的]检测冠心舒通胶囊在治疗血栓栓塞性疾病中的疗效。[方法]对比冠脉舒通胶囊对二磷酸腺苷(ADP)和凝血酶诱导的大鼠血小板最大聚集率、抑制率;对比其对去甲肾上腺素和氯化钾(KCl)诱导的大鼠胸主动脉环收缩的舒张率。[结果]冠心舒通胶囊对ADP和凝血酶诱导的血小板聚集有抑制作用;对去甲肾上腺素和KCl诱导的大鼠胸主动脉收缩有舒张作用。[结论]冠心舒通胶囊对血栓栓塞性疾病有确切疗效。     

HPLC测定白芷药材中欧前胡素与异欧前胡素的含量

目的：建立白芷中欧前胡素与异欧前胡素的高效液相色谱含量测定方法。方法：色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,以甲醇-水（70∶30）为流动相,检测波长254 nm,流速1.0 ml/min。结果：欧前胡素在0.094 8~0.853 2μg/ml具有良好的线性关系（r=0.999 8）,异欧前胡素在0.150 0~1.350 0μg/ml内具有良好的线性关系（r=1.000 0）。欧前胡素的平均回收率为98.0%,RSD=0.7%;异欧前胡素的平均回收率为99.0%,RSD=1.1%。结论：本法简便、快速、准确,可用于白芷中欧前胡素与异欧前胡素的含量测定。     

白芷提取液加热过程中欧前胡素稳定性研究

目的:研究白芷提取液65℃和70℃加热过程中欧前胡素的浓度变化,为浓缩温度的设定提供依据。方法:采用高效液相色谱法,测定欧前胡素在65℃、70℃不同加热时间的浓度变化。结果:在65℃和70℃水浴恒温条件下,0～8 h欧前胡素浓度保持不变。结论:在65℃、70℃欧前胡素受热8 h浓度稳定。     

川白芷中欧前胡素含量测定方法的比较

目的:比较川白芷中欧前胡素的含量测定方法。方法:分别用《中国药典》2005年版白芷项下欧前胡素的HPLC测定方法及川白芷规范化种植(GAP)课题组建立的川白芷中三种香豆素成分的HPLC测定方法对六批川白芷药材中欧前胡素进行了含量测定。结果:药典方法中供试品溶液的制备方法更加简单、快速,且提取效率高。川白芷GAP课题组建立的方法可同时测定三种主要香豆素类成分的含量。结论:两种方法均可用于白芷药材的检验和质量控制。     

中药对Aβ25-35损伤的SH—SY5Y细胞的保护作用

目的：研究阿尔兹海默病（Alzheimer disease,AD）治疗常用中药熟地黄、黄芪等几种单味药及中药复方左归丸对β淀粉样蛋白（Aβ）产生及聚集的影响,以探讨中药对AD的保护作用。方法：用Aβ25-35对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞进行损伤,制备AD细胞模型。采用刚果红染色、MTT法检测熟地黄、黄芪、石菖蒲等中药对Aβ聚集的影响;Real—timePCR方法观察这几种中药的药物血清对细胞的β淀粉样蛋白前体（APP）基因、β-分泌酶、γ-分泌酶表达的影响。结果：刚果红染色结果显示,山茱萸、黄芪、当归和左归丸可以抑制Aβ25-35聚合,形成长的淀粉样原纤维;熟地黄、山茱萸、黄芪、当归、左归丸对Aβ所致细胞的损伤均有保护作用,并呈现剂量依赖关系;低浓度的石菖蒲及远志能够保护细胞,但高浓度的石菖蒲和远志对细胞无保护作用。实时定量PCR结果显示,熟地黄、黄芪、左归丸对APP、β-分泌酶及γ-分泌酶的mRNA表达均有不同程度的抑制;当归能抑制β-分泌酶mRNA的表达。结论：熟地黄、山茱萸、黄芪、当归等中药及左归丸对Aβ损伤的神经细胞均有保护作用,其可能是通过抑制APP、β-分泌酶及γ-分泌酶mRNA的表达,从而减少Aβ的产生及聚集、降低Aβ的沉积,以达到防治AD的作用。     

欧前胡素通过下调Mcl-1蛋白的表达诱导人肝癌细胞HepG2凋亡

目的：探讨欧前胡素对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法：将人肝癌细胞系HepG2用欧前胡素治疗,MTT法检测欧前胡素治疗后HepG2细胞的增殖抑制情况;通过流式细胞术和western blot检测欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导作用和Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)的表达;在HepG2细胞中转染pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体后再用欧前胡素治疗,检测欧前胡素对HepG2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应。结果：欧前胡素呈剂量和时间依赖性显著抑制HepG2细胞的增殖;欧前胡素能显著诱导HepG2细胞的凋亡和PARP的切割;欧前胡素治疗后,HepG2细胞的Mcl-1表达水平显著下降,当用pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体转染HepG2细胞后, 欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导活性显著下降。结论： 欧前胡素具有体外抗肝肿瘤的生物活性,其抗肿瘤效应的机制可能是通过下调Mcl-1蛋白的表达从而诱导细胞凋亡。     

高效液相色谱法测定不同产地白芷中欧前胡素和异欧前胡素含量

目的采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定不同产地白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量,为更好的评价不同产地白芷的质量提供依据。方法色谱柱:L ichrospher-C18(250×4.6 mm,5μm),柱温:30℃,流动相:甲醇-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL.m in-1。结果欧前胡素、异欧前胡素进样量分别在0.54~5.40μg、0.244~2.44μg范围内,呈现良好的线性关系。欧前胡素平均回收率99.020%,相对标准偏差(RSD)3.318%;异欧前胡素平均回收率97.528%,RSD 2.904%。欧前胡素平均含量为1.465 mg.g-1;异欧前胡素平均含量为0.575 mg.g-1。结论该测定方法简单,快速,重现性好,可作为该药材质量的控制方法。     

桃仁、甘草对血小板聚集功能的双相作用

本文就桃仁、甘草对SJAMP、ADP、AA、PAF诱导的血小板聚集功能的影响进行研究,发现甘草对ADP、AA诱导的血小板聚集具有抑制作用,其抑制作用甚至强于同浓度的桃仁;对由SJAMP诱导的血小板聚集,随浓度的不同,甘草、桃仁可表现为抑制及促进双相作用,对PAF诱导的血小板聚集,随浓度的不同,甘草亦表现为双相作用。     

舒筋通络外用颗粒质量标准的研究

目的：建立舒筋通络外用颗粒的质量标准。方法：采用薄层鉴别法对制剂中的当归、桂枝、独活、大黄进行定性鉴别;用高效液相色谱法测定大黄素、大黄酚的含量。结果：薄层色谱可明显地检出当归、桂枝、独活、大黄;高效液相色谱法测得大黄素、大黄酚含量之和为34.50～35.24mg/15g,大黄素在0.010～0.500μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为102.3%,RSD为0.93%（n=6）;大黄酚在0.025～1.250μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为100.4%,RSD为1.30%（n=6）。结论：本方法简单、准确、专属性好,可用于舒筋通络外用颗粒的质量控制。     

一测多评法测定无硫和低硫白芷中5种香豆素类成分的含量

目的 建立一测多评方法比较无硫和低硫白芷药材中5种香豆素类成分含量的差异,并验证方法准确性和可行性。方法 以欧前胡素为内参物,建立相对校正因子。计算4种香豆素成分含量,同时与外标法计算结果进行比较,验证该方法的可行性。结果 相对校正因子在不同实验条件下RSD均在3.0%以内,且一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著差异。结论 一测多评法可以用于无硫和低硫白芷药材中5种香豆素类成分含量测定。     

辨证论治神经性皮炎经验

目的：总结周宝宽主任医师辨证论治神经性皮炎经验。方法：以医案形式阐述神经性皮炎的病因、病机、证型、治法、方药。结果：神经性皮炎的病因病机,外为风湿热邪,内为情志内伤导致风湿热蕴肤,血虚风燥、肝郁化火而成。祛风、清热、利湿,养血、熄风、疏肝、泻火、止痒为基本治疗原则。常用防风、荆芥、蝉蜕、白鲜皮、刺蒺藜、苦参、全蝎、当归、生地黄、龙胆草、柴胡等中药。结论：辨证论治神经性皮炎有显著疗效。