Experimental Study on Infiuence of Gua-shi Decoction to Bcl-2 Expression of Primary Senile Rat Ovary

目的:探讨瓜石汤延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理.方法:选10～12月龄、阴道细胞学涂片显示动情周期长、动情周期紊乱者作为初老大鼠模型随机分组,灌药4周后处死,取同侧卵巢用于检测Bcl-2.结果:与模型组比较,瓜石汤组Bcl-2的表达均有所增强,其中瓜高组与模型组比较有统计学意义(P＜0.05).结论:瓜石汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

养肝和血方对初老雌性大鼠卵巢Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨养肝和血方对初老雌性大鼠卵巢Bcl-2和Bax表达的影响,并以此论证在围绝经前期从肝论治的思想。方法通过阴道细胞学观察,选择10～11个月龄自然衰老雌性大鼠30只,随机分为模型对照组、六味地黄汤组、养肝和血方组,另选4个月龄的雌性大鼠10只为青年对照组。灌胃3周后,采用免疫印迹法(Western-blot法)检测各组大鼠卵巢细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果与模型对照组、六味地黄汤组比较,养肝和血方组卵巢细胞Bcl-2蛋白表达明显增高,Bax蛋白表达明显降低,Bcl-2/Bax比值增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论养肝和血方有抑制初老雌性大鼠卵巢细胞凋亡作用,可能是养肝和血方延缓卵巢衰老的机制之一。     

加减温经汤对寒凝血瘀模型大鼠卵巢功能的影响

目的观察加减温经汤对寒凝血瘀模型大鼠卵巢功能的影响,探讨加减温经汤治疗寒凝血瘀型妇科疾病的作用机制。方法将大鼠置于0~1℃冰水中造成寒凝血瘀大鼠模型,采用阴道涂片检测大鼠动情周期;剖取子宫、卵巢,称重,计算子宫指数、卵巢指数;HE染色,光镜下观察子宫、卵巢组织形态学改变;采用放射免疫法测定血清生殖激素水平。结果各组大鼠子宫指数、卵巢指数之间差异无统计学意义;与正常组比较,模型组大鼠组织形态学异常,动情周期延长,血清生殖激素水平明显下降;与模型组比较,治疗组动情周期缩短,血清生殖激素水平明显升高;桃红组血清E2、P、LH、FSH明显升高;治疗组与桃红组比较动情周期缩短,血清E2、P明显升高。结论寒凝血瘀时内分泌紊乱,卵巢功能异常,加减温经汤可通过调节内分泌,改善卵巢功能而治疗寒凝血瘀型妇科疾病。     

补肾化痰方对多囊卵巢综合征大鼠性激素及卵巢形态学的影响

目的:观察补肾化痰方对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠性激素及卵巢形态学的影响。方法:采用皮下注射脱氢表雄酮造模法建立PCOS大鼠模型,60只造模大鼠随机分为模型对照组、二甲双胍组、补肾化痰方低剂量组、补肾化痰方高剂量组,另取15只大鼠为正常对照组,各组给予相应药物连续灌胃28 d。行阴道涂片、HE染色观察动情周期;用酶联免疫吸附测定法测定血清促黄体生成素、睾酮水平;行卵巢组织HE染色,光镜下观察卵巢组织形态学变化。结果:与对照组比较,模型组大鼠无规律的动情周期,血清促黄体生成素、睾酮水平升高,卵巢表面苍白、体积增大、黄体数目减少、呈多囊样改变。二甲双胍和补肾化痰方两个剂量组可明显降低模型大鼠血清促黄体生成素、睾酮水平,恢复大鼠动情周期,增加各级卵泡数目及黄体数目,改善卵巢形态学结构。与补肾化痰方低剂量组比较,补肾化痰方高剂量组降低睾酮水平更明显。结论:补肾化痰方可从总体上调节下丘脑-垂体-卵巢轴功能,降低多囊卵巢综合征大鼠促黄体生成素、睾酮水平,恢复大鼠动情周期,改善卵巢形态学结构。     

基于Bcl-2/Bax凋亡探讨仙子益真胶囊对大鼠卵巢储备功能减退的作用机制

【目的】基于Bcl-2/Bax凋亡途径,探讨仙子益真胶囊（熟地黄、菟丝子等）对卵巢储备功能减退大鼠的作用机制。【方法】选用动情周期规律的60只SPF级雌性大鼠,随机分为正常组,模型组,中药低、中、高剂量组,西药组,每组10只。除正常组,其余组别大鼠构建卵巢储备功能减退模型。造模14 d后给药,中药低、中、高剂量组分别给予0.625、1.25、2.5 g·kg-1·d-1仙子益真胶囊灌胃,西药组给予补佳乐、地屈孕酮灌胃序贯治疗。干预28 d后,选择动情间期取材,实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测卵巢组织凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3、p53 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测卵巢组织核转录因子kappaB(NF-κB) p65、子宫内膜ERα、PR的蛋白表达水平。【结果】与正常组比较,模型组卵巢组织Bcl-2 mRNA表达水平降低,Bax、Caspase-3、p53 mRNA表达水平升高,Bcl-2/Bax比率降低,卵巢组织NF-κB p65,子宫内膜ERα、 PR蛋白表达水平降低（均P<0.05）;与模型组比较,中药组卵巢组...     

耳针 山药对衰老雌性大鼠血清DHEA-S E2骨密度及其腺体影响的实验研究

目的：根据雌性卵巢机能增龄性衰减的特性,研究耳针、山药抗衰老的可能机制。方法：Wistar大鼠适应性喂养1周后随机分为：耳针组、山药组、耳针加山药组,并设置老年对照组和青年对照组。治疗6周后,测定各组血清DHEA、E2、卵巢、肾上腺及卵巢的病理生理改变。结果：耳针、山药能有效改善老年大鼠的内分泌状况和自由基代谢;预防骨密度的降低;延缓性腺衰退。结论：耳针、山药具有延缓衰老的作用,从性激素代谢方面看,其可能的作用机理是,通过延缓性腺衰退,调节DHEA、E2的合成及分泌,维持DHEA、E2、骨密度在体内的一定含量,使其发挥抗氧化、调节免疫等多方面的生物学效应,从而起到延缓衰老的作用。     

人参皂苷Rb1对化疗致卵巢早衰大鼠性激素影响

目的探讨人参皂苷皂苷Rb₁对环磷酰胺所致卵巢早衰大鼠性激素的影响。方法选用60只2～3月龄具有正常动情周期雌性Wistar大鼠随机分对照组、给药组和模型组。采用放射免疫法检测卵巢早衰大鼠卵巢促卵泡成熟素（FSH）和雌二醇（E2）水平,同时对比观察人参皂苷皂苷Rb₁治疗后对其性激素水平的影响。结果给药组与模型组的E2浓度差异有统计学意义（P>0.05）;给药组的FSH浓度低于模型组（P<0.05）。结论 Rb₁可能是通过上调E2水平、下调FSH水平减少卵巢颗粒细胞的凋亡,进而对化疗所致卵巢早衰起到一定的治疗作用,延缓其衰老。     

中药天年饮对衰老大鼠脑γ-氨基丁酸含量的影响

目的:观察衰老大鼠不同脑区抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)含量的变化及中药天年饮的延缓衰老作用.方法:30只SD大鼠随机分为3组,正常组、衰老模型组和天年饮用药组,每组10只大鼠.D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型.采用高效毛细管电泳法检测各组大鼠大脑皮质、海马、下丘脑抑制性氨基酸GABA的含量.结果:衰老大鼠皮质、海马、下丘脑抑制性氨基酸GABA的含量明显下降(正常组大鼠与模型组大鼠比较:P＜0.01);中药天年饮可明显提高衰老大鼠各脑区GABA的含量(天年饮用药组大鼠与模型组大鼠比较:P＜0.01).结论:中药天年饮可改善衰老大鼠脑GABA的代谢,具有延缓脑老化的作用.     

miR-204-5p对卵巢早衰大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的调控机制

【摘要】目的 探讨微小RNA（miR）-204-5p对卵巢早衰（POF）大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及调控机制。方法 体外分离大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）,将含有miR-204-5p基因反义寡核苷酸序列的重组慢病毒载体转入BMSCs,获得稳定转染LV-rno-ASO-miR-204-5p的BMSCs细胞。选取动情周期正常的75只SPF级雌性Wistar大鼠,随机分为对照组、POF组、BMSCs组、shRNA组、shRNA-BMSCs组,每组各15只。除对照组外,均采用腹腔注射顺铂法制备POF模型。shRNA组、BMSCs组及shRNA-BMSCs组分别双侧卵巢注射慢病毒载体、BMSCs细胞及稳定转染慢病毒载体的BMSCs细胞,对照组和POF组注射生理盐水。观察各组动情周期恢复情况,比较各组干预前、干预28 d后血清促卵泡生成素（FSH）、雌二醇（E2）水平,观察卵巢组织形态、卵泡颗粒细胞凋亡率,检测卵巢组织miR-204-5p mRNA及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA和蛋白表达。结果 干预后,POF组大鼠动情周期未恢复;BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组动情周期均有所恢复,其中shRNA-BMSCs组动情周期恢复率均高于BMSCs组及shRNA组（P＜0.05）。病理染色显示,BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡及窦卵泡数量均多于POF组,但仍少于对照组（P＜0.05）;shRNA-BMSCs组上述各级卵泡数量多于BMSCs组和shRNA组（P＜0.05）。BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组血清FSH水平、卵巢颗粒细胞凋亡率、卵巢组织中miR-204-5p mRNA及MAPK、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量均低于POF组,且shRNA-BMSCs组低于BMSCs组和shRNA组,但仍高于对照组（P＜0.05）;BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组血清E2水平及卵巢组织Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量均高于POF组,且shRNA-BMSCs组高于BMSCs组和shRNA组,但仍低于对照组（P＜0.05）。shRNA组与BMSCs组比较,卵巢组织miR-204-5p mRNA相对表达量较低（P＜0.05）,各级卵泡数量、血清FSH、E2水平、卵巢颗粒细胞凋亡率及卵巢组织MAPK、Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 下调miR-204-5p表达可增强BMSCs对POF大鼠卵巢结构和功能的改善作用,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,可能与下调MAPK、Bcl-2、Bax、Caspase-3基因和蛋白表达有关。     

益胃汤对初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞超微结构的影响

目的:研究补益阳明津气方药益胃汤对初老雌性大鼠卵巢机能影响的作用机理。方法:电镜观察了益胃汤高,中,低剂量组对初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞超微结构的影响,并与西药己烯雌酚作比较。结果:益胃汤可丰富卵巢颗粒细胞内线粒体和滑面内质网,胞质内有大量脂滴,凋亡小体少见。结论:实验研究提示补益阳明津气方药能够有效延缓初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞衰老,改善卵巢内分泌功能。     

宁心红杞胶囊对雌性老龄大鼠垂体-卵巢轴功能的影响

目的宁心红杞胶囊对老龄大鼠雌激素水平及垂体、卵巢、肾上腺的影响。方法14月龄SD雌性大鼠随机分为模型组、阳性药组、宁红低剂量组、宁红中剂量组、宁红高剂量组,4月龄SD雌性大鼠为青年组。给药2个月后,取血、离心,放免（RIA）法测定血清中雌二醇（E2）、孕酮（P）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）的水平;垂体、卵巢、肾上腺脏器系数比较。结果宁心红杞胶囊使更年期大鼠血清中原下降的E2水平上升,上升的PSH和LH水平下降,增加垂体、卵巢、肾上腺的质量。结论宁心红杞胶囊能缓解垂体、卵巢、肾上腺的萎缩,调节垂体-卵巢轴功能。      

雷公藤多甙及雌孕激素治疗对大鼠卵巢Bcl-2和Bax表达的实验研究

目的探讨雷公藤多甙（TWP）致雌性大鼠生殖系统损害机制及防治方法。方法取50只SD雌性大鼠随机分为对照组,雌孕激素干预组（干预组）,雌孕激素治疗组（治疗组）,恢复组和雷公藤组。运用放免法测定血清性激素水平的变化,HE染色观察卵巢组织变化,免疫组化染色法检测卵巢组织颗粒细胞凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达水平。结果与对照组相比,雷公藤组和恢复组大鼠血清黄体生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH）水平明显升高,雌激素（E2）的分泌明显下降,且差异有统计学意义（P值均〈0．05）;卵巢组织明显受损,各级卵泡明显减少,卵泡闭锁较多,干预组各指标则无明显改变;大鼠颗粒细胞凋亡蛋白Bcb2的表达在雷公藤组明显低于对照组,而干预组及治疗组均高于雷公藤组;Bax蛋白在各组的表达则相反（P〈0．01）,其中干预组与对照组无明显差异（P〉0．05）。结论TWP可致雌性大鼠生殖系统的损害,雌孕激素替代治疗对卵巢功能有较好的保护作用,其机制可能与Bcl-2蛋白表达上调以及Bax表达下凋有关。     

茵陈术附汤对阴黄证大鼠肝细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的　观察阴黄证大鼠肝细胞凋亡和凋亡相关蛋白Bcl 2、Bax的表达以及茵陈术附汤对其的影响。方法　 48只大鼠随机分为 4组 :正常对照组 ,阴黄模型组 ,阳黄对照组 ,茵陈术附汤组。采用TUNEL和免疫组化法检测大鼠肝细胞凋亡及Bcl 2、Bax表达。结果　阴黄证大鼠肝细胞凋亡程度明显高于阳黄及正常对照组 (P <0 .0 1) ,茵陈术附汤组肝组织Bcl 2蛋白表达明显高于阴黄模型组 (P <0 .0 5) ,且其Bax蛋白表达明显低于阴黄模型组 (P <0 .0 5)。结论　茵陈术附汤通过促进Bcl 2表达和抑制Bax表达阻断阴黄证大鼠肝细胞凋亡 ,可能是其治疗阴黄证的机制之一     

补肾助孕汤对雄激素致不孕大鼠的促排卵及卵巢IGF-1表达的影响

目的 探讨补肾助孕汤对雄激素致不孕大鼠(ASR)促排卵的作用机制.方法 选择9日龄SD龄雌性大鼠随机分为4组,正常对照组:皮下注射中性茶油;ASR模型组:皮下注射丙酸睾丸酮;中药组及西药组:ASR模型自81 d龄起,每天灌胃给药;连续28 d.采用阴道涂片测定大鼠动情周期及排卵率,采用ELISA法测定促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)及孕酮(P)水平;采用免疫组织化学sp检测卵巢细胞胰岛素样生长因子(IGF-1)表达.结果 补肾助孕汤可明显增加大鼠卵巢组织各级卵泡及黄体数目,恢复排卵功能;提高血清中FSH、LH及P水平,并且降低卵巢细胞中IGF-1的表达.结论 补肾助孕汤可通过调节卵巢局部因子IGF-1及相应激素,促进卵泡生长发育及排出.     

柴桂枣安汤对失眠模型大鼠的治疗作用及其机制

目的:研究柴桂枣安汤对对氯苯丙氨酸(p-Chlorophenylalanine,PCPA)所致失眠模型大鼠的治疗作用及机制.方法:雄性SD大鼠随机分成5组,即正常组、模型组、阳性药组(地西泮1 g/kg)和柴桂枣安汤高(30 g/kg)、低(15 g/kg)剂量组,每组5只.除正常组外,各组腹腔注射350 mg/kg ...     

保心康对心力衰竭大鼠心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的调节作用

[目的]观察保心康对腹主动脉缩窄致心力衰竭模型大鼠左心室肌细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的调节作用,并进行性别相关性分析。[方法]普通级SD大鼠32只,随机分为保心康组、模型组和假手术组,复制腹主动脉缩窄致心力衰竭模型,采用流式细胞仪进行胞内抗原定量检测Bax和Bcl-2蛋白表达率。[结果]模型组大鼠与假手术组相比,心脏和左心室质量及心脏质量指数均增加(P<0.05或P<0.01),Bax蛋白表达率未改变,Bcl-2表达率降低(P<0.05),故Bax蛋白表达率和Bcl-2蛋白表达率的比值(rBax/rBcl-2)高于假手术组(P<0.01),而保心康组上述指标与假手术组比较无显著性差异(P>0.05),但与模型组比较,则差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01),显示保心康对模型组的病理状况有改善作用,并使之基本恢复正常;其中3个组的雄性大鼠心脏和左心室质量及心脏质量指数均比雌性大鼠升高(P<0.05或P<0.01)。且Bcl-2蛋白表达率均比雌性大鼠低(P<0.05),但rBax/rBcl-2雌雄相仿(P>0.05)。[结论]保心康具有预防压力超负荷大鼠左心室肥厚的作用,可上调左心室心肌细胞Bcl-2的表达,下调Bax的表达,同时降低rBax/rBcl-2,从而抑制心肌细胞的凋亡;雌性大鼠与雄性相比,可能对压力超负荷具有更强的代偿能力;但保心康对雄性大鼠的保护作用可达到对雌性大鼠同样的水平。     

补肾调冲方对更年期综合征大鼠模型神经内分泌调节机制的研究

目的 研究补肾调冲方对更年期综合征大鼠模型神经内分泌的调节机制.方法将48只雌性Wister大鼠随机分为假手术组,模型组,补肾调冲方高、中、低剂量组,己烯雌酚组,每组8只.除假手术组外,其余各组大鼠行双侧卵巢切除手术复制更年期综合征模型,各组分别灌胃相应药物及生理盐水60 d,采用放射免疫分析法测定各组大鼠血清雌二醇(...     

1-磷酸-神经鞘氨醇预防化疗大鼠卵巢功能损害的实验研究

 【目的】探讨1-磷酸-神经鞘氨醇(S1P)对环磷酰胺(CTX)导致的大鼠卵巢功能损害的保护作用及可能机制。【方法】40只雌性SD大鼠随机分为4组,即实验对照组(生理盐水组)、CTX组、S1P+NS组及S1P+CTX组,每组10只,于结束用药的第1～2周内的动情间期处死,观察卵泡数量的变化,并采用半定量RT-PCR检测卵巢组织Bcl-2及Bax的mRNA变化。【结果】S1P+CTX组的原始卵泡、初级卵泡和生长卵泡数与S1P+NS组、对照组的差别不显著(P>0.05),而CTX组的所有卵泡数均少于其余3组,其差异均有显著性意义(P<0.01)。卵巢组织中,S1P两组Bcl-2 mRNA的表达明显高于对照组及CTX组(P<0.01),Bax mRNA表达明显低于对照组及CTX组(P<0.01);而CTX组的Bcl-2 mRNA表达明显低于对照组及S1P两组(P<0.01),BaxmRNA表达明显高于对照组及及S1P两组(P<0.01)。【结论】S1P能预防CTX导致的大鼠卵巢功能损害,其抗凋亡作用可能是通过调节Bcl-2家族成员表达而实现。     

基于Nrf2通路研究二仙解毒方对弱精子症大鼠精子微环境的影响*

目的基于Nrf2信号通路研究二仙解毒方对弱精子症模型大鼠精子微环境的改善作用及可能机制。方法 使用奥硝唑法构建成熟雄性大鼠弱精子症模型,随机分为模型组、二仙解毒方低剂量组、中剂量组、高剂量组、左卡尼汀组,每组各12只,连续灌胃4周后,检测各组大鼠精子浓度、精子活动力、相关氧化应激指标、大鼠睾丸及附睾中基于Nrf2蛋白表达及mRNA表达。结果 二仙解毒方可增强弱精子症模型大鼠精子活动力,剂量越高,氧化应激指标改变越显著,二仙解毒方高剂量组可将模型组大鼠的精液抗氧化能力恢复至正常大鼠水平;二仙解毒方可促进大鼠附睾、睾丸组织Nrf2基因转录与蛋白表达。结论 二仙解毒方确有提高精子活动力的作用,其可能的作用机制为通过诱导上调生殖细胞内Nrf2 mRNA和蛋白表达,以改善弱精子症大鼠精液氧化应激状态,从而提高精子活动力。