谷胱甘肽对KLE与HEC 1 b子宫内膜癌细胞生长的影响

目的比较还原型谷胱甘肽（GSH）对KLE和HEC 1 b子宫内膜癌细胞生长的影响,并探讨其机制。方法①用GSH处理KLE和HEC 1 b子宫内膜癌细胞,噻唑蓝（MTT）法检测两型细胞的增殖水平;②用5 mmol/L GSH处理KLE和HEC 1 b子宫内膜癌细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平,酶标仪检测细胞内GSH和氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平,分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH Px）活性。结果在不进行处理的情况下,KLE子宫内膜癌细胞较HEC 1 b子宫内膜癌细胞的ROS水平及CAT活性较低,GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GSH Px活性较高（P＜0.01）。用GSH处理后,KLE子宫内膜癌细胞生长加快,细胞内ROS和GSH水平及GSH/GSSG比值下降,SOD、CAT和GSH Px活性降低（P＜0.01）;HEC 1 b子宫内膜癌细胞生长被抑制,细胞内ROS、GSH及GSSG水平下降,GSH/GSSG比值明显升高,CAT和GSH Px活性降低（P＜0.01）。结论GSH对两种子宫内膜癌细胞生长有明显不同的影响,与两种细胞内ROS水平和抗氧化系统活性有密切的关系。     

子宫颈鳞癌及腺癌细胞抗氧化能力的比较

目的比较子宫颈鳞癌及腺癌细胞对氧化应激的抵抗并探讨其机制。方法①H2O2处理子宫颈鳞癌(Siha、SW756)及腺癌(Hela、GH329)细胞,噻唑蓝(MTT)法检测两型细胞的增殖水平;②用250、250、650及800μmol/L H2O2分别处理子宫颈鳞癌(Siha、SW756)及腺癌(Hela、GH329)细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶标仪检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平,分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性。结果在不进行处理的情况下,子宫颈鳞癌(Siha、SW756)细胞较子宫颈腺癌(Hela、GH329)细胞有较低的ROS水平、GSH含量及GSH/GSSG比值,较高的GSSG水平及SOD和GPx活性。在氧化应激条件下,子宫颈鳞癌(Siha、SW756)细胞的GSH水平及GSH/GSSG比值明显下降,SOD、CAT和GPx活性升高;子宫颈腺癌(Hela、GH329)细胞的GSH水平及GSH/GSSG比值略有下降,SOD、CAT和GPx活性升高。结论子宫颈鳞癌及腺癌细胞处于不同的氧化还原状态,子宫颈鳞癌细胞较子宫颈腺癌细胞抗氧化能力弱,这可能与H2O2处理后鳞癌细胞ROS较腺癌细胞增多明显及两型细胞抗氧化系统有不同的应答有关。     

参杞强精颗粒对H2O2诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤的作用

目的 探讨参杞强精颗粒对过氧化氢H₂O₂诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激损伤的作用。方法 以小鼠睾丸间质细胞为细胞模型,用MTT法检测参杞强精颗粒对正常TM3的细胞毒性作用;以500 μmol/L H₂O₂诱导损伤TM3细胞4 h后复制氧化应激损伤模型,采用CCK-8法检测不同浓度参杞强精颗粒对H₂O₂损伤TM3细胞增殖活力的影响;分别给予参杞强精颗粒（0.4、0.8和1.6 mg/mL）干预处理24 h后,用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中睾酮分泌水平、一氧化氮（NO）、乳酸脱氢酶（LDH）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量及谷胱甘肽-S转移酶（GST）的活性;同时检测细胞内活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）及总抗氧化能力（TAOC）的含量;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测睾酮合成酶类固醇合成快速调节蛋白（StAR）、胆固醇侧链裂解酶（P450scc）、17β-羟基固醇脱氢酶（17β-HSD） mRNA表达。结果 参杞强精颗粒在浓度为0.05～2.50 mg/mL时对正常TM3细胞无毒性作用。与H₂O₂损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高TM3细胞增殖活率（P <0.05）。与H₂O₂模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组提高细胞上清液中睾酮水平和NO含量,增加GST活性,降低LDH和8-OHdG含量（P <0.05）。与H₂O₂损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组降低细胞内ROS、MDA含量,同时增强CAT、SOD和TAOC的活性（P <0.05）。与H₂O₂模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高睾酮合成酶StAR、P450scc、17β-HSD mRNA相对表达量（P <0.05）。结论 参杞强精颗粒对H₂O₂诱导睾丸间质细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能通过清除氧自由基、抗氧化应激损伤及促进睾酮合成有关。     

苦参素对H2O2诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤保护作用的研究

目的 研究苦参素（oxymatrine,OMT）对H₂O₂诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法 无菌环境下分离并培养乳鼠心肌细胞72h后随机分为空白对照组、H₂O₂（200μmol/L）干预组、OMT（20、40、60μmol/L）+H₂O₂（200μmol/L）干预组,每组设10个复孔。药物干预12h后,MTT法检测细胞存活率,采用氧敏感荧光探针DCFH-DA检测氧自由基（ROS）;测定细胞中抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）活性和丙二醛（MDA）含量,检测细胞培养液中心肌酶（AST、CPK、LDH）含量,流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测细胞凋亡并计算凋亡率,Western blot法检测细胞中caspase-3、NF-κB蛋白表达并进行半定量分析。结果 与H₂O₂（200μmol/L）干预组比较,OMT（40、60μmol/L）干预12h能够显著提高H₂O₂诱导损伤乳鼠心肌细胞存活率,降低ROS含量,改善SOD、GSH-Px、CAT活性并降低MDA含量,降低培养基中AST、CPK、LDH含量,降低细胞凋亡率,降低caspase-3、NF-κB蛋白表达,差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 苦参素可能通过改善抗氧化酶活性而提高氧自由基清除能力、抑制促凋亡蛋白表达而降低细胞凋亡,对H₂O₂诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤起到保护作用。     

褐藻多糖硫酸酯对H2O2诱导皮层神经元氧化应激损伤保护作用

目的 研究褐藻多糖硫酸酯对H₂O₂诱导小鼠皮层神经元氧化损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法 以含有B-27的Neurobasal培养基无血清体外原代培养新生小鼠大脑皮层神经元,H₂O₂（50 μmol/L）诱导氧化应激损伤模型,MTT法检测不同质量浓度（0.01、0.1、1 g/L）褐藻多糖硫酸酯对细胞存活的影响,生化法测定乳酸脱氢酶（LDH）释放量和丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性。结果 与H₂O₂处理组比较,0.1、1 g/L褐藻多糖硫酸酯能显著提高H₂O₂诱导损伤皮层神经元的存活率（P＜0.05）,并且降低培养液中LDH的漏出量,抑制细胞内MDA的生成,提高细胞内SOD的活性。结论 褐藻多糖硫酸酯对H₂O₂损伤皮层神经元具有显著的保护作用,其机制与抗氧化作用有关。     

干预GLP-1通路保护过氧化氢诱导心肌细胞凋亡的研究

目的 观察Exendin-4（Ex-4,GLP-1受体激动剂）对H₂O₂孵育的心肌细胞凋亡的影响,探讨GLP-1通路干预心肌细胞损伤的机制。方法 分离、培养心室肌细胞,分成5组∶A组为对照组;B组为H₂O₂干预组（100μmol/L,24h）;C组为H₂O₂+Ex-4（Ex-10nmol/L,孵育24h）组;D组为H₂O₂+Ex-4（Ex-20nmol/L,孵育24h）组;E组为H₂O₂+Ex-4+LY294002（Ex-20nmol/L,LY-5μmol/L,孵育24h）组。荧光染色测定各组细胞内活性氧簇（ROS）生成的水平;流式细胞仪测定各组细胞凋亡率情况。以Western blot法测定各组细胞凋亡蛋白及机制蛋白（PI₃K/AKT）的表达。结果 与H₂O₂孵育组相比,Ex-4干预使得心肌细胞内ROS水平下降,细胞凋亡率下降,在高剂量组（D组）均达到差异统计学意义（P<0.05）。同时,Ex-4干预可使p-AKT/AKT表达显著增加,caspase-3表达显著下降（P<0.05）;而这些效应可被LY294002共孵育（E组）所逆转。结论 干预GLP-1通路,可缓解H₂O₂诱导的心肌细胞凋亡,此效应至少部分是通过影响PI₃K/AKT途径实现的。     

miR-630对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞的增殖、凋亡与氧化损伤的影响

目的 探讨miR-630对H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞的增殖、凋亡与氧化损伤的影响。方法 将HLE-B3细胞分为对照组、H₂O₂组、H₂O₂₊阴性对照组(H₂O_2+miR-NC)和H₂O_2+miR-630抑制剂组(H₂O_2+miR-630 inhibitor)。qRT-PCR检测各组细胞中miR-630的表达水平。细胞集落形成实验和EdU实验分析各组细胞的增殖能力。细胞划痕愈合实验分析各组细胞的迁移能力。Annexin Ⅴ-FITC/PI分析各组细胞凋亡能力。试剂盒检测ROS水平和SOD含量。Western blot法检测各组细胞中Bcl-2和Akt蛋白的表达。结果 与对照组比较,H₂O₂组和H₂O_2+miR-NC组中miR-630的表达显著上调(P=0.000);与H₂O₂组和H₂O_2+miR-NC组比较,低表达miR-630使HLE-B3细胞中miR-630的表达降低。与对照组比较,H₂O₂组和H₂O_2+miR-NC组HLE-B3的增殖能力(P均<0.000)、迁移能力显著下降(P均=0.000),凋亡能力明显提高(P均=0.000);与H₂O₂组和H₂O_2+miR-NC组比较,H₂O_2+miR-630 inhibitor组HLE-B3细胞的增殖能力(P均<0.01)、迁移能力提高(P均<0.05),凋亡能力显著下降(P=0.000)。与对照组比较,H₂O₂组和H₂O_2+miR-NC组中ROS水平上调(P均=0.000)、SOD含量减少(P=0.000)、Bcl-2和Akt蛋白表达水平下调(P均=0.000);与H₂O₂组和H₂O_2+miR-NC组比较,H₂O_2+miR-630 inhibitor组中ROS水平下调(P均<0.01)、SOD含量增加(P<0.05)、Bcl-2和Akt蛋白表达水平上调(P<0.01,P<0.05)。结论 低表达miR-630可能促进H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞的细胞增殖、迁移,抑制细胞凋亡和减少氧化损伤,其可能与Bcl-2和Akt的表达上调相关。     

丹参多酚酸盐对过氧化氢所致乳鼠心肌细胞凋亡的影响

[目的] 研究丹参多酚酸盐（Salvianolate）对过氧化氢（H₂O₂）所致乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。[方法] 于无菌环境下分离并培养乳鼠心肌细胞72 h后随机分为空白对照组、H₂O₂组、丹参多酚酸盐（50、100和200 mg/L）+H₂O₂组,每组设8个复孔;给药干预24 h后,检测培养液中谷草转氨酶（AST）、磷酸肌酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）含量,四甲基噻唑蓝（MTT）法检测细胞存活率,通过流氏细胞术（Flow Cytometry）检测细胞凋亡状况并计算凋亡率;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测AKT mRNA和bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值,Western blotting法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、核转录因子-κB（NF-κB）表达并进行半定量分析,测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量。[结果] 与H₂O₂组比较,丹参多酚酸盐（100、200 mg/L）+H₂O₂组培养液中AST、CPK、LDH含量显著降低,细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低。细胞中细胞中AKT mRNA、bcl-2 mRNA表达显著上调,Bax mRNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,caspase-3、NF-κB表达显著下调,SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,上述差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。[结论] 丹参多酚酸盐对H₂O₂所致乳鼠心肌细胞凋亡具有抑制作用。     

银杏内酯B对H2O2诱导H9C2心肌细胞损伤保护作用研究

目的 研究银杏内酯B（ginkgolide B,GB）对H₂O₂诱导H9C2心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法 将对数生长期的H9C2心肌细胞随机分为4组：空白对照、H₂O₂（200μmol/L）干预、GB（100μmol/L）+H₂O₂（200μmol/L）干预、GB（200μmol/L）+H₂O₂（200μmol/L）干预,每组设10个复孔。经药物干预16h后观察各组细胞形态,采用MTT法检测细胞存活率;检测培养液中心肌酶（AST、CPK、LDH）活性;测定细胞中抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）活性和丙二醛（MDA）含量;酶联免疫法（ELISA）测定培养液中炎性因子（CRP、TNF-α、IL-1、IL-6）含量水平;采用流氏细胞术检测细胞凋亡状况并计算细胞凋亡率,采用反转录PCR（RT-PCR）技术检测细胞中bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值,Western blot法检测细胞中NF-κB蛋白表达并进行半定量分析。结果 与H₂O₂干预组比较,GB（100、200μmol/L）+H₂O₂（200μmol/L）干预组细胞培养液中AST、CPK活性和TNF-α、IL-6、CRP、MDA含量均显著降低,SOD、CAT活性显著升高,细胞凋亡率显著降低;bcl-2 mRNA表达显著上调、Bax mRNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;其中GB（200μmol/L）+H₂O₂（200μmol/L）干预组细胞生存状态明显改善、存活率显著升高,LDH活性、IL-1含量以及NF-κB蛋白表达量显著降低,细胞中GSH-Px活性显著升高,差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 GB对H₂O₂诱导损伤H9C2心肌细胞具有保护作用,作用机制可能与GB能够有效改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤,上调抑凋亡基因bcl-2表达、下调促凋亡基因Bax表达,提高bcl-2/Bax表达比值,下调NF-κB蛋白表达,降低炎性因子含量相关。     

GX-50抗皮肤衰老的研究

目的 研究GX-50抗皮肤衰老的作用。方法 通过在20月高龄小鼠背部涂抹GX-50,采用HE染色和免疫组织化学法对GX-50抗皮肤衰老的作用进行组织学观察。原代培养人皮肤成纤维细胞,采用H₂O₂诱导建立皮肤细胞衰老模型,分为空白对照组、DMSO组、GX-50组、H₂O₂组和GX-50预处理后H₂O₂处理组（GX-50+H₂O₂组）;采用β-半乳糖苷酶染色实验以及测定细胞分泌物丙二醛（MDA）和细胞内活性氧（ROS）含量检测GX-50在细胞水平的抗衰老能力。应用Draize兔眼刺激性实验评价GX-50的刺激性。结果 在组织学水平,GX-50可使高龄小鼠衰老的皮肤年轻化,增加胶原蛋白的表达。在细胞水平,GX-50可使人皮肤成纤维细胞β-半乳糖苷酶合成降低;GX-50组细胞MDA分泌量较空白对照组下降30.45%,GX-50+H₂O₂组较H2O2组下降61.46%,组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）;GX-50组细胞胞内ROS荧光值较空白对照组下降8.03%,GX-50+H₂O₂组较H2O2组下降8.36%,组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。Draize兔眼刺激性评分为0。结论 GX-50可以在一定程度上保护和延缓皮肤衰老,具有作为护肤品有效添加剂的应用前景。     

Tamarind seed coat extract restores reactive oxygen species through attenuation of glutathione level and antioxidant enzyme expression in human skin fibroblasts in response to oxidative stress

ObjectiveTo investigate the role and mechanism of tamarind seed coat extract (TSCE) on normal human skin fibroblast CCD-1064Sk cells under normal and oxidative stress conditions induced by hydrogen peroxide (H₂O₂).MethodsTamarind seed coats were extracted with boiling water and then partitioned with ethyl acetate before the cell analysis. Effect of TSCE on intracellular reactive oxygen species (ROS), glutathione (GSH) level, antioxidant enzymes such as superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx) and catalase activity including antioxidant protein expression was investigated.ResultsTSCE significantly attenuated intracellular ROS in the absence and presence of H₂O₂ by increasing GSH level. In the absence of H₂O₂, TSCE significantly enhanced SOD and catalase activity but did not affected on GPx. Meanwhile, TSCE significantly increased the protein expression of SOD and GPx in H₂O₂-treated cells.ConclusionsTSCE exhibited antioxidant activities by scavenging ROS, attenuating GSH level that could protect human skin fibroblast cells from oxidative stress. Our results highlight the antioxidant mechanism of tamarind seed coat through an antioxidant enzyme system, the extract potentially benefits for health food and cosmeceutical application of tamarind seed coat.     

褐藻多糖硫酸酯对组织蛋白酶B活性影响的实验研究

目的研究褐藻多糖硫酸酯(Fucoidan)对氧化应激损伤及溶酶体组织蛋白酶B活性的影响,探讨Fucoidan用于中枢神经系统疾病的作用机制。方法 50μg.L-1神经生长因子(nerve growth factor,NGF)分化大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞(differentiated PC12,dPC12)7 d,0.5 mmol/L H2O2刺激30 min,给予10 mg.L-1Fucoidan干预。酶标仪检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性;荧光底物法检测细胞质中溶酶体组织蛋白酶B的活性;酶-底物法检测不同浓度Fucoidan(0.1、1、10、50、100 mg.L-1)对人肝脏溶酶体组织蛋白酶B活性的影响。结果氧化损伤后细胞中ROS显著升高达正常水平的185.2%,伴有SOD下降,溶酶体组织蛋白酶B活性上升至正常水平的236.7%;Fucoidan对SOD活性没有明显影响,能降低ROS水平,且对细胞质内和人肝脏溶酶体组织蛋白酶B的活性均具有抑制作用。结论 Fucoidan降低活性氧含量抗氧化损伤的作用可能与其抑制溶酶体组织蛋白酶B的活性有关。     

Hepatoprotective and Antioxidant Activity of Rhizome of Podophyllum hexandrum against Carbon Tetra Chloride Induced Hepatotoxicity in Rats

Objective To test possible antioxidant activity of n-hexane extract of Podophyllum hexandrum under in vitro and in vivo conditions. Methods The in vitro antioxidant activity was evaluated by the ability of the extract to interact with the stable free radical DPPH, Superoxide (O2-), Hydroxyl (OH-), Hydrogen peroxide (H2O2) radicals, and reducing power ability of the extract was also evaluated. Under in vivo conditions the extract was evaluated for its hepatoprotective activity by measuring different biochemical parameters, such as serum alanine aminotransaminase, serum aspartate aminotransaminase and serum lactate dehydrogenase and antioxidant enzymes. Antioxidant status was estimated by determining the activities of antioxidative enzymes, glutathione reductase (GR), glutathione peroxidase (GPx), glutathione-S-transferase (GST) and superoxide dismutase (SOD), and by determining the levels of reduced glutathione (GSH) and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). Results Hexane extract of P. hexandrum exhibited good radical scavenging capacity in neutralization of DPPH, O2-, OH -, and H2O2 radicals in a dose dependent manner. n-hexane extract of Podophyllum hexandrum at the doses of 20, 30, and 50 mg/kg-day produced hepatoprotective effect by decreasing the activity of serum marker enzymes, while it significantly increased the levels of glutathione (GSH), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR), super oxide dismutase (SOD), and glutathione-S-transferase (GST) in a dose dependant manner. The effect of n-hexane extract was comparable to that of standard antioxidant vitamin E. Conclusion The extract of Podophyllum hexandrum possess free radical scavenging activity under in vitro conditions and could protect the liver tissue against CCl 4 induced oxidative stress probably by increasing antioxidant defense activities.     

丹参酮ⅡA对2型糖尿病患者氧化应激的作用

目的探讨丹参酮ⅡA对2型糖尿病患者氧化应激的影响作用。方法选取2型糖尿病患者53例（其中51例完成研究）为DM组,选取糖耐量正常的健康体检者（OGTT正常）50例作为正常对照组（NC组）。DM组在原降糖的基础上,每日加用丹参酮ⅡA磺酸钠注射液60mg,共2周。于治疗开始时和治疗后2周,抽取早晨空腹外周静脉血检测血清超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH）、活性氧（ROS）活性和丙二醛（MDA）水平以及空腹血糖和胰岛素水平等。观察DM组患者治疗前后氧化应激指标变化、相关临床指标并与NC组作比较。结果DM组的ROS和MDA显著高于NC组（P〈0.05或P〈0.01）,而GSH和SOD显著低于NC组（P〈0.05）。与治疗前相比,治疗后DM组患者的ROS和MDA明显下降（P〈0.05）、GSH和SOD明显升高（P〈0.05）,经校正血糖变化值后,差异仍具有统计学意义（P〈0.05）。结论丹参酮ⅡA对2型糖尿病患者具有抗氧化应激作用,可用于糖尿病及其并发症的防治。     

顺势疗法药物山金车30C通过上调核苷酸切除修复基因的表达减少紫外线照射后大肠杆菌的DNA损伤

目的：检测高度稀释的顺势疗法药物山金车30C是否能够调节暴露于紫外线照射下的大肠杆菌的核苷酸切除修复基因的表达。方法：大肠杆菌在标准培养基中培养至对数阶段,然后接受亚致死剂量的紫外线照射（25和50J／m。分别照射22．5和45s）。接受不同剂量紫外线照射的大肠杆菌分别与山金车30C及安慰剂30C共同培养,90min后检测其DNA损伤情况及氧化应激状态。采用多种方法及指标如彗星实验、梯度凝胶电泳、细胞内活性氧生成及测量其他生物活性指标如过氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽衡量DNA损伤情况及细胞氧化应激状态。逆转录聚合酶链反应检测大肠杆菌细胞紫外线损伤修复基因uvrA、B、c（核苷酸切除修复基因）mRNA的表达情况。结果：接受照射后的大肠杆菌出现了DNA损伤及氧化应激反应,表现为细胞内活性氧生成增加及过氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽活性降低。与安慰剂组相比,山金车30C降低了大肠杆菌的DNA损伤及氧化应激反应,表现为细胞内活性氧生成减少及过氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽活性增强。与对照组相比,山金车30C上调了大肠杆菌细胞紫外线损伤修复基因的表达。结论：山金车30C能够通过上调紫外线损伤修复基因的表达修复紫外线引起的大肠杆菌细胞的DNA损伤,并通过减少细胞内活性氧的生成及调节抗氧化酶活性降低细胞的氧化应激反应。     

活血温通方对缺氧心肌细胞氧化应激和凋亡的影响

[目的] 观察活血温通方对缺氧诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用。[方法] 采用H9c2心肌细胞进行缺氧无血清刺激,同时加入活血温通方含药血清和空白血清处理4 h后,检测细胞活力、Caspase 3和Caspase 8活性、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶 （CAT）、丙二醛（MDA）含量,并进行二氢乙啶（DHE）染色观察活性氧（ROS）变化,以及Hoechst染色观察细胞凋亡情况,对比分析各组之间差异。[结果] 与对照组比较,缺氧组H9c2心肌细胞活力、SOD和CAT活性显著下降（P<0.01）,Caspase 3和Caspase 8活性、MDA含量明显升高（P<0.01）,同时累积的ROS含量和细胞凋亡数量增多（P<0.01）。活血温通方含药血清能提升细胞活力、增加SOD、CAT活性（P<0.01）,明显降低MDA水平、Caspase 3和Caspase 8活性（P<0.01）,同时减少ROS累积,抑制心肌细胞凋亡（P<0.01）。[结论] 通过抑制细胞凋亡、减轻氧化应激,活血温通方一定程度上可以保护心肌细胞免受缺氧损伤。     

Cellular oxidative damage of HEK293T cells induced by combination of CdCl<Subscript>2</Subscript> and Nano-TiO<Subscript>2</Subscript>

This study investigated the conjoined cellular oxidative damage of human embryo kidney 293T(HEK293T) cells induced by cadmium chloride(CdCl2) and nanometer titanium dioxide(nano-TiO2).RT-PCR technique was used to detect the expressions of Heme oxygenase-1(HO-1) and 8-oxoguanine DNA glycosylase(OGG1).The activities of superoxide dismutase(SOD) and catalase enzyme(CAT) and concentrations of reactive oxygen species(ROS) and maldondialdehyde(MDA) were measured by different approaches.The results showed that CdCl2 and nano-TiO2 at a low concen-tration of 0.75 total toxic unit(TU) exerted an additive effects on HO-1 gene expression,CAT activities and MDA concentrations.When the total TU was increased to 1 or 1.25 TU,the interaction was syner-getic.Moreover,the mixture with high proportion of CdCl2 produced an additive effect on the OGG1 gene expression,and the interaction was changed to be synergetic when the concentration of CdCl2 was lower than or equal to that of nano-TiO2.Synergetic effects of CdCl2 and nano-TiO2 on cellular oxida-tive damage of HEK293T cells were found as indicated by the changes in the SOD activities and ROS concentrations.It was concluded that CdCl2 and nano-TiO2 exerts synergistic effects on the cellular oxidative damage of HEK293T cells,and the sensitivity of these indicators of oxidative damage varies with the proportion of CdCl2 and nano-TiO2 in the mixture.     

CLA对2型糖尿病大鼠肝脏线粒体呼吸链酶活性及氧化应激的影响

目的:观察共轭亚油酸(CLA)对2型糖尿病(DM2)大鼠肝脏线粒体呼吸链酶活性及肝内氧化应激(OS)的影响.方法:将60只SD大鼠随机分为阴性对照组,DM组和CLA治疗组.高糖、高脂及高胆固醇饲料诱导胰岛抵抗联合ip链脲佐菌素建立大鼠DM2模型.血糖仪检测血糖浓度,放免法检测血清胰岛素水平,生化法测定肝组织丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,Clark氧电极法观察大鼠肝脏线粒体呼吸链酶活性.结果:成功诱导大鼠DM2模型,与对照组比,DM组大鼠血糖浓度、血清胰岛素水平、肝脏MDA含量明显升高(P＜0.05),同时肝脏线粒体呼吸链酶活性以及抗氧化酶活性(SOD,CAT)及GSH显著降低(P＜0.05),与DM组相比,CLA治疗组大鼠以上各项指标均有改善,并存在一定的剂量效应关系.结论:CLA通过抑制氧化应激增强大鼠肝脏线粒体呼吸链酶活性改善了DM大鼠肝脏的能量代谢障碍,对DM引起的氧化损伤有保护作用.     

Effect of Oenanthe Javanica Extract on Antioxidant Enzyme in the Rat Liver

Background:

Oenanthe javanica (O. javanica) has been known to have high antioxidant properties via scavenging reactive oxygen species. We examined the effect of O. javanica extract (OJE) on antioxidant enzymes in the rat liver.

Methods:

We examined the effect of the OJE on copper, zinc-superoxide dismutase (SOD1), manganese superoxide dismutase (SOD2), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPx) in the rat liver using immunohistochemistry and western blot analysis. Sprague-Dawley rats were randomly assigned to three groups; (1) normal diet fed group (normal-group), (2) diet containing ascorbic acid (AA)-fed group (AA-group) as a positive control, (3) diet containing OJE-fed group (OJE-group).

Results:

In this study, no histopathological finding in the rat liver was found in all the experimental groups. Numbers of SOD1, SOD2, CAT, and GPx immunoreactive cells and their protein levels were significantly increased in the AA-fed group compared with those in the normal-group. On the other hand, in the OJE-group, numbers of SOD1, SOD2, CAT, and GPx immunoreactive cells in the liver were significantly increased by about 190%, 478%, 685%, and 346%, respectively, compared with those in the AA-group. In addition, protein levels of SOD1, SOD2, CAT, and GPx in the OJE-group were also significantly much higher than those in the AA-group.

Conclusion:

OJE significantly increased expressions of SOD1 and SOD2, CAT, and GPx in the liver cells of the rat, and these suggests that significant enhancements of endogenous enzymatic antioxidants by OJE might be a legitimate strategy for decreasing oxidative stresses in the liver.