单核细胞趋化蛋白—1在大肠杆菌中的表达

将人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的ｃＤＮＡ插入融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，构建成质粒ｐＧＥＸ／ＭＣＰ转化大肠杆菌ＪＭ１０９，经ＩＰＴＧ诱导后合成ＧＳＴ－ＭＣＰ－１融合蛋白。用１２％ＳＣＳ－ＰＡＧＥ检测在３０ｋＤ左右有新生蛋白条带出现，表达量约占菌体总蛋白的３１．７％，趋化实验证明，该产物具备明确的单核细胞趋化活性。     

高浓度的糖刺激人肾小球内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的 :探讨高浓度的糖对培养的人肾小球内皮细胞 (HUGEC)表达单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)的影响 ,以及HUGEC的条件培养基对单核细胞 (MC)的趋化作用及抗MCP 1抗体对MC迁移的影响。方法 :采用原位杂交技术和细胞ELISA法 ,观察MCP 1的表达 ;用改良的Boyden小室微孔滤膜法 ,测定高浓度的糖刺激HUGEC后的条件培养基 ,对MC的趋化作用 ,以及抗MCP 1抗体对MC迁移的影响。结果 :(1)在低浓度的糖(含 5 .5mmol/LD 葡萄糖 )条件下培养的HUGECMCP 1mRNA呈弱表达。高浓度的糖 (含 2 5mmol/LD 葡萄糖 )刺激后 ,8h即出现MCP 1表达增强 ,于 16h达高峰。(2 )高浓度的糖刺激HUGEC后的条件培养基 ,对MC具有明显的趋化作用 ;抗MCP 1抗体可抑制其作用。结论 :在高浓度的糖诱导下 ,人HUGECMCP 1的表达增强 ,其条件培养基对MC具有趋化作用 ,从而可能招引单核细胞迁入内皮下间隙。     

人单核细胞趋化蛋白—1（MCP—1）cDNA的克隆和序列测定

人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）是由多种细胞产生的一种趋化因子。它不但能趋化单核细胞还能激活单核细胞，在机体防御。炎症恢复和抗肿瘤等方面起重要作用。本文利用ＲＴ－ＰＣＲ方法克隆了人ＭＣＰ－１ｃＤＮＡ，经核鞋酸序列测定，除第１２位密码子为ＴＧＴ与国外报道的ＴＧＣ不同，但编码相同的氨基酸半胱氨酸外，其余序列完全相同。     

单核细胞趋化蛋白-1在CNS疾病中的表达

中枢神经系统(CNS)并非免疫豁免区是最近几年来神经免疫学研究的进展之一,在用细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱发的炎症反应中,CNS脑实质内的小胶质细胞、脑室周围、脉络膜、室管膜细胞均可检测到受体TLR2、TLR4(Toll—like recep—     

单核细胞趋化蛋白—1对胃癌荷瘤鼠作用的研究

肿瘤相关巨噬细胞对恶性肿瘤的生长、转移和预后,可能有着相当程度的影响。巨噬细胞在肿瘤局部的浸润与其相关的趋化因子的关系十分密切。人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)为趋化因子超家族的成员之一[1]。本实验利用原核表达的MCP-1和胃癌细胞系SGC7901建立的荷瘤裸鼠模型,对MCP-1在胃癌的成瘤性及导致肿瘤相关巨噬细胞聚集的作用进行了观察和测定。1 材料和方法1.1 材料含人MCP-1 cDNA的质粒pUC19-MCP,由本校分子生物学研究所王字玲博士惠赠。融合表达载体pGEX-4T-1由本校分子生物学研究所提供。胃癌细胞系SGC7901由本研究…     

大鼠急性甲醇中毒大脑皮质单核细胞趋化蛋白-1蛋白的表达

目的　观察大鼠急性甲醇中毒后单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）在大脑皮质的表达变化。 方法　应用通有混合气体（N2O/O2）的密闭有机玻璃箱并灌胃相应剂量甲醇溶液复制急性高剂量和低剂量甲醇中毒大鼠模型,运用Western Blot和免疫组化染色检测不同时间点大脑皮质中MCP-1的表达变化。 结果　Western Blot显示急性甲醇中毒后低剂量组和高剂量组MCP-1蛋白表达在12 h明显升高（P<0.01）,24 h达高峰,然后逐渐下降,3 d仍高于对照组（P<0.01）。高剂量组MCP-1蛋白表达在12 h和24 h高于低剂量组（P<0.05）,3 d 组MCP-1的表达无显著差异。免疫组化染色显示对照组大鼠大脑未见明显MCP-1阳性表达,急性甲醇中毒后,高剂量组24 h MCP-1阳性表达数增加,3 d达高峰,和对照组相比有显著差异（P<0.01）,阳性表达多集中在梨状皮质,1周阳性反应减少,但与对照组相比仍有显著差异（P<0.01）。 结论　大鼠急性甲醇中毒后,脑组织MCP-1蛋白表达显著增高并持续一定时间,可能参与了脑组织病理变化过程,程度与甲醇中毒剂量有关。     

单核细胞趋化蛋白-1在糖尿病肾病中的研究进展

糖尿病肾病（ｄｉａｂｅｔｅｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ＤＮ）的发病机制十分复杂 ,已基本确认的病因有 :高糖 -蛋白激酶Ｃ(ＰＫＣ）途径 ,蛋白质的非酶糖化 -晚期糖化终产物（ａｄ＿ｖａｎｃｅｄｇｌｙｃａｔｉｏｎｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ，ＡＧＥｓ）途径 ,醛糖还原酶（ＡＲ） -多元醇途径 ,氧化应激（ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ）途径 ［１，２］,以及局部肾素血管紧张素系统（ｒｅｎｎｉｎａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｓｙｓ ｔｅｍ，ＲＡＳ）等。单核细胞趋化蛋白 -１（ｍｏｎｏｃｙｔｅｃｈｅｍｏａ＿ｔｒａｃｔｔａｎｔｐｒｏｔｅ…     

尘螨抗原对支气管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的探讨屋尘螨（Dermatophagoides pteronyssinus，Derp）抗原对支气管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响。方法使支气管上皮细胞BEAS-2B暴露于系列不同浓度（0．02、0．2．2、20μg／ml）的Derp抗原24h至96h，分别观察各时间点细胞的表现，然后用酶联免疫法（ELISA）检测其细胞上清MCP-1的浓度表达。结果正常为未加Derp抗原。表现为单层细胞完全平铺；实验各组在抗原的刺激下，表现为随着浓度和时间的增加，细胞逐渐变瘦长，细胞间距逐渐增大；在无抗原刺激因素培养条件下的对照组，MCP-1释放水平很低，而在加入Derp抗原组，引起细胞分泌MCP-1蛋白水平的显著增加，并随着时间和浓度增加，MCP-1蛋白的表达水平呈上升趋势，特别是在高浓度组，即20μg／ml抗原组，各时间点MCP-1的表达差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论Derp抗原刺激气道上皮细胞，引起支气管上皮损伤和脱落等气道炎症反应，激发单核巨噬细胞产生大量的MCP-1，促成和加重气道炎症反应，因此认为MCP-1可能参与哮喘疾病的某些过程。     

法舒地尔对大鼠动脉粥样硬化斑块中单核细胞趋化蛋白-1表达的抑制作用

目的探讨Rho/Rho激酶途径在大鼠动脉粥样硬化形成过程中的作用及机制。方法将30只健康雄性Wistar大鼠（体质量220～250g）,随机分为正常对照组、动脉硬化组和法舒地尔组,每组10只。正常对照组行假球囊损伤手术给予正常饮食,余两组每只大鼠给予30万U/kg维生素D3右下肢肌肉注射后用球囊行动脉拉伤,在基础饲料中加入2%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶、维生素D3粉剂（1.25×10^6U/kg饲料）、3%猪油等饲养。法舒地尔组同时给予法舒地尔5mg/kg体质量,每日2次腹腔注射。喂养9周后空腹24h抽血并处死,检测血脂水平,自主动脉弓下约1cm处留取动脉组织1cm用4%甲醛溶液固定,行HE染色,用免疫组织化学法检测斑块中血管紧张素Ⅱ-1型受体（AT1R）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）蛋白的表达。结果动脉硬化组均形成了典型的粥样斑块;免疫组化半定量分析表明：动脉硬化组与正常对照组和法舒地尔组比较,AT1R和MCP-1蛋白均明显升高（P〈0.001）,法舒地尔组与正常对照组比较,AT1R和MCP-1蛋白的表达也明显升高,有明显差异（P〈0.05）。结论Rho/Rho激酶途径在大鼠动脉粥样硬化的形成过程中参与了重要的作用,该途径的激活与RAS系统的激活有密切关系,Rho激酶抑制剂的抗动脉粥样硬化作用可能是通过抑制了MCP-1的表达而起作用。     

人单核细胞趋化蛋白－1（MCP－1）基因的PCR扩增、克隆及序列分析

本文报道用植物血凝素（ＰＨＡ）诱导健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ，包括单核细胞和淋巴细胞），提取细胞总ＲＮＡ，反转录合成ｃＤＮＡ第一链，再以其为模板进行ＰＣＲ，得到了编码成熟单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的ｃＤＮＡ。该ｃＤＮＡ用ＥｃｏＲＩ、ＢａｍＨＩ双酶切后，回收含ＭＣＰ－１基因的长约２８０ｂｐ的ＤＮＡ片段，插入到经ＥｃｏＲＩ、ＢａｍＨＩ双酶切的ｐＵＣ１９载体中，进行序列分析。结果表明，ＭＣＰ－１中第１２个氨基酸的编码序列与国外报道的不同。由ＴＧＴ变成了ＴＧＣ，但编码相同的氨基酸即半胱氨酸，其余的编码序列则完全相同，说明ＭＣＰ－１的基因型可能存在着多态性。     

单核细胞趋化蛋白-1与糖尿病肾病

单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是一种特异性趋化因子，在糖尿病肾病 (diabetic nephropathy，DN)的发生发展中起重要作用。代谢性因素如高糖（HG）、糖基化白蛋白（glycated albumin， Gly-Alb）、氧化应激，蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)等和血流动力学因素如肾素-血管紧张素系统（RAS）等均可上调肾小球内皮细胞、系膜细胞 (mesangial cell，MC)、小管上皮细胞（tubulus epithelial cells，TECs）中MCP-1基因和蛋白的表达，使单核/巨噬细胞在肾组织中聚集，通过多种机制引起肾脏损伤。     

细菌脂多糖诱导单核细胞趋化蛋白-1在小鼠睾丸中表达

目的:正常睾丸间质组织中存在一定数量的巨噬细胞群和淋巴细胞,炎症时这些细胞大量增加,这一机制还未完全解明.本研究探讨正常睾丸和系统感染后睾丸中单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chenoattractant protein-1,MCP-1)的表达变化.方法:给予小鼠一次性腹腔注射0.4 μg/kg细菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS),用半定量RT-PCR和Western blot方法检测3、6、12、24、48小时后单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA和蛋白质在睾丸中的表达情况,并用组织免疫荧光染色确定MCP-1在睾丸中的部位.结果:MCP-1 mRNA和蛋白质在正常小鼠睾丸中低剂量表达;注射LPS 3小时后MCP-1 mRNA表达水平迅速增加,一直延续到24小时;MCP-1蛋白质表达水平从染毒后12小时开始增加,48小时后仍处于高水平.MCP-1主要在睾丸的间质中表达.结论:正常睾丸中低剂量MCP-1可能起着维持巨噬细胞群在睾丸间质中滞留的作用;系统炎症中,MCP-1在睾丸中的高水平表达可能与吸引单核细胞和巨噬细胞进入间质组织有关.     

人单核细胞趋化蛋白－1（MCP－1）cDNA的克隆和序列测定

人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）是由多种细胞产生的一种趋化因子。它不但能趋化单核细胞还能激活单核细胞，在机体防御、炎症恢复和抗肿瘤等方面起重要作用。本文利用ＲＴ－ＰＣＲ方法克隆了人ＭＣＰ－１ｃＤＮＡ，经核苷酸序列测定，除第１２位密码子为ＴＧＴ与国外报道的ＴＧＣ不同、但编码相同的氨基酸半胱氨酸外，其余序列完全相同。     

TH1类细胞因子对结核病患者产生单核细胞趋化蛋白1的调节作用

目的 探讨TH1类细胞因子干扰素γ(IFN—γ)、白细胞介素—2(IL-2)对结核病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌MCP—1的影响。方法 将12例结核患者和8例健康人PBMCs在LPS诱导前，用IL2、IFN-γ进行预刺激1h，采用ELCSA法检测各组培养上清液中MCP—1的水平。结果 与单纯用LPS组相比，加入IL-2、IFN-γ能明显上调结核患者及健康人PBMC的MCP—1分泌，且呈现浓度依赖性，两者联用具有协同效应。结论 TH1类细胞因子IL-2、IFN—γ通过上调MCP—1，使单核细胞、淋巴细胞向炎症部位趋化，参与组织炎症及肉芽肿形成，从而发挥保护性的免疫效应。     

单核细胞趋化蛋白1和骨形成蛋白7在病理性瘢痕中的表达

背景：单核细胞趋化蛋白1是新近明确的对单核/巨噬细胞有趋化和激活双重作用的趋化因子,骨形成蛋白7作为一种新发现的纤维化负性调节因子逐渐成为抗组织纤维化治疗的研究热点,但两者对病理性瘢痕形成中组织纤维化作用的研究至今鲜有报道。 目的：研究单核细胞趋化蛋白1,骨形成蛋白7在病理性瘢痕中的表达水平。 方法：采用免疫组织化学方法检测单核细胞趋化蛋白1、骨形成蛋白7在25例瘢痕疙瘩、30例增生性瘢痕、24例非病理瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达水平。所有标本均来自2008-07/2010-01郑州大学第一附属医院整形外科住院患者,且均无皮肤疾病、结缔组织病、传染病、恶性肿瘤和其他重要脏器疾病,术前无射线治疗、激光治疗及免疫治疗史,其中所取瘢痕组织来自于临床诊断明确的瘢痕患者。 结果与结论：单核细胞趋化蛋白1在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕中的阳性表达率均高于非病理性瘢痕与正常皮肤组织(P < 0.05),骨形成蛋白7阳性表达率均降低(P < 0.05),两者阳性表达率在病理性瘢痕(瘢痕疙瘩和增生性瘢痕)中呈明显负相关(r = -0.639,P < 0.01)。结果显示,在病理性瘢痕的形成过程中单核细胞趋化蛋白1表达上调,而骨形成蛋白7表达下调。      

实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠单核细胞趋化蛋白-1的表达与临床评分的相关性

目的：探讨实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）大鼠脑和脊髓中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达及其与临床评分的关系。方法：将Wistar大鼠分为正常组、佐剂（CFA）组和EAE组,取脑和脊髓制成石蜡切片,进行HE染色和MCP-1mRNA的原位杂交,并与各项临床指标比较。结果：EAE组的体重减轻、MCP-1 mRNA表达的阳性细胞百分数与正常大鼠、佐剂组相比显著性增加。EAE组大鼠MCP-1 mRNA的表达呈动态性变化,其MCP-1 mRNA先于临床症状高表达,并随临床评分的升高而升高,与临床评分呈正相关。结论：MCP-1是参与EAE发病的重要的炎性介质。     

肾小球系膜细胞与单核细胞趋化蛋白-1的关系

肾小球系膜细胞是最活跃的细胞固有成分,单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）是一种对单核细胞具有特异趋化功能的细胞因子,系膜细胞可表达MCP-1及其特异性受体,两者相互作用对多种肾小球病理生理过程发挥重要影响。本文简要地叙述了肾小球系膜细胞及MCP-1的生物学作用,重点分析介绍影响系膜细胞MCP-1表达的因素以及干预治疗对MCP-1表达的影响。     

糖尿病和冠心病患者血清糖基化终产物与单核细胞趋化蛋白—1浓度的相关变化

目的观察糖尿病和冠心病患者血清中糖基化终产物(AGEs)与单核细胞趋化蛋白 -1(MCP -1)之间的变化。方法对照组23例,男14例 ,女9例。为健康查体者 ,体格检查和心电图未发现器质性心脏病证据 ,空腹和餐后2h血糖均在正常范围 ,无胸痛、胸闷、冠心病和糖尿病病史。糖尿病组32例 ,男13例 ,女19例。有多饮、多尿、多食等症状 ,血糖浓度升高 ,符合2型糖尿病诊断标准。无胸痛、胸闷和冠心病病史 ,查体未见心脏异常体征 ,心电图无心肌缺血的表现。其中部分病例冠脉造影阴性。冠心病组26例 ,男17例 ,女9例。多有胸痛、胸闷等症状和心电图心肌缺血的表现 ,都经过冠脉造影显示严重冠脉狭窄 ,空腹和餐后2h血糖均正常。糖尿病合并冠心病组8例 ,男6例 ,女2例。有明确糖尿病史 ,空腹血糖大于7.0mmol·L-1,同时伴心肌缺血的临床症状或心电图表现 ,冠脉造影证实有严重冠脉狭窄。以上各组年龄范围为40～65岁。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测糖尿病、冠心病及糖尿病合并冠心病患者血清中AGEs与MCP -1的水平。结果糖尿病人血清中MCP -1和AGEs的浓度分别为(735.50±55.75)pg·ml -1和(12.43±0.52)U·ml -1,较对照组 (417.80±27.34)pg·ml -1和(8.82±0.36)U·ml-1)明显升高 (P<0.001) ,糖尿病合并冠心病患者血清中MCP -1和AGEs     

二十碳五烯酸抑制早期糖尿病肾病单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的:观察二十碳五烯酸(EPA)对早期阶段的糖尿病肾病单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法:体内实验中,KKAy/Ta小鼠随机分为2组:治疗组予以EPA1g·kg-1.d-1腹腔内注射共8周,对照组同步予以生理盐水注射,应用免疫组化和实时RT-PCR检测肾脏中MCP-1表达及巨噬细胞浸润的变化。应用ELISA方法检测高糖和EPA刺激后的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)上清MCP-1的表达。结果:EPA治疗后KKAy/Ta小鼠肾脏MCP-1的蛋白表达及巨噬细胞浸润明显减弱。实时RT-PCR结果显示EPA治疗组小鼠肾皮质MCP-1mRNA的表达明显低于对照组。25mmol/LD-葡萄糖作用72h可引起HUVECs分泌MCP-1明显增加,30μmol/L和50μmol/LEPA均可显著地抑制高糖诱导的MCP-1表达。结论:EPA降低了KKAy/Ta小鼠肾脏及高糖诱导的内皮细胞MCP-1的表达,提示EPA可能抑制早期糖尿病肾病的炎症反应。     

单核细胞趋化蛋白1与神经干细胞的体外迁移

背景：研究表明趋化因子基质细胞衍生因子1及血管内皮生长因子参与神经干细胞的迁移。 目的：观察趋化因子单核细胞趋化蛋白1及其受体CCR2对神经干细胞体外迁移的作用。 方法：分离培养胎鼠海马组织神经干细胞,体外传代扩增及鉴定;通过细胞免疫荧光及RT-PCR检测其受体CCR2表达情况;通过琼脂糖下细胞迁移实验观察50,100,200,300,500 μg/L 单核细胞趋化蛋白1对神经干细胞的体外趋化作用。 结果与结论：细胞免疫荧光及RT-PCR检测证实胎鼠海马来源神经干细胞表达趋化因子受体CCR2;琼脂糖下细胞迁移实验显示,体外条件下单核细胞趋化蛋白1可趋化神经干细胞迁移,且趋化迁移作用随质量浓度增加而增强,抗CCR2多克隆抗体可对抗其趋化迁移作用。