T细胞表面6种细胞表型的变化与大肠癌分期及术式的关系

应用流式细胞仪检测３９例大肠癌患者手术前后Ｔ细胞表面６种细胞表型，发现随着Ｄｕｋｅｓ分期的增高，术前ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ６９及ＣＤ３＋／ＨＬＡ－ＤＲ＋逐渐下降，ＣＤ８逐渐增高（Ｐ＜０．０５）；Ａ期大肠癌患者机体免疫功能活跃，术前ＣＤ３、ＣＤ４高于对照组（Ｐ＜０．０５），ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ３＋／ＨＬＡ－ＤＲ＋与对照组相同；根治及姑息性切除术后，ＣＤ８降低，ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ６９、ＣＤ３＋／ＨＬＡ－ＤＲ＋升高（Ｐ＜０．０５）；肿瘤未切组术后ＣＤ３、ＣＤ１６、ＣＤ４／ＣＤ８进一步下降（Ｐ＜０．０５）。提示大肠癌患者术前免疫状态与疾病的程度呈负相关，切除肿瘤有益于改善患者细胞免疫功能。     

头颈肿瘤浸润γδT细胞的数量及表型与临床分期相关

目的研究头颈肿瘤中浸润的Foxp3+γδT细胞的数量与头颈肿瘤临床分期的关系。方法 用组织研磨法分离患者肿瘤浸润淋巴细胞(TILs),用密度梯度离心法分离患者外周血单个核细胞(PBMCs);用固相化anti-pan-TCRγδ单克隆抗体对TIL和PBMC进行2～4周的体外扩增,免疫荧光染色和流式细胞仪测定扩增前后的细胞;对头颈肿瘤组织芯片进行免疫组织化学染色。结果 15例头颈肿瘤组织标本TIL中γδT占CD3+T细胞的0.37%～12.35%,其中0.13%～34.38%为Foxp3+γδT。扩增后TIL中γδT占CD3+T细胞的20.38%～82.87%,且以Vδ1亚型为主。肿瘤组织芯片按照肿瘤TNM分期中的T分期分为4组,Foxp3+γδT细胞的比例随肿瘤分期的提高而增加。结论 现有证据证明了头颈肿瘤组织中存在Foxp3+γδT细胞的浸润,并提示肿瘤组织中调节表型T细胞的数量可能与头颈肿瘤的预后相关。     

胃癌组织中记忆T细胞与TNM分期关系的研究

根据ＣＤ45分子异构型的不同 ,Ｔ细胞可分为表达ＣＤ45ＲＡ的未致敏Ｔ细胞及表达ＣＤ45ＲＯ的记忆Ｔ细胞[1] 。记忆Ｔ细胞是一群在抗原驱动下发生寡克隆扩增的Ｔ细胞 ,可识别特异性抗原 ,参与增强性的再次免疫应答。记忆性Ｔ细胞还表达ＩＣＡＭ及ＭＨＣＩＩ类分子等。本文旨在研究胃癌组织中ＣＤ45ＲＯ、ＣＤ45ＲＡ及ＩＣＡＭ等的表达情况 ,并分析记忆Ｔ细胞与ＴＮＭ分期关系 ,从而研究胃癌患者免疫状态 ,间接判断患者预后。1　材料与方法1 1　材料　正常胃粘膜组 2 0例 ,其中男 15例 ,女 5例 ,平均年龄 (4 4 8± 16 7)岁 ;胃癌粘膜组 75例…     

自身免疫病患者T淋巴细胞表型分析

本文报告利用流式细胞仪检测了１０例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者、１８例干燥综合症（ＳＳ）患者、３７例风湿性关节炎（ＲＡ）患者和１６例人外周血Ｔ淋巴细胞表型，发现ＳＬＥ患者ＣＤ３＾＋Ｔ细胞明显降低，ＳＳ和ＲＡ患者正常；ＳＬＥ患者ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋Ｔ细胞比值倒置，ＳＳ和ＲＡ正常，但ＳＳ和ＲＡ ＣＤ８＾＋Ｔ细胞明显减少。文中对这三种疾病发病机理进行了初步讨论。     

T—AK细胞的形态学和免疫表型研究

Ｔ－ＡＫ（Ｔ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｌｌｅｒ，Ｔ－ＡＫ）细胞是由抗ＣＤ３单克隆抗体和ｒＩＬ－２共同激活诱生的具有高度溶细胞活性的肿瘤杀伤效应细胞。为探讨Ｔ－ＡＫ细胞的免疫生物学特征，研究了Ｔ－ＡＫ细胞的形态学和细胞表型。结果表明，Ｔ－ＡＫ细胞体积较大，核／浆比例小，胞浆内含有大量颗粒，具有活化淋巴母细胞的形态学特征；９０％以上的Ｔ－ＡＫ细胞表达Ｔ淋巴细胞表型（ＣＤ３＾＋，ＣＤ８＾＋），２０％￣５     

T细胞受体γδ表型淋巴细胞与肿瘤免疫

Ｔ细胞受体γδ表型细胞是一个新发现的Ｔ淋巴细胞亚群，约占人外周血淋巴细胞总数的３－１０％。实验证明，此类细胞具有多种细胞因子的分泌能力且可表现出对多种自体及建纱肿瘤细胞较强的细胞毒活性。因其具有特殊的ＭＨＣ非限制性的抗原识别方式，在某些肿瘤浸润淋巴细胞中的存在以及经过继免疫实验可获得明显的抗肿瘤效应而引起了免疫学工作者们的兴趣。本文仅就γδＴ细胞在肿瘤免疫研究的近年进展作一综述。     

人γδT细胞表型与功能特征的探讨

目的比较观察人外周血PBMCs和CBMCs中αβT和γδT细胞的表型与功能特征,进一步了解γδT细胞在免疫应答中的作用。方法分离正常人PBMCs及脐带血CBMCs,检测表面分子的表达。PMA+Ionomycin刺激PBMCs或CBMCs后,利用流式细胞术(FCM)检测其细胞因子的产生以及初始/记忆细胞标记的表达。结果与αβT细胞相比,γδT细胞高表达CD45RO,低表达CD25和CCR7;与CBMCs中γδT细胞相比,PBMCs中γδT细胞表达CD45RO升高,CD45RA与CD25降低。细胞因子表达的结果表明,与αβT细胞相比,γδT细胞分泌大量IFN-γ和TNF-α,较少分泌IL-2,且IFN-γ+细胞主要为CD45RA-CD62L-CCR7-;与PBMCs中γδT细胞不同,体外刺激CBMCs中γδT细胞后,表达IFN-γ数量较低,且IFN-γ+细胞主要为CD45RA+CD62L-CCR7-/+。结论PBMCs与CBMCs中αβT和γδT细胞的表型与功能均存在差别,记忆性γδT细胞的增加可能与其活化和免疫应答的作用相关。     

T,B细胞表型抗体免疫组化敏感性与特异性分析

探讨Ｔ、Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤免疫表型染色的特异性和交叉反应性。方法应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学方法对６２例非霍奇金淋巴瘤进行ＣＤ２０、ＣＤ７４、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４３和ＣＤ３免疫表型测定。结果：发现Ｂ细胞表型抗本ＣＤ２０和ＣＤ７４对Ｂ细胞非奇金淋巴瘤染色阳性率达８８．２％－１００％，但ＣＤ７４的特异性不强，与Ｔ细胞有２６．７％（４／１５）－３５．７％（５     

CD4~+T细胞表型与功能上的异质性

<正> 根据能识别大鼠白细胞共同抗原(L-CA)家族中某些抗原决定簇的小鼠 McAb(MRCOX-22)与大鼠外周血 CD4~+细胞的反应格局,大鼠的CD4~+细胞可从表型上分为不同的亚群。本文综合分析了作者和其他实验室有关大鼠T诱导/辅助细胞的体内外功能。 大鼠T细胞L-CA的表达:L-CA首先     

T细胞受体γδ表型淋巴细胞与肿瘤免疫

T细胞受体γδ表型细胞是一个新发现的T淋巴细胞亚群，约占人外周血淋巴细胞总数的3％～10％。实验证明，此类细胞具有多种细胞因子的分泌能力且可表现出对多种自体及建系肿瘤细胞较强的细胞毒活性。因其具有特殊的MHC非限制性的抗原识别方式，在某些肿瘤浸润淋巴细胞中的存在以及经过继免疫实验可获明显的抗肿瘤效应而引起了免疫学工作者们的兴趣。本文仅就γδT细胞在肿瘤免疫研究的近年进展作一综述。     

正常人PBMC中T细胞的PD-1表达及其表型分析

目的观察正常人外周血单个核细胞（PBMC）T细胞的PD-1表达,并对其表型进行分析。方法分离正常成年人PBMCs,利用流式细胞术检测CD4、CD8、CD45RA、CD27和PD-1等表面分子的表达;通过对比分析,了解PD-1＋T细胞表型与记忆T细胞的关系。结果正常成年人周围血中CD4＋PD-1＋T细胞和CD8＋PD-1＋T细胞的平均表达水平为（8.71±3.97）%,CD8＋PD-1＋T细胞的频率为（2.44±0.76）%。正常人外周血CD4＋PD-1＋T细胞可分成3个亚群,即初始T细胞（CD45RA＋CD27＋T细胞）、中央记忆型（CD45RA-CD27＋）T细胞和效应记忆型（CD45RA-CD27-）T细胞,其比例分别为（18.5±8.79）%、（65.0±13.84）%和（15.5±5.12）%,而在CD4＋PD-1-T细胞中3种T细胞的比例分别为（68.25±10.33）%、（27.75±9.04）%和（3.0±1.22）%。结论正常人周围血中存在CD4＋PD-1＋T细胞,并且多为中央记忆T细胞,而CD4＋PD-1-T细胞则多为初始T细胞。     

hCG对T细胞表型及功能亚群的作用

分别用ＣＤ３、ＣＤ４及ＣＤ８分子作为检测Ｔ细胞表型亚群的指标，以ＩＦＮγ和ＩＬ－４作为检测ＣＤ４Ｔ细胞中Ｔｈ１与Ｔｈ２功能亚群的指标，观察了ｈＣＧ对Ｔ细胞各类亚群的作用。结果证明一定剂量范围内的ｈＣＧ对上述各Ｔ细胞功能亚群均有显著抑制作用。用抗ｈＣＧ各亚单位的单抗封闭ｈＣＧ后作上述试验，证明抗ｈＣＧβ（１０号）及抗完整ｈＣＧ（１７号）单抗可阻断上述抑制作用，而抗ｈＣＧα单抗（４号）则无此作用，阐明了ｈＣＧ分子上参与此抑制作用的表位所在。     

流式细胞术在弥漫性大B细胞淋巴瘤伴大量T细胞反应病理诊断中的应用

目的探讨流式细胞免疫分型技术在弥漫大B细胞淋巴瘤伴大量T细胞反应病例诊断中的应用价值。方法对3例弥漫大B细胞淋巴瘤伴大量T细胞反应病例病理形态、免疫组织化学染色及流式细胞免疫分型进行回顾性分析。结果例1：在CIM5-SSC（Side Scatter,侧向散射角）点图上可见CD45阳性细胞明显分2群,强阳性细胞由T细胞和B细胞共同组成,但以T细胞为主,其中B细胞为免疫球蛋白轻链非限制性表达。而CD45弱阳性细胞基本都是B细胞,且为免疫球蛋白轻链入限制性表达。例2：在CD45-SSC点图中可见CD45阳性细胞因SSC大小不同而分2群,SSC较小的细胞群为T、B细胞混合存在,SSC较大,相当于单核细胞位置的细胞群主要为B细胞,且为免疫球蛋白轻链K限制性表达;例3：再作CD19／κ／CD20,CD19／λ／CD20三重标记发现部分CD19阳性细胞CD20阴性,该群细胞呈κ限制性表达。结论通过多参数、多组合流式细胞免疫分型技术可以从抗原表达减弱或增强、抗原丢失、是否表达非B系抗原、FSC（前向散射光）和（或）SSC的变化以及是否有表达不成熟B细胞的抗原6个方面将肿瘤性B细胞与反应性细胞区分开。     

Vδ1T细胞和TINs细胞表达情况与宫颈癌患者临床分期及预后的关系

目的 探讨Vδ1 T细胞和肿瘤浸润性中性粒细胞(tumor infiltrating neutrophil,TINs)细胞表达情况及其与宫颈癌临床分期及预后关系.方法 选取我院2012年1月至2017年1月期间经组织病理学确诊的60例宫颈癌患者为研究组,根据临床分期分为Ⅰ～Ⅳ期,患者数22例、18例、12例、8例,并选...     

不同宫颈癌临床分期患者外周血中T淋巴细胞及NK细胞的表达分析

目的分析宫颈癌患者外周血中T淋巴细胞及其亚群以及NK细胞的表达情况。方法前瞻性分析145例在我院就诊的宫颈癌患者的临床资料,按照宫颈癌FIGO临床分期差别分为:宫颈癌Ⅰ期38例、宫颈癌Ⅱ期42例、宫颈癌Ⅲ期35例、宫颈癌Ⅳ期30例;同期选择体检正常女性30例作为对照组。应用流式细胞仪检测各组患者外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+T细胞亚群、调节性T细胞(Treg)以及NK细胞数量,同时计算各亚群的比例以及Treg占CD4^+T细胞的比例。应用多元Logistic回归分析评估各细胞亚群数量及比例与宫颈癌临床分期的相关性。结果与对照组相比,宫颈癌患者CD3^+T细胞、CD4^+T细胞、NK细胞数量以及CD4^+/CD8^+比值均较低,Treg/CD4^+比值较高(均P <0.05),而CD8^+T细胞数量差异无统计学意义(均P>0. 05)。随宫颈癌病理严重程度递增,CD3^+T细胞、CD4^+T细胞、NK细胞数量以及CD4^+/CD8^+比值逐步降低,Treg/CD4^+比值逐步增高(均P <0.05),而CD8^+T细胞数量差异无统计学意义(均P>0.05)。多元Logistic回归分析显示,Treg/CD4^+比值是宫颈癌临床分期的危险因素,CD4^+T细胞、CD4^+/CD8^+比值及NK细胞是其保护性因素(均P<0.05)。结论宫颈癌患者细胞免疫功能均不同程度降低,晚期患者降低最显著。检测T淋巴细胞亚群及NK细胞可用于宫颈癌患者免疫监测,为临床治疗及预后评估提供参考。     

血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤的形态及免疫表型研究

目的 研究血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(AITL)形态学特点、特异性标志物,并探讨AITL中滤泡树突状细胞网的增生状况及其起源.方法 对29例AITL行bcl-6、CD10、CXCL13、CD21染色(EliVision法)及bcl-6/CD3、CD10/CD21及CD10/CD20双重染色,并选取外周T细胞淋巴瘤,非特殊类型(PTL-U);结外NK/T细胞淋巴瘤,鼻型;间变性大细胞淋巴瘤(ALCL);肠病性T细胞淋巴瘤(ETTL);皮下脂膜炎性T细胞淋巴瘤及淋巴结反应性增生作为对照.结果 (1)22例(75.9%)AITL表达CD10,对照组除1例PTL-U外均阴性;24例(82.8%)AITL表达CXCL13,所有PTL-u均阴性;而AITL中bcl-6的表达情况和PTL-u及反应性增生病例有一定程度的交叉.(2)29例AITL显示特征性的CD21阳性滤泡树突状细胞网增生,4例具有明显生发中心的病例,2例显示增生的滤泡树突状细胞网覆盖并超过生发中心.结论 AITL具有典型的形态学变化,CD10和CXCL13是AITL特异性标志物,而bcl-6不具有特异性;AITL中增生的滤泡树突状细胞网可能部分起源于生发中心.     

马立克病毒强毒株感染鸡T细胞表型动态变化的研究

为深人探讨马立克病(Marek’s disease,MD)免疫发病机理,本实验以马立克病强毒株(vMDV)人工感染1日龄无特殊病原体(SPF)雏鸡,在不同感染期,以流式细胞仪分析脾脏、胸腺、外周血单个核细胞中CD4~+、CD8~+及CD3~+T细胞的动态变化.结果表明.感染鸡CD3~+和CD4~+T细胞表现为短暂的升高,其后迅速下降,而CD8~+T细胞却异常增高.CD4~+T细胞与CD8~+T细胞表型特征的这种异常变化是vMDV感染的重要特征之一.     

T、B细胞表型抗体免疫组化敏感性与特异性分析

目的：探讨Ｔ、Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤免疫表型染色的特异性和交叉反应性。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学方法对６２例非霍奇金淋巴瘤进行ＣＤ２０、ＣＤ７４、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４３和ＣＤ３免疫表型测定。结果：发现Ｂ细胞表型抗体ＣＤ２０和ＣＤ７４对Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤染色阳性率达８８．２％～１００％,但ＣＤ７４的特异性不强,与Ｔ细胞有２６．７％（４／１５）～３５．７％（５／１４）的交叉反应,而ＣＤ２０表现出高度的特异性,交叉反应为０。Ｔ细胞表型抗体ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４３和ＣＤ３对Ｔ细胞非霍奇金淋巴瘤染色阳性率达８５．７％～１００％,但ＣＤ４５ＲＯ和ＣＤ４３对Ｂ细胞的交叉反应高达４０％（６／１５）～４７．１％（８／１７）,特异性不强,而多克隆抗体ＣＤ３与Ｂ细胞仅有５．９％（１／１７）的交叉反应,表现出明显的特异性。结论：提示在进行Ｔ、Ｂ细胞免疫表型划分时,应使用一组包括ＣＤ２０、ＣＤ７４,ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４３和ＣＤ３等抗体,ＣＤ３是一种具有高度敏感性和高度特异性的Ｔ细胞标志抗体,值得推荐。     

小鼠脾细胞CD4+CD25+调节性T细胞的表型特征

观察CD4+CD25+T和CD4+CD25-T细胞的表型和细胞因子的表达。自小鼠脾脏制备单个细胞悬液,分离CD4+T细胞、CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞,进行细胞表面标记,激活后进行细胞内细胞因子染色,利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析细胞表面分子、转录因子和细胞因子表达之间的关系。结果:在CD4+T细胞中,约有7.8%的细胞同时表达CD25分子。与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞CD44的表达略有增加,CD45RB的表达明显下降,CTLA-4和Foxp3明显增加。以同时表达CTLA-4和Foxp3的细胞为主,其次为单独表达Foxp3的细胞。细胞因子的研究结果表明,与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞IL-2、IFN-γ明显减少,而只产生IL-10的细胞略有增加。CD4+CD25+调节性T细胞无论在表型、转录因子的表达以及细胞因子表达方面均于非调节性T细胞不同。