槲皮素对人结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用

目的:观察槲皮素对体外培养的人结肠癌SW480细胞的增殖抑制作用。方法:观察不同浓度(5、10、20、40、80、160μmol/L)的槲皮素及50mg/L的5-Fu(阳性对照组)在不同时间(24、48、72h)对SW480细胞增殖的影响。运用细胞计数试剂盒检测法(CCK-8)检测槲皮素对SW480细胞生长的影响;光学显微镜和电子显微镜下观察槲皮素处理后SW480细胞形态结构的变化;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)分析槲皮素对SW480细胞的细胞周期分布及凋亡率的影响。结果:CCK-8法检测显示槲皮素对SW480细胞的增殖有抑制作用,其抑制作用随着作用浓度的增加和作用时间的延长而增强(P<0.05);经槲皮素处理的SW480细胞与阳性对照组比较,呈明显凋亡状态;PI染色FCM分析发现槲皮素以浓度依赖方式诱导SW480细胞G2/M期细胞累积,且细胞凋亡率随药物浓度增加而增加(P<0.05)。结论:槲皮素对人结肠癌SW480细胞的增殖有抑制作用,且能诱导SW480细胞凋亡,是一种高效低毒的药物。     

辣椒素对人结肠癌SW480细胞株增殖作用的影响

目的了解辣椒素对人结肠癌SW480细胞株增殖作用的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用MTT检测法,观察终浓度100-400μmol/L的辣椒素作用24、48 h对人结肠癌SW480细胞株生长作用的影响;采用流式细胞仪检测400μmol/L辣椒素作用人结肠癌SW480细胞株后其细胞周期变化和凋亡率。结果辣椒素能抑制结肠癌SW480细胞株增殖,呈浓度、时间依赖性。在400μmol/L辣椒素作用下,结肠癌SW480细胞株停滞于G0/G1期。辣椒素作用24、48 h,SW480细胞凋亡率升高（F=8.73、8.10,q=4.86-7.30,P〈0.01）。结论辣椒素抑制SW480细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能是阻滞细胞周期于G0/G1期。     

5-FU联合热疗诱导SW480细胞凋亡及其对细胞周期的影响

目的探讨5-Fu（5-氟尿嘧啶）联合热疗诱导SW480细胞（人结直肠癌细胞株）的增殖抑制率、细胞周期各时相的影响及亚细胞结构改变。方法应用MTT比色法检测SW480细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期各时相的变化,电子显微镜观察亚细胞结构变化。结果联合热疗组与5-FU组、热疗组相比差异非常显著,P〈0．01。且SW480细胞周期进程发生明显改变,G1期细胞增多、S期细胞减少、G2／M细胞相对增多,细胞凋亡率升高。电子显微镜结果显示染色质趋边凝集、线粒体膜、溶酶体膜、内质网膜系统明显改变,可见凋亡小体。结论5-FU联合热疗可显著提高SW480细胞增殖抑制率,抑制SW480细胞G1期向S期转化进程,诱导细胞凋亡及亚细胞结构改变。     

姜黄素对SW480细胞株诱导分化的研究

目的探讨姜黄素对SW480(人结肠癌细胞)细胞株诱导分化机制。方法应用MTT比色法和流式细胞仪测定细胞周期的变化。并通过电子显微镜观察诱导分化后的亚细胞结构。结果姜黄素对SW480细胞增殖有明显的抑制作用。且呈时间、剂量依赖性,流式细胞仪分析G1期细胞堆积、S期细胞减少、G2/M期细胞增多、亚细胞结构、细胞空化、核仁不规则、染色质趋边凝集。结论姜黄素能够抑制SW480细胞增殖,阻止G1期细胞向S期转化的进程,促进SW480细胞凋亡。     

槲皮素对人结肠癌细胞SW480基质金属蛋白酶及组织蛋白酶-D的作用

目的 观察槲皮素对人结肠癌SW480细胞分泌的基质金属蛋白酶(MMPs)的影响;观察槲皮素对人结肠癌SW480细胞组织蛋白酶-D表达的影响.方法 酶谱分析技术观察槲皮素对人结肠癌SW480细胞MMPs分泌的影响;运用免疫组织化学方法观察槲皮素对人结肠癌SW480细胞组织蛋白酶-D表达的影响.结果 酶谱分析法检测显示不同浓度的槲皮素能够抑制人结肠癌SW480细胞分泌MMP-2及MMP-9,随浓度的升高,MMP-2及MMP-9的分泌量减少;免疫组织化学法显示不同浓度的槲皮素处理人结肠癌SW480细胞后,组织蛋白酶-D的表达随药物浓度的升高和作用时间的延长而降低.结论 不同浓度的槲皮素能够抑制人结肠癌SW480细胞MMP-2和MMP-9的分泌及组织蛋白酶-D的表达,这些都可能是槲皮素抑制结肠癌细胞侵袭和转移的原因.     

Kiss-1对结肠癌SW480细胞增殖的影响

目的以结肠癌细胞SW480为模型,探讨Kiss-1基因过表达对结肠癌细胞增殖的影响。方法将人结肠癌细胞株SW480培养后随机分为3组:阴性对照组(转染pEGFP-N1空载体)、实验组(转染pEGFP-N1-Kiss-1)及空白对照组(未转染)。实验组采用脂质体转染的方法将pEGFP-N1-Kiss-1重组质粒转染至SW480细胞,上调结肠癌细胞中Kiss-1的表达水平,经G418筛选出稳定表达株。采用Western-blot检测转染后细胞中Kiss-1的表达,采用CCK8试验分析Kiss-1对SW480细胞增殖的抑制效果。结果成功将pEGFP-N1-Kiss-1重组质粒转染至SW480结肠癌细胞。Kiss-1在实验组中高表达,而在空白对照组及阴性对照组中低表达,3组比较差异有统计学意义(P<0.05);培养48、72 h后,实验组SW480细胞数均明显低于空白对照组与阴性对照组(P<0.05),而空白对照组与阴性对照组SW480细胞数差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Kiss-1基因在SW480-Kiss-1细胞中能稳定、高效地表达;Kiss-1可抑制结肠癌细胞的增殖。     

染料木黄酮诱导人结肠癌SW480细胞凋亡及机制

目的 探讨染料木黄酮（GEN）诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的生物学效应及抗肿瘤机制。方法 通过MTT法检测GEN对该细胞系生长的影响；应用PI染色流式细胞术（FCM）分析GEN处理前后的细胞周期分布的变化；SP免疫组化法检测细胞内bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 GEN能抑制SW480细胞增殖，呈浓度依赖性。流式细胞仪示不同浓度GEN作用于SW480细胞，出现G2／M阻滞；SP免疫组化结果表明GEN处理细胞72h后，Bax蛋白表达升高，bcl-2蛋白表达下降。结论 GEN有诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用，其机制与bcl-2／Bax比值下降有关。     

IL-8对人结肠癌细胞SW480迁移的影响及机制分析

使用MTT法悬挑合理的IL-8使用浓度,分别使用划痕实验及Transwell实验检测IL-8对结肠癌SW480细胞迁移的影响,Western-blot检测MMP-2蛋白的表达。对照组及不同浓度IL-8(25、50、100μg/L)组穿过小室的细胞数依次表示为16±2.0、50±7.4、120±16.4、62±10,与对照组比较,不同浓度IL-8穿过Transwell实验细胞数量明显增多,这一结果与划痕试验一致,再次验证IL-8能促进SW480细胞迁移。IL-2可提高MMP-2蛋白的表达水平。IL-8能有效促进人结肠癌SW480细胞的迁移,可能通过上调MMP-2的表达有关。     

复方苦参含药血清对人结肠癌细胞SW480的凋亡诱导作用

目的探讨复方苦参含药血清对人结肠癌细胞SW480的凋亡诱导作用,为今后的研究工作提供有价值的参考信息。方法采取血清药理学方法,研究分析复方苦参对结肠癌细胞SW480体外效应,观察含药血清对SW480细胞克隆形成率的影响。结果含药血清会对SW480细胞形成产生一定程度的抑制,48 h后能够观察到荧光染色明显增强,细胞核固缩,胞核碎裂,经流式细胞仪可检测到亚G1峰。结论复方苦参含药血清在体外可以对SW480细胞增殖产生抑制作用,并且可诱导细胞凋亡,在今后的临床研究工作中,应对其给予足够的重视。     

间歇性缺氧/复氧对结肠癌SW480细胞晚期氧化蛋白产物表达的影响

目的:研究间歇性缺氧/复氧对体外培养SW480细胞生长形态及晚期氧化蛋白产物(AOPP)表达的影响,探讨结肠癌SW480细胞间歇性缺氧/复氧的氧化应激现象.方法:将SW480细胞体外培养48 h后传代,随机分为四组:A组持续缺氧15 min,B组间歇性缺氧/复氧120 min,C组持续缺氧60 min,D组为常氧组,检测细胞培养液中的AOPP含量.结果:A、D组细胞形态无明显改变,B、C组细胞两端突起明显,A、B组和B、C组间AOPP差异显著(P＜0.05),B、D组间AOPP存在非常显著差异(P＜0.01).结论:相同缺氧方法、不同缺氧时间SW480细胞生长形态发生改变,且间歇性缺氧/复氧使SW480细胞中的AOPP含量明显升高,发生明显的氧化应激.     

粉防己碱对人结肠癌细胞株HT-29增殖与凋亡的影响

目的:通过观察粉防己碱对人结肠癌细胞株HT-29增殖与凋亡的影响,初步探讨粉防己碱对结肠癌的体外抗肿瘤效应。方法:采用MTT比色法观察粉防己碱对HT-29细胞的增殖抑制效应,利用细胞DNA琼脂糖凝胶电泳及细胞凋亡荧光染色法检测粉防己碱诱导肿瘤细胞凋亡的作用,以免疫细胞化学法检测粉防己碱对Bcl-2和BAX表达水平的影响。结果:MTT比色法显示粉防己碱对人结肠癌细胞株HT-29增殖有抑制作用,其抑制效应具有剂量依赖的特点,细胞凋亡荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳表明粉防己碱可诱导HT-29细胞凋亡,免疫细胞化学法显示粉防己碱上调BAX基因表达,下调Bcl-2基因表达。结论:粉防己碱对人结肠癌细胞株HT-29增殖的抑制效应具有剂量依赖性,并可诱导细胞凋亡,其抗肿瘤效应可能与凋亡相关基因表达的调控有关。     

紫杉醇联合miR-200a对胃腺癌SGC-7901细胞增殖侵袭能力的影响

目的观察紫杉醇联合应用 miR-200 a 对胃癌 SGC-7901细胞增殖侵袭能力的影响。方法体外应用50 nmol/L紫杉醇单独处理胃癌SGC-7901细胞或联合应用脂质体转染miR-200 a模拟物（miR-200a mimics）,通过流式细胞仪检测细胞凋亡水平和周期分布,克隆形成试验观察细胞的增殖能力,Tr-answell实验和细胞划痕试验观察细胞的侵袭迁移能力。通过以上实验比较单独应用紫杉醇与联合应用miR-200 a对胃癌细胞增值侵袭能力影响的差异,并探讨可能的作用机制。结果流式细胞凋亡检测表明50 nmol/L紫杉醇联合应用 miR-200a 细胞早期凋亡率高于单独用药组[（22.79±0.43）％ vs．（11.76±0.64）％,P＜0.05],联合组阻滞于G2/M期细胞比例（63.74±1.76）％高于单独应用紫杉醇组的（51.75±2.01）％,结果具有统计学差异（ P＜0.01）;细胞克隆形成实验显示联合用药组克隆形成率与紫杉醇组相比[（4.03±0.25）％vs．（7.80±0.30）％]显著降低（P＜0.01）;Transwell侵袭实验表明联合用药组穿过小室的细胞数目少于紫杉醇组（22.00±2.00 vs．56.33±5.13,P＜0.01）;细胞划痕试验表明在划痕后48 h,联合组细胞迁移水平与单独用药组迁移率已有显著降低[21.43±2.34）％ vs．（54.26±2.49）％, P ＜0.01]。结论紫杉醇联合应用miR-200 a能增加紫杉醇对胃癌SGC-7901细胞增殖侵袭能力的抑制作用,为今后胃癌的化疗及基因靶向治疗提供新的思路。     

和厚朴酚对结肠癌细胞生长影响及Caspase凋亡途径相关蛋白的表达研究

目的:探讨和厚朴酚对人结肠癌(SW480)细胞增殖抑制作用及诱导Caspase凋亡途径的研究.方法:利用MTT检测和厚朴酚在不同浓度和时问下对SW480细胞体外增殖的影响;用流式细胞术、Hoechst33258荧光染色检测及Caspase-3,-8,-9 酶活性检测方法和厚朴酚诱导下结肠癌SW480细胞凋亡指标及路径.结果:MTT结果显示和厚朴酚具明显抑制SW480细胞的体外增殖,其抑制率存在剂量和时间依赖性;药物处理24,48,72 h的IC50值分别是54.36、44.72、36.20 μmol/L.和厚朴酚作用细胞后,G0/G1期的细胞比例随药物浓度增加而逐渐增多(P<0.05),表明和厚朴酚能阻滞细胞于G0/G1期.荧光染料 Hoechst33258染色结果显示.细胞核出现典型的凋亡小体.Caspase家族蛋白酶活性检测结果,胞内Caspase-3,-8,-9酶家族分别被激活.其活性随不同时间点升高(P<0.05).结论:和厚朴酚能明显抑制人结肠癌SW480细胞体外增殖,并诱导大肠癌细胞SW480通过激活Caspase途径发生凋亡.     

反义miR-21抑制宫颈鳞状细胞癌CaSki细胞系生长体外研究

目的探讨敲低miR-21表达对宫颈鳞状细胞癌细胞系CaSki增殖活性与凋亡的影响。方法实时荧光定量RT-PCR法检测正常宫颈组织、CaSki细胞转染前后miR-21的表达水平,采用MTT法、流式细胞术等技术检测转染后CaSki细胞增殖活性与凋亡的变化。结果 miR-21在CaSki细胞中表达水平为正常宫颈组织的3.25倍。CaSki细胞中转染反义miR-21(AS-miR-21)可显著抑制其表达。转染后24h、48h、72h、96h,MTT检测提示10nmol与20nmolAS-miR-21转染组中细胞增殖率较对照组明显降低(P<0.05),自48h抑制作用显现,且随着转染浓度增加,抑制作用增强,呈现剂量依赖性。细胞周期检测结果显示AS-miR-21转染组的G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少(P<0.05)。AnnexinⅤ联合PI技术检测细胞凋亡,结果显示AS-miR-21转染组早期凋亡细胞率[(23.40±2.16)%]明显高于空白对照组[(5.1±2.16)%]、阴性对照组[(6.87±0.55)%](P=0.000)。结论 AS-miR-21转染可敲低CaSki细胞中miR-21表达,并有效抑制细胞增殖活性,促进细胞凋亡。     

高机械指数超声辐照微泡对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨高机械指数超声造影对结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 体外培养结肠癌细胞株(Lovo细胞).分为对照组、微泡+超声组、单纯超声辐照组和单纯微泡组.使用超声造影剂SonoVue,探头频率1.5 MHz,机械指数1.7进行超声间歇辐照,采用MTT法、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡指数.结果 对照组、单纯辐照组及单纯微泡组的增殖能力、细胞周期与凋亡指数无明显差异(P>0.05);微泡+超声组与对照组比较,其增殖能力明显低于对照组(P<0.01),而凋亡指数明显高于对照组(P<0.01).结论 高机械指数超声辐照微泡击破效应对结肠癌细胞的增殖有明显抑制作用,而对结肠癌细胞的凋亡有明显促进作用.     

DPC4基因转染对结肠癌SW480细胞的影响

目的研究DPC4基因转染对结肠癌SW480细胞的影响。方法建了表达DPC4基因的逆转录病毒pLXSN载体,转染SW480细胞和未转染的SW480细胞为对照。Western鉴定DPC4蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖率。结果发现SW480/DPC4细胞较SW480/pLXSN、SW480/-细胞,生长明显减缓,经统计有显著差异(P<0.05)。培养第7天的时候,抑制率达50%左右。结论 DPC4基因具有抑制结肠癌细胞生长的作用,为结肠癌的侯选肿瘤抑制基因。     

薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响

目的观察薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响。方法结肠癌SW480细胞分为4组,其中A组为对照组,B,C,D组分别在培养基中给予5,10,20mg／L薏苡仁酯处理。采用噻唑蓝比色法检测4组细胞生长情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果作用24h后,B,C,D组的抑制率分别为16．43％,22．51％,31．24％,呈剂量依赖关系,与A组比较差异均有统计学意义（P〈O．05）;给药后24hD组细胞G0～G,期比例较A组增高,S期细胞比例较A组降低（P〈O．05）;D组24,48h凋亡率明显高于A组,差异有统计学意义（P（0．05）。结论薏苡仁酯可在体外直接抑制结肠癌细胞的增殖,诱导凋亡,在结肠癌中药防治中有一定作用。     

胃癌中高表达的miR-21对胃癌细胞生物学行为的影响

目的:研究miR-21在胃癌中的表达情况及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:通过实时荧光定量PCR检测30例胃癌手术切除组织和周围正常组织中以及10株胃癌细胞中miR-21的表达情况。通过CCK8法、Annexin-Ⅴ+PI、流式细胞仪检测、划痕实验,观察过表达miR-21对胃癌细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移等生物学行为的影响。结果:定量real-time PCR结果显示miR-21在胃癌组织中高表达(P0.05),miR-21过表达细胞株增殖能力增强,与阴性对照组和空白对照组对比差别具有统计学意义(P<0.01),miR-21转染细胞划痕愈合速度较对照组快。结论:miR-21在胃癌中呈高表达,过表达miR-21可以促进BGC-823胃癌细胞的增殖能力和迁移能力,但对凋亡和细胞周期影响不明显。