新型阿片受体配基特异性结合μ受体并抑制cAMP生成

本文研究新合成阿片受体配基对稳定表达 μ阿片受体的CHO细胞的受体结合特性和对胞内cAMP的抑制作用。采用放射性配基结合的方法研究了阿片受体配基 [3H] diprenorphine(3H dip)在稳定表达 μ阿片受体的CHO细胞模型上 ,对 μ阿片受体的饱和性结合特征及和一系列新合成阿片配基A、B、C、D、E、F、G、及DAMGO([D Ala ,N Me Phe4 ,Gly ol5] enkephalin)和吗啡的竞争性结合特征。利用竞争性结合蛋白法测定阿片受体配基对胞内cAMP的抑制作用。 [3H] diprenorphine结合 μ阿片受体的Kd值为 1 0 6nmol L ;Bmax为 930fmol mg蛋白。结果表明新配基、DAMGO和吗啡竞争性结合 μ受体的IC50 值分别为 13 33± 3 73、14 36± 1 5 8、0 6 2± 0 0 3、5 6 38± 2 33、6 5 72±2 6 4 4、33 10± 11 33、0 5 5± 0 0 6、3 6 9± 1 5 9和 1 83± 0 5 0。其中C和G配基对 μ阿片受体的亲和力高于DAMGO和吗啡。B、D、E和F配基对μ受体的亲和力低于DAMGO和吗啡。新配基、DAMGO和吗啡抑制cAMP生成的IC50 值分别为 6 4 9± 1 5 9、1390± 6 1 10、0 84± 0 11、2 33± 1 2 4、2 5 0 0± 17 2 0、1 4 2± 1 2 1、0 0 1± 0 0 1、0 10± 0 0 5和0 0 4± 0 0 1。其中G配基的抑制胞内cAMP作用最强 ,强于吗啡 ,类     

新合成阿片受体配基对δ受体的激动作用

研究新合成的阿片受体配基对δ阿片受体的激动作用。采用生物鉴定的方法 ,检测新型阿片受体配基、DP DPE和吗啡对小白鼠输精管 (MVD)收缩的抑制作用和检测所激动的阿片受体亚型 ,以达到最大抑制作用的 5 0 %的药物浓度 (IC50 值 )评价效价强度。结果表明新型阿片受体配基、DPDPE和吗啡 (Mor)都可抑制MVD的电刺激收缩 ,显示纯激动剂作用。认为新型阿片受体配基与阿片受体的结合为可逆性结合。新型阿片受体配基A、C、D、E、F和G以及典型的阿片受体激动剂DPDPE和吗啡的IC50 值分别为 31 73± 3 5 4、15 92± 9 19、88 70± 16 2 6、10 74 0 0± 2 6 3 0 0、74 88± 5 8 6 9和 6 7 16± 8 4 9、3 2 0± 0 0 5、6 9 84± 2 7 5 8nmol L。竞争性拮抗剂纳洛酮 (Nal)可拮抗配基的激动作用 ,使新型阿片受体配基 ,DPDPE和吗啡的量效曲线平行右移。新型阿片受体配基可激动δ阿片受体 ,是典型的δ受体激动剂     

一种新的内源性阿片类物质——内吗啡肽

新近的研究发现,脑内存在着能与μ阿片受体特异性结合的内源性配体,其性能类似吗啡,故被命名为内吗啡肽(endomorphine,EM).本文简述了近两年来对EM的研究状况.其中包括EM对μ受体作用机制的影响,EM的生理功能,以及利用EM对μ受体有高亲和力的特征的研究等.这些资料可为进一步证实EM是受体的天然配体奠定一定的基础.     

阿片受体及其配体研究进展

1. 阿片受体及其配体的分类;阿片菲类生物硷和吗啡合成代用品以及内阿片肽,都是阿片受体激动剂,吗啡类似物纳洛酮、纳屈酮、和纳洛刹腙(Naloxazone),则是阿片受体阻断剂;具有吗啡基本结构的纳丁啡、戊唑星等,属于阿片受体部分激动剂或部分阻断剂。根据阿片受体的放射性配基结合试验和生理药理功能,可把阿片受体     

纳洛酮对心肌收缩力和心脏节律的影响

纳洛酮(naloxone,NAL)为特异性阿片受体拮抗剂,它与阿片受体特异性结合,阻断内源性阿片肽的效应。其作为一种治疗各类休克     

肺的肾上腺素能受体和肺疾患

肾上腺素能受体可接受其激动剂的刺激产生效应,其作用与交感神经兴奋所致的效果相似。肾上腺素(E)与去甲肾上腺素(NE)均为肾上腺素能受体激动剂,但前者是激素,后者是神经递质,在机体保护自身和适应环境中均起重要作用。肾上腺素能受体有两种不同类型,即α和β,又分别分为α_1、α_2及β_1、β_2亚型,有人将其分为神经受体和激素受体,β_1α_1属前者,β_2、α_2属后者。见图1 对受体的研究常用两种方法,药理的方法是将功能完好的器官或组织,在特殊实验条件下用各种药物试验,得到浓度-效应数据。生化的方法常用放射性配基结合测定法,将器官或组织匀浆,加入放射性配基与其温育,去除未与受体结合的放射性配基,用放射性测定结合     

甲醛固定对阿片受体结合能力的影响

应用放射受体分析和体外受体放射自显影技术,研究了甲醛固定对阿片受体结合能力的影响。结果表明,1％多聚甲醛溶液中孵育30分钟或12小时,对大鼠脑膜阿片受体结合能力均无显著影响; 2％或4％多聚甲醛溶液中孵育30分钟,对阿片受体结合能力也无显著影响。经甲醛固定的脑切片上的阿片受体,与[~3H]-埃托啡结合的饱和曲线与新鲜脑切片的相似。用1％多聚甲醛固定的组织切片进行体外受体放射自显影,较好地显示了阿片受体的分布。这些结果提示,甲醛固定的组织可用于进行体外受体放射自显影研究。     

一些膜受体配基结合部位研究的进展

本文以一些生物胺类受体为主,综述了以嵌合受体、位点定向和缺失突变以及物理学技术,对受体配基结合部位研究的一些进展。受体配基结合部位是由受体各跨膜区段的特定氨基酸残基组成、能与配基相互作用的特殊结构,它埋藏于脂类双层中,以“配基结合小袋”的形式存在。     

阿片受体及其激动剂和阻断剂

一、阿片和内阿片肽 1967年Martin根据Morphine、Ketocyclazocine、和SKF10047(烯丙去苯唑星)的作用特点,把阿片受体分为三种亚型,名为μ(mu)、K(Kappa)、和σ(sigma)受体。1975年从脑内分离出甲啡肽和亮啡肽;接受陆续发现近二十种与阿片作用相似的肽类,     

培养乳鼠心肌细胞M—胆碱能受体的放射自显影

体外培养乳鼠心肌细胞是药理学研究中的有用工具,尤其在药物—受体作用的研究中可进行直接的受体结合研究,具有独特的优点。[~3H]-二苯羟乙酸奎宁酯(~3H-QNB)是一种强效的M-胆碱能拮抗剂,能与M-受体紧密结合,具有很高的特异性。它可作为放射性配基进行受体结合研究,本实验应用放射配基受体结合法,以放射自显影技术直接观察培养乳鼠心肌细胞中的M-胆碱能受体。     

δ阿片受体在大鼠脊髓后角浅层内一级传入C纤维上的免疫电镜定位

脑啡肽是一种高效内源性阿片肽镇痛物质,δ阿片受体是其特异性受体。脊髓后角浅层,脑啡肽与δ阿片受体都有高密度表达。以前的资料表明,脑啡肽可通过对一级传入C纤维的突触前抑制在脊髓后角浅层对痛觉进行调制。本研究根据西非单叶豆(Griffoniasimplicifolia)同工凝集素I-B4与一级传入C纤维选择性结合的特性,应用免疫电镜双标技术观察δ阿片受体是否定位在大鼠一级传入C纤维中枢终末上,为脑啡肽在痛觉调制中的突触前抑制作用提供相应的受体基础。电镜下在大鼠脊髓后角浅层内观察到,以纳金(nanogold)标记的δ阿片受体除定位在部分树突中外…     

三种新的奥利文衍生物的药理作用

在离体组织豚鼠回肠（ＧＰＩ）、小鼠输精管（ＭＶＤ）和兔输精管（ＲｂＶＤ）上的作用表明,１０ｂ、１０ｃ和１０ｃｄ是三种新的奥利文衍生物为阿片受体的广谱合激动－拮抗剂,用大鼠脑、豚鼠小脑和豚鼠回肠纵肌匀浆Ｐ２膜制备进行的受点结合实验表明,三者对各型阿片受点都有一定的亲和力,其作用可可逆性并且对小鼠有微弱的镇痛效应,１０ｃ有弱的抗吗啡镇痛作用。     

~(125)ICYP测定人外周淋巴细胞β肾上腺素能受体方法的建立及鉴定

本文建立了用高特异性配基~(125)ICYP(idiocynopindolol)测定人外周淋巴细胞β肾上腺素能受体(HLCβAR)的方法并进行了鉴定。动力学实验显示,~(125)ICYP与HLCβAR达半量最大结合时间为7.75分钟,60分可     

大鼠肺间质巨噬细胞CCK受体的结合特性

目的:观察大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)胆囊收缩素(CCK)受体的表达亚型和结合特性。方法:用酶消化法结合肺泡耗竭灌洗和肺循环灌洗技术分离纯化大鼠PIMs,超速离心法提取细胞膜,与标记的硫酸化CCK-8(-CCK-8S)进行放射配基结合实验,用非标记的CCK-8S、CCK-A受体(CCK-AR)特异性拮抗剂CR1409及CCK-B受体(CCK-BR)特异性拮抗剂CR2945进行竞争抑制实验,观察配体受体结合的特异性及CCK受体表达亚型,观察孵育时间和温度对特异性结合的影响。结果:正常大鼠PIMs未能检出特异性结合,静脉注射脂多糖(LPS)48h出现特异性结合,且对孵育时间与温度有依赖性。经Scatchard分析,平衡解离常数(Kd)值为:(0.68±0.28)nmol·L^-1,最大结合容量(Bmax)值为(32.50±2.70)pmol·g^-1蛋白。通过竞争抑制实验,-CCK-8S与膜的结合可被CCK-8S、CR1409、CR2945所抑制,其IC₅₀值分别为:(3.20±1.13)nmol·L^-1,(0.19±0.06)μmol·L^-1和(2.30±0.80)nmol·L^-1。结论:大鼠PIMs存在CCK-A和CCK-B两种受体亚型,为CCK对生理及病理条件下巨噬细胞发挥效应提供了直接的结构依据。     

白细胞介素6受体

白细胞介素6受体(IL-6R)是造血生长因子受体家族的一员。它由一个80kD的配基结合链(IL-6R)和作为信号转导子的非配基结合链gp130组成。IL-6R既能以膜受体形式存在,也能以可溶性受体形式存在。可溶性白介素6受体(sIL-6R)同样具有膜受体的功能。白介素6受体的表达及调节在某些白介素6相关疾病的发病过程中起着重要作用。     

大鼠脊髓背角内吗啡肽阳性终末与μ阿片受体阳性神经元的突触联系

目的观察大鼠脊髓背角内吗啡肽阳性终末与μ阿片受体阳性神经元的突触联系.方法包埋前内吗啡肽免疫组织化学方法结合包埋前μ阿片受体免疫金颗粒标记的免疫电镜双标技术.结果内吗啡肽阳性终末以及μ阿片受体阳性胞体、纤维和终末主要分布于脊髓背角浅层（Ⅰ、Ⅱ层）;在电镜下可见二氨基联苯胺（DAB）反应产物标记的内吗啡肽阳性终末与免疫金颗粒标记的μ阿片受体阳性神经元胞体及其树突之间形成以非对称性为主的突触联系,其中的轴-树突触明显多于轴-体突触. 结论脊髓背角浅层内内吗啡肽与μ阿片受体阳性结构在分布方式上互相匹配,这种分布方式为其在外周痛信息传递的过程中发挥镇痛效应提供了形态学基础.     

大鼠脊髓后角内初级传入C纤维中δ阿片受体的免疫电镜定位

目的：观察大鼠脊髓后角浅层内δ阿片受体是否存在于初级传入Ｃ纤维内,为脑啡肽在痛觉切级传入调制中的突触前抑制提供更为可靠的形态学依据。材料与方法：应用双标（免疫）组织化学电镜护林在鼠脊髓后角浅层（Ⅰ～Ⅲ层）凝集素Ｉ－Ｂ们 和δ阿片受体。结果：大量轴突及轴突终末呈δ阿片受体阳性免疫反应,特别是在双标切片上,观察到约４０％的凝集素Ｉ－Ｂ４结合位点阳性纤维及其终末内也含有δ阿片受体。结论：脊髓后角浅层内的     

δ—阿片受体激动剂DADLE对β—内啡肽和催乳素释放的影响

本工作给大鼠第三脑室微量注射δ-阿片受体相对选择性激动剂DADLE,增加血浆中β-内啡肽和催乳素的含量。结果表明,激活脑内δ-阿片受体,可同时兴奋上述垂体前叶激素的分泌。     

内源阿片肽的研究进展

长期应用于临床的可片碱类药物,如吗啡、可待因等是一类从植物中提取的麻醉品类镇痛药。1973年人们发现哺乳动物脑中存在有阿片受体,这使对阿片碱类药物的药物作用原理的认识进入到分子水平,然而却提出了一个新的问题——既然有阿片受体存在,那么体内必定存在某种生物活性物质与之相互作用。从此人们开始寻找内源性阿片物质。1975年起从体内先后分离出多种阿片肽。它们参与了痛觉调制。免疫调节等多种复杂的生理功能。1　内源性阿片肽1.1　内源性阿片肽的分类与结构内源性阿片肽是哺乳动物体中天然生成的片样活性物质,它包括了最初发现的三…     

对氯苯丙氨酸对大鼠海马胞液皮质酮受体数量的影响

脑内激素受体的研究是神经内分泌学的一个重要内容。已证实大鼠脑内皮质酮受体集中分布在海马,近年来报道,海马皮质酮受体数量受脑内5—HT能系统的调节。本文用放射配体结合测定法研究了去肾上腺大鼠海马胞液皮质酮受体的结合持性以及对氯苯丙氨酸降低海马5—HT含量后,海马胞液皮质酮受体数量的变化。