三甲基氯化锡诱导PC12细胞凋亡的机制

目的 在体外条件下,研究三甲基氯化锡(trimethyltin chloride,TMT)对PC12细胞增殖、细胞凋亡及细胞氧化损伤的作用,并探讨TMT对NF-kB表达的影响.方法 (1)不同浓度TMT(0、0.3125、0.6250、1.2500、2.500、5.000、10.000、20.000 μmol/L)处理PC12细胞24、48 h,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率;(2)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L TMT分别染毒PC12细胞12、24h后,流式细胞仪检测检测细胞凋亡率;(3)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L剂量的TMT染毒PC12细胞6h后,测定活性氯(ROS)和谷胱甘肽(GSH)含量的变化;(4)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L剂量的TMT染毒PC12细胞12h后免疫印迹法(Western blot)检测核蛋白NF-kB的水平.结果 与溶剂对照组比较,染毒24 h,2.5000、5.0000、10.0000、20.0000 μmol/L TMT剂量组细胞存活率明显下降;染毒48 h,1.2500、2.5000、5.0000、10.0000、20.0000 μmol/L剂量组细胞存活率明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L TMT染毒细胞12h,凋亡率分别为15.30％±0.75％、18.90％±0.61％、22.00％±0.60％、36.50％±0.66％,染毒24 h凋亡率分别为28.60％±0.40％、43.54％±2.00％、65.73％±0.71％、74.67％±0.40％,明显高于对照组[12 h:(12.80％±1.00％)、24 h:(16.83％±0.25％)],差异均有统计学意义(P＜0.05).1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L剂量组的ROS荧光强度值分别为对照组的1.42、1.71、1.78、1.89倍,差异有统计学意义(P＜0.05).2.50、5.00、10.00 μmol/L组GSH含量分别为(0.17±0.0)、(0.20±0.04)、(0.07±0.03)μmol/μg pro,明显低于对照组(0.30±0.01) μmol/L pro,差异有统计学意义(P＜0.05).2.50、5.00、10.00 μmol/L剂量组NF-kB p65表达的蛋白条带灰度值明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在本实验条件下,TMT对PC12细胞具有明显抑制增殖和诱导凋亡的作用,其作用可能与氧化应激以及NF-kB信号通路的激活有关.     

miR - 107在铝引起学习记忆下降及Aβ1 - 42沉积中的作用

目的 探讨miR - 107在麦芽酚铝染毒致大鼠学习记忆下降及Aβ1 - 42表达升高中的作用机制。方法 细胞实验:麦芽酚铝染毒HEK293细胞,对照组、低剂量组（100 μmol/L）、中剂量组（200 μmol/L）、高剂量组（400 μmol/L）染毒24 h, RT - qPCR检测 miR - 107表达水平,ELISA检测 BACE1、Aβ1 - 42表达量。动物实验:健康2月龄雄性SD大鼠,按体重随机分为对照组（生理盐水）、低剂量组（10 mM/kg）、中剂量组（20 mM/kg）、高剂量组（40 mM/kg）,采用腹腔注射染毒45 d,Morris水迷宫实验测定大鼠的学习记忆能力, RT - qPCR检测大鼠海马miR - 107的相对表达量。结果 不同剂量麦芽酚铝染毒HEK293细胞24 h后,与对照组相比,低、中、高剂量组miR - 107相对表达量降低（F = 11.385,P＜0.001）;中、高剂量组BACE1和Aβ1 - 42表达量均升高（P＜0.05）。Morris水迷宫实验结果:定位航行实验表明大鼠逃避潜伏期没有变化（F = 0.662, P＞0.05）;空间探索实验表明大鼠穿越平台次数（F = 0.069,P＞0.05）和目标象限停留时间(F = 0.779,P＞0.05)均没有变化。RT - qPCR结果:与对照组相比,中、高剂量组大鼠海马miR - 107相对表达量降低（F = 16.654,P＜0.01）。结论 麦芽酚铝染毒后,miR - 107相对表达量在染铝早期即出现降低:BACE1、Aβ1 - 42表达量升高,提示铝染毒致大鼠学习记忆能力下降及BACE1、Aβ1 - 42表达升高可能与早期miR - 107表达降低有关。     

CS_2致大鼠睾丸Sertoli细胞DNA损伤的研究

目的研究CS2对离体培养大鼠睾丸Sertoli细胞DNA的损伤作用。方法从大鼠睾丸组织中分离Sertoli细胞进行离体原代培养、纯化及鉴定,用不同浓度(0、0.36、0.72和1.44μmol/ml)CS2染毒,应用SCGE检测CS2诱导Sertoli细胞DNA损伤,以彗星尾DNA%和Olive尾距反映DNA损伤水平。结果染毒组Sertoli细胞呈彗星状,尾DNA%[(13.91±3.23)、(37.07±5.42)和(49.10±5.26)]和Olive尾距[(3.71±1.66)、(11.73±2.65)和(19.54±3.41)]随CS2染毒浓度的增高而逐渐增高,与阴性对照组比较差异均有显著性(P<0.01),且与剂量对数呈明显的剂量-效应关系。结论CS2可诱导大鼠睾丸Sertoli细胞DNA损伤。     

氯化镉对大鼠肾上皮细胞丝裂原活化蛋白激酶表达及其磷酸化的影响

目的 探讨氯化镉染毒大鼠正常肾上皮(normal rat kidney epithelial,NRK)细胞对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达及其磷酸化水平的影响.方法 应用不同剂量(0、1、5、10、20、40 μmol/L)氯化镉染毒NRK细胞24 h和同一剂量氯化镉(10 μmol/L)于不同时间(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 h)染毒NRK肾细胞.采用蛋白免疫印迹法检测氯化镉染毒后NRK细胞中MAPK表达水平,并用磷酸化抗体检测MAPK磷酸化水平.结果 不同氯化镉剂量和不同染毒时间染毒NRK细胞,发现MAPK表达无明显改变,但MAPK磷酸化蛋白表达量较对照组升高.氯化镉浓度在10 μmol/L时p-ERK1/2表达明显,表达量为1. 00±0.06;20 μmol/L和40 μmol/L剂量组表达量分别为2.58±0.11、2.76±0.23,比10 μmol/L组高1.58倍和1.76倍,差异有统计学意义(F=827.70,P＜0.01);氯化镉浓度为20 μmol/L(2.47±0.20)和40 μmol/L(3.73±0.25)时p-p38MAPK表达量比对照组(1.00±0.02)高1.47倍和2.73倍,差异有统计学意义(F=280.06,P＜0.01).p-ERK1/2和p-p38MAPK表达量与氯化镉浓度存在剂量-效应关系(p-ERK1/2相关系数为r=0.919,t=4.69,P=0.009;p-p38MAPK相关系数为r=0.945,t=5.79,P=0.004).MAPK磷酸化蛋白表达水平也与染毒时间相关,p-ERK1/2在染毒1 h(1.26±0.11)时表达明显,染毒4 h(1.51±0.07)和8 h(3.53±0.23)时表达量是对照组(1.00±0.02)的1.5倍和3.5倍,差异有统计学意义(F=427.82,P＜0.001);p-p38MAPK在染毒1 h(1.31±0.07)时表达也明显增加,染毒4 h(3.53±0.32)和8 h(4.41±0.38)时表达水平是对照组(1.00±0.03)的3.5倍和4.4倍,差异有统计学意义(F=280.06,P＜0.001).结论 氯化镉染毒NRK细胞可引起MAPK蛋白磷酸化水平明显升高,可能与MAPK的激活有关.     

DNA聚合酶β表达水平对苯代谢物氢醌致细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

目的 探讨DNA聚合酶β(DNA polymerase beta,polβ)对氢醌(HQ)所致细胞凋亡的影响及其可能的分子机制.方法 以polβ野生型(polβ+/+)、polβ缺陷型(polβ-/-)及polβ高表达型(polβoe)小鼠胚胎成纤维细胞为研究对象,以不同浓度的HQ溶液染毒后,采用流式细胞术分别检测HQ对细胞凋亡和线粒体膜电位( △Ψm)的影响,试剂盒法测定细胞内活性氧(ROS)和羟自由基(·OH)含量;化学发光法分析细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.结果 与对照组相比,各染毒组凋亡细胞率和△Ψm降低的细胞比例明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).与polβ+/+细胞比较,20.00、40.00、80.00 μmol/L染毒组polβ-/-细胞凋亡率明显增高,10.00、20.00、40.00、80.00μmol/L染毒组polβ oe细胞凋亡率明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与polβ+/+细胞(20.60％±0.57％、37.95％+0.64％、44.50％±1.27％、57.55％+1.06％)比较,10.00、20.00、40.00、80.00 μmol/L染毒组polβ-/-细胞△Ψm降低的细胞比例(33.60％±1.55％ 、46.05％±1.77％、52.75％±2.05％、75.20％±0.56％)明显增高,polβ oe细胞△Ψm降低的细胞比例(16.05％±1.20％、29.80％±1.21％、35.15％±1.06％、53.80％±0.85％)明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与polβ+/+细胞比较,各染毒组polβ-/-细胞产生的荧光强度明显增高,polβ oe细胞的荧光强度明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与polβ+/+细胞相比,20.00、40.00 μmol/L染毒组polβ-/-细胞内·OH含量明显增高,polβ oe细胞内·OH含量明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).在相同浓度HQ染毒剂量下,polβ-/-细胞内SOD和GSH-Px消耗最快,polβ oe细胞内的SOD和GSH-Px消耗速度缓慢.结论 HQ可诱导细胞产生ROS,降低△Ψm,从而介导凋亡的发生;polβ可以帮助细胞对抗ROS的产生,降低线粒体发生去极化的几率,从而对HQ介导的凋亡起到一定的保护作用.     

糖皮质激素通路介导邻苯二甲酸二丁酯对大鼠睾酮合成的抑制作用

目的 探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)抑制大鼠睾酮(T)合成的作用机制.方法 雄性Wistar大鼠按数字表法随机分为5组,即0.25、0.50、1.00和2.00g/kg DBP剂量组和溶剂对照组,每组16只.经口灌胃,每天1次,连续30 d,染毒结束后,每组处死8只动物,另8只饲养15 d后处死.放射免疫法检测血清T和糖皮质激素(GC)水平;RT-PCR法检测11 β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSD)和类固醇生成急性调控蛋白(StAR)基因表达水平;Western blotting检测糖皮质激素受体(GR)表达水平.结果 染毒期,1.00和2.00 g/kg DBP剂量组血清T水平分别为(0.260±0.218)和(0.260±0.342)ng/ml,GC水平分别为(13.470±5.661)和(13.740±3.977)ng/ml,对照组血清T水平为(1.045±1.222)ng/ml,GC水平为(9.224±3.496)ng/ml,1.00和2.00g/kg DBP剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(tT值分别为-2.295、-2.295,tGC值分别为2.159和2.296,P值均小于0.05);1.00和2.00 g/kg DBP剂量组StAR基因表达水平降低,STAR/β-Actin比值分别为0.657±0.060和0.407±0.033,与对照组(0.871±0.081)比较,差异有统计学意义(t值分别为-3.707和-8.037,P值均小于0.05);1.00和2.00 g/kg DBP剂量组11β-HSD基因表达水平(11β-HSD/β-Actin比值分别为0.538±0.138和0.988±0.133)和GR蛋白表达水平(GR/β-Actin比值分别为0.785±0.106和0.956±0.076)与对照组(0.285±0.106和0.275±0.035)比较,差异有统计学意义(t11β-HSD/β-Actin值分别为2.829、7.860,tGR/β-Actin值分别为8.064和10.77,P值均小于0.05),与DBP剂量呈正相关,r值分别为0.776和0.790.恢复期,DBP各剂量组上述指标与对照组比较差异均无统计学意义.结论 DBP能通过GC通路介导对大鼠T合成的抑制作用.     

壬基酚对大鼠垂体和N2a细胞雌激素受体β表达的影响

目的 探讨壬基酚（nonylphenol, NP）对大鼠垂体组织及神经瘤母细胞（neuro-2a cells, N2a）中雌激素受体β(estrogen receptor β, ERβ)表达水平的影响。方法 （1）24只SD雄性大鼠随机分成4组,每组6只,分别为空白对照组（C,玉米油）,NP低剂量组（L-NP, 0.4 mg/kg）、中剂量组（M-NP, 4 mg/kg）、高剂量组（H-NP, 40 mg/kg）,空腹灌胃90 d后进行悬尾实验;（2）取大鼠垂体组织,高效液相色谱测定NP含量、免疫荧光检测ER β的表达水平;（3）0～200μmol/L NP细胞染毒后,显微镜下观察细胞,确定细胞实验的NP剂量;CCK-8法检测剂量浓度NP影响下N2a细胞的吸光度,免疫荧光检测N2a细胞ER β表达。结果 壬基酚可致大鼠不动时间延长（F=11.28, P<0.01）且随着染毒剂量的增加而增加。与对照组相比,各NP染毒组垂体ER β荧光强度变暗（F=6.335, P<0.05）;垂体NP含量与不动时间呈正相关（r=0.642, P<0.01）、与垂体ER β荧光表达呈负相...     

微囊藻毒素LR对碱基切除修复基因和凋亡相关基因mRNA表达的影响

目的 探讨微囊藻毒素LR(MCLR)对碱基切除修复基因和凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法 用不同剂量（O、1、5、10、30 μg/ml）的MCLR对大鼠肝细胞株BRL-3A进行不同时间(24、48、72 h)的染毒,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,同时用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定碱基切除修复基因和凋亡相关基因mRNA表达情况。结果 BRL-3A细胞存活率随MCLR染毒剂量升高和染毒时间延长而降低。BRL-3A细胞在MCLR作用24h时,30 μg/ml剂量组P53基因的mRNA表达量( 1.327±0.028)增高,明显高于其他各组(分别为1.005±0.117、0.862±0.154、1.028±0.056、1.015±0.091),差异有统计学意义（P＜0.05）。同样,在MCLR作用24h时,各组Bax基因mRNA表达水平也增高,1、5、10、30 μg/ml染毒组Box基因mRNA表达水平(分别为5.080±0.729、5.820±0.373、6.018±0.359、6.183±0.515)明显高于对照组(1.024±0.277),差异有统计学意义(P＜0.01),而后表达下降,染毒72 h时,30 μg/ml染毒组Bax基因mRNA的表达量(0.604±0.146)低于其他各组(分别为1.004±0.107、0.811±0.142、0.855±0.101、0.814±0.056),差异有统计学意义(P＜0.05)。BRL-3A细胞在MCLR作用48 h,30 μg/ml染毒组PARP1基因mRNA的表达(0.488±0.147)低于对照组(1.006±0.132)和1μg/ml染毒组(1.034±0.241),而72 h时,30 μg/ml染毒组JWA、XRCC1和PA RP1表达(分别为0.594±0.180、0.491±0.015、0.305±0.091)均低于其他各组,差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 肝细胞在高剂量MCLR染毒后,不同基因在不同时间的mRNA表达改变是不同的。对于碱基切除修复通路上基因mRNA表现为抑制作用,这可能是MCLR促肝癌的机制之一。     

硫酸铟对大鼠肾脏的损害作用

目的探讨硫酸铟亚慢性经口染毒对大鼠的肾脏损害作用。方法选取4周龄SPF级雄性Wistar大鼠32只,随机分成对照组(生理盐水)、硫酸铟低剂量组(52.3 mg/kg)、中剂量组(104.6 mg/kg)和高剂量组(261.4 mg/kg),每组8只。采用灌胃方式进行染毒,1次/天,5天/周,连续染毒8周,染毒结束后收集24 h尿液;次日处死前称重,并收集血液和肾脏。采用试剂盒测定血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、白蛋白(ALB)、总抗氧化能力(T-AOC),以及肾组织微量还原型谷胱甘肽(GSH)含量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清和尿液中β2-微球蛋白(β2-MG)含量;采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定血液、尿液和肾组织中的铟含量;采用HE染色对肾组织进行病理形态学观察。结果实验期间,各组大鼠一般状况正常,体重稳定增长,在染毒第7周和第8周时,高剂量染毒组大鼠体重明显低于对照组(P0.05)。与对照组比较[(1.27±0.55)、(0.40±0.01)和(0.30±0.06)μg/L],3个剂量组大鼠血铟[(44.10±23.10)、(52.08±21.03)和(67.42±45.98)μg/L]、尿铟[(0.72±0.13)、(2.75±0.15)和(4.31±0.33)μg/L]和肾铟含量[(1.36±0.83)、(1.52±0.49)和(2.87±0.20)μg/g]均显著升高(P0.05);高剂量染毒组大鼠血清中Cr明显高于对照组[(66.06±18.62)μmol/L和(46.53±7.95)μmol/L,P0.05],高剂量组和中剂量组大鼠血清BUN含量[(3.98±0.82)mmol/L和(4.09±0.71)mmol/L]明显低于对照组[(4.77±0.49)mmol/L,P0.05];3个剂量组血清和尿液中β2-MG水平较对照组均明显升高(P0.05);3个剂量组大鼠血清T-AOC水平[(4.87±2.36)、(4.50±2.33)和(4.00±3.29)U/m L]和肾组织GSH水平[(6.41±1.86)、(5.06±2.09)和(2.77±2.64)μmol/(g prot)]均明显低于对照组[(15.20±5.43)U/mL和(14.74±6.47)μmol/(g prot),P0.05];中、高剂量染毒组与对照组比较有明显的炎症性病理改变,主要表现为肾小球肿胀、肾小管结构异常和炎性细胞浸润等。结论硫酸铟灌胃染毒会引起大鼠肾脏铟的蓄积、发生氧化损伤、病理改变以及功能障碍等。     

双酚A对大鼠睾丸支持细胞的功能影响及机制

目的 探讨双酚A(BPA)对雄性SD大鼠睾丸支持细胞功能的影响及损伤机制.方法 将16～22日龄SPF级雄性SD大鼠的睾丸支持细胞制成3.0×10~6～3.5×10~6个/ml的细胞悬液,设立空白对照组、溶剂对照组和1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)、1×10~(-4)mol/L BPA染毒组,观察睾丸支持细胞的增殖、细胞周期以及PCNA、Vimentin蛋白表达的情况.结果 各染毒组睾丸支持细胞的存活率明显低于对照组(P<0.05),G_0/G_1期细胞构成比增加,而S期和M期细胞构成比降低,PI下降.免疫细胞化学结果显示,10~(-4)mol/L、10~(-5) mol/L BPA实验组显著抑制大鼠睾丸支持细胞PCNA的表达.BPA在10~(-4) mol/L、10~(-5)mol/L、10~(-6) mol/L剂量组显著抑制大鼠睾丸支持细胞内Vimentin的表达.结论 双酚A可通过影响睾丸支持细胞的细胞增殖、细胞周期和抑制PCNA、Vimentin蛋白表达而表现出生殖毒性.

Abstract：

Objective To investigate the effects of bisphenol A on SD rat Sertoli cell function and the injury mechanism. Methods SD rat Sertoli cells were treated with bisphenol A at different doses,and the control group,solvent control group were set. Sertoli cell proliferation,cell cycle and PCNA.Vimentin protein expression were observed. Results The survival rate of Sertoli cells in the treated groups was significantly lower than the control group (P<0.05), constitution ratio of G_0/G_1 phase cells increased,while for S phase and M-phase, it decreased,and PI decreased. Immunocytochemistry showed PCNA expression in Sertoli cells was significantly inhibited by 10~(-4),10~(-5) mol/L BPA. Vimentin expression in Sertoli cells was significantly inhibited by 10~(-4), 10~(-5),10~(-6) mol/L BPA. Conclusion Bisphenol A can affect Sertoli cell proliferation,cell cycle and inhibit PCNA.Vimentin protein expression in Sertoli cells.     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。