经皮电刺激促进周围神经再生的实验研究

为了观察经皮电刺激能否促进周围神经再生，选用３６只大鼠坐骨神经，切断后的神经断端吻合与钳夹损伤后的神经干瘢痕模型，通过参数为２～５Ｈｚ，０．４ｍｓ，２４～４８Ｖ的经皮电刺激，分别于术后１～６周，进行电生理组织形态学观察。结果显示：电刺激组的神经传导速度、肌肉最大诱发电位波幅、神经纤维生长速度、吻合口轴突通过率、肌纤维截面积及肌重均优于同期对照侧。表明经皮电刺激能促进周围神经再生。     

^125碘—辣根过氧化物酶追踪手术后神经轴浆流的实验研究

目的 研究^125碘－辣根过氧化物酶（^125I-HRP）追踪术后神经轴浆流的可行性；为临床应用放射性同位素研究神经再生提供实验依据。方法 24只SD磊鼠，按手术先后顺序分为两组。（1）实验组：于从骨结节远端0．8cm处切断大鼠右侧坐骨神经后立即行端端缝合术。术后4周，从右侧小腱三头肌内注射^125I－HRP。（2）对照组：将^125Ｉ－ＨＲＰ注射到大鼠右侧小腱三头肌内。于注射^125I－HRP24h后，实验组取神经缝合口近段0．8cm神经干，对照组取石侧坐骨结节远端的坐骨神经0．8cm；两组同时切取该段神经周围肌肉和左侧相应部位坐骨神经干，进行^125碘放射性强度的Г－计数。结果 对照组，注射侧坐骨神经干的^125碘放射性强度是其它组织的30倍以上。实验组，注射侧坐骨神经的6125碘放射性强度是其周围肌肉和对侧坐骨神经的6倍和7倍。两组注射侧坐骨神经的^125碘放射性强度和其它组织相比，均有显著性意义（P＜0．01）。结论 ^125I-HRP注入肌肉被神经末梢摄取后，经轴浆逆流可以通过神经缝合口到达神经近段，应用Г－计数器可探测神经组织中的^125碘放射性强度。     

体外神经牵延器修复周围神经缺损的实验研究

目的：观察体外神经牵拉延长器修复兔周围神经缺损效果。为临床应用提供实验依据。方法：健康成年家兔36只，造成右侧坐骨神经缺损模型，随机分为神经牵拉延长组（12只）、神经游离移植组（12只）和神经端端吻合组（12只），术后每周观察动物一般情况，第12、16、20周神经电生理测定，第20周观察组织学变化。结果：神经牵拉延长器组神经功能恢复情况与神经游离移植组无明显差别，优于神经经端端吻合组。结论：神经牵延器体外缓慢延长修复周围神经缺损是可行的。     

外源性神经生长因子促进周围神经再生的研究

目的：探讨外源性神经生长因子促进周围神经再生的作用。方法：切断兔双侧坐骨神经，用硅胶管桥接，神经两断端在管内相距６ｍｍ，一侧管内注入神经生长因子溶液，另一侧注入等量生理盐水作对照，以观察神经生长因子对神经再生的影响。术后１￣５周取标本，经光镜、电镜及轴突图像分析检测。结果：注入神经生长因子管内再生神经干的直径是对照侧的２位，神经远断端再生神经轴突数目及其再生轴突恢复率是对照侧的２．５倍。结论；外源     

尼莫地平注射液对周围神经损伤再生的影响

目的 观察尼莫地平注射液对周围神经损伤再生动物模型的影响.方法 40只SD大鼠随机分为给药（尼莫地平）组与对照组,所有动物离断左侧坐骨神经后予以神经外膜间断缝合造周围神经损伤再生模型.给药组隔日术侧肌肉注射尼莫地平0.5ml,对照组给与等量生理盐水.术后定期行坐骨神经功能评估和神经生理指标测定,并于12周时取材行形态学观察.结果 给药组在坐骨神经功能、神经电生理及形态学指标上均优于对照组（P〈0.05）.结论 尼莫地平注射液可明显促进周围神经损伤的再生.     

神经营养素3基因修饰的神经干细胞对周围神经再生修复的影响

目的 探讨神经营养素3基因修饰的神经干细胞对周围神经再生的影响。方法 54只SD大鼠随机分为3组，造成坐骨神经切断损伤模型，神经外膜端端缝合，于小腿三头肌每周分别注射生理盐水、未被神经营养素3基因修饰的神经干细胞、及神经营养素3基因修饰的神经干细胞。术后3、6、9周动态观察坐骨神经功能指数(SFI)以了解后肢功能恢复情况、组织学切片观察、肌湿重恢复率测定、9周后吻合口神经干的电镜观察。结果 神经营养素3基因修饰的神经干细胞组动物的有髓神经纤维密度、神经组织面积、髓鞘厚度、肌湿重以及坐骨神经功能指数均显著优于未被神经营养素3基因修饰的神经干细胞组和生理盐水组，9周时差异有统计学意义。单纯神经干细胞组各项指标优于生理盐水组。结论 将神经营养素3基因修饰的神经干细胞移植于修复的周围神经，使局部释放的NT-3加快轴突再生速度以促进周围神经再生，减缓失神经支配肌肉的萎缩。     

甲基泼尼松龙对周围神经修复的影响

目的 探讨甲基泼尼松龙对周围神经再生的促进作用及剂量选择。方法 28只成年SD雌性大，取股外侧切口，钳夹造成双侧坐骨神经损伤。创伤后1h起分别肌注不同剂量的甲基泼尼松龙或对照溶液，并间隔3h维持肌注，持续24h。按肌注剂量的不同随机分为大剂量组（首剂150mg/kg）、中剂量组（首剂30mg/kg）、小剂量组（首剂15mg/kg）和对照组（生理盐水与0．9％苯甲醛1：1混合液）。肌注后观察各组大鼠一般状态，记录术前及术后4周大鼠足印，测定坐骨神经功能指数（SFI0；术后4周显露双侧坐骨神经测定神经传导速度（NCV）；对取得的数据进行统计学分析。同时行神经横切片组织学观察。结果 中、小剂量组SFI均值优于大剂量组和对照组，但差异无显著性意义；中、小剂量组神经诱发电位引出率（100％）明显高于对照组（57．1％）（P＜0．01）；小剂量组NCV值优于其他三组，而且差异具有显著性意义（P＜0．05）；大剂量组大鼠均出现明显神经精神症状，有1只因感染死亡，3只4侧出现局部感染，其他三组未见明显异常。中、小剂量组神经横切片轴索再生情况优于大剂量组及对照组。结论 甲基泼尼松龙的全身应用可有效促进周围神经损伤后再生，但剂量选择不应过大，以减少感染及精神症状等副作用。     

FK506缓释膜片促进外周神经端-侧吻合后神经再生的研究

目的 探讨免疫抑制剂FK506缓释膜片局部应用对周围神经端-侧吻合后神经再生的影响。方法 选用SD大白鼠40只，随机平均分成实验组和对照组。实验组：切断腓总神经，在邻近的胫神经干外膜上开一1mm窗口，将腓总冲经远端与胫神经干做端-侧神经吻合后在吻合口周围放置含有FK506分子可降解缓释膜片。对照组：单纯行神经端-侧吻合：两组分别于术后2、4、8、12周取材，对腓总神经和胫神经干用快蓝（FB）和荧光金（FG）注射标记，取背根神经节（DRG）和脊髓在荧光显微镜下观察被标记细胞。结果 实验组背根冲经节和脊髓内FB标记细胞明显多于对照组。结论 免疫抑制剂FK506能促进外周神经端-侧吻合后神经再生的速度和质量。     

125碘 - 辣根过氧化物酶追踪手术后神经

目的　研究12 5碘 辣根过氧化物酶 ( 12 5I HRP)追踪术后神经轴浆流的可行性 ;为临床应用放射性同位素研究神经再生提供实验依据。方法　 2 4只SD大鼠 ,按手术先后顺序分为两组。 ( 1)实验组 :于坐骨结节远端 0 .8cm处切断大鼠右侧坐骨神经后立即行端端缝合术。术后 4周 ,从右侧小腿三头肌内注射12 5I HRP。 ( 2 )对照组 :将12 5I HRP注射到大鼠右侧小腿三头肌内。于注射12 5I HRP 2 4h后 ,实验组取神经缝合口近段 0 .8cm神经干 ,对照组取右侧坐骨结节远端的坐骨神经 0 .8cm ;两组同时切取该段神经周围肌肉和左侧相应部位坐骨神经干 ,进行12 5碘放射性强度的г 计数。结果　对照组 ,注射侧坐骨神经干的12 5碘放射性强度是其它组织的 3 0倍以上。实验组 ,注射侧坐骨神经的12 5碘放射性强度是其周围肌肉和对侧坐骨神经的 6倍和 7倍。两组注射侧坐骨神经的12 5碘放射性强度和其它组织相比 ,差异均有显著性意义 (P <0 0 1)。　结论　12 5I HRP注入肌肉被神经末梢摄取后 ,经轴浆逆流可以通过神经缝合口到达神经近段 ;应用г 计数器可探测神经组织中的12 5碘放射性强度。     

周围神经移植修复脊髓损伤的实验研究

目的：探讨自体坐骨神经移植修复脊髓损伤的可行性。方法：将58只雌性Wistar大鼠分为二组，实验组：采用显微外科技术，将50只大鼠于T13水平切除左半侧脊髓10mm，再取右侧坐骨神经10mm移植到脊髓缺损处，近端接脊髓，远端接马尾，分别于术后2、4、6、8、12、22周在光镜和电镜下观察移植处坐骨神经、吻合口远端马尾神经、左后肢坐骨神经再生情况，并用摄像机记录患肢功能恢复情况。对照组：8只大鼠，于13水平切除左半侧脊髓10mm，不移植坐骨神经，观察脊髓缺损远端马尾神经和左右肢坐骨神经再生情况。结果：对照组坐骨神经的轴突及髓鞘部分崩解，密度降低，无再生轴突形成。实验组术后4周电镜下偶见移植处坐骨神经髓鞘及轴突形成，术后8周光镜及电镜下可见较多细的有髓神经纤维，22周时接近正常；同时观察到左后肢坐骨神经再生；大鼠后肢功能部分恢复，肌力达3级。结论：大鼠脊髓损伤后有再生能力，周围神经移植修复脊髓损伤是可行的。     

超激光对家兔坐骨神经损伤后再生的作用

目的探讨超激光照射疗法对坐骨神经钳夹伤后神经再生的作用.方法45只成年雄性家免随机分为3组,对照组根据是否钳夹坐骨神经分为两组(A组和B组),C组为钳夹后超激光治疗组.钳夹前、钳夹后24h、超激光治疗10d、20d、30d时测运动神经传导速度(MNCV),治疗30d后行坐骨神经神经纤维单丝制备、Bielschowsky染色、Loyez染色、电镜超薄切片观察坐骨神经再生和修复情况.结果超激光治疗20d、30d时,C组MNCV明显快于B组(P＜0.01),但仍慢于术前(P＜0.01).治疗30d后光镜和电镜下观察,C组损伤处神经纤维有大量轴突和髓鞘形成,郎飞氏结清晰,结间距变短,髓鞘板层样结构清楚,轴浆内线粒体结构正常且数目增多,雪旺氏细胞胞浆丰富,胞浆内线粒体数目增多.结论超激光照射疗法对神经钳夹损伤后再生修复有明显的促进作用.     

Compound injection of Radix Hedysari to promote peripheral nerve regeneration in rats

OBJECTIVE: To study the effect of compound injection of Radix Hedysari on peripheral nerve regeneration in rats. METHODS: Seventy-five healthy adult SD male rats, weighing 150 g, were randomized into 5 groups (15 rats in each group). The bilateral sciatic nerves of the rats were exposed and clamped with a smooth clamp to make an injury area of 2 mm. After clamp operation Group 1 was injected with compound injection of radix Hedysari (CIRH) 1.5 ml/day, Group 2 with CIRH 1.0 ml/day, Group 3 with CIRH 0.5 ml/day, Group 4 with nerve growth factor (NGF) 50 U/day, and Group 5 was taken as the control group without any management. The bilateral sciatic nerve was taken out at 3 days, 1, 2 and 4 weeks after clamping, stained with osmic acid and observed microscopically. The myelinated nerve fibers were counted. The nerve conduction velocity was determined 2 and and 4 weeks before sample taking the sciatic nerve function index was measured 4 weeks before sample taking. RESULTS: The results of nerve conduction velocity, the myelinated nerve fiber count and the sciatic functuion index in the CIRH treated groups were better than those in the control group. The results of the nerve conduction velocity and the myelinated nerve fiber count at 2 weeks and the nerve conduction velocity at 4 weeks in Group 1 were better than those of Group 4. Biological observation showed that degenerated and necrotic myelin sheath in CIRH treated Groups at 2 and 4 weeks decreased remarkably compared to the NGF treated group. CONCLUSIONS: CIRH can promote regeneration of peripheral nerves and absorption of degenerated and necrotic injured nerves. It has the same effect as NGF.     

Peripheral nerve injection injury: an experimental study.

In an attempt to answer questions regarding nerve injection injuries, we injected 11 agents in current use and commonly administered by intramuscular injection into the sciatic nerves of adult Wistar rats. Equal volumes of normal saline were used as control. We harvested the sciatic nerves at various times after injection and examined them by both light and electron microscopy. We performed myelinated nerve fiber counts and constructed histograms. Any impairment of motor function was also noted. We gave injections to 79 animals a total of 158 times; 116 injections were directly into the nerve fascicle (intrafascicular) and 42 were into the epineural tissue (extrafascicular). The results revealed considerable variation in the degree of nerve fiber injury according to the agent injected. Minimal damage resulted from the injection of iron-dextran, meperidine, and cephalothin, and maximal nerve injury followed the injection of penicillin, diazepam, and chlorpromazine. The site of injection was crucial. Intrafascicular injection was invariably associated with severe nerve injury, but, with few exceptions, extrafascicular injection resulted in minimal damage. The quantity of drug injected was also important in determining the degree of injury. Large, heavily myelinated fibers were more susceptible to injection injury than smaller, thinly myelinated nerve fibers. The effect of the injected drug seemed to be related to injury of the nerve fiber unit--both the axon and the Schwann cell with its myelin sheath. Regeneration in damaged nerves was a constant finding; even the most severely injured nerves, with total axonal degeneration, underwent subsequent regeneration.     

嗅鞘细胞与雪旺细胞修复神经缺损的效果比较

目的 比较雪旺细胞和嗅鞘细胞修复周围神经损伤的能力. 方法体外培养异体雪旺细胞及嗅鞘细胞2周后纯化浓缩待用.60只成年雌性Wistar鼠随机分成三组,坐骨神经切除25 mm长轴突,保留神经外膜吻合于近端,分别将细胞培养液、雪旺细胞、嗅鞘细胞分别植入A、B、C组神经外膜腔内,术后3个月,通过大体形态观察、显微镜及透射电镜观察、逆行标记荧光红的运输距离、免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白及神经生长因子、踝关节功能评分、酶联免疫方法检测髓鞘碱性蛋白及神经丝蛋白来评估神经缺损的修复效果. 结果神经缺损再生情况,肉眼观C组最完全,B组次之,而A组最差,光学显微镜及透射电镜观察神经纤维生长情况、荧光显微镜下观察逆行标记荧光红在神经中的运行距离,C组最长,B组次之,而A组最短;免疫荧光检测神经生长因子及胶质纤维酸性蛋白浓度、酶联免疫吸附实验检测髓鞘碱性蛋白及神经丝蛋白浓度均数、踝关节运动功能评分均数的结果都是C组最高,B组次之,而A组最低,三组间差异有统计学意义(P<0.05). 结论嗅鞘细胞能促进神经缺损再生,且效果优于雪旺细胞.     

犬自体骨髓间充质干细胞组织工程化神经荧光金逆行示踪标记实验

目的采用荧光金逆行示踪方法来评价自体骨髓间充质干细胞组织工程化神经修复狗坐骨神经缺损,再生神经的物质运输功能。方法在自体骨髓间充质干细胞组织工程化神经桥接狗坐骨神经5cm缺损,术后6个月,将5%荧光金(Fluoro-Gold,FG)注射入桥接侧的远段坐骨神经干内,2周后取相应的脊髓节段和背根节进行冰冻切片,并在激光共聚焦显微镜下观察结果,并进行了计量分析。结果桥接侧相应脊髓灰质前角和背根神经节切片中观察到被FG逆行标记的神经元。结论再生神经修复了缺损,恢复了神经干的连续性,再生神经具有良好的物质运输功能。     

弥可保对周围神经嵌压伤治疗作用的实验研究

目的 探讨弥可保对兔坐骨神经嵌压伤的疗效。方法 将24只免子,按手术先后顺序随机平分为3组;术后即刻治疗组,术后1周治疗组和对照组。用特制的气囊压迫装置,对免坐骨神经进行急性压迫,压力为60mmHg（1mmHg＝0．133kPa)持续加压1h后即刻解压。弥可保治疗组：术后即刻及术后1周,腹腔内注射弥可保（500μg/kg.d^-1),共3周。对照组用生理盐水（2ml.d^-2)腹腔内注射,共3周。分别于加压前和处死前行运动神经导速度检测;术后4周各组取标本作病理形态学观察和计算机图像分析。计算各组的髓鞘数、髓鞘面积、髓鞘面积百分比和单个髓鞘的面积。结果 神经传导速度表明术后即刻治疗组优于术后1周治疗组和对照组,术后1周治疗组和对照组的差异无显著性意义。髓鞘数、髓鞘面积、髓鞘面积百分比和单个髓鞘的平均面积,术后即刻治疗组大于术后1周治疗组和对照组;但2个治疗组均大于对照组。结论 周围神经嵌压伤后早期应用弥可保,对髓鞘改变有明显的治疗作用;对神经再生具有积极的促进作用。     

大鼠臂丛神经根吻合后脊髓病理改变和轴突再生的研究

目的 评价臂丛神经根椎孔外断裂后神经根直接吻合的可行性.方法 取4～6月龄SD大鼠48只,雌雄不限,体重250～300 g.手术分离左侧C5～7神经根至臂丛神经干部,于椎孔外根干交界部位切断C5～7神经根,切断后即刻吻合(实验侧);右侧不作处理(对照侧).术后观察大鼠一般情况,于术后3周,3、6个月取材,行大体、组织学观察及BDA神经示踪技术,观察肱二头肌湿重变化,脊髓前角α运动神经元和神经元内尼氏体数目及形态的改变,周围神经纤维再生数目、距离,轴索和髓鞘发育情况.结果 大鼠术后存活良好.实验侧术后呈跛行步态,出现展爪反射;3个月后展爪反射消失;对照侧正常.大体观察,实验侧术后6个月内神经粘连加重,吻合口两侧神经干干瘪,无光泽;对照侧正常.术后3周和3个月实验侧及对照侧肱二头肌湿重分别为(0.28±012)、(1.37±0.33)g和(0.58±0.10)、(1.36±0.35)g,差异有统计学意义(P＜0.05);6个月时分别为(1.39±0.31)、(1.37±0.38)g,差异无统计学意义(P＞0.05).实验侧脊髓和上干改良Marsland与LFB双重染色后观察脊髓内神经元数目减少,胞体由肿大到皱缩,细胞核和尼氏体减少;上干内染色完整的神经纤维逐渐增多,神经轴索较细,髓鞘淡染.术后3周、3个月、6个月实验侧脊髓前角α运动神经元数目分别为对照侧的84.5%±3.2%、74.4%±4.5%、73.7%±3.8%.实验侧肱二头肌HE染色观察术后3个月内变性明显,之后逐渐恢复;对照侧无明显变性.术后6个月神经纤维BDA染色观察:神经越靠近近端,髓鞘着色越明显,轴突越粗大:越靠近远端时情况相反,并可见到轴突中断.肌皮神经入肌点处偶见阳性标记的神经髓鞘和轴突.结论 臂丛神经根椎孔外断裂即刻吻合后,脊髓前角α运动神经元坏死比率为20%～30%,残存神经元多为受损神经元,再生神经纤维表现为动力不足和发育不全,对终末器官功能恢复无意义.肱二头肌恢复机制有待进一步研究.     

腹腔注射ATP对大鼠坐骨神经再生影响的实验研究

目的 观察腹腔注射细胞外ATP对大鼠坐骨神经再生的影响。方法 健康雌性Wistar大鼠48只，随机分成两组。将两组大鼠左侧坐骨神经切断后立即行外膜吻合术。术后实验组腹腔注射ATP（2mg／kg）0．4ml，对照组注射生理盐水0．4ml。术后1周、4周和8周从每组随机取8只大鼠，检测每只大鼠双侧小腿三头肌湿重、术后1周时测神经纤维再生速度、术后4周时电镜检测髓鞘横截面积和髓鞘厚度。结果实验组与对照组相比，1周时神经再生速度快（P〈0．05）、4周时髓鞘横截面积大（P〈0．05）、髓鞘厚（P〈0．05），4周、8周时小腿三头肌湿重明显优于对照组（P〈0．05）。结论 腹腔注射细胞外ATP对大鼠神经再生和功能恢复具有较强促进作用。     

活体小鼠坐骨神经的形态学观察

目的 使用表达绿色荧光蛋白的转基因小鼠,建立用激光共聚焦显微镜活体、实时观察周围神经形态的方法.方法 将转基因小鼠麻醉后,分离显露坐骨神经,并将小鼠固定于激光共聚焦显微镜操作台,使显露的坐骨神经与载玻片贴合,从而观察活体小鼠坐骨神经的形态学特点.测量神经干、神经束及神经纤维的直径,并计算神经束及神经纤维的数量;将小鼠坐骨神经切断或钳夹,造成神经损伤模型,在损伤即刻及损伤后2 h,观察损伤神经近端、损伤处及损伤远端形态的改变.结果 正常小鼠坐骨神经神经干直径为800.0μm,神经束直径为70.0-100.0μm,神经束数量为2个,神经纤维直径为7.5,μm,神经纤维数量为70-200个.神经损伤即刻及损伤后2 h,损伤近端处可见神经纤维逐渐出现空泡样变性,神经纤维走向逐渐紊乱,部分纤维中断.损伤段神经纤维完全扭曲,空泡样变性明显,并出现神经纤维崩解,神经连续性完全中断.损伤远端250.0μm圾500.0μm处.神经纤维荧光强度逐渐增强,结构恢复,排列逐渐整齐.结论 绿色荧光蛋白转基因小鼠结合激光共聚焦显微镜在体成像技术为实现活体实时观测周围神经提供了良好的技术平台,可用于观察小鼠正常及损伤后周围神经结构的形态和变化.     

硫酸肝素复合胶原蛋白支架材料桥接大鼠坐骨神经的形态学研究

目的以形态学方法观测硫酸肝素复合胶原蛋白支架材料桥接大鼠坐骨神经10mm缺损的疗效。方法以硫酸肝素复合胶原蛋白经冷冻干燥技术制备新型神经组织支架材料,并用此材料桥接修复SD大鼠坐骨神经缺损10mm,术后36周分别以辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,HE、甲苯氨蓝和镀银染色法,S100、生长相关蛋白43(GAP-43)、神经丝蛋白(NF)免疫组化染色法、MBP免疫荧光染色法及透射电镜等形态学方法观测其引导神经再生的疗效。结果硫酸肝素复合胶原蛋白支架材料在移植术后36周已神经化。除再生有髓神经纤维的密度低于自体移植,有髓神经纤维的面积和髓鞘厚度与自体移植组无明显差异。结论以硫酸肝素复合胶原蛋白制备的神经组织工程支架材料,可以引导神经再生。