新型材料PLLA-脱细胞软骨粒支架的制备及性状研究

目的:以聚左旋乳酸(PLLA)和猪的脱细胞软骨粒混合物为材料制备一种新型的支架,即PLLA-脱细胞软骨粒支架,并对其性状进行研究,从而为软骨组织工程提供一种新的支架材料。方法:利用热相致分法(T IPS法)制备PLLA与脱细胞软骨粒在不同混合比例、不同温度下的聚合物支架,并对各种支架的孔径大小、孔隙率、水结合力、生物力学性状、降解率等进行探讨。结果:PLLA-脱细胞软骨粒支架具有与天然软骨基质相近的成分与结构,其各种性状基本符合软骨支架的要求。结论:PLLA-脱细胞软骨粒支架可作为软骨组织工程良好的细胞外基质材料。     

体外组织工程软骨的构建及其对关节软骨损伤的修复

目的探讨体外组织工程软骨的构建及其对关节软骨损伤治疗的可行性。方法①体外分离、培养、扩增骨髓基质干细胞,诱导分化培养为软骨样细胞;②以胶原膜为支架在体外构建组织工程软骨;③建立兔髋关节软骨缺损动物模型16只,对照组8只,实验组8只;应用组织工程软骨修复兔股骨头关节软骨缺损,8、16周后观察修复效果。结果8周后大体标本显示关节软骨缺损为白色软骨样组织填充,组织切片显示缺损处有新生软骨形成,阿新兰染色和Ⅱ型胶原免疫组化检测有GAG和Ⅱ型胶原强阳性表达;16周后关节软骨缺损仍为软骨样组织修复,部分见表面粗糙,镜下见软骨细胞排列紊乱。结论体外构建的组织工程软骨可用于修复兔股骨头关节软骨缺损,较长期的观察结果显示有退变倾向。     

组织工程法治疗Perthes病的实验研究

目的 观察运用组织工程法治疗Perthes病模型。方法 以骨髓基质细胞为种子细胞，纤维蛋白凝胶为支架，结合钻孔减压，将其移植入Perthes病模型。结果 自体或异体骨髓基质细胞组相比较单纯钻孔和模型组，其修复的活跃程度和修复范围均明显占优，异体移植未表现出明显的免疫排斥。骨髓基质细胞在损伤骨骺板处形成团块状软骨，未见类似骺板结构。结论 运用组织工程法治疗Perthes病模型，可促进骨骺和干骺端骨修复，但不能修复损伤的骺板。     

应用组织工程骨-软骨复合组织块修复猪软骨缺损

目的 比较应用组织工程骨-软骨复合组织块与单纯组织工程软骨修复猪膝关节软骨缺损的疗效.方法 用软骨细胞和成骨细胞构建组织工程软骨和组织工程骨,再将两者缝合形成骨-软骨复合组织块.在12只猪双侧股骨内髁负重区制造直径8mm的软骨缺损24个,并均分为组织工程骨-软骨复合组织块修复(A)组、组织工程软骨修复(B)组和空白支架(C)组.6个月后对修复部位行大体观察和组织学观察,免疫组化法检测Ⅱ型胶原的表达,并测定新生软骨的力学性能和糖胺聚糖(GAG)含量.结果 A组缺损区被新生透明软骨修复,新生软骨中的圆形细胞分布均匀.A组缺损区的新生软骨弹性模量和GAG含量高于B组.结论 组织工程骨-软骨复合组织块修复软骨缺损的效果明显优于组织工程软骨.     

关节软骨组织工程支架材料研究进展

组织工程学是一门交叉学科,它利用工程学和生命科学的原理,来研究和发展具有生物活性的人工替代物.用以维持、恢复或提高人体受损组织的功能.目的是利用人体活细胞在适宜的支架材料上生长成天然的组织和器官以替代人体内受损和缺失的组织和器官.支架材料的选择是组织工程学研究的焦点之一.支架材料作为人工细胞外基质,为功能细胞的停泊、生长、繁殖、新陈代谢提供三维空间.理想的软骨组织工程支架应具有良好的生物组织相容性、良好的结构相容性、良好的表面活性、生物可降解性、可塑性和一定的机械强度.目前,关节软骨组织工程支架材料研究主要涉及天然材料、人工合成材料、人工和天然复合材料、纳米材料.本文就关节软骨组织工程支架材料进行综述.     

组织工程化关节软骨损伤修复的研究进展

组织工程学是近10年来生物医学工程中一个快速发展的新领域,其核心是应用生物学和工程学的原理和方法来发展具有生物活性的人工替代物,用以维持、恢复或提高人体组织的功能。由于软骨组织为单一细胞成分(软骨细胞),与多细胞成分的组织相比,构建相对较为容易。组织工程化关节软骨的基本方法是将体外培养的高浓度组织细胞,扩增后吸附于一种生物相容性良好,并可被人体逐步吸收的细胞基质上,然后将这种细胞生物材料复合体植入机体病损部位,在生物支架吸收的过程中,种植的细胞继续增生繁殖,达到损伤软骨的修复和重建功能的目的。     

人羊膜作为组织工程支架材料的应用进展

组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理,研究开发制作用于修复、改善损伤组织结构和功能替代物的技术。种子细胞、支架材料和组织构建是当前组织工程研究的主要内容。细胞载体的支架材料有人工合成的高分子聚合物和天然生物材料。人羊膜作为天然的高分子物质,在组织工程中也有所研究和应用,本文就人羊膜的特点及其在科研和临床中的应用进展进行综述。     

关节软骨组织再生修复技术新进展

关节软骨损伤的修复是一个长期困扰的医学难题,生物移植和组织工程技术的发展为软骨再生修复带来新的希望,利用负载生长因子的特殊可降解软骨支架材料调动内源干细胞来实现软骨组织再生修复的新技术,易于实现产业化操作,也预示着软骨缺损的再生修复治疗一个全新时代的到来。     

BMP2/β-TCP-HA复合支架体内构建组织工程软骨的实验研究

目的 探讨以骨形态发生蛋白2(BMP2)/β磷酸三钙-透明质酸(β-TCP-HA)复合支架在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性.方法 分别构建BMP2/β-TCP-HA(实验组),BMP2/β-TCP(对照组)及β-TCP(空白组)支架.分离培养大鼠间质干细胞(MSCs)至三代,利用负压吸引将MSCs作为种子细胞分别接种于各组支架内,并植于裸鼠皮下.于术后12周观察其成软骨效果并对修复组织行大体,组织学及免疫组化观察.结果 术后12周实验组支架降解基本完全,能形成丰富的软骨组织,软骨细胞外基质丰富,糖胺多精(GAG)及Ⅱ型胶原免疫组化染色均旱强阳性;对照组支架大部降解,支架内形成岛状软骨增生;GAG及Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阳性;空白组支架部分降解,以纤维组织和脂肪组织为主;仅在支架边缘见少最软骨组织,GAG及Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阴性.结论 BMP2/β-TCP-HA复合支架为MSCs提供了一条可能有效的关节软骨修复途径,是目前软骨组织工程较为理想的细胞支架材料.     

间充质干细胞联合石墨烯支架培养治疗膝骨性关节炎的研究进展

膝骨性关节炎是困扰中老年人的疾病之一, 关节软骨损伤是其病理过程的核心, 围绕软骨损伤的病理研 究也越来越深入, 而现有的治疗方法尚不能从根本上逆转这一过程。近年来随着软骨组织工程技术的发展, 特别是 间充质干细胞的使用为解决这一困难提供了一条新的途径。同时, 石墨烯材料在医学领域的应用也逐渐成为热门, 利用石墨烯材料作为支架结构联合间充质干细胞, 以此寻求对软骨损伤修复的新方法。本文从膝软骨损伤的机制、 间充质干细胞对软骨的修复以及石墨烯支架材料的应用方面进行总结, 以期能开拓新的治疗思路。     

Matrigel凝胶和壳聚糖/磷酸甘油凝胶两种支架体外构建组织工程软骨的比较

目的 探讨适合构建组织工程软骨的细胞支架材料.方法 将体外分离培养的兔关节软骨细胞种植于Matrigel凝胶和壳聚糖/磷酸甘油(C/GP)凝胶两种支架上体外培养3周,对组织工程软骨进行大体标本、HE染色,ELISA检测培养上清液中透明质酸和Ⅱ型胶原的含量.结果 软骨细胞在两种支架内均生长良好,Matrigel凝胶中软骨细胞培养3周后仍能维持软骨细胞的表型,其分泌透明质酸和Ⅱ型胶原的能力较C/GP凝胶中软骨细胞强,并可更好的促进受损的软骨细胞增殖.结论 Matrigel凝胶和C/GP凝胶均可作为软骨细胞载体修复关节软骨缺损.Matrigel凝胶支架更适合软骨细胞的贴附生长,有利于维持软骨细胞的表型,是较好的软骨组织工程细胞支架.     

组织工程皮肤支架材料的研究和发展

组织工程化皮肤是指由细胞或细胞外基质或由两者共同结合组成的皮肤产品,是应用生命科学和工程学的原理与技术将种子细胞与适当的支架材料相结合构建出的用于修复、维护和改善损伤皮肤组织功能和形态的生物替代物。组织工程支架材料在人工皮肤的构建中起着重要作用,支架材料的研究及其优选是人工皮肤的重要研究内容之一,按化学性质可将其分为合或类与生物类,它们各有优缺点,现分别将其研究现状及其发展作一综述。     

碱性成纤维细胞生长因子对骨髓间质干细胞的作用

骨髓中的细胞包括造血细胞和非造血细胞两大类,其中骨髓基质非造血细胞中含有间质干细胞(MesenchymalStemCells,MSCs)。骨髓间质干细胞具有自我增殖和多向分化的特性[1],在不同诱导条件下可分化成多种类型的结缔组织,如骨、软骨、骨骼肌、肌腱、韧带、真皮、脂肪和骨髓基质,也可分化成神经系统的神经元和神经胶质细胞等。近年来,骨髓间质干细胞被认为是组织工程的一种理想种子细胞,在骨、软骨、肌腱组织工程,中枢神经系统疾病及颅脑损伤修复、心肌重建、创面修复、协助重建造血、细胞和基因治疗等方面都已显示了良好的应用前景。国内外学…     

应用骨髓间充质干细胞复合关节软骨脱细胞基质修复兔软骨缺损的实验研究

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合关节软骨脱细胞基质修复兔关节软骨缺损的效果。方法选取36只3~4个月龄的健康新西兰兔,分离其骨髓间充质干细胞(BMSCs),并在体外进行培养扩增。将BMSCs与关节软骨脱细胞基质在体外培养瓶中进行复合培养约3 d。将实验对象随机分为3组,分别进行3种不同的处理,实验结果用关节软骨组织学评分标准进行评分。结果移植手术后12周,移植培养好的骨髓间充质干细胞和关节软骨脱细胞基质复合物的实验组修复组织和周围组织整合良好,且修复效果显著优于移植单独的关节软骨脱细胞基质组和空白对照组。结论应用骨髓间充质干细胞和关节软骨脱细胞基质的复合物能有效的修复兔关节软骨缺损。     

碱性成纤维细胞生长因子对骨髓间质干细胞的作用

骨髓中的细胞包括造血细胞和非造血细胞两大类，其中骨髓基质非造血细胞中含有间质干细胞（Mesenchymal Stem Cells，MSCs）。骨髓间质干细胞具有自我增殖和多向分化的特性，在不同诱导条件下可分化成多种类型的结缔组织，如骨、软骨、骨骼肌、肌腱、韧带、真皮、脂肪和骨髓基质，也可分化成神经系统的神经元和神经胶质细胞等。近年来，骨髓间质干细胞被认为是组织工程的一种理想种子细胞，在骨、软骨、肌腱组织工程，中枢神经系统疾病及颅脑损伤修复、心肌重建、创面修复、协助重建造血、细胞和基因治疗等方面都已显示了良好的应用前景。国内外学者对它向各种组织细胞的诱导分化方面，作了大量的基础研究与临床研究。     

脂肪干细胞在软骨组织工程中的应用

软骨组织工程的兴起为软骨缺损的修复重建提供了新的治疗途径,但是由于缺乏合适的种子细胞,发展相对缓慢。脂肪干细胞来源广,含量丰富,创伤小,有望成为理想的种子细胞。本文就脂肪干细胞软骨诱导的几种方法做一综述,希望为以后脂肪干细胞在软骨组织工程的应用和发展提供理论基础。     

组织工程化关节软骨的研究进展

20世纪80年代以来,组织工程学的出现及发展为解决关节软骨缺损、重建关节功能提供了新思路,使软骨组织缺损的完全再生成为可能。软骨组织工程是当前组织工程研究的热点之一,它的基本方法是将体外分离培养的正常组织细胞接种到具有一定空间结构和良好的生物相容性的三维支架上,然后将细胞一支架复合物在体外继续培养或植入体内,同时辅以特殊的生长因子,支架材料逐渐降解,为细胞分泌的基质所代替,形成组织或器官的结构,并行使功能,现将其研究进展综述如下。     

组织工程心脏瓣膜体外构建的初步研究

目的:初步体外构建组织工程人工心脏瓣膜。方法:种子细胞选用胸骨骨髓,抽取后分离出人骨髓间充质干细胞,体外培养,扩增待用。脱细胞瓣膜支架的构建应用破膜剂曲拉通-脱氧胆酸钠对新鲜猪主动脉瓣膜36片(实验组)进行处理48h后,与对照组未经处理的猪主动脉瓣膜(36片)进行对比,在光镜和电镜下观察脱细胞效果。将人骨髓间充质干细胞接种于脱细胞瓣膜支架上静态培养7d,观察细胞-支架复合体生长状况。结果:曲拉通-脱氧胆酸钠法脱细胞彻底,保持原有纤维结构。种植的人骨髓间充质干细胞7d后可生长于瓣膜支架的表面。结论:曲拉通-脱氧胆酸钠法是一种较为理想的猪瓣膜脱细胞方法;人骨髓间充质干细胞能在脱细胞猪瓣膜支架上较好地黏附和生长,从而初步构建组织工程人工心脏瓣膜。     

壳聚糖、Ⅱ型胶原和PGA三种支架体外构建组织工程软骨的比较研究

目的 观察兔关节软骨细胞在壳聚糖、Ⅱ型胶原、聚羟基乙酸(PGA)三种细胞支架上的生长情况,探讨更适合构建工程软骨的细胞支架材料.方法 多聚赖氨酸包埋壳聚糖、Ⅱ型胶原和PGA三种多孔海绵支架.将体外分离培养的兔关节软骨细胞种植于三种支架上.体外培养4周,对组织工程软骨进行大体标本观察和HE染色,检测软骨内DNA含量、Ⅱ型胶原和糖胺多糖(GAG)的分泌量.结果 软骨细胞在壳聚糖支架内生长良好,培养4周后仍能维持软骨细胞的表型,其分泌Ⅱ型胶原和GAG的能力较其他两种支架好(P＜0.01).结论 壳聚糖支架更适合软骨细胞的贴附生长,有利于维持软骨细胞的表型,是较好的软骨组织工程细胞支架.     

组织工程心脏瓣膜支架构建的研究

目的：构建脱细胞猪主动脉瓣膜支架，为体外构建组织工程心脏瓣膜提供适宜的支架材料。方法：新鲜猪主动脉瓣叶，采用“低渗液-0．5％SDS-核酸酶”处理，进行大体、光镜、电镜观察和DNA含量测定。结果：“低渗液-0．5％SDS-核酸酶”可以完全脱去瓣膜细胞，同时较好地保持了胶原纤维和弹力纤维的原有排列和形态。结论：本方法可以成功构建脱细胞猪主动脉瓣膜支架，可进一步用于体外构建组织工程心脏瓣膜的研究。