一种霉菌染色的新方法

一种霉菌染色的新方法张海，张谷一、材料与方法１．试剂配制（１）５０％硝酸银溶液：取４ｇ硝酸银溶解于８ｍｌ的蒸馏水。（２）０．５％甲酸—明胶溶液：取２ｇ明胶溶解于１００ｍｌ的蒸馏水，加０．５ｍｌ甲酸。（３）改良银染工作液：（１）和（２）以体积２：１均匀...     

塑料不脱钙、石蜡包埋、明胶浸泡法对骨组织切片的比较

骨组织内含有大量的钙盐和无机盐,如不脱钙切片,常给骨组织切片和染色造成非常大的困难,直接影响实验结果。作者根据研究的需要,对塑料包埋不脱钙、石蜡包埋、明胶浸泡３种方法切片及染色进行比较,以便找出一种最佳切片方法。１　材料与方法１－１　塑料包埋组　所用材料是我所研究生课题实验材料。新西兰大耳白兔１０只,体重２－２～２－５ｋｇ,♀、♂不限。取双侧尺桡骨１－５ｃｍ保留周围少量肌肉。１０％中性福尔马林固定。梯度乙醇脱水。甲液：甲基丙稀酸甲酯（ＭＭＡ）７５ｍｌ,邻苯二甲酸二丁酯（ＤＢＰ）２５ｍｌ。乙液：Ｍ…     

原位恶性黑素瘤细胞色素氧化酶(CYO)组织化学方法

方法１．１取材与制备临床活检恶性黑素瘤组织０．５×０．５ｃｍ,用１０％甲醛固定２４ｈ。常规石蜡包埋,连续切片,厚度６～７μｍ,粘附于涂有铬明矾盖玻片上,然后常规脱蜡,脱苯备用。１．２将连续切片随机分为两组,一组进行常规ＨＥ染色,另一组进行细胞色素氧化...     

亚甲蓝可用于防治肠缺血再灌注后肺损伤

目的：研究氧自由基抑制剂亚甲蓝是否能预防组织缺血再灌注性肺损伤。材料与方法：腹腔注射氯胺酮（６０ｍｇ／ｋｇ）、安定（２．５ｍｇ／ｋｇ）将１２０只成年韦斯达（Ｗｉｓｔａｒ）鼠麻醉后进腹并均分为甲、乙、丙三组。夹闭肠系膜上动脉１ｈ，将甲、乙两组制成缺血再灌注模型后分别注入１％亚甲蓝２ｍｌ（５０ｍｇ／ｋｇ）、灭菌生理盐水２ｍｌ。丙组分丙甲、丙乙两亚组，除不作动脉夹闭外，余操作分别同甲、乙。再灌注４ｈ后将动物处死，以２５ｃｍＨ２Ｏ压向肺内注入１０％甲醛固定后切片，ＨＥ染色，镜检评估其病理损伤程度（由轻至…     

盐酸在免疫组化染色中的应用

免疫组化染色已成为临床病理诊断的重要手段之一,由于在常规制片过程中,常因组织标本经甲醛固定后,抗原被封闭,使染色效果不理想。目前,国内外报道多采用微波辐射、高压加热等方法来修复组织抗原,而应用盐酸水解的方法则较少报道,作者应用盐酸水解法来修复组织抗原,获得满意效果,介绍如下。１　材料和方法１－１　材料　本院手术送检的食管、胃、肠、乳腺、卵巢等肿瘤组织。均经４％甲醛固定、石蜡包埋,连续４μｍ厚切片,６０℃恒温箱烤片１～２４ｈ。载玻片先用多聚赖氨酸处理。１－２　试剂　１ｍｏｌ·Ｌ－１盐酸水解液（配制…     

Bcl－2免疫反应在甲状腺髓样癌中的预后价值

Ｂｃｌ－２免疫反应在甲状腺髓样癌中的预后价值［英］ＶｉａｌｅＧ…／／ＨｕｍＰａｔｈｏｌ．一１９９５，２６（９）．一９４５～９５０材料和方法３３例甲状腺髓样癌（随访１～２６年，平均１０．３年），均采用福尔马林固定，石蜡包埋组织切片。ｂｃ１－２单克隆抗体...     

恶性黑色素瘤中细胞角蛋白的表达

一、材料和方法１材料：收集本院恶性黑色素瘤（下称恶黑）标本１２例,其中皮肤原发恶黑９例,淋巴结内转移性恶黑３例。无色素性恶黑２例。组织用４％甲醛液固定,石蜡包埋,切片均作ＨＥ染色和细胞角蛋白、波形蛋白、ＨＭＢ４５、Ｓ１００染色。２方法：免疫组化...     

30例胃嗜酸性肉芽肿临床病理分析

３０例胃嗜酸性肉芽肿临床病理分析邹积骏１材料和方法按Ｖａｎｅｃｈ提出的本病的病理诊断标准〔１〕，收集我院１９８０～１９９４年间确诊为胃嗜酸性肉芽肿共３０例。活检标本均以１０％福尔马林固定，石蜡包埋切片，ＨＥ染色，显微镜下观察。２结果２．１临床资料３０...     

建立显微分离细胞技术并检测胃癌细胞内p53基因突变

一、材料和方法１．材料：取自瑞金医院外科１９８９年１月～１９９２年１２月间的胃癌切除标本１７１例,标本展平固定于４％甲醛溶液中,常规石蜡包埋,ＨＥ染色,并进行病理诊断。其中有早期胃癌２２例,进展期胃癌１４９例。２．显微分离细胞技术及ＰＣＲ根据Ｚｈｕａｎｇ等［１］介绍的方法改良。（１）显微镜下分离微量细胞：将石蜡包埋的组织块,连续切片２张,一张ＨＥ染色,以选取合适的视野,另一张伊红染色。将伊红染色的切片放在显微镜下,用细针轻刮目的细胞,由于静电吸引作用,细针头上可以粘附很多细胞,将细胞迅速移入已准…     

图像处理技术在血管形态定量分析中的应用

血管腔狭窄和血管壁增厚的分级，血管收缩或舒张时管腔和管壁的变化，传统的病理观察常用定性或半定量描述，这种描述方法易受主观因素影响。本室用“ＶｉｄｅｏＰｒｏ３２”彩色图像分析系统，对小白鼠的肾小动脉，肠系膜下小动脉进行了定量分析，兹介绍如下。１　材料和方法１．１　材料　１０７例小白鼠之肾小动脉，肠系膜下小动脉，经１０％福尔马林固定、脱水、浸蜡、包埋后，进行连续切片４ｍｍ厚，ＨＥ常规染色。１．２　方法　将染色后的切片置于（４Ｘ）倍数的显微镜下，对所测血管进行定位后，由彩色摄像机提取整个血管横断面图像…     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺血管内皮细胞的变化

３０只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成正常对照和缺氧１、２、３、４周组（共５组），吸入１０％Ｏ＿２，９０％Ｎ＿２，每天８ｈ，每周６天。静注１％ＦｅＣｌ３０．２ｍｌ／１００ｇ体重，每周２次。于缺氧１、２、３、４周未测肺动脉压力，取肺动脉及肺组织行电镜检查，结果显示：缺氧时间越长，肺血管内皮细胞结构损伤越重，肺动脉压力越高。提示血管内皮细胞损伤在肺动脉高压形成中起重要作用。     

c-erbB-2在结直肠神经内分泌肿瘤的表达及意义

１材料和方法１．１材料收集我院１９８０年１月～１９９６年１２月手术切除的结直肠神经内分泌肿瘤１４例，男性９例，女性５例，发病年龄２７～７４岁，平均５８．３２岁。１．２方法标本经１０％福尔马林固定，常规石蜡包埋、切片、ＨＥ染色。免疫组化采用ＬＳＡＢ法，...     

新疆喀什地区包虫病临床病理学研究

作者收集新疆喀什地区１７５例包虫病病例进行统计分析,报道如下。１材料与方法１９８０年以来,我们收检包虫手术切除标本１７５例,其中男性９８例,女性７７例。送检标本经１０％福尔马林液固定,常规取材,石蜡切片,ＨＥ染色。特殊的肝泡状棘球蚴标本切片加做ＰＡＳ...     

邻菲罗啉化学发光体系测定羟自由基的建立

本文描述了一个测量羟自由基（ＯＨ）的化学体系。该体系由１０×１０３ｍｏｌ／Ｌ邻菲罗啉溶液５０～１００μｌ，１０×１０３ｍｏｌ／Ｌ抗坏血酸溶液２０μｌ，１０×１０３ｍｏｌ／Ｌ硫酸铜溶液５０μｌ，硼砂硼酸缓冲液所组成，由４４×１０５ｍｏｌ／ＬＨ２Ｏ２溶液５０～１００μｌ启动发光，反应总体积为１ｍｌ，反应发光强度强，稳定时间可达１ｍｉｎ以上，经对ＯＨ的清除剂硫脲试验，线性范围为５０×１０６ｍｏｌ／Ｌ～５０×１０４ｍｏｌ／Ｌ，最低可检测限为５０×１０７ｍｏｌ／Ｌ，该体系有良好的稳定性，批内变异系数为０４％（ｎ＝８），批间变异系数为０５％（ｎ＝１３）。     

正常前列腺和良性前列腺增生(BPH)凋亡和增殖区的变化

目的　通过对瘤蛋白Ｂｃｌ－２在前列腺中拮抗细胞死亡的变化过程和范围以及表达情况的研究,从而得出细胞凋亡和增殖二者失衡导致良性前列腺增生（ＢＰＨ）的结果。方法　从尸体解剖中获取１０例正常前列腺标本（平均年龄４３．７岁）作对照,３０例有症状行前列腺切除的前列腺瘤标本（平均年龄６１．４岁）,组织经福尔马林固定,石腊包埋切片。增殖细胞和Ｂｃｌ－２的表达分别以Ｍｉｂ－１和抗－Ｂｃｌ－２抗体行免疫组化染色,凋亡小体用特殊的原位杂交技术染色,光镜下确定细胞分布的百分比。结果　正常前列腺外周区上皮细胞增殖和凋亡…     

2种嗜银染色改进法的应用

在以往的嗜银染色中由于染色时间长、操作较为复杂,制约了这种技术的广泛应用。我们经复习文献发现２种改进法既可保证染色结果又能缩短染色时间。为了更好地了解和掌握这２种方法,我们作了应用染色实验,并根据条件对原方法稍作修改,现报道如下。１　材料和方法１１　材料　选择已确诊的１０例肿瘤,其中肺类癌３例,甲状腺髓样癌４例,嗜铬细胞瘤３例。标本经常规处理后切片,厚４μｍ。切片经Ｇｒｉｍｅｌｉｕｓ方法证实有嗜银细胞存在,然后应用下列方法进行实验。１２　方法１２１　Ｓｔａｐｌｅｓ煮沸法　用煮沸的双蒸馏水…     

改良神经髓鞘的依来铬氰R染色法

为研究周围神经髓鞘被覆状态 ,我们经常要进行髓鞘染色 ,在实践中 ,我们摸索了一种便捷、有效、经济的染色方法 ,介绍如下。一、材料和方法1.取材、固定、切片 :取大鼠正常坐骨神经组织 ,4%甲醛生理盐水固定。石蜡切片 6～ 10 μｍ厚 ,6 0℃左右烘箱烘 3～4ｄ。2 .试剂配制 :(1)依来铬氰Ｒ液 :依来铬氰Ｒ 0 .2ｇ ,蒸馏水 96ｍｌ,10 %铁明矾液 4ｍｌ,浓硫酸 0 .5ｍｌ。 (2 )苦味酸丽春红Ｓ液 :1%丽春红Ｓ水溶液 10ｍｌ,苦味酸饱和水溶液 86ｍｌ,1%醋酸水 4ｍｌ。3.染色程序 :(1)石蜡切片 ,常规脱蜡水洗 ,吸干或烘干切片。 (2 )依来铬氰Ｒ液染…     

改良Warthin-Starry染色技术的新用途

我们用改良Ｗａｒｔｈｉｎ Ｓｔａｒｒｙ(Ｗ Ｓ)染色方法检查一些病原体取得较好效果 ,现将我们的工作体会介绍给同行。1　材料和方法1.1　材料　实验材料均取自外检组织 ,包括梅毒螺旋体感染的皮肤粘膜组织、鼻硬结症之鼻腔粘膜 ,侵袭性霉菌病之上颌窦粘膜组织、胃炎粘膜组织及淋病炎性渗出物涂片。组织均经常规处理、石蜡包埋 ,每份切成数张 6 μｍ厚的切片备用。涂片常规固定 1ｍｉｎ后漂洗吹干备用。1.2　染色液的配制和染色程序1.2 .1　 染色液的配制　①明胶原液 :明胶 5 ｇ ,蒸馏水 10 0ｍｌ,加热溶解。②显色剂 :明胶原液 8ｍｌ、2 …     

凋亡相关基因产物Fas和bcl-2蛋白在胃癌组织中的表达

用流式细胞免疫技术检测胃癌组织中Ｆａｓ及ｂｃｌ－２蛋白表达,报告如下。１　材料与方法１．１　一般资料　２７例进展期胃癌病人中男１５人,女１２人,年龄２７～６６岁。术前未化疗、放疗。即取新鲜癌组织和切缘正常粘膜组织各１．０ｇ左右,ＰＢＳ冲洗两遍,滤纸吸干后放入１０％福尔马林中待检。１．２　方法　制备单细胞悬液,调整细胞为１０９／ｍｌ。取两试管,每管加细胞悬液１００μｌ,其中一管加Ｆａｓ－ＦＩＴＣ（或ｂｃｌ－２－ＦＩＴＣ）（法国国际免疫公司提供）２０μｌ,一管加ＩｇＧ１－ＦＩＴ－Ｃ２０μｌ,室温避光…     

微波骨髓活组织快速半薄石蜡切片的制备

骨髓穿刺活组织检查（骨髓活检）是确诊血液疾病的主要技术之一。微波骨髓活检组织快速半薄石蜡切片的制备，把微波辐射应用到骨髓活检组织的固定、脱水、透明、浸蜡及其切片染色等主要步骤中，结果仅需２～３ｈ即可完成切片制作，而且制片质量近似骨髓组织塑料包埋切片技...