电针夹背穴在佐剂性关节炎大鼠镇痛过程中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶电针的变化及作用

目的观察电针夹脊穴对佐剂性关节炎大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)内磷酸化 p38MAPK表达的影响,从信号转导的角度研究电针镇痛的机制.方法以完全福氏佐剂(CFA)佐剂性关节炎大鼠为疼痛模型,采用免疫组化技术,分别检测空白对照组、模型组、及电针治疗组 SD大鼠 DGG内磷酸化 p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)表达特征.结果与空白对照组 [(7.65± 0.72) s]相比,造模后 24,48 h及 7 d后,模型组大鼠痛阈下降分别为 (6.67± 0.59),(6.53± 0.73), (6.64± 0.76) s,同时 DRG内 p38MAPK磷酸化明显增多(P< 0.05),尤以 48 h后增加明显;电针治疗组大鼠在电针夹脊穴治疗后, 24, 48 h及 7 d后痛阈检测发现其痛阈回升,分别为 (7.31± 0.79),(7.42± 0.93),和 (7.44± 0.89) s , DRG内 p38MAPK磷酸化水平下降(P< 0.05).结论 p38MAPK可能为电针镇痛中一个重要的信号转导分子,其磷酸化在疼痛及电针镇痛过程中其重要作用.     

电针夹脊穴在佐剂性关节炎大鼠镇痛过程中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶的变化及作用

目的:观察电针夹脊穴对佐剂性关节炎大鼠背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)内磷酸化p38MAPK表达的影响,从信号转导的角度研究电针镇痛的机制。方法:以完全福氏佐剂(CFA)佐剂性关节炎大鼠为疼痛模型,采用免疫组化技术,分别检测空白对照组、模型组、及电针治疗组SD大鼠DGG内磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinki-nase,MAPK)表达特征。结果:与空白对照组犤(7.65±0.72)s犦相比,造模后24,48h及7d后,模型组大鼠痛阈下降分别为(6.67±0.59),(6.53±0.73),(6.64±0.76)s,同时DRG内p38MAPK磷酸化明显增多(P<0.05),尤以48h后增加明显;电针治疗组大鼠在电针夹脊穴治疗后,24,48h及7d后痛阈检测发现其痛阈回升,分别为(7.31±0.79),(7.42±0.93),和(7.44±0.89)s,DRG内p38MAPK磷酸化水平下降(P<0.05)。结论:p38MAPK可能为电针镇痛中一个重要的信号转导分子,其磷酸化在疼痛及电针镇痛过程中其重要作用。     

糖尿病大鼠肾脏组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶的表达特征及意义

目的:探讨糖尿病(DM)大鼠肾组织p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及其下游转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的表达特征及与肾小球肥大、细胞外基质积聚的关系.方法:70只雄性Wistar2周后,随机分为两组:右肾切除对照组(CN)和DM组.DM组经腹腔注射链脲佐菌素(STZ,65 mg/kgDM.CN组注射等量枸橼酸缓冲液.两组分别于注射后第1、2、4、8和12周各取6只大鼠,收集24 h尿液,测定尿蛋白(Upro)、肌酐(UCr);股动脉放血分离血清,测血糖(Glu)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN),并计算肌酐清除率(CCr);免疫组化法检测肾皮质磷酸化p38 MAPK (P-p38 MAPK)及?CREB(P-CREB)的表达特征,并检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维粘连蛋白(FN)及层粘连蛋白(LN)的表达,应用图像分析系统进行定量分析.流式细胞术检测P-p38 MAPK和P?CREB蛋白的表达.结果:与CN组比较,DM组P-p38 MAPK在1、2、4和8周升高(P均<0.01),第12周降至正常.DM组P-CREB在第2、4和8周增高(P均<0.01),在12周时降至正常.TGF-β1、FN、LN分别于第2、4周开始升高.结论:肾小球p38 MAPKCREB活性在早期糖尿病肾病大鼠肾组织中升高,p38 MAPK途径的激活有可能在糖尿病肾病;的早期肾小球肥大和细胞外基质积聚中发挥一定作用.     

脊髓背角P38MAPK活化在大鼠切口痛形成中的作用

目的:研究切口痛大鼠脊髓背角磷酸化p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)表达的变化和鞘内注射p38MAPK特异性抑制剂SB203580对切口痛大鼠疼痛的影响.方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(SH组)、切口痛组(IP组)、药物组和DMSO组.按Yaksh法施行鞘内置管.按Brennan法建立大鼠切15口疼痛模型.采用Hargreaves法(热痛觉过敏)测定热刺激缩足反射潜伏期(TWL).应用免疫组织化学法检测脊髓背角p-p38MAPK表达的变化.结果:与SH组相对应的时间点和术前值比较,IP组和DMSO组大鼠在术后2 h、3 h、6h、ld、2 d和3 d的TWL均明显缩短(P<0.05或P<0.01),但IP组和DMSO组各相对应的时间点比较无明显差异;与IP组和DMSO组相对应的时间点比较,药物组大鼠在术后2 h、3 h、6 h、1 d和2 d的TWL均明显延长(P<0.05或P<0.01).与SH组比较,IP组和DMSO组P-p38MAPK阳性细胞数增加(P<0.01);与IP组和DMSO组比较,药物组P-p38MAPK阳性细胞数降低(P<0.01或0.05),IP组和DMSO组间差异无统计学意义(P>0.05).IP组和DMSO组p-p38MAPK阳性细胞数在术后6h开始增加,1d达到高峰,然后逐渐下降,5d后逐渐恢复.结论:脊髓背角p38MAPK活化参与切口痛的形成与发展.     

p38丝裂原活化蛋白激酶基因敲除对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响

目的 研究p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因敲除对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响.方法 用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测小鼠胚胎成纤维细胞中p38+/+和p38-/-的表达;利用噻唑蓝(MTT)比色法绘制p38+/+和p38-/-细胞的生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期各时相所占百分比.结果 绘制的生长曲线表明,p38-/-细胞的生长速率明显下降,增殖受到抑制,细胞倍增时间延长,培养96 h时,p38-/-细胞数量较p38+/+减少了15.5%,说明p38基因敲除明显抑制了G2/M的进程.流式细胞仪检测结果显示,p38+/+细胞中G0/G1期细胞占34.47%,G2/M期占10.81%,S期占54.72%;p38-/-细胞中G0/G1期占48.49%,G2/M期占4.06%,S期占47.44%.与p38+/+细胞相比,G1期的p38-/-细胞增加了40.7%,S期则减少了13.3%,说明p38基因敲除抑制了G1/S的进程.结论 p38基因敲除能够阻滞细胞周期进展,减慢细胞增殖速度.     

小肠缺血-再灌注后磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶的表达特征及与干细胞定位的关系

目的：观察大鼠肠缺血－再灌注（I－R）后磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）的表达特征及与干细胞定位的关系。方法：雄性Wistar大鼠48只，随机分为假手术组（C）、肠缺血组（I）和肠缺血-再灌注组（R）。C组仅分离肠系膜上动脉根部而不夹闭；I组用微血管夹夹闭肠系膜上动脉根部45分钟后即刻活杀；R组动物在缺血45分钟之后放松血管夹，分别于再灌注后2、6、12和24小时活杀。取血检测血浆二胺氧化酶（DAO）活性，取小肠组织进行形态学观察，用免疫组织化学方法研究磷酸化p38的表达特征。结果：与C组相比，I组和R组血浆DAO活性升高，R组动物的小肠黏膜表现为充血、水肿、炎细胞浸润及坏死糜烂，以再灌注后12小时最显著。磷酸化p38染色显示，C组和I组大鼠每个小肠隐窝仅有5－6个阳性细胞，主要在隐窝的下1／2，大部分表现为分布在胞浆中的棕色颗粒，与肠道干细胞及其初级子代细胞的位置一致。再灌注后2小时阳性细胞数量下降，在6小时隐窝底部的阳性细胞数量增多，主要分布在隐窝的中下1／3，在12小时达到高峰，为隐窝细胞总数的35．6％，在24小时明显下降接近正常。绒毛基质偶有阳性细胞，绒毛上皮无表达。结论：磷酸化p38在肠道的表达与干细胞及其初级子代细胞的分布非常接近，肠I－R使其表达增加，表明磷酸化p38与肠道干细胞之间存在密切的关系，有可能作为干细胞的标记物。     

复苏后大鼠转化生长因子-β1和p38丝裂原活化蛋白激酶变化及治疗

目的 探讨窒息至心脏骤停大鼠复苏后心脑TCF-β1和p38mAPK的变化及血必净对其影响.方法 采用呼气末夹闭气管窒息法建立大鼠心脏骤停模型,并心肺复苏成功后生存24 h,将50只健康Wistar大鼠随机(随机数字法)分为5组,分别为:模型组,正常埘照组,小剂量血必净组,中剂量血必净组,大剂量血必净组.复苏24 h后处死大鼠,取心、脑组织标本,电镜下观察心、脑组织的病理改变.采用酶联免疫吸附法(EUSA)榆测心、脑组织巾的TCF-β1和p38MAPK含量变化.结果 心、脑组织病理观察显示,与对照组相比其他组心脑细胞超微结构出现损伤性改变,其中模型组损伤最重,大剂量血必净组损伤性改变轻微;心、脑中TGF-β1和p38MAPK含量变化,与对照组相比模型组心、脑TCV-β1和p38MAPK含量升高明显,与模型组相比血必净治疗组心、脑VCF-β1含量升高更明显和P38NAPK含量下降更明显,治疗组中,大剂量较小剂量TCF-β1含量升高更明显和p38NAPK含量下降更为明显.结论 心跳骤停复苏后大鼠心、脑组织内TCF-β1和p38MAPK含量增多,血必净可明显调节心、脑组织中的TCF-β1和p38MAPK含量,而且存在明显量-效关系,从而缓解心跳骤停大鼠复苏中缺氧及再灌注后炎性因子所带来的损伤.     

大鼠创伤失血性休克复合内毒素打击模型中p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化水平的改变

目的　探讨创伤失血性休克复合内毒素打击模型中大鼠腹腔巨噬细胞 (M)内p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)磷酸化水平的改变。方法　制作大鼠创伤失血性休克复合内毒素打击动物模型 ,检测伤后 90min、4h血清中TNF-α、IL - 1β含量的改变及大鼠腹腔M内p38MAPK磷酸化水平的变化 ,并观察致伤组大鼠肺及小肠组织的病理改变。 结果　大鼠在创伤失血性休克复合内毒素打击后血清TNF -α、IL - 1β的含量较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,腹腔M内p38MAPK磷酸化水平较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,致伤组大鼠肺及小肠组织炎症病理改变显著。结论　p38MAPK的激活状态可能在大鼠创伤失血性休克复合内毒素打击模型的炎症反应中占有重要地位。     

定心方对大鼠心肌缺血再灌注损伤时p38丝裂原活化蛋白激酶和肿瘤坏死因子α的影响

目的：探讨定心方防治大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法：60只SD大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)抗体组、定心方小剂量组和定心方大剂量组，每组12只。利用结扎、放松左冠状动脉的方法制作大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。用放射自显影激酶活性测定心肌中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases，p38 MAPK)活性。用2，4二硝基苯肼显色法测定血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性。用免疫酶联吸附法(ELISA)检测心肌内TNF-α含量。结果：定心方大、小剂量组均能不同程度地提高再灌注后平均动脉压(mean arterial pressure，MAP)，减少血清LDH的活性。MI／R模型组大鼠心肌中TNF-α的含量(pg／g)显著高于假手术组(1120&;#177;111和165&;#177;16；t=23．483，P&;lt;0．01)；与模型组相比，TNF-α抗体组、定心方大、小剂量组均能显著降低心肌中TNF-α含量，分别为312&;#177;25，515&;#177;54，843&;#177;86；差异有显著性意义(t=18．341，23．142，5．554，P均&;lt;0．01)。MI／R模型组大鼠心肌中p38MAPK活性(nkat／g)显著高于假手术组(90．01&;#177;2．88和16．67&;#177;0；t=44．00，P&;lt;0．01)；TNF-α抗体组心肌中p38MAPK活性(93．35&;#177;2．55)与模型组无显著性差异(t=0．866，P&;gt;0．05)；定心方大、小剂量组p38 MAPK活性显著低于模型组(大剂量组：58．34&;#177;3．33；小剂量组：68．35&;#177;3．33；t=32．909，6．245，P均&;lt;0．05)。结论：定心方能通过调节p38 MAPK信号传递，减少M／R心肌内TNF-α的生成，从而保护心肌细胞，减轻心肌缺血再灌注损伤。     

磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶与转化生长因子β1在正常和腰椎间盘退变组织中的表达

背景:研究表明p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与椎间盘退变过程中炎症反应密切相关。目的:检测腰退变椎间盘组织和正常腰椎间盘组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的表达。方法:选取经手术切除的36例退变椎间盘组织和10例正常椎间盘组织为对象,应用免疫组织化学法检测两组中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的表达,并应用真彩色病理图像分析系统进行分析。结果与结论:腰退变椎间盘组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的阳性表达率均高于正常椎间盘组织(P<0.05),证实磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1在退变椎间盘组织中呈高表达。     

磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶与转化生长因子β1在正常和腰椎间盘退变组织中的表达

背景：研究表明p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与椎间盘退变过程中炎症反应密切相关。目的：检测腰退变椎间盘组织和正常腰椎间盘组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的表达。方法：选取经手术切除的36例退变椎间盘组织和10例正常椎间盘组织为对象,应用免疫组织化学法检测两组中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的表达,并应用真彩色病理图像分析系统进行分析。结果与结论：腰退变椎间盘组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的阳性表达率均高于正常椎间盘组织（P〈0.05）,证实磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1在退变椎间盘组织中呈高表达。     

盐酸氨溴索对AECOPD患者p38丝裂原活化蛋白激酶通路的影响研究

目的探讨盐酸氨溴索对慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）患者p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）通路的影响。方法90例AECOPD患者在给予抗感染、解痉平喘等对症支持治疗的基础上,根据应用祛痰药物不同,随机分为生理盐水组、溴己新组、氨溴索组,每组30例,监测治疗过程中白细胞计数（WBC ）、中性粒细胞比例（N％）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、红细胞沉降率（ESR）变化;测定3组患者入院当天及用药治疗7 d后血清中p38MAPK、白细胞介素（IL）-8、IL-10的变化情况。结果经治疗后患者血常规、CRP、ESR较治疗前明显下降;并且氨溴索组改善情况优于溴己新组;氨溴索组治疗后第7天,与生理盐水组、溴已新组治疗后第7天比较,以氨溴索组的p38M A PK、IL-8、IL-10下降最明显,3组比较差异有统计学意义（ P＜0．01）。结论氨溴索通过下调p38MAPK通路活化,调节AECOPD患者血清IL-8、IL-10,是其抗炎作用机制之一。     

p38丝裂原活化蛋白激酶对大鼠肾脏分泌单核细胞趋化因子-1的影响

目的 动态观察单核细胞趋化因子-1(MCP-1)在单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾小管的表达,探讨它与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、核转录因子-кB(NF-кB)及肾损害之间的关系. 方法 雌性SD大鼠共36只,体质量150～170 g.随机分为2组:假手术组作为对照组;手术组根据梗阻时间分3组,每组6只.皮下注射水合氯醛(4 mg/kg)麻醉,开腹后结扎右侧输尿管,缝合腹腔,即制备UUO模型.假手术组开腹后不结扎输尿管,缝合腹腔.采用免疫组织化学检测NF-кB、MCP-1,Western印迹分析法检测p38MAPK的磷酸化水平和lVICP-1蛋白水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MCP-1 mRNA的表达.光镜检查肾组织的形态改变.生化方法测定血尿素氮、血肌酐. 结果 与对照组比,随着梗阻时间的延长,MCP-1蛋白表达明显上调,[对照组:0.401±0.039,UUO组8h:0.894±0.137;24 h:1.416±0.135;72 h:1.894±0.143,与对照组相比,P<0.05],MCP-1 mRNA表达明显上调,[对照组:50.08±3.210,UUO组8 h:108.25±4.325;24 h:179.34±3.237;72 h:230.12±3.026,与对照组相比,P<0.05],同时NF-кB、p38MAPK蛋白活性增高,[p38MAPK蛋白对照组:110.65±9.734,UUO组8 h:200.15±8.326;24 h:272.74±7.244;72 h:549.11±9.544,与对照组相比,P<0.05],肾小管MCP-1的表达与p38MAPK、NF-кB呈显著正相关(r=0.74、r=0.81,P<0.01). 结论 UUO大鼠.肾小管MCP-1表达增加参与了UUO大鼠.肾小管间质损害的发病机制;p38MAPK可能介导了NF-кB的表达,进而调节MCP-1的表达增多.     

p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对脓毒症大鼠多器官损伤的保护作用研究

目的探讨脓毒症致多器官损伤的原因，以及p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂的保护作用和机制。方法采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制备脓毒症大鼠模型，治疗组采用术前给予p38MAPK抑制剂SB203580灌胃。在不同时间点观察大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)以及生化指标如丙氨酸转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸磷酸激酶-同工酶(CPK—MB)浓度的变化。结果CLP术后大鼠血清TNF—α、IL-1β显著升高，ALT、BUN、Cr、CPK—MB也进行性升高；血清ALT、BUN、Cr、CPK—MB变化与TNF—α、IL-1β呈显著正相关。应用SB203580后，血清TNF—α、IL-1浓度显著降低，同时ALT、BUN、Cr、CPK—MB也降低。结论TNF—α、IL-1β的大量释放是脓毒症致多器官损伤的原因之一，通过调控p38MAPK信号转导通路可对脓毒症所致多器官损伤起保护作用。     

达格列净通过p38丝裂原活化蛋白激酶抑制高糖诱导的人肾小球足细胞损伤

目的 探讨达格列净通过p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）信号通路对D-葡萄糖诱导的人肾小球足细胞凋亡、自噬、炎症反应及氧化损伤的影响。方法 体外培养人肾小球足细胞（HGPCs），分为对照组（5 mmol/L D-葡萄糖）、D-葡萄糖组（30 mmol/L D-葡萄糖）、达格列净组（30 mmol/L D-葡萄糖＋50 μmol/L达格列净）、抑制剂组（30 mmol/L D-葡萄糖＋10 μmol/L p38 MAPK通路抑制剂SB 203580）、达格列净＋抑制剂组（30 mmol/L D-葡萄糖＋50 μmol/L达格列净＋10 μmol/L SB 203580）和达格列净＋激活剂组（30 mmol/L D-葡萄糖＋50 μmol/L达格列净＋10 μmol/L p38 MAPK通路激活剂C16-PAF）。对照组与D-葡萄糖组用D-葡萄糖干预24 h；其他组D-葡萄糖干预24 h后相应药物继续干预 24 h。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞活力；采用Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡率；采用ELISA检测白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、丙二醇（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的表达水平；采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测酵母ATG6同源物（Beclin-1）、微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ（LC3 Ⅱ）mRNA表达水平；采用Western印迹法检测Beclin-1、LC3 Ⅱ、p53、p38 MAPK及p-p38 MAPK蛋白表达。结果 与对照组相比，D-葡萄糖组细胞活力降低（P＜0.05），达格列净组细胞活力升高（P＜0.05），细胞凋亡率，IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Beclin-1、LC3 ⅡmRNA和蛋白、p53和p-p38 MAPK蛋白水平升高（P＜0.05），SOD水平降低（P＜0.05）。与D-葡萄糖组相比，达格列净组和抑制剂组细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Beclin-1、LC3 ⅡmRNA和蛋白、p53和p-p38 MAPK蛋白水平降低（P＜0.05），SOD水平升高（P＜0.05）。与达格列净组相比，达格列净＋抑制剂组细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Beclin-1、LC3 Ⅱ mRNA和蛋白、p53和p-p38 MAPK蛋白水平进一步降低（P＜0.05），SOD水平进一步升高（P＜0.05）；达格列净＋激活剂组与达格列净＋抑制剂组变化趋势相反，与达格列净组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 达格列净可抑制高糖诱导的人HGPCs的凋亡、自噬、炎症反应及氧化损伤，其作用机制可能与抑制p38 MAPK通路信号转导相关。     

洛伐他汀对糖尿病大鼠肾功能及肾脏组织p38丝裂原激活蛋白激酶表达的影响

目的 探讨洛伐他汀对糖尿病(DM)大鼠肾小球结构、功能及肾组织p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及其下游转录因子cAMP反应元件结合蛋白(cREB)表达的影响。方法 18只雄性Wistar大鼠行右肾切除术2周后,随机分为3组:右肾切除对照组、DM组和洛伐他汀治疗组每组6只。DM组和洛伐他汀组腹腔注射链脲佐菌素(STZ,65 mg／kg)诱发DM模型,洛伐他汀组制模后1 d每日给予洛伐他汀20 mg／kg灌胃。分别于注射STZ后4周收集大鼠尿液,测定尿蛋白(Upro)、尿肌酐(UCr);股动脉放血分离血清,测定血糖(Glu)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)和甘油三酯(TG),并计算肌酐清除率(CCr)。免疫组化检测肾皮质磷酸化p38 MAPK(P-p38 MAPK)及磷酸化CREB(P-CREB)的表达特征,并检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维粘连蛋白(FN)及层粘连蛋白(LN)的表达,应用图像分析系统进行定量分析。流式细胞术检测P-p38 MAPK和P-CREB蛋白的表达,Western印迹法检测肾皮质P-p38 MAPK和P-CREB活性的变化。结果 与对照组相比,4周时DM组P-p38 MAPK、P-CREB、TGF-β1、FN及LN表达均明显升高(P均<0.01);而与DM组相比,洛伐他汀组各指标的表达有不同程度的降低(P均<0.01)。结论 洛伐他汀对DM大鼠肾脏结构和功能具有保护作用,可能通过调节p38 MAPK和CREB蛋白的表达     

脑缺血预适应大鼠脑内p38丝裂原激活蛋白激酶磷酸化水平和蛋白表达量的测定

目的初步探讨p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)在大鼠脑缺血预适应(IPC)形成中的作用。方法选用成年雄性Sprague-Dawley大鼠复制整体脑缺血预适应模型。将大鼠随机分为空白对照(control)、假手术(SI)、缺血预适应或缺血耐受(IT)、外周伤害对照(PNC)、外周伤害耐受(PNT)5组。应用SDS-PAGE、Western blot等实验方法,借助Gel Doc和Versa Doc凝胶成像系统,半定量检测脑躯体感觉皮层、海马组织内p38 MAPK的磷酸化水平和蛋白表达量。结果经脑IPC后,大鼠躯体感觉皮层和海马组织内p38 MAPK磷酸化水平和蛋白表达量与各自对照组相比均未见显著性差异(P>0.05,n=6)。结论大鼠大脑躯体感觉皮层和海马组织内p38 MAPK可能未以磷酸化水平和蛋白表达量改变的形式参与脑缺血预适应的形成。     

褪黑素抑制大鼠急性肺损伤时磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶的表达

目的 探讨褪黑素(MT)对大鼠急性肺损伤(ALI)时肺脏的保护作用及可能机制.方法 将72只SD大鼠按随机数字表法均分为对照组、脂多糖(LPS)组和LPS+MT处理组.LPS组、LPS+MT组动物经气道内滴注LPS 1 ml/kg(200 μg/200 μl)染毒.LPS+MT组给药前后30 min分别经腹腔注射10 mg/kg MT;对照组、LPS组给予1 ml/kg乙醇-生理盐水溶剂.给药后3、6和10 h处死动物取肺组织,检测一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;用免疫组化法检测磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶(p-p38MAPK)在肺组织的表达.结果 LPS组SOD活性(U/mg)较对照组明显降低(3 h:73.78±3.62比112.69±3.26,6 h:66.07±2.31比117.85±1.96,10 h:55.13±5.26比118.27±2.16,均P<0.01),而NO(μmol/mg)与MDA(nmol/mg)含量以及p-p38MAPK表达量(A值)显著升高(NO 3 h:8.19±0.48比2.32±0.20,6 h:11.71±0.27比2.08±0.15,10 h:16.53±0.60比2.76±0.21;MDA 3 h:11.43±0.68比2.86±0.21,6 h:19.63±1.29比2.85±0.19,10 h:26.63±2.00比2.84±0.28;p-p38MAPK 3 h:0.340±0.020比0.238±0.019,6 h:0.410±0.016比0.218±0.024,10 h:0.578±0.066比0.238±0.036,均P<0.01);应用MT能显著缓解上述变化[3、6、10 h SOD(U/mg)为86.02±2.81、80.87±3.40、94.46±5.03,NO(μmol/mg)为3.80±0.28、5.32±0.22、7.24±0.52,MDA(nmol/mg)为8.18±0.84、7.84±0.78、6.43±1.06,p-p38MAPK(A值)为0.311±0.018、0.312±0.019、0.314±0.021,P<0.05或P<0.01].结论 MT对ALI时肺脏的保护作用可能与MT的抗氧化作用及抑制p-p38MAPK的过度表达有关.     

电针干预自发性高血压大鼠主动脉丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1及磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白的表达

背景:近年来大量临床研究表明针刺风池、太冲、曲池等穴位能有效降低血压,可用于高血压,但对其治疗的分子机制尚未阐明.目的:观察针刺大鼠风池、太冲、曲池等穴位对丝裂原活化蛋白激酶信号转导调控系统的影响,从而探讨针刺治疗高血压的分子机制.方法:选取8月龄自发性高血压雄性Wistar大鼠14只,随机分为针刺组和模型组,每组7只;另选取同月龄正常血压雄性Wistar-Kyoto大鼠7只作为对照组.对针刺组大鼠采用电针针刺双侧风池、曲池和三阴交穴,毫针刺太溪和太冲穴.3周后采用RT-PCR方法检测各组大鼠主动脉组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1 mRAN的表达,Western blot方法检测丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达.结果与结论:与对照组比较,模型组主动脉组织磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达水平升高,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1 mRNA及其蛋A表达水平降低(P<0.01);与模型组比较,针刺组主动脉组织磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达水平降低,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1 mRNA及其蛋白表达水平升高(P<0.05).提示针刺治疗自发性高血压大鼠可能是通过调控丝裂原活化蛋白激酶信号转导途径,增强磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达,降低丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1蛋白表达,从而改善血管重塑,降低血压.     

丝裂原活化蛋白激酶p38与低浓度一氧化碳对脂多糖诱导肺损伤大鼠肺炎症反应的作用

目的:观察低浓度一氧化碳(CO)吸入对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺炎症反应的影响及影响过程中丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)的变化.方法:4组SD大鼠静脉注入5 mg/kg质量LPS或等容量生理盐水,1 h后.对照及LPS组吸入室内空气,C0吸人及LPS+CO吸入组吸入250 ppm CO.观察3 h后放血处死,取肺组织,酶联免疫吸附法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-10(IL-10)含量.蛋白印迹法测定磷酸化p38 MAPK表达.结果:LPS组TNF-α、IL-6、磷酸化p38 MAPK表达明显升高、IL-10显著降低,与对照组及CO吸人组比较,差异有统计学意义(P均<0.01).LPS+CO吸入组TNF-α、IL-6显著低于、IL-10和磷酸化p38 MAPK表达明显高于LPS组(P均<0.05).结论:p38 MAPK信号转导通路可能参与了低浓度CO吸入对LPS诱导ALI大鼠肺炎症反应的抑制.