幽门螺旋菌分型方法的研究进展

门螺旋菌与慢性胃炎和消化性溃疡密切相关。婴门螺旋菌的分型对此菌传染源、传播途径等重要问题的探讨及流行病学研究有重大意义。近年来，该菌的分型方法取得了一些进展。本文综述了分型该菌的传统分型法、分子分型法和分子指纹法、其中分子指纹法分辨力高、重复性好。     

滴金免疫法检测血清幽门螺旋菌抗体

自1983年Warren与Mashall分离出幽门螺旋菌（HelicobaecterPylort）许多学者都在研究此菌与胃病，尤其是与胃、十二指肠溃疡的关系。本文应用滴金免疫法对168例胃病患者的血清幽门螺旋菌抗体（以下略为HP）进行了检测，与常规的培养法做了对比评价，现报道如下。[第一段]     

幽门弯曲菌分离、传代及保存方法的评价

培养幽门螺旋菌的方法有多种,可分为两类,以营养琼脂为基础的非选择培基如加5%羊或马血等的脑心浸液琼脂和含有抗生素的2,3,5三苯基氯化四氮唑的选择性培基.作者等对何种培基适合于幽门螺旋菌的初代分离、传代和保存作了对比观察。用羊血琼脂(SBA),Belo Horizonte 培基和Brussels 弯曲菌碳末琼脂从309例胄活检标本中检     

当前欧洲治疗幽门螺旋菌感染的新准则

关于幽门螺旋菌感染的治疗仍然存在着相当多的模糊认识,特别是在基层医生中,许多欧洲国家对这一迅速发展的医学领域缺乏国家准则。欧洲幽门螺旋菌研究小组召开了一次由幽门螺旋菌研究专家、基层医生、欧洲各国胃肠病学会代表参加的大会,制定了基层医生以及专家的治疗幽门螺旋菌感染的共同准则,讨论了与此感染相关的一般性保健护理议题。     

三种方法检测幽门螺旋菌的结果比较

自1983年Warren和Marshall首次分离出幽门螺旋菌(Hp)后，现已基本证实该菌与慢性胃炎及消化性溃疡的发生、发展有一定关系。本文采用快速尿素酶试验(RUT)、Hp—IgG检测卡和组织涂片染色法对150例胃病患者的Hp进行了检测比较，现报道如下。     

耶尔森菌的分子分型

耶尔森菌属包括11个种,其中能引起人类疾病的有鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌.本文综述了目前耶尔森菌多种分子分型技术的研究现状.这些分子分型技术是对常规表型分型技术的补充和深入,使我们对所要研究的细菌有更加全面的了解.     

传代培养对基于肽质量指纹谱的细菌识别稳定性影响分析

目的 应用肽质量指纹谱技术对多次传代细菌进行识别,分析细菌传代对细菌识别能力的影响。方法 将幽门螺杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌分别连续传57、50、100代,金黄色葡萄球菌留取抗原。每一代新鲜培养菌和冻存抗原通过乙醇/甲酸法提取蛋白,采用肽质量指纹谱技术进行谱图采集和菌株鉴定。进一步采用NanoLC-MS/MS对幽门螺杆菌基于肽质量指纹谱识别的蛋白进行批量鉴定。结果 幽门螺杆菌、大肠埃希菌分别连续传57代和50代,采用肽质量指纹谱每代均能正确识别到种水平;金黄色葡萄球菌连续传100代,采用肽质量指纹谱每代新鲜菌株及冻存抗原均能正确识别到种水平,各代冻存抗原和新鲜菌株的肽质量指纹谱具有很好的一致性。幽门螺杆菌蛋白扫描分析,鉴定出206个蛋白,包括各种酶类（29.6%）、核糖体蛋白（15.5%）、外膜蛋白（10.7%）、假想蛋白（19.0%）、转运相关蛋白（2.0%）、其他蛋白（22.0%）。结论 细菌连续传代和抗原冻存不影响肽质量指纹谱对菌株的正确识别,细菌的肽质量指纹谱具有传代稳定性。     

利用幽门螺旋菌的尿素酶活性诱导细菌的自身破坏

已证实95%以上的十二指肠溃疡病人感染幽门螺旋菌,大约50%的成年人的胃窦粘膜感染该菌,但迄今的治疗药物由于副作用或耐药性,根治这种感染不令人满意。作者介绍利用本菌的高尿素酶活性这一特点来诱导细菌自身的破坏,从而达到杀死细菌的目的。     

2014－2017年北京市顺义区腹泻病例中沙门菌流行特征与分子分型特征分析

目的分析2014 — 2017年北京市顺义区腹泻病例中沙门菌流行特征和分子分型特征,为沙门菌的防控、预警、溯源等提供依据。方法收集北京市顺义区腹泻病例标本和流行病学数据,分离沙门菌并进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型检测,利用国家致病菌识别网平台进行指纹图谱比对,结合实验室检测结果、流行病学资料、临床资料对本地区沙门菌流行和分子分型特征进行描述分析。结果顺义区腹泻病例中沙门菌检出率为5.23%,21种血清型,以鼠伤寒沙门菌（32.89%）和肠炎沙门菌（30.26%）为主;沙门菌检出率呈春秋季双高峰分布;女性和男性肠炎沙门菌的检出率差异有统计学意义（χ2＝5.978,P＝0.014）;发热体温越高的病例组,沙门菌属检出率越高,差异有统计学意义（χ2＝22.579,P＜0.001）;菌株PFGE分析结果显示存在多次聚集的现象。结论沙门菌在北京市顺义区腹泻病原中占有重要位置;不同血清型沙门菌的人群分布、临床症状分布和分子分型分布均具有一定特征;利用国家致病菌识别网识别、预警、评估、溯源沙门菌引起的食源性疾病和肠道传染病是本地区沙门菌防控工作的方向。     

沙门菌玻片凝集血清分型与多重荧光PCR血清分型检测试剂盒方法比较

目的探讨在肠道多病原监测中,沙门菌多重荧光PCR血清分型检测试剂盒的适用性,扩展沙门菌的分子分型和鉴定方法,提高分型效率,以更快更好地应对由沙门菌引起的腹泻事件。方法利用沙门菌多重荧光PCR血清分型检测试剂盒和传统玻片凝集血清分型方法,对2013 — 2018年北京市丰台区肠道多病原监测中分离获得的95株沙门菌进行分型分析,比较2种结果的符合程度。结果采用传统玻片凝集法,95株沙门菌被分为21种血清型。 采用多重荧光PCR血清分型检测试剂盒,85株沙门菌被分为17种型别,10株菌无法分型,包含Salmonella Goldcoast、S. London、S. Senftenberg、S. Thompson、S. Panama、S. Othmarsche 6种血清型。 在试剂盒成功分型的85株菌中,83株菌的分型结果与玻片凝集法一致,符合率为97.65%。结论在沙门菌分型中,玻片凝集法应用良好,多重荧光PCR血清分型检测试剂盒与前者分型结果一致性高,检测效率显著提升,对不常见血清型的鉴定有待扩充,2种方法联合使用可全面提高实验室对沙门菌的分型检测效率和准确率。     

培养和检测幽门螺旋菌尿素酶活性的新培养基

目前鉴定幽门螺旋菌(HP)的方法虽多,但均不理想。本文研究了一种新的平板培养基,不含血液,可直接培养该菌并检测其尿素酶活性。该培养基系非选择培养基(NSM),由哥伦比亚琼脂39g、氯化血红素10mg、IsoVitalex20ml、尿素20mg、酚红1.2mg、琼脂4g,蒸馏水980ml 组     

儿童幽门螺旋菌的血清学指标检测分析

幽门螺旋菌(Helicobacter pylori,Hp)可致胃炎、胃或十二指肠溃疡等消化系统疾病，一般需作胃镜取胃粘膜组织检测。本文测定了880例儿童幽门螺旋菌的血清学指标，现将结果报道如下。     

CYP2C10基因多态性对奥美拉唑治疗十二指肠溃疡的影响

目的 探讨奥美拉唑治疗十二指肠溃疡合并幽门螺旋菌感染的疗效及其与CYP2C19基因多态性的关系.方法 应用奥美拉唑+阿莫西林+克拉霉素三联用药1周后单用奥美拉唑抑酸3周的方案治疗65例经胃镜证实的十二指肠溃疡合并幽门螺旋菌( Hpylori)感染患者.记录治疗前和用药后症状的变化,并于治疗结束时复查胃镜.患者CYP2C19的基因型检测采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法.结果 65例十二指肠溃疡患者中,24例为纯合子强代谢者,31例为杂合子强代谢者,10例为弱代谢者.纯合子强代谢组、杂合子强代谢组和弱代谢组有效率分别为75.0％、90.3％和100％,纯合子强代谢组的治愈率显著低于弱代谢组(P＜0.05).弱代谢型组患者的Hpylori清除率显著高于纯合子强代谢型和杂合子强代谢型(P＜0.05).结论 CYP2C19基因多态性与奥美拉唑治疗十二指肠溃疡合并幽门螺旋菌感染的疗效密切相关.CYP2C19基因分型检测是临床治疗酸相关性疾病中的一个重要的工具.     

应用ERIC-PCR技术分析多药耐药肺炎克雷伯菌的基因分型

目的 分析多药耐药肺炎克雷伯菌的肠杆菌科基因间重复一致序列PCR （ERIC-PCR）基因分型,为临床诊断和防治肺炎克雷伯菌感染提供依据.方法 先利用纸片扩散法检测18株临床分离的肺炎克雷伯菌对17种抗菌药物的耐药性并获得耐药谱型;再利用ERIC-PCR获得18株肺炎克雷伯菌DNA指纹图谱,通过非加权配对聚类分析（UPGMA）法构建分子进化树;最后探讨肺炎克雷伯菌ERIC-PCR基因型与其耐药性及耐药谱之间的关系.结果 18株肺炎克雷伯菌对17种抗生素呈不同程度耐药,对亚胺培南敏感性达100％.18株肺炎克雷伯菌对17种抗生素呈现12种耐药模式,并可分为9种基因型.结论 肺炎克雷伯菌耐药性及耐药谱与特定的ERIC-PCR基因型之间存在较高程度的关联.     

抗幽门螺旋菌单克隆抗体初步临床应用

自1983年Warren 和Marshall 从胃粘膜组织中分离到幽门螺旋菌(Helicobacter pylori,HP)以来,许多学者对HP 感染的诊断方法进行了摸索.本文介绍HP-MAbs 免疫过氧化物酶染色法诊断HP 感染,并用ELISA 法鉴定HP,报告如下.     

一种罕见的福氏志贺菌4c型流行菌株的鉴定分析

目的鉴定、分析新出现的福氏志贺菌4型流行菌株的表型和DNA型别特征。方法在部分测试典型菌株用生化、血清型别及药敏试验等的基础上结合R iboprinter DNA指纹图谱分析系统(RP)来分析鉴定测试菌。结果该类菌株表型符合志贺菌定义,血清学分型为福氏志贺菌4 c型(F4 c,Ⅳ:7,8);限制性内切酶EcoRⅠ的酶谱与RP数据库中志贺菌一致,PvuⅡ的酶切结果发现,参考菌株中有1株F2b地方株与F4 c酶谱一致。结论福氏志贺菌4 c型可能是F2b的溶源性变异菌株。应用RP双酶切福氏志贺菌具有分子鉴定和分子分型的作用。     

沙门菌血清型多态性与PFGE分型及其相关性研究

目的分析上海青浦区沙门菌血清型的分布情况和分子分型多态性,以及血清型与分子分型的相关性。方法从2015—2018年的人源性样品中分离并收集384株沙门菌,采用玻片凝集法进行血清学分型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行基因分型,BioNumerics软件进行聚类分析。结果 384株沙门菌可分为10个血清群、34个血清型别;以鼠伤寒和肠炎沙门菌为优势血清型,分别占24.7%和21.9%;常见血清型有伦敦、德尔卑、罗森、婴儿沙门菌等。341株菌株完成PFGE分型,以肠炎沙门菌的优势簇为主。结论 2015—2018年上海市青浦区沙门菌的血清型别和基因型表现出多态性的特征,各年份优势血清型稳定。同一血清型的沙门菌分子分型基本位于同一聚类簇中,但有部分血清型沙门菌表现出高度的遗传变异性。     

鼠伤寒沙门菌分子分型及耐药性特点

目的了解广州市鼠伤寒沙门菌的分子分型以及耐药性特点。方法利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型技术对鼠伤寒沙门菌进行分子分型,采用纸片扩散(K-B)法进行药敏试验,且采用WHONET 5.6软件对药敏结果进行耐药分析。结果 PFGE结果聚类分析将44株鼠伤寒沙门菌分为15型,其中PFGE9型、PFGE8型、PFGE3型为广州市的优势菌型,菌株比例为54.5%(24/44)。耐药表型分型可将其分为21型,多重耐药菌占61.4%(27/44)。结论广州市鼠伤寒沙门菌分子分型呈多样性,分离株的多重耐药较为严重。     

结核分枝杆菌随机扩增多态性DNA指纹分型技术及应用研究

目的 探讨重庆地区结核病分子流行病学的发展趋势。方法 建立随机扩增多态性DNA聚丙酰胺凝胶电泳（RAPD－PAGE）指纹分型法；采用1对随机引物对重庆地区287例肺结核患者416株结核分枝杆菌进行DNA指纹分型。结果 416株分离菌株其DNA指纹可分为7种类型，以Ⅰ型（35.5%)、Ⅱ型（29.3%）和Ⅲ型（22.6%)为主,其中20-39岁和40-49岁年龄组的初治患者在3型中分别占58.0%和46.2%.在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中初治患者分别占52.0%、46.4%和58.5%，至少耐利福平和异烟肼（MDR）的初治患者又分别占的11.3%、35.9%和24.3%，至少耐利福平和其他药物的多理耐药株在3型中占21.7%（初治）。结论 RAPD－PAGE指纹分型法，是一种简便、特异、敏感、重复性好的菌株分型方法，可用于结核病分子流行学的研究；以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型为主的结核分枝杆菌正在重庆及周边地区的人群中传播；MDR株和含利福平的其他多种耐药株的传播占有较高频率。     

北京市顺义区细菌性痢疾临床诊断病例的感染致病菌检测分析

目的 分析北京市顺义区细菌性痢疾临床诊断病例的感染致病菌构成及病原特征,为该类疾病的科学防控提供依据.方法 收集细菌性痢疾临床诊断病例44例,进行志贺菌属、弯曲菌属、沙门菌属、副溶血弧菌、霍乱弧菌、致泻大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌7种常见致病菌的分离培养,对分离菌株进行血清分型、分子分型及毒力基因检测.结果 志贺菌属...