树突状细胞在角膜移植排斥反应中的免疫调节机制的探讨

目的 观察自体未成熟树突状细胞(Idc)对于小鼠同种异体角膜移植的免疫调节作用,探讨其作用机制.方法 PBS或自体Idc尾静脉注射7 d后,采用双色免疫荧光染色法及流式细胞术分析小鼠脾脏中CD4 CD28 及CD4 CTLA4 T细胞的表达.PBS或自体Idc尾静脉注射7 d后进行小鼠同种异体角膜移植,临床观察两组植片的存活时间.结果 Idc注射后,脾脏中CD4 CD28 T细胞的比例下降(P＜0.01),而CD4 CTLA 4 T细胞比例明显升高 (P＜0.01).Idc经尾静脉注射后明显延长了同种异体角膜移植片的存活时间(P＜0.01).结论 Idc可诱导CD80/CD86-CTLA-4抑制型共刺激信号替代CD80/CD86-CD28信号通路,从而阻断协同刺激信号的传递及T细胞的活化,对于同种异体角膜移植排斥反应具有免疫抑制作用.     

共刺激分子Tim-1在角膜移植排斥反应中的作用

背景 角膜移植是目前临床上治疗角膜盲可靠且有效的复明手段,角膜移植术后的免疫排斥反应是角膜移植失败的主要原因. 目的 研究共刺激分子Tim-1在大鼠角膜组织中的表达及其在角膜移植排斥反应发生和发展过程中的作用.方法 40只清洁级成年雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、自体角膜移植组和同种异体角膜移植组.正常对照组大鼠未行任何手术,自体角膜移植组分别以Wistar大鼠作为供体和受体施行穿透角膜移植术,而同种异体角膜移植组以SD大鼠角膜作为供体,Wistar大鼠作为受体行穿透角膜移植术,各组供体角膜植片均为3.5mm,植床直径为3.0 mm.分别于术后7d、14d在裂隙灯显微镜下观察术眼角膜炎症反应情况,按照Larkin的标准进行排斥反应评分,计算排斥反应指数（RI）,观察各组角膜植片的平均存活时间和植片存活率.术后7d、14d,3个组各取3只大鼠眼球制备角膜组织切片,分别行组织病理学检查和免疫组织化学检测,观察角膜组织的炎症反应和共刺激分子Tim-1蛋白在角膜组织中的表达;此外分别于术后7d、14d各组取5只大鼠角膜制备组织匀浆,采用实时荧光定量PCR法检测共刺激分子Tim-1 mRNA在大鼠角膜植片中表达量（吸光度,A）的变化.结果 术后7d,自体角膜移植组和同种异体角膜移植组大鼠角膜植片均出现轻度水肿;术后14 d,自体角膜移植组角膜植片水肿消失,植片透明,而同种异体角膜移植组大鼠角膜植片水肿增厚,呈灰白色混浊,可见新生血管形成.自体角膜移植组植片的存活率为100％,同种异体角膜移植组植片存活率为0,平均生存时间为（9.8±1.2）d.组织病理学检查表明,术后7d自体角膜移植组植片基质层可见炎性细胞浸润,但术后14d炎性细胞明显减少;同种异体角膜移植组术后7d植片水肿,基质层可见炎性细胞浸润,术后14 d阳性细胞大量增加,可见新生血管.免疫?     

转化生长因子—β防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

转化生长因子-β（TGF）是一具有免疫调节活性的多肽分子，包括抑制T细胞和B细胞的分化以及灭活巨噬细胞功能。本研究建立兔同种异体偏中心穿透性角膜移植和异位角膜移植模型，观察了TGF-β对角膜移植排斥反应的影响。发现使用TGF-β具有延长移植片存活和抑制供体特异性迟发型超敏反应的作用。结果提示TGF-β具有作为免疫抑制剂抑制角膜移植排斥反应的能力。     

RelA基因修饰的树突状细胞在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用

目的 探讨RelA基因修饰供体骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells,DC)在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用.方法 以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,建立大鼠穿透性同种异体角膜移植动物模型.将60只受体大鼠随机分为4组,每组15只,分别为对照组(造模前7d尾静脉注射PBS 1 mL)、mDC组(造模前7d尾静脉注射mDC 1 mL,共5×106个细胞)、imDC组(造模前7d尾静脉注射imDC 1 mL,共5×106个细胞)及RelA-DC组(造模前7d尾静脉注射RelA修饰的DC 1 mL,共5×106个细胞).术后每天观察角膜植片免疫排斥反应情况并记录角膜植片的存活时间;术后14 d每组随机处死5只受体大鼠取其角膜作组织病理学观察.结果 RelA-DC组角膜植片存活时间为(26.2±2.3)d,较对照组(11.4±1.3)d、mDC组(9.3±1.3)d及imDC组(19.4±2.6)d均明显延长,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);imDC组的存活时间显著长于对照组、mDC组(均为P＜O.05);与mDC组比较,对照组植片的存活时间延长,差异有统计学意义(P＞0.05).角膜植片组织病理学(HE染色)结果显示,对照组、mDC组角膜植片明显增厚、水肿,基质层胶原纤维排列紊乱,可见大量炎症细胞浸润以及新生血管;imDC组角膜植片呈不同程度水肿,基质层胶原纤维排列轻度紊乱,可见少量炎症细胞浸润;RelA-DC组角膜植片轻度水肿,基质层胶原纤维排列较规则,几乎没有单核细胞浸润.结论 静脉输注RelA基因修饰的DC能抑制大鼠角膜移植术后免疫排斥反应的发生,明显延长角膜植片的存活时间.     

小鼠角膜移植排斥反应中植片内细胞因子表达水平的变化

背景研究表明细胞因子在角膜移植免疫调节中起重要的作用,但关于角膜移植术后角膜植片内细胞因子表达的变化报道较少。目的探讨角膜移植术后不同时间点细胞因子的表达变化。方法采用雌性6～8周龄BALB／c小鼠及C57BL／6小鼠分别建立小鼠自体角膜移植和同种异体角膜移植模型,每组各10只,自体角膜移植术组供体和受体同为BALB／c小鼠,同种异体角膜移植术组供体为C57BL／6小鼠,受体为BALB／c小鼠。于术后1d开始临床观察角膜植片并对炎症程度进行评分,当植片评分总和≥5分或植片混浊≥2分时为发生植片排斥反应。将BALB／c小鼠随机分为正常对照组3只和同种异体角膜移植术组15只,后者分别于术后6h及1、3、7、14d对角膜植片行逆转录PCR（RT—PCR）检测植片中细胞因子白细胞介素4（IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）、IL-10、肿瘤坏死因子α（TNF—α）表达的变化。结果在60d的观察期中,自体角膜移植术后小鼠角膜植片混浊评分均〈2分,植片的炎症评分之和均〈5分,植片存活率为100％,但同种异体角膜移植术后角膜植片水肿、混浊,伴有角膜新生血管形成,至术后24d角膜植片排斥反应评分之和均≥5分,植片混浊评分≥2分,全部发生排斥反应,角膜植片平均存活时间为（17．80±4．66）d。RT—PCR检测结果表明,正常角膜中IL-4和IFN-γ呈阳性表达,IL-10和TNF-α表达阴性。同种异体角膜移植术后6h可检测到IL-4呈阳性表达,IFN-γ和IL-10表达呈强阳性,而未检测到TNF—α的表达。术后1～3d角膜植片中IL-4呈强阳性表达,IFN-γ阳性表达,TNF—α表达增强,IL-10表达逐渐消失。角膜移植术后7d,可见IL-4表达阴性,而IFN-γ、IL-10和TNF—α仍呈强阳性表达。至术后14d,角膜植片中IL-4、IFN-γ和TNF—α．均未见表达,仅检测到IL-10呈阳性表达。结论TNF-α是角膜移植术后局部参与调控的主要因子。     

诱导供体特异性前房相关免疫偏离对高危角膜移植排斥反应的影响

目的:探讨诱导供体特异性的前房相关免疫偏离(anterior chamber-associated immune deviation,ACAID)对高危角膜移植排斥反应的影响。方法:采用新西兰白兔眼角膜建立碱烧伤眼模型,实验动物随机分为4组,A:正常角膜常规角膜移植组(正常对照组);B:碱烧伤常规角膜移植组(碱烧伤对照组);C:正常角膜诱导ACAID的角膜移植组(正常诱导组)。D:碱烧伤后诱导ACAID的角膜移植组(碱烧伤诱导组)。B,D组进行左眼碱烧伤,烧伤后1mo进行角膜移植。C,D组在角膜移植前2wk于右眼前房注入可溶性抗原以预先诱导供体特异性ACAID。A,B组右眼前房注等量平衡盐溶液。术后记录植片存活时间;对角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)生长情况进行评分;记录移植排斥指数(rejection index,RI);角膜固定、包埋后制作切片行HE染色。结果:A、C组角膜植片长期存活,碱烧伤对照组植片平均存活25.13±0.64d,碱烧伤诱导组角膜植片平均存活时间为38.25±1.28d。与碱烧伤对照组相比,碱烧伤诱导ACAID组角膜植片平均存活时间显著延长,两组植片存活时间的差异具有统计学意义(P=0.00)。结论:诱导供体特异性ACAID可以延长碱烧伤高危眼角膜植片的存活时间。     

免疫赦免在小鼠角膜移植排斥中的作用研究

目的:阐明同种异体小鼠角膜移植术后免疫排斥反应及免疫赦免的相关性。方法:建立小鼠原位角膜移植及同种异体小鼠角膜移植实验模型。观察原位移植与同种异体移植术后角膜植片发生排斥的情况,对比两种移植术后植片的存活率,了解小鼠角膜移植术后发生排斥反应与免疫赦免反应之间的关系。结果:小鼠原位角膜移植术后植片100%存活;同种异体小鼠角膜移植术后存活率为25%。结论:小鼠角膜移植术后免疫排斥并非绝对,免疫赦免在角膜移植术中发挥重要作用。     

小分子化合物J2在抑制小鼠角膜移植排斥反应中作用的初步研究

目的 探讨小分子化合物J2在抑制小鼠角膜移植排斥反应中的作用。方法以23只C57BL／6小鼠作为供体,76只BALB／c小鼠作为受体建立角膜移植实验模型,随机数字法分为A、B、C及D组,A组为BALB／c小鼠自体原位角膜移植,B、C及D组为C57BL／6-BALB／c小鼠间同种异体角膜移植。术后灌胃给药,A组和B组给予不含药物的空白液,C组和D组分别给予环孢素A（CsA）和小分子化合物J2,连续灌胃12d,比较各组小鼠角膜植片的存活时间和存活率,术后21d对各组小鼠行外周血单核细胞行流式细胞学检查,并做角膜植片的组织学检查。结果A组观察期内角膜植片未发生排斥,B组角膜植片平均存活时间为（17．8±2．1）d,C组为（38．1±9．9）d,D组角膜植片存活时间为（40．6±8．3）d,D组与A组（P=0．04）及B组（P=0．00）比较存活时间差异均有统计学意义,与C组比较差异无统计学意义（P：0．99）。流式细胞学检查显示J2给药小鼠外周血CD^＋细胞、CD8^＋细胞未发生增殖,组织学检查证实术后21dD组角膜植片未见明显的淋巴细胞浸润。结论小分子化合物J2能够抑制排斥的发生,延长小鼠角膜植片存活时间。（中华胺群条峦,2007,43：608-612）     

雷帕霉素抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的探讨雷帕霉素(RAPA)对大鼠角膜移植排斥反应的防治效果。方法以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体建立角膜移植实验模型。采用完全随机分组设计方案,将68只Wistar鼠(68只眼)随机分为4组,A组为Wistar鼠自体原位角膜移植,B、C、D组为SDWistar鼠之间进行同种异体角膜移植。术后灌胃给药,A组和B组给予空白液,C组和D组分别给予RAPA(3mg·kg-1·d-1)和环孢霉素A(CsA)(10mg·kg-1·d-1),连续用药12d。根据Holland排斥反应评分系统,判断术后植片排斥情况。比较各组角膜植片的平均存活时间和植片存活率。采用广义估计方程对角膜的新生血管评分进行统计学分析。术后14d,对各组角膜进行组织学检查。结果RAPA组发生排斥反应的时间明显延迟,同种异体移植对照组植片平均存活时间(MST)为(11.0±1.5)d,RAPA组MST为(36.1±14.9)d,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。RAPA组角膜植片存活情况较CsA组好,但两组植片存活率比较差异无统计学意义(P>0.05)。RAPA组术后角膜新生血管的生长明显低于异体移植对照组(P<0.05)和CsA组(P<0.05)。组织学检查证实,术后14d,RAPA组角膜植片未见明显淋巴细胞浸润。结论口服RAPA能够延缓大鼠角膜移植排斥反应的发生,并能够抑制术后新生血管的生成。     

雷公藤多甙防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

用兔同种异体角膜移植模型，观察了雷公藤多甙及联合环孢霉素A对植片存活时间和移植抗原诱导的迟发型超敏反应的影响。结果显示：与对照组相比，雷公藤多甙组、环孢霉素组和两种药物联合组植片存活时间显著延长，移植抗原诱导的迟发型超敏反应也显著受到抑制；其中联合组的作用又大于两种药物单独应用组。结果提示：雷公藤多甙具有显著延长角膜移植存活和防止免疫排斥反应发生的作用；与环胞霉素A具有一定的协同作用，为进一步应用于临床提供了实验依据。     

IL-10基因修饰的未成熟树突状细胞在大鼠角膜移植排斥反应中的作用

目的：通过建立大鼠角膜穿透性移植模型,探讨IL－10基因修饰的未成熟树突状细胞在大鼠角膜移植排斥反应中的作用及其作用机制。方法：建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,将受体SD大鼠随机分为：阳性对照组、GFP－DC组、8－DC组及IL－10－GFP－DC组,分别于角膜移植术前3 d尾静脉注射等量的PBS、供体Wistar 大鼠骨髓源8－DC （培养8d的DC）、转染48h的GFP－DC及IL－10－GFP－DC。术后每天在裂隙灯下观察角膜植片情况,记录排斥反应指数及角膜植片存活时间,在移植术后第14 d行各组角膜组织的病理学检查及免疫组织化学检查。结果：IL－10－GFP－DC组角膜植片存活时间较GFP－DC组、8－DC组比较显著延长（ P＜0．01）。术后第14 d时IL－10－GFP－DC组角膜植片的混浊、水肿、新生血管及排斥指数均显著降低（P＜0．01）。病理组织学检查结果显示各实验组角膜植片的炎症反应较阳性对照组轻,植片中央未见明显新生血管。免疫组织化学结果显示：IL－10－GFP－DC组的CD4＋、CD8＋、CD25＋、IL－2＋、NK＋及NF－κB＋阳性细胞数量较阳性对照组、GFP－DC组、8－DC组减少,差异均具有显著统计学意义（P＜0．01）。结论：经过供体来源未成熟树突状细胞预处理的受体,角膜植片的存活时间显著延长,成功诱导角膜移植免疫耐受。 CD4＋、CD8＋、CD25＋、IL－2＋、NK＋及NF－κB＋阳性细胞参与了同种异体角膜移植排斥反应的调控,IL－10－GFP－DC可降低CD4＋、CD8＋、CD25＋、IL－2＋、NK＋及NF－κB＋阳性细胞的浸润,抑制角膜移植排斥反应的发生。     

颈浅淋巴结在大鼠角膜移植免疫中的作用

目的探讨颈浅淋巴结在角膜移植免疫中的作用,为抑制移植术后的免疫排斥反应提供新的思路。方法建立大鼠同种异体角膜移植模型,24只SD鼠为受体,12只Wistar鼠为供体,所有大鼠均为雌性。受体鼠再分为A、B、C、D4组,A组为正常角膜移植组,B组为正常角膜移植合并颈浅淋巴结切除组,C组为高危角膜移植组,D组为高危角膜移植合并颈浅淋巴结切除组。每组均为6只,其中1只于术后14d行植片病理学检查及巨噬细胞免疫组化染色。对各组角膜存活情况进行评分比较,评价疗效。结果各组植片存活时间分别是(10.40±1.14)d、(46.30±9.46)d、(7.00±1.58)d和(15.00±3.39)d。植片存活时间B组较A组、C组,D组较C组均明显延长,差异均具有显著性意义(P<0.05)。结论颈浅淋巴结在大鼠角膜移植免疫中起着非常重要的作用,颈浅淋巴结切除术能有效抑制正常及高危角膜移植术后的免疫排斥反应。     

耐受型抗原递呈细胞对小鼠角膜植片免疫排斥的影响

目的建立小鼠同种异体角膜移植模型,观察静脉注入抗原递呈细胞对术后免疫排斥的影响。方法建立BALB/c→C57BL/6小鼠角膜移植模型。随机分2组,静脉注入耐受型或普通抗原递呈细胞。根据植片混浊评分,判断植片排斥情况。随机取两组小鼠脾脏检测CD4 NKT百分比和IL-10质量分数。结果与对照组相比,实验组移植排斥出现晚(19d±1.6d,P=0.009)。术后脾脏CD4 NKT百分比、IL-10质量分数相对恒定。结论小鼠角膜移植术后耐受型抗原递呈细胞静脉注射可延长植片存活时间。     

角结膜干燥症自体颌下腺移植术后角膜植片存活情况的实验研究

目的 探讨自体颌下腺移植治疗角结膜干燥症后同种异体板层角膜移植术后植片存活情况和CD25＋细胞在角膜排斥植片的表达情况.设计实验研究.研究对象健康成年新西兰兔20只.方法 20只实验动物用摘除泪腺和Harder腺的方法制成千眼模型,随机分两组：实验组行自体颌下腺移植 对照组不处理.移植腺体成活后两组都行同种异体板层角膜移植术.主要指标角膜植片存活时间和CD25＋细胞在角膜植片表达情况.结果 实验组角膜植片存活时间（37.0±5.4天）明显长于对照组（21.3±4.3天）（t=6.495,P〈0.001）,两组植片CD25表达情况（实验组：22.80±1.61个/5个倍视野 对照组：23.05±1.87个/5个高倍视）,无显著差异（t=0.287,P〉0.05）.结论 颌下腺移植术后角膜植片失败主要原因是免疫排斥反应、血管化高危植床及泪液分泌不稳定.唾液泪液对角膜植片无明显不良影响.     

TGF-β1对大鼠角膜移植后免疫排斥和IL-2的影响

目的:探讨IL-2在角膜移植免疫排斥反应过程中表达的动态变化规律,转化生长因子β1(TGF-β1)对IL-2表达的影响及TGF-β1的免疫抑制作用。方法:建立大鼠穿透性角膜移植模型,分为实验组(同种异体角膜移植,使用TGF-β1眼液),实验对照组(同种异体角膜移植,使用氯霉素眼液)及空白对照组(自体角膜移植,使用氯霉素眼液)3组,分不同时间点用RT-PCR法检测角膜植片中IL-2 mRNA的含量变化,并进行显微镜观察,根据角膜移植植片水肿,混浊,新生血管3项指标进行排斥指数评分(RI)。结果:实验组大鼠植片存活时间较实验对照组明显延长(19.3±1.4dvs13.7±2.6d,P<0.01);实验组各个时间点IL-2 mRNA的含量较实验对照组均有明显降低(P<0.01)。结论:TGF-β1对大鼠穿透性移植术后的免疫排斥反应有明显抑制作用,并能下调植片中IL-2的表达。     

角膜移植排斥反应中ICAM-1含量的变化

目的:探讨细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion mole-cule-1,ICAM-1)在血液和房水中的含量变化与角膜移植排斥反应的关系。方法:缝线法诱发兔角膜新生血管化(corneal neovascular-ization,CNV)后,制作穿透性角膜移植(penetrating kerato-plasty,PKP)模型4组,A组:正常对照组;B组:自体穿透性角膜移植组;C组:同种异体穿透性角膜移植组;D组:新生血管化穿透性角膜移植组。术后记录植片存活时间和移植排斥指数(rejection index,RI);ELISA法检测房水及外周血中可溶性ICAM-1(sICAM-1)的含量,免疫组化法观察ICAM-1的表达。结果:B、C组在观察期内未见排斥反应发生。D组发生排斥反应,角膜植片平均存活12.4±1.3d,术后房水及外周血中sICAM-1含量即升高,至排斥反应前达最高水平分别为53.9±19.3ng/L,378.8±30.6ng/L,在排斥反应发生时,免疫组化染色发现角膜组织中ICAM-1呈强阳性表达。结论:血液和房水中的ICAM-1含量可以是角膜移植免疫排斥反应发生的指标,术后监测ICAM-1浓度变化对排斥反应的发生有一定预测和早期诊断作用。     

来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的影响

目的探讨来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用。方法建立SD-Wistar大鼠同种异体穿透角膜移植模型,随机分组。A组为空白对照组;B、C、D组分别为0．5％、1．0％及2．0％A771726滴眼液组;E组为Wistar大鼠自体移植对照组。术后比较各组角膜植片排斥指数（RI）及植片存活时间,并对植片进行组织学及免疫组织化学染色观察。结果A组角膜植片存活时间为（9．38±2．26）d,B组（10．13±2．41）d,C组（17．57±1．72）d,D组（17．50±2．14）d,E组（〉28．00）d。A组、B组分别与C组、D组植片存活时间差异有统计学意义（P〈0．01）。移植术后10d,A组、B组角膜植片发生排斥反应,植片高表达IFN-γ及ICAM-1;术后20d,C组、D组植片发生排斥反应,植片IFN-γ及ICAM-1表达增高。结论局部应用A771726滴眼液能有效抑制角膜移植排斥反应。     

TLR2/MyD88信号系统在大鼠角膜移植术后排斥反应中的作用

目的 探讨Toll样受体2(Toll like receptor,TLR2)/MyD88信号系统在大鼠角膜移植术后排斥反应中的作用.方法 取14只SD大鼠为供体,28只Wistar大鼠为受体,建立28个同种异体穿透性角膜移植模型.建模后分为同种异体角膜移植组14只(6只用于术后观察排斥情况),同种异体角膜移植TLR2单克隆抗体组14只(6只用于术后观察排斥情况).另选16只Wistar大鼠,分为同种自体角膜移植组8只,正常对照组8只.3个手术组大鼠分别行穿透性角膜移植术.术后TLR2单克隆抗体组给予0.5 g·L-1TLR2单克隆抗体,分别于术后0d、2d、4d、6d、8d分5次经球结膜下注射给药.正常对照组、同种自体角膜移植组及同种异体角膜移植组给等量生理盐水.术后每天于裂隙灯下观察角膜透明度、新生血管,并用排斥反应指数评分.第9天取材,行HE、免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测.结果 术后随时间变化各手术组角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊和新生血管生长,以同种异体角膜移植组最为明显.HE染色结果显示在同种异体角膜移植组,角膜基质层出现水肿、大量炎症细胞浸润和新生血管,而在同种自体角膜移植组和TLR2单克隆抗体组中炎症反应较轻.免疫组织化学检测结果:TLR2和MyD88分子在正常对照组、同种自体角膜移植组及TLR2单克隆抗体组的角膜上皮中均有微量表达,同种异体角膜移植组角膜上皮、基质细胞中TLR2和MyD88分子的表达明显增多,尤以基质层明显.实时荧光定量PCR结果显示同种异体角膜移植组角膜组织TLR2 mRNA、MyD88 mRNA的表达较同种自体角膜移植组(P =0.000、0.004)和正常对照组(P=0.000、0.000)显著增加,两者的表达亦较TLR2单克隆抗体组显著增加(P =0.000、0.003).结论 TLR2单克隆抗体抑制TLR2及其下游信号分子MyD88的表达;TLR2/MyD88信号系统参与了角膜移植术后排斥反应,影响了角膜植片的转归.     

TGF-β1对大鼠角膜移植后免疫排斥和白介素的影响

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对IL-1,2,6,8表达的影响及TGF-β1的免疫抑制作用.方法 采用建立大鼠穿透性角膜移植模型,分为实验组(同种异体角膜移植,使用TGF-β1眼液),实验对照组(同种异体角膜移植,使用氯霉素眼液)及空白对照组(自体角膜移植,使用氯霉素眼液)3组,分不同时间点用免疫组化法、ELISA法及RT-PCR法检测角膜植片中TGF-β1、IL-1β及IL-2mRNA的含量变化,以及大鼠外周血中IL-6,IL-8含量的变化,并进行显微镜观察,根据角膜移植植片水肿,混浊,新生血管3项指标进行排斥指数评分(RI).结果 实验组大鼠植片存活时间较实验对照组明显延长(19.3±1.4)dvs(13.7±2.6)d,P＜0.01;实验组各个时间点IL-1β,IL-6,IL-8及IL-2mRNA的表达较实验对照组均有明显降低(P＜0.01).结论 TGF-β1对大鼠穿透性移植术后的免疫排斥反应有明显抑制作用,并能下调植片中多种白介素的表达.     

角膜不同保存方法与术后免疫排斥反应相关性的比较研究

目的：探讨角膜不同保存方法与术后免疫排斥反应的关系。方法：随机用Wistar大鼠30只作为供体,SD大鼠60只作为受体。建立角膜移植排斥反应动物模型。将SD大鼠随机分3组,各组分别使用不同保存方法的Wistar鼠眼为供体角膜。观察3组角膜移植术后排斥反应指数（RI）、植片存活时间（MST）和植片的病理变化。结果： MST湿房保存组（Ⅰ组）为10.4±1.70d,中期保存液保存组（Ⅱ组）为12.9±1.81d,深低温保存组（Ⅲ组）为16.1±2.57d。Ⅲ组MST明显延长,与其他两组比较均有显著性（P〈0.01）。角膜移植术后10d时HE 染色显示Ⅲ组炎性反应较Ⅰ组、Ⅱ组明显减轻。结论：深低温保存的大鼠角膜移植术后排斥反应发生率降低,发生时间延迟。