不同质量浓度粒巨噬细胞集落刺激因子对Lewis大鼠骨髓源性树突状细胞

背景：体内成熟和不成熟树突状细胞(dendritic cells, DC)数量极少,仅占外周血单核细胞的1%,占脾细胞的0.2%~0.5%,几乎不能直接从体内分离出大量的纯化的DC,要获得足够的DC,只有依靠体外培养增殖。 目的：以不同剂量粒巨噬细胞集落刺激因子诱导分化获得大鼠骨髓源性DC,拟建立合适的大鼠骨髓源性未成熟DC的培养方法。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-06/2008-05在苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室和附属儿童医院骨科实验室完成。 材料：雄性SPF级Lewis大鼠用于培养骨髓源性DC,雄性SPF级Brown Norway大鼠用于混合淋巴细胞反应实验。 方法：采用密度梯度离心法从Lewis大鼠股骨和胫骨获取骨髓源性单个核细胞,分别以2.5,5,10,20 µg/L粒巨噬细胞集落刺激因子和5 µg/L白细胞介素4诱导分化获得大鼠骨髓源性DC,采用黏附法纯化DC。 主要观察指标：以流式细胞仪分析DC表型。混合淋巴细胞反应中以Lewis大鼠DC作为刺激细胞,以Brown Norway大鼠脾脏T细胞作为反应细胞,检测其刺激同种T细胞增殖能力。ELISA测定分泌细胞上清液中白细胞介素12、干扰素水平。 结果：随粒巨噬细胞集落刺激因子质量浓度的增高,诱导的细胞获得率逐渐升高,但DC比例逐渐下降。CD86、MHC-II表达阳性率随培养时间延长逐渐增加。培养第5,7天,DC不能有效刺激同种异体T细胞的增殖反应,培养第13天,DC刺激同种异体T细胞的增殖反应能力明显增强(P < 0.01)。培养7 d以后,DC上清液中白细胞介素12水平明显增高(P < 0.01),脂多糖刺激以后升高更加明显(P < 0.01)。脂多糖刺激后DC表型MHCII、CD86表达明显增加,白细胞介素12分泌增加,刺激同种T细胞增殖能力轻度增强。 结论：5 µg/L粒巨噬细胞集落刺激因子为诱导大鼠骨髓源性未成熟DC的最佳剂量,培养9 d可以获得足够数量和纯度的未成熟DC。 关键词：     

耐受性树突状细胞体外培养的基本特征

背景：树突状细胞是体内最重要的抗原提呈细胞,在免疫调节中扮演着免疫应答和免疫耐受的双重角色,对维持机体的免疫平衡起重要作用。 目的：探讨耐受性树突状细胞的体外培养方法,观察不同培养条件下耐受性树突状细胞的基本特征。 设计、时间及地点：以细胞为观察对象,随机分组设计,于2006-09/2008-02在南昌大学第一附属医院中心实验室完成。 材料：8周龄的Balb/c纯系雄性小鼠,体质量20~25 g,用于分离和制备骨髓单个核细胞。 方法：将小鼠骨髓单个核细胞分为5组在不同的培养体系中进行体外诱导培养：空白对照组(不加任何因子)、树突状细胞组(粒-巨噬细胞集落刺激因子+白细胞介素4)、血管活性肠肽组(粒-巨噬细胞集落刺激因子+血管活性肠肽)、地塞米松组(粒-巨噬细胞集落刺激因子+地塞米松)、血管活性肠肽+地塞米松组(粒-巨噬细胞集落刺激因子+血管活性肠肽+地塞米松)。 主要观察指标：光镜下动态观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞CD80、CD86、CD40、CD11c表达,四甲基偶氮唑盐法检测树突状细胞刺激淋巴细胞增殖的活性,特异性夹心酶联免疫分析测定树突状细胞上清液中白细胞介素10、白细胞介素12的水平。 结果：①利用粒-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素4、血管活性肠肽、地塞米松、脂多糖等因子体外培养能生成具有典型树枝状突起的树突状细胞。②树突状细胞组、血管活性肠肽组、地塞米松组、血管活性肠肽+地塞米松组CD11c的表达高于空白对照组(P < 0.05)。血管活性肠肽组、地塞米松组、血管活性肠肽+地塞米松组CD40、CD80和CD86表达,淋巴细胞增殖活性及培养上清液白细胞介素12水平均低于树突状细胞组(P < 0.05),血管活性肠肽组以质量浓度为40 μg/L、地塞米松组以10 μg/L减低明显,其中血管活性肠肽+地塞米松组在血管活性肠肽质量浓度为40 μg/L、地塞米松为10 μg/L条件下为最低,差异具有显著性意义(P < 0.05)。③血管活性肠肽组、地塞米松组、血管活性肠肽+地塞米松组细胞培养上清液中白细胞介素10水平均高于树突状细胞组(P < 0.05),血管活性肠肽组以质量浓度为40 μg/L,地塞米松组以10 μg/L升高明显,其中血管活性肠肽+地塞米松组在血管活性肠肽质量浓度为40 μg/L、地塞米松为10 μg/L条件下为最高,差异具有显著性意义(P < 0.05)。 结论：①小鼠骨髓单个核细胞体外经粒-巨噬细胞集落刺激因子、血管活性肠肽或/和地塞米松、脂多糖联合诱导培养生成致耐受性树突状细胞。②与常规诱导培养树突状细胞方法比较,耐受性树突状细胞具有CD40、CD80、CD86表达低,刺激淋巴细胞增殖弱的特点;耐受性树突状细胞培养体系上清液白细胞介素10水平高而白细胞介素12水平低。③粒-巨噬细胞集落刺激因子、血管活性肠肽+地塞米松、脂多糖联合诱导培养生成耐受性树突状细胞效果较佳,其中以血管活性肠肽40 μg/L、地塞米松10 μg/L的培养条件为最好。     

小鼠脾脏树突状细胞的体外扩增与培养

背景：脾脏来源的树突状细胞诱导周期长，产量相对较少，相关报道亦较少。 目的：建立简便的体外扩增小鼠脾脏树突状细胞的方法。 设计、时间及地点：细胞形态学观察实验，于2007-02/09在华北石油总医院中心实验室完成。 材料：健康BALB/C小鼠、C57小鼠及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素4。 方法：无菌手术取C57小鼠脾脏，用1 mL注射器抽取Hanks液，刺入脾脏并反复冲洗，获取单个核细胞，用0.1 g/L粒-单核细胞集落刺激因子、白细胞介素4的H-DMEM培养，8 d后即得成熟的树突状细胞。同时无菌取BABL/C小鼠脾脏制备单细胞悬液，收集非黏附细胞调整密度后作为反应细胞。再将两种细胞混合培养。 主要观察指标：成熟树突状细胞的形态学观察，并对其表面CD11c，CD86及MHC-Ⅱ类分子进行检测。并计算两种细胞混合培养后的吸光度值。 结果：体外诱导培养8 d后获得大量成熟的树突状细胞，细胞表面具有典型的树枝状突起，高表达树突状细胞相对特异性表面分子CD11c（78.46%）、 CD86(87.24%)及MHC-Ⅱ(92.65%)，同时具有较强的刺激同种异基因混合淋巴细胞增殖的能力。 结论：联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素体外诱导培养小鼠脾脏细胞，可生成大量功能成熟的树突状细胞。     

小鼠骨髓源性树突状细胞培养与冻存

树突状细胞因其良好的抗原提呈功能及促T细胞增殖功能,成为肿瘤抗原的良好载体。获得大量的树突状细胞,对于肿瘤疫苗的研制具有重要作用。 目的：对小鼠骨髓树突状细胞进行诱导、培养、扩增及冻存,并对比冻存后复苏细胞与未冻存细胞的细胞特性,寻找一种能够大量获得树突状细胞及有效储存的方法。 方法：取小鼠骨髓细胞,在含重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(10 μg/L)和重组小鼠白细胞介素4(5 μg/L)的完全培养基中对其进行诱导、培养及扩增。培养第6天,对培养获得的树突状细胞在加有冷冻保护剂DMSO的完全培养液中冻存。复苏后,在培养基中加入脂多糖、对细胞诱导,获得大量的成熟树突状细胞,最终获得的树突状细胞与未进行冻存的细胞在细胞活力、形态学、细胞表型、混合淋巴细胞反应等方面对比。 结果与结论：复苏后,(82.2±4.73)%细胞存活,存活的细胞经脂多糖诱导后发育为成熟树突状细胞,在形态学、细胞表型及混合淋巴细胞反应等方面与未经冻存的树突状细胞差异无显著性意义。提示小鼠骨髓源性树突状细胞冻存复苏后,细胞生物学特性与未冻存的细胞无明显差别,用冻存的方法储存树突状细胞,能够避免在不同时期应用细胞时反复进行培养,可以获得大量的同质细胞。     

小鼠骨髓树突状细胞的培养扩增及生物学特性分析

背景：树突状细胞是目前已知功能最强的专职性抗原递呈细胞，但树突状细胞在体内分布广泛且数量较少，获得大量的树突状细胞是研究树突状细胞特性和功能的前提。 目的：建立小鼠骨髓源树突状细胞体外培养和扩增方法，观察其形态和相关特征。 设计、时间及地点：树突状细胞形态学观察实验，于2006-08/2007-05在中山大学中山眼科中心实验室完成。 材料：健康雌性C57BL/6小鼠。 方法：在无菌条件下提取C57BL/6鼠骨髓细胞，分离单个核细胞，以小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4协同诱导下培养，加用磷酸脂多糖刺激，分成磷酸酯多糖-树突状细胞和单纯树突状细胞组，前者在培养加入磷酸酯多糖，后者不加。 主要观察指标：应用光镜和电镜下观察树突状细胞的形态，流色细胞仪检测鉴定其生物学特征。 结果：体外培养2 周后具有典型的树突状细胞形态，光镜下显示细胞表面不规则，呈树突状突起，电镜下可见培养的细胞具有典型树突状细胞的形态特征，流式细胞鉴定为髓系树突状细胞，高表达MHC II类分子及共刺激分子(MHC II，CD80，CD83，CD11 c)。单纯树突状细胞组的细胞中度表达MHCⅡ类分子，低水平表达共刺激分子，刺激T细胞增殖的能力较弱；磷酸酯多糖-树突状细胞组细胞高水平表达MHCII类分子和共刺激分子。 结论：实验所采用的树突状细胞体外原代培养的方法能在体外培养出大量的未成熟树突状细胞，具有典型树突状细胞的形态特征及较高的纯度。     

人外周单个核细胞来源树突细胞成熟与肺炎支原体膜脂蛋白的影响*★

目的：实验着眼于肺炎支原体膜脂蛋白对人外周血单个核细胞来源的树突细胞的表型(CD83，CD86)及分泌细胞因子的作用，探讨肺炎支原体加重哮喘的机制是否是改变了树突细胞的性状。 方法：①对象：所有外周血采自正常人，志愿献血者为武汉大学医学院2005级硕士博士研究生6人；实验用肺炎支原体膜脂蛋白购自广州华银医药科技有限公司。②实验过程及分组：从肘静脉采集志愿者20 mL新鲜全血，以不连续密度梯度离心法及贴壁法获取单核细胞，加入重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子，重组人白细胞介素4培养5 d得到不成熟树突细胞后，分别予肺炎支原体膜脂蛋白，脂多糖和空白刺激再培养2 d。③评估：用流式细胞仪检测各组树突细胞表面表达CD83，CD86的情况，用酶联免疫吸附法检测各组树突细胞分泌白细胞介素12的水平。 结果：①肺炎支原体膜脂蛋白组树突细胞表达CD83，CD86高于未刺激组(P < 0.01,P < 0.01)；脂多糖组树突细胞表达CD83，CD86高于未刺激组(P < 0.01,P < 0.01)；肺炎支原体膜脂蛋白组树突细胞表达CD83较脂多糖组无差异，表达CD86高于脂多糖组(P < 0.05)。②肺炎支原体膜脂蛋白组树突细胞分泌白细胞介素12高于未刺激组(P < 0.01)；脂多糖组树突细胞分泌白细胞介素12高于未刺激组(P < 0.01)；肺炎支原体膜脂蛋白组树突细胞分泌白细胞介素12低于脂多糖组(P < 0.05)。 结论：肺炎支原体膜脂蛋白可刺激未成熟树突细胞分化成熟，但较脂多糖刺激的不同，前者刺激成熟的树突细胞在呈递抗原给T细胞时，可进一步使T细胞向Th2极化，导致Th1/Th2平衡失调，从而加重哮喘。     

过敏性紫癜患儿外周血树突状细胞功能变化及黄芪的体外干预

背景：树突状细胞在过敏性紫癜发病机制中可能具有重要的地位。已有报道黄芪在体内可以纠正过敏性紫癜患儿的Th1/Th2失衡,但目前关于黄芪在树突状细胞水平对过敏性紫癜病免疫功能调节的影响尚不清楚。 目的：观察过敏性紫癜患儿外周血树突状细胞功能变化及黄芪对其的影响。 设计、时间及地点：病例对照分析,于2005-10/2007-12在青岛大学医学院附属医院儿科研究所完成。 材料：急性期过敏性紫癜患儿外周静脉血28份作为过敏性紫癜组,以门诊体检的健康同龄儿童外周静脉血18份作为正常对照组。黄芪水提剂由四川百利药业有限公司提供。 方法：采用密度梯度离心法获取过敏性紫癜患儿及健康儿童外周血单个核细胞,获取的外周血单个核细胞体外经重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子、重组人白细胞介素4、重组人肿瘤坏死因子α以诱生树突状细胞,并培养8 d,其中过敏性紫癜组又分成2组：对照组和黄芪干预组。 主要观察指标：ELISA法检测过敏性紫癜患儿及健康儿童血浆γ-干扰素和白细胞介素4水平及培养上清液中白细胞介素10,12,18水平,流式细胞仪检测树突状细胞表面CD83、CD86（B7-2）和CD80（B7-1）的表达率。 结果：过敏性紫癜患儿急性期外周血中Th1型细胞因子γ-干扰素水平减少,Th2型细胞因子白细胞介素4水平增加,γ-干扰素/白细胞介素4比值明显降低。过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞经诱导培养的树突状细胞表面CD86表达率较正常对照组明显升高,且两组CD86表达率与血浆白细胞介素4水平皆呈显著正相关,与γ-干扰素/白细胞介素4比值皆呈显著负相关;CD80表达率明显低于正常对照组,且两组CD80表达率与血浆γ-干扰素水平及γ-干扰素/白细胞介素4比值均呈显著正相关。过敏性紫癜患儿树突状细胞分泌白细胞介素12水平低于正常对照组（P < 0.05）,而白细胞介素10,18水平均高于正常对照组（P < 0.05）,两组树突状细胞分泌白细胞介素12水平与血浆γ-干扰素水平皆呈显著正相关(P < 0.01),与γ-干扰素/白细胞介素4比值皆呈正相关(P < 0.01,P< 0 .05);白细胞介素10分泌水平与其血浆白细胞介素4水平皆呈显著正相关(P均< 0.01),与γ-干扰素/白细胞介素比值皆呈负相关(P < 0.01,P < 0.05);白细胞介素18分泌水平与其血浆白细胞介素4水平皆呈显著正相关(P均< 0.01),与γ-干扰素/白细胞介素4比值皆呈负相关(P < 0.01,P < 0.05)。黄芪干预组树突状细胞表面CD83、CD86和CD80的表达率与对照组差异不显著,树突状细胞分泌白细胞介素12水平高于对照组（P < 0.01）,白细胞介素10,18水平均低于对照组（P < 0.05,P < 0.01）。 结论：①过敏性紫癜患儿外周血树突状细胞存在明显功能紊乱,表现为CD86表达率升高、CD80降低,白细胞介素12分泌减少、白细胞介素10 和白细胞介素18增加,上述变化与Th1/Th2失衡关系密切。②黄芪主要是通过改变过敏性紫癜患儿树突状细胞分泌细胞因子的水平来调节其功能。     

“自体血清＋鸡尾酒法”诱导外周血DC成熟的研究

目的比较三种不同的分离诱导外周血树突状细胞（DC）成熟的方法。方法取正常成人外周血约180ml，分成三组。分离单核细胞后，经典脂多糖（LPS）诱导组（A组）：接种于含RPM11640＋胎牛血清完全培养基的25cm^2培养瓶中，2h后弃悬浮细胞，将贴壁单核细胞，用粒-巨噬细胞集落刺激因子和白介素4培养，培养到第6天时加入LPS诱导24h；鸡尾酒诱导组（B组）：单核细胞的培养同A组，培养到第6天时用细胞因子组合（1000U／ml肿瘤坏死因子、10ng／ml白介素6、10ng／ml白介素1β、1μg/ml前列腺素E2）诱导24h；自体血清＋鸡尾酒诱导组（C组）：单核细胞用RPM11640＋10％自体血清完全培养基培养，诱导方法同B组。用流式细胞仪检测各组收集的DC细胞成熟表型CD80、CD86、CD83以及白细胞表面抗原HLA-DR的表达；动态观察各组细胞成熟过程中形态的改变以及其激活淋巴细胞增殖的能力。结果C组DC成熟过程中形态好、突起多；其成熟表型CD86、CD83、CD80以及HLA-DR的平均表达率分别是（88．60±6．34）％、（50．55±4．03）％、（73．89±6．15）％、（93．24±7．78）％，明显高于A、B组（P〈0．05）；激活淋巴细胞增殖指数为2．03，亦明显高于A、B组（P〈0．05）。结论自体血清＋鸡尾酒诱导法是一种简单、方便、经济的外周血DC分离诱导成熟的新方法。     

草分支杆菌对人脐血树突状细胞体外扩增的影响

背景：树突状细胞因其强大的抗原提呈能力而在机体抗肿瘤作用的中心地位逐渐受到重视，但如何能有效获得足够数量有功能的树突状细胞成为目前研究的重点，尤其是有关低毒免疫调节剂的报道较少。 目的：观察草分支杆菌F.U.36(乌体林斯，Utilins)对人脐血来源树突状细胞体外扩增的影响。 方法：应用Ficoll-Hypaque法分离人脐血单个核细胞，分别用乌体林斯，细胞因子(重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子+重组人肿瘤坏死因子α+重组人白细胞介素4)，细胞因子联合乌体林斯进行干预，并以RPMI-1640培养液诱导培养人脐血单个核细胞作为对照组，诱导培养树突状细胞，并于倒置显微镜下观察其生长情况及形态。培养第9天，采用流式细胞仪检测各组人树突状细胞特异性表型CD1a及MHC-Ⅱ分子HLA-DR的变化，并将细胞涂片行瑞氏-姬姆萨染液染色，油镜下观察摄片。 结果与结论：除对照组外，实验各组均得到高表达CD1a及HLA-DR的典型树突状细胞。乌体林斯组CD1a及HLA-DR阳性细胞比例亦明显高于对照组而低于细胞因子组 (P < 0.05)，联合组HLA-DR阳性细胞比例高于细胞因子组(P < 0.05)。结果提示，草分支杆菌F.U.36(乌体林斯)不仅能促进脐血树突状细胞体外扩增，还能协同细胞因子促进树突状细胞成熟。     

未成熟树突状细胞表面CD1d分子在体外移植免疫中的作用☆

背景：树突状细胞具有双向免疫调节作用,成熟树突状细胞激活免疫应答,而未成熟树突状细胞则倾向诱导免疫耐受。 目的：探讨鼠CD1d分子在未成熟树突状细胞诱导移植免疫耐受中的作用,以及在此过程中细胞因子的参与机制。 方法：利用vIL-10转染的BALB/c小鼠未成熟树突状细胞在体外用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因、脂多糖刺激成熟,经抗CD1d(anti-CD1d)干预。观察培养后的细胞表型、细胞因子表达。为探明CD1d分子在异体T细胞存在下的免疫作用,进行不同实验条件的初次、再次混合淋巴细胞培养(1stMLC、2ndMLC),观察T细胞增殖、细胞因子表达。 结果与结论：Anti-CD1d的干预降低了未成熟树突状细胞增殖异体T细胞的能力,anti-CD1d干预的未成熟树突状细胞致敏异体T细胞后其免疫功能低下;anti-CD1d干预在异体T细胞存在时影响未成熟树突状细胞在功能上的成熟,主要表现在抑制白细胞介素12的分泌,加强白细胞介素10的分泌。     

神经干细胞与脑胶质瘤干细胞☆

所有的肿瘤组织并不是由均一的肿瘤细胞所组成的,不同的细胞具有不同的增殖、浸润和转移能力,亦即肿瘤的异质性。其中存在少数担当着干细胞角色的肿瘤细胞,具有干细胞的基本特性,包括自我更新能力、无限的增殖能力和多向分化潜能,为肿瘤干细胞。神经干细胞具有很强的自我更新机制,获得较少突变即有可能恶性转化,而且干细胞存活时间较长,这意味着干细胞比成熟细胞发生细胞复制的错误几率更大,因外界环境的刺激而发生突变的机会更多,最终形成脑胶质瘤干细胞,同时调节神经干细胞增殖和自我更新的基因在脑胶质瘤的脑胶质瘤干细胞中也表达,这也是支持神经干细胞是脑胶质瘤干细胞来源的;也有推测认为它可能起源于已分化的细胞,由这些细胞突变发生去分化得来,并通过基因突变而获得了干细胞自我更新的特性,从而形成脑胶质瘤干细胞。通过探讨神经干细胞与脑胶质瘤干细胞,为脑胶质瘤的治疗提供依据。     

Lysophosphatidic acid activates satellite glia cells and Schwann cells

Pruritus is a common and disabling symptom in patients with hepatobiliary disorders, particularly in those with cholestatic features. Serum levels of lysophosphatidic acid (LPA) and its forming enzyme autotaxin were increased in patients suffering from hepatic pruritus, correlated with itch severity and response to treatment. Here we show that in a culture of dorsal root ganglia LPA 18:1 surprisingly activated a large fraction of satellite glia cells, and responses to LPA 18:1 correlated inversely with responses to neuronal expressed transient receptor potential channels. LPA 18:1 caused only a marginal activation of heterologously expressed TRPV1, and responses in dorsal root ganglion cultures from TRPV1-deficient mice were similar to controls. LPA 18:1 desensitized subsequent responsiveness to chloroquine and TGR5 agonist INT-777. The LPA 18:1-induced increase in cytoplasmatic calcium stems from the endoplasmatic reticulum. LPA receptor expression in dorsal root ganglia and Schwann cells, LPAR1 immunohistochemistry, and pharmacological results indicate a signaling pathway through LPA receptor 1. Peripheral rat Schwann cells, which are of glial lineage as the satellite glia cells, were also responsive to LPA 18:1. Summarizing, LPA 18:1 primarily activates rather glial cells than neurons, which may subsequently modulate neuronal responsiveness and sensory sensations such as itch and pain.     

Large-scale analysis of neural stem cells and progenitor cells

The past few years have seen remarkable progress in our understanding of stem cell biology. The wealth of genomic data and the multiplicity of sources have enabled researchers to begin to profile stem cells in detail. In this paper we describe the biological and technical controls necessary to obtain reliable data and the relative merits of various large-scale analytical techniques including microarray, expressed sequence tag enumeration, serial analysis of gene expression and massively parallel signature sequencing. We suggest that while much has been learned, additional information remains to be gleaned by meta-analysis of existing data.     

Spastic muscle cells are shorter and stiffer than normal cells

The mechanical properties of isolated single muscle fiber segments were measured in muscle cells obtained from patients undergoing surgery for correction of flexion contractures secondary to static perinatal encephalopathy (cerebral palsy). "Normal" muscle cells from patients with intact neuromuscular function were also mechanically tested. Fiber segments taken from subjects with spasticity developed passive tension at significantly shorter sarcomere lengths (1.84 +/- 0.05 microm, n = 15) than fibers taken from normal subjects (2.20 +/- 0.04 microm, n = 35). Elastic modulus of the stress-strain relationship in fibers from patients with spasticity (55.00 +/- 6.61 kPa) was almost double that measured in normal fibers (28.25 +/- 3.31 kPa). The fact that these muscle cells from patients with spasticity have a shorter resting sarcomere length and increased modulus compared with normal muscle cells suggests dramatic remodeling of intracellular or extracellular muscle structural components such as titin and collagen. Such changes in muscles of patients with spasticity may have implications for therapy.     

Effects of atropine on hippocampal theta cells and complex-spike cells

The medial septal nuclei are essential for the naturally occurring hippocampal theta rhythm. Evidence that the rhythmic activity of the septum is carried via cholinergic afferents to the hippocampus has been: (a) the existence of a cholinergic septo-hippocampal projection, and (b) the sensitivity of one type of theta rhythm to antimuscarinic agents or cholinergic depletion. The muscarinic action of acetylcholine on pyramidal cells, however, is too slow to carry even a 4 Hz signal. Recent in vitro studies have confirmed a fast excitatory response by some hippocampal interneurons to muscarinic agonists. In urethane anesthetized rats, iontophoretic application of atropine to 17 hippocampal theta cells (presumed interneurons) during the theta rhythm, reduced their firing rates to an average of 24% of control rates. The effect of iontophoretic atropine application to 4 CA1 complex-spike cells (presumed pyramidal cells) was a selective elimination of their bursting activity with no significant effect on overall firing rate. The data suggest that: (1) interneuronal firing, during the hippocampal theta rhythm, is dominated by an excitatory cholinergic input and not by excitatory collaterals of pyramidal cells; and (2) somatic burst firing by CA1 pyramidal cells requires the presence of acetylcholine.     

Adult adipose-derived stromal cells differentiating into neurons and neuron-like cells

Totally three articles regarding autophagy and apoptosis during differentiation of adult adipose-derived stromal cells into neurons and neuron-like cells were published in Neural Regeneration Research. We hope that our readers find these papers useful to their research.No. 1: Autophagy and apoptosis during adult adipose-derived stromalcells differentiation into neuron-like cells in vitro Neural Regen Res. 2012;7(16):1205-1212.     

Thymic myoid cells as a myasthenogenic antigen and antigen-presenting cells

We investigated immune property of a myoid cell line, established from Fisher rat thymus. Immunization of syngeneic rats with the myoid cells induced anti-rat acetylcholine receptor (AChR). Implantation of them into the thymus failed to induce typical thymic pathology of human myasthenia gravis (MG) or anti-AChR responses. We also demonstrated that the myoid cells were able to present exogenous antigens to T cells and induce antigen-specific T cell proliferation. These results suggest that myoid cells have the potential antigenicity to induce anti-AChR and the functions of antigen-presenting cells, but their expansion in the thymus may not directly cause MG.     

In vitro differentiation of adipose-derived stem cells and bone marrow-derived stromal stem cells into neuronal-like cells

Adipose-derived stem cells and bone marrow-derived stromal stem cells were co-cultured with untreated or Aβ1-40-treated PC12 cells, or grown in supernatant derived from untreated or Aβ1-40-treated PC12 cells. Analysis by western blot and quantitative real-time PCR showed that protein levels of Nanog, Oct4, and Sox2, and mRNA levels of miR/125a/3p were decreased, while expression of insulin-like growth factor-2 and neuron specific enolase was increased. In comparison, the generation of neuron specific enolas...