柴胡渗湿汤对肺纤维化大鼠肺组织MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的探讨柴胡渗湿汤治疗肺纤维化机制。方法 Wistar大鼠90只,随机分为正常对照组、模型对照组、强的松组、柴胡渗湿汤组、柴胡渗湿汤加强的松组。除正常对照组外,均采用经支气管注入博莱霉素法建立肺纤维化大鼠模型。动态对比各组大鼠第14天、28天肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白的表达。结果与正常对照组比较,模型对照组第14天、28天MMP-9、TIMP-1阳性颗粒表达明显增多,差异有统计学意义(P0.05)。与模型对照组比较,各治疗组大鼠MMP-9、TIMP-1阳性颗粒表达及MMP-9/TIMP-1比值均明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与强的松组比较,柴胡渗湿汤组大鼠MMP-9、TIMP-1阳性颗粒表达接近,差异无统计学意义(P0.05);而柴胡渗湿汤加强的松组MMP-9、TIMP-1阳性颗粒表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。与柴胡渗湿汤组比较,柴胡渗湿汤加强的松组MMP-9、TIMP-1阳性颗粒表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。肺组织病理形态学改变亦说明各治疗组优于模型组。结论柴胡渗湿汤可能通过降低MMP-9、抑制TIMP-1表达,调节两者比例的平衡来治疗肺纤维化,与强的松联合后效果有一定程度加强。     

羟基喜树碱用于放射增敏治疗局部晚期非小细胞肺癌的Ⅰ期临床研究

目的：探讨HCPT用于放疗增敏治疗LANSCLC的最大耐受剂量（MTD）和剂量限制性毒性（DLT），确定和建议Ⅱ／Ⅲ期临床试验的剂量，观察近期疗效。方法：15个诊断明确Ⅲ期NSCLC患者进入本研究。放射治疗，采用常规分割放射治疗，总剂量60Gy／30f，6周完成。羟基喜树碱，根据HPCPT初始剂量为4mg／m^2，以后剂量按2mg／m^2的剂量递增，每个剂量水平入选3个病人，如没有Ⅲ／Ⅳ级毒性，接下来的3个病人入选下一个剂量水平直至出现DLT，如果在1／3病人中出现DLT，还需在增加3个病人再在同一剂量水平进行试验，在增加的病人中未发现问题方可升到下一个剂量水平，否则升级将被停止。如果DLT发生于超过1／3的受试者，升级也被停止。DLT经对症治疗2周内不缓解退出研究组。每个剂量水平治疗6周，即至放疗结束或至DLT。试验过程中每例病人不增加或降低药物剂量。羟基喜树碱（HCPT）在放射治疗的第一天开始给药，每周两次，周一、周四给药，放疗后1小时内给药，加入0．9％NS500ml静脉滴注。结果：剂量限制性毒性为骨髓抑制、消经道反应和腹泻；最大耐受剂量为10mg／m^2（周2次，连用6周）；推荐Ⅱ期临档试验剂量为8mg／m^2（周2次，连用6周）；总有效率71．7%（10／14）。     

羟基喜树碱用于放疗增敏治疗不能手术的中晚期食道癌的临床疗效分析

目的：对比羟基喜树碱（HCPT）用于放射增敏合并放疗与常规放疗治疗不能手术的中晚期食道癌的客观疗效及其毒副作用。方法：60例不能手术的中晚期食道癌患者随机分为2个组，每组30例．试验组：采用6-MV—X射线照射，三野等中心照射DT60—70GY／30～35次／6—7W，放疗第一天给HCPT（8mg／m^2）化疗增敏，每周两次，疗程同放射治疗。对照组：同试验组单纯放射治疗。结果：试验组和对照组近期有效率分别为93．3％和70．0％，差异有显著性（P=0．020）；1年生存率分别为66．7％和40g，差异有显著性（P=0．038）；毒副反应的发生以骨髓抑制最为明受，两组发生率分别为66．7％和30％，差异有显著性（P=0．001）；其次为消化道反应，两组发生率分别为70％和46．7％，差异无显著性（P-0．067），但多为轻度，未影响疗程进行，其它的毒副作用两组无显著差异。结论：羟基喜树碱用于放射增敏治疗中晚期食道癌是一种安全有效的治疗方法，值得进一步临床研究。     

优化活血利水方对大鼠自体髓核移植后移植髓核MMP-3、TIMP-1表达的影响

目的:建立自体髓核移植致大鼠非压迫腰椎间盘髓核突出神经根性疼痛模型,探讨优化活血利水方对移植髓核MMP-3、TIMP-1表达的影响。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组、阿斯匹林组,建立大鼠自体髓核移植致腰5神经根性痛模型,造模后1周起各组分别予生理盐水1.82mL、生理盐水1.82mL、中药汤剂1.82mL、阿斯匹林1.82mL(0.1g.kg-1.d-1),每日1次,连续用药4周。第31天取移植髓核检测MMP-3、TIMP-1mRNA及蛋白的表达。结果:正常髓核中MMP-3、TIMP-1mRNA及蛋白表达量很少,各实验组移植髓核中MMP-3、TIMP-1mRNA及蛋白表达量与对照组比较均显著增多(P<0.0l)。与模型组比较,中药组、西药组MMP-3mRNA及蛋白表达量显著减少(P<0.01),TIMP-1mRNA及蛋白相对表达量显著增多(P<0.01)。中、西药组比较,两组间存在显著性差异,中药组MMP-3mRNA及蛋白显著减少,TIMP-1mRNA及蛋白显著增多。结论:优化活血利水方可以显著下调移植髓核MMP-3mRNA及其蛋白表达,上调TIMP-1mRNA及其蛋白表达,减轻椎间盘的退变,促进椎间盘的修复。     

秦艽不同配伍对风寒湿痹模型大鼠MMP-3及TIMP-1的影响

目的:观察秦艽寒热不同配伍药对对风寒湿痹型类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠踝关节基质金属蛋白酶-3 (matrix metalloproteinase-3,MMP-3),基质金属蛋白酶组织抑制物-1 (matrix metalloproteinase tissue inhibitor-1,TIMP-1)的影响。方法:选取80只SD大鼠并随机分为正常组,Ⅱ型胶原组,风寒湿病证模型组,雷公藤多苷片组(6 mg·kg~(-1)),单味秦艽组(25 g·kg~(-1)),秦艽配伍威灵仙(秦威组,25 g·kg~(-1)),秦艽配伍桑寄生(秦桑组,25 g·kg~(-1))、秦艽配伍防己(秦防组,25 g·kg~(-1)),共8组,每组10只。采用注射Ⅱ型胶原乳剂诱导并给予风寒湿刺激制备风寒湿RA大鼠模型。模型建立完成后正常组,Ⅱ型胶原组及风寒湿病证模型组大鼠给予生理盐水,各给药组给予相应药液灌胃。实验过程中,每3 d测量1次大鼠左后足跖厚度,计算足跖肿胀度;实验第38天对各组大鼠进行关节炎指数(AI)评分;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清类风湿因子(RF)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测踝关节MMP-3,TIMP-1的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测踝关节MMP-3,TIMP-1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,Ⅱ型胶原组及风寒湿病证模型组足跖肿胀度,AI评分,血清RF含量,踝关节MMP-3蛋白表达水平,MMP-3 mRNA明显升高(P 0. 05,P 0. 01),踝关节TIMP-1蛋白表达水平,TIMP-1 mRNA显著降低(P 0. 01);与风寒湿病证模型组比较,各给药组足跖肿胀度,AI评分及血清RF含量均有不同程度降低,其中秦威组降低最显著(P 0. 01); Western blot及Real-time PCR结果显示,与风寒湿病证模型组比较,各给药组踝关节MMP-3蛋白表达水平及MMP-3 mRNA表达水平均显著降低(P 0. 01),以秦威组降低最明显,雷公藤多苷片组、秦威组及秦桑组大鼠踝关节TIMP-1蛋白表达水平及TIMP-1 mRNA表达水平均有所升高,以秦威组升高最显著(P 0. 01)。结论:对于风寒湿痹型类风湿关节炎,平温相配的秦威组疗效优于平平相配的秦桑组、平寒相配的秦防组及单味秦艽组,实验结果与中医"寒者热之"的原则基本相符。该配伍治疗风寒湿痹型类风湿关节炎的机制可能与其可以减少MMP-3,升高TIMP-1的表达,减轻关节软骨破坏有关。     

葛根素对糖尿病大鼠肾功能及肾组织MMP-10与TIMP-1表达的影响

目的 探讨葛根素对糖尿病大鼠肾小球结构、功能及肾组织基质金属蛋白酶10(MMP—10)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP—1)表达的影响。方法 ip链脲佐菌素(65mg／kg)诱发糖尿病大鼠模型，每日ip葛根素注射液，共16周。给药结束后，收集尿液，测定尿蛋白(Upro)，尿肌酐(Ucr)含量；腹主动脉取血，测定血糖(Glu)，血肌酐(Scr)，尿素氮(BUN)含量；采用原位杂交法检测肾小球MMP—10，TIMP—1 mRNA表达，流式细胞术和免疫组化检测肾皮质MMP—10、TIMP—1及Ⅳ型胶原、层黏连蛋白(LN)表达。结果 糖尿病组较对照组肾小球MMP—10、TIMP—1 mRNA及蛋白表达增加，肾皮质MMP—10，TIMP—1及Ⅳ型胶原、LN表达亦增加；反映肾功能的各项生化指标水平升高。葛根素用药组较糖尿病组MMT—10、TIMP—1 mRNA、蛋白及Ⅳ型胶原、LN表达减少；肾功能有所改善。结论 葛根素对糖尿病大鼠肾结构功能具有保护作用，除降低血糖外，调节肾小球MMP—10，TIMP—1表达从而减轻肾小球细胞外基质沉积也可能是其作用途径之一。     

血府逐瘀汤对大鼠血管平滑肌细胞MMP-2、TIMP-1表达的影响

目的 观察血府逐瘀汤含药血清对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移、侵袭的影响,以及其生成MMP -2、TIMP -1情况,探讨其作用机制.方法 通过划痕损伤实验、Boyden - chamber细胞侵袭实验观察VSMCs的迁移、侵袭,RT - PCR检测血府逐瘀汤含药血清对基质金属蛋白酶-2(MMP -2)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的mRNA表达.结果 与空白对照组比较,血府逐瘀汤高剂量组和中剂量组能显著抑制VSMCs的增殖和迁移(P＜0.05);与空白对照组比较,血府逐瘀汤组均能明显下调MMP-2 mRNA的表达同时上调TIMP-1 mRNA的表达(P＜0.01).结论 血府逐瘀汤含药血清有抑制VASMCs迁移和侵袭的作用,MMP -2表达降低、TIMP -1的表达升高可能是其机制之一.     

苦参素对免疫性肝纤维化大鼠肝脏组织MMP-1, TIMP-1表达的影响

目的:探讨苦参素对免疫性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-1抑制剂(TIMP-1)表达的影响.方法:建立猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化模型.SD雄性大鼠44只,随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组(0.1 mg·kg-1)和苦参素组(60 mg· kg-1),ip,1次/d,连续8周.采用免疫组化方法检测MMP-1,TIMP-1在各组大鼠中的表达.结果:与模型组相比,苦参素组MMP-1表达为(3.42±0.53)％,高于模型组的(2.81±0.53)％,(P＜0.05);苦参索组TIMP-1表达水平为(30.62士3.18)％,明显低于模型组的(41.64±4.51)％,(P＜0.01);苦参素组TIMP-1/MMP-1比值也明显低于模型组(P＜0.01).结论:苦参素能增加免疫性肝纤维化大鼠肝脏组织MMP-1的表达,抑制TIMP-1表达,调节TIMP-1/MMP-1比值,通过对细胞外基质(ECM)的调节起到抗肝纤维化的作用.     

熊果酸对乳腺癌细胞caspase-3和PARP表达的影响

目的:探讨三萜类中药成分熊果酸(UA)诱导乳腺癌细胞MCF-7的凋亡作用,并通过分析UA作用后MCF-7细胞的caspase-3和多聚ADP核糖多聚糖(PARP)蛋白表达的变化,探讨其诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法:采用细胞培养技术,用不同浓度的药物在一定的时间内处理细胞株,采用MTT法、活细胞原位光镜和荧光染色技术、流式细胞技术(FCM)、荧光免疫组织化学技术,图象分析技术,研究UA对caspase-3和PARP蛋白表达的影响,诱导细胞凋亡的作用。结果:UA剂量依赖性的抑制MCF-7细胞增殖,半数生长抑制剂量(IC₅₀)为(22.6±3.0)μmol.L^-1,诱导caspase-3和PARP表达增加,使细胞呈现典型的凋亡形态学特征,核质浓集,有凋亡小体。结论:UA诱导MCF-7细胞凋亡,其机制涉及到caspase-3和PARP依赖性凋亡调节信号通路。     

黄芪、水蛭对脂多糖诱导的大鼠肾系膜细胞MMP-2及TIMP-2表达的影响

目的:研究黄芪、水蛭有效成分及大鼠含药血清对脂多糖(LPS)诱导的系膜细胞增殖中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)因子的调控作用,探讨黄芪、水蛭治疗系膜增生性肾小球肾炎的机制。方法:LPS诱导大鼠系膜细胞增殖,选用MTT法检测后最大无毒浓度的黄芪、水蛭有效成分及含药血清进行干预。实验分为正常组、LPS组、黄芪多糖组、黄芪甲苷组、毛蕊异黄酮组、水蛭素组、黄芪高剂量血清组、水蛭高剂量血清组、黄芪低水蛭高剂量血清组、黄芪高水蛭高剂量血清组,干预24 h后收集细胞,Western Blot法测定MMP-2及TIMP-2表达的变化。结果:模型组经LPS诱导后,MMP-2表达高于正常组(P<0.01),TIMP-2蛋白表达低于正常组(P<0.01),黄芪、水蛭能不同程度地抑制MMP-2蛋白的表达(P<0.05),同时上调TIMP-2蛋白的表达(P<0.01)。结论:说明黄芪、水蛭通过调节MMP-2/TIMP-2动态平衡来减少肾小球细胞外基质的沉积,延缓肾纤维化进程。     

生肌化瘀方对糖尿病大鼠皮肤溃疡组织中MMP-3及TIMP-1表达的影响

目的探讨生肌化瘀方对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面组织中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达的影响效应。方法以糖尿病大鼠皮肤溃疡模型为研究对象,采用不同配伍比例的生肌化瘀方（生肌方与化瘀方分别按2：1、1：1和1：2比例组合）进行干预,采用West—ernblot法检测皮肤渍疡组织中MMP．3蛋白表达,免疫组化法检测TIMP．1蛋白表达。结果在成模各时间点,各组糖尿病大鼠血糖水平差异无统计学意义（P〉0．05）,而与正常创面组比较显著升高（P〈0．01）。创面面积处理前后差值方面,生肌化瘀3号方组、正常创面组均明显优于糖尿病溃疡模型组（P〈0．05）。Westernblot法检测结果显示：生肌化瘀2号方组MMP-3蛋白表达高于生肌化瘀3号方组（P〈0．05）。免疫组化法检测结果显示：生肌化瘀2号方组TlMP．1蛋白的表达低于糖尿病溃疡模型组和生肌化瘀1号方组（P〈0．05）,生肌化瘀3号方组的表达高于生肌化瘀2号方组（P〈0．01）。结论在创面修复早期,采用生肌化瘀3号方生肌方有利于促进创面愈合;在创面愈合晚期,采用生肌化瘀2号方可能有利于抑制病理性瘢痕的形成。     

高山红景天对肝纤维化大鼠TIMP-1mRNA表达的影响

目的:观察高山红景天对大鼠实验性肝纤维化的治疗效果,并探讨其作用机制。方法:用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,将实验动物随机分为正常对照组(A)、模型组(B)、秋水仙碱组(C)、红景天高剂量组(D)、红景天低剂量组(E)。除正常对照组外,其余4组均用四氯化碳诱发肝纤维化,并相应灌药8周。各组于造模第8周末处死动物,分别用放射免疫法检测血清层黏连蛋白(LN),Ⅲ型前胶原(PCⅢ),透明质酸(HA)及Ⅳ型胶原(CⅣ);RT-PCR检测肝组织金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)mRNA的表达;肝组织HE染色和胶原纤维染色。结果:与模型组大鼠比较,各用药组大鼠血清中LN、HA、PCⅢ、CⅣ水平明显降低(P<0.01);大鼠肝组织内TIMP-1mRNA表达明显下降(P<0.01);大鼠肝组织病理学检测改善显著。结论:高山红景天能有效地抑制肝纤维化的发展,其机制可能是通过下调肝组织内TIMP-1mRNA表达,降低ECM的分泌而达到的。     

不同针灸方法对KOA模型大鼠软骨损伤生物标志物MMP-1、MMP-3、TIMP-1的影响

摘要：目的：观察比较不同针灸方法对KOA模型大鼠MMP-1、MMP-3、TIMP-1的影响。方法：将体重180-200g的SPF级雄性SD大鼠50只,适应性饲养7天后随机分为正常组（N）、模型组（M）、温针组（W）、电针组（D）、手针组（S）五组,每组10只。N组不作任何处理,其余四组腹腔注射戊巴比妥钠（1%,0.04ml/g）麻醉后,1mg单碘乙酸盐（MIA）溶于50μL 9%的无菌生理盐水,右膝关节注射造模,周期14天,造模前后进行行为学Lequesne MG评分检测。N、M组不作任何干预,其余三组对鹤顶、阳陵泉穴分别进行针刺、电针、温针干预,手针组0.25*25mm针灸针,刺入约5mm平补平泻手法,200 r/min,1min,留针20 min,10 min行针1次;电针组平补平泻后接电针,疏波,1mA,2Hz,20min/次;温针组平补平泻后,将直径5mm艾柱置于针柄,20min/次;三组均隔天干预,共28天。干预前后进行行为学机械刺激回缩阈值检测,28天后戊巴比妥钠麻醉,生理盐水心脏灌注取关节软骨和关节进行Western blot、免疫组化检测。结果：行为学Lequesne MG评分检测显示,造模前各组大鼠膝关节评分差异无统计学意义（P>0.05）,造模后除N组外,其余四组评分显著高于造模前,差异有统计学意义（P<0.05）。机械刺激回缩阈值检测显示,干预前M、W、D、S组与N组相比回缩阈值均降低,其结果有统计学意义（P<0.05）。干预后D组较M组升高,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组化检测关节软骨显示,MMP-1阳性表达M组较N组升高（P<0.05）,D、W、S组较M组降低（P<0.05）;D组较W组降低（P<0.05）,MMP-3阳性表达M组较N组升高（P<0.05）,D、W、S组较M组降低（P<0.05）,D组较S、W组降低（P<0.05）;T1MP-1阳性表达N、M、W、S组较D组降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,S组较M组升高（P<0.05）。Western blot检测软骨显示,MMP-1蛋白表达M组较N组升高（P<0.05）,D、W、S组较M组降低（P<0.05）,W组较D组升高（P<0.05）;MMP-3蛋白表达M组较N组升高（P<0.05）,D、S组较M组降低（P<0.05）;T1MP-1蛋白表达D、S、W组较M组升高（P<0.05）。其余结果无统计学意义（P>0.05）。结论：电针、温针、手针三种方法可有效改善KOA模型大鼠关节软骨损伤,可能通过升高TIMP-1的表达从而降低MMP-1、MMP-3的表达,相比之下电针更有利于调节上升TIMP-1且抑制MMP-1、MMP-3的表达,手针方法次之,温针效果则略逊于前两者。     

羟基喜树碱对人胰腺癌细胞作用的研究

目的　探讨人胰腺癌细胞对羟基喜树碱的敏感性。方法　将人胰腺癌细胞株 (P3,SW - 1990 )接种于 96孔板 ,分别加入不同浓度的羟基喜树碱 ,作用不同时间后采用噻唑蓝法 (MTT法 )测定其抗癌敏感性。结果　羟基喜树碱对胰腺癌细胞的抑制率随药物浓度增加和作用时间的延长而增高 ,单药最大抑制率为 5 4 .6 % ;羟基喜树碱与DDP联合后产生协同作用 ,抑制率最高可达 74 .8% ,与临床常用化疗方案FEM ( 5 -氟尿嘧啶、表阿霉素、丝裂霉素 )相比无显著性差异。结论　胰腺癌细胞对羟基喜树碱敏感 ,可进一步进行胰腺癌患者的临床实验。     

绞股蓝总皂苷对光老化HSF细胞MMP-3、TIMP-2mRNA及蛋白表达影响的实验研究

目的:观察绞股蓝总皂苷(gypenosides,GPs)含药血清对光老化人皮肤成纤维细胞株(HSF)MMP-3和TIMP-2 mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用长波紫外线(UVA)照射方法建立老化HSF细胞模型,并给予含不同浓度GPs大鼠血清进行干预,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western-blot)法,分别对各组细胞MMP-3与TIMP-2 mRNA和蛋白表达进行检测。结果:与空白对照组比较,UV模型组细胞内MMP-3基因和蛋白表达显著增加,同时TIMP-2基因和蛋白表达显著减少。与UV模型组比较,低、中、高剂量含药血清组细胞内MMP-3基因和蛋白表达显著下降,TIMP-2基因和蛋白表达显著上升。结论:GPs通过抑制HSF细胞MMP-3表达,同时促进TIMP-2表达,恢复MMP-3与TIMP-2表达平衡状态,抑制基质金属蛋白酶对细胞外基质(胶原蛋白、蛋白多糖)的降解,为GPs抗皮肤光老化作用机制之一。     

中药川贝母对哮喘模型小鼠MMP-2,MMP-9和TIMP-1的影响

观察中药川贝母对哮喘模型小鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。BALB/C小鼠,随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常组外,其他各组用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0,9.0 mg·kg-1剂量给予中药川贝母灌胃;阳性对照组于腹腔注射0.5 mg·kg-1剂量地塞米松;正常组和模型组等量生理盐水灌胃,每天1次,连续28 d。观察各组小鼠气道反应性的变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和白细胞分类的变化以及支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度的变化;ELISA法检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1水平;RT-PCR检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1 mRNA的表达。结果显示,模型组气道反应性、BALF中细胞总数以及中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数、支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组(P0.05或P0.01);模型组MMP-2,MMP-9和TIMP-1水平和mRNA表达明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。推断中药川贝母可改善哮喘模型小鼠气道重塑状态,其机制可能与其降低MMP-2,MMP-9和TIMP-1有关。     

紫草素对胶原诱导关节炎MMP-1和TIMP-1表达影响的研究

目的:研究紫草素对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)MMP-1、TIMP-1表达的影响。方法:紫草素及对照药物口服给药CIA小鼠,连用30天,用酶联免疫吸附测定试剂盒测定CIA小鼠血清中的MMP-1、TIMP-1;用逆转录聚合酶链反应测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的MMP-1、TIMP-1表达水平。结果:与模型组(775.9 102.12)相比,紫草素组(255.9 103.7)降低了CIA小鼠血清中MMP-1水平(P<0.001),紫草素组(135.3 9.1)与模型组(106.3 7.07)相比,升高了TIMP-1水平(P<0.05),髌骨及邻近滑膜组织的MMP-1mRNA水平与对照组相比显著被抑制(P<0.05);TIMP-1mRNA水平与对照组相比明显升高(P<0.05)。结论:紫草素可能通过抑制MMP-1,提高TIMP-1发挥对CIA小鼠的治疗作用。     

苦瓜提纯液对糖尿病肾病大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1 mRNA表达的影响

目的探讨苦瓜对糖尿病肾病大鼠细胞外基质及基质金属蛋白酶9（MMP-9）、组织抑制剂1（TIMP-1）基因表达的影响。方法将60例Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组、苦瓜组及洛汀新组，采用链脲佐菌素一次性腹腔内注射法诱导糖尿病模型，造模1、5周测定各组24h尿蛋白、肾功能及血糖，5周后取各组肾组织用RT—PCR技术检测MMP-9、TIMP-1的基因表达。结果模型组较对照组肾小球MMP-9、TIMP-1 mRNA表达增加，反映肾功能的各项生化指标水平升高。苦瓜组、洛汀新组较模型组MMP-9、TIMP-1 mRNA表达减少，肾功能有所改善。结论苦瓜对糖尿病大鼠肾结构功能具有保护作用，除降低血糖外，调节肾小球MMP-9、TIMP-1表达从而减轻肾小球细胞外基质沉积也可能是其作用途径之一。     

川芎嗪对鼠骨关节炎关节软骨MMP-1、TIMP-1表达的影响

目的:观察关节内注射川芎嗪对鼠骨关节炎(Osteoarthritis,OA)模型关节软骨退变及软骨中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,探讨川芎嗪对OA的修复作用。方法:50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、透明质酸钠组、丹参组和川芎嗪组5组:除空白对照组外,其余四组作左侧跟腱切除建立右膝OA模型。造模后第5周开始,川芎嗪组于右膝关节内注射盐酸川芎嗪注射液作为治疗,于第12周末处死动物,取股骨外髁软骨标本,进行HE染色,光镜下观察其病理改变,以免疫组织化学法检测关节软骨中的MMP-1、TIMP-1水平。结果:川芎嗪组关节软骨退变减缓,Mankin’s评分及软骨中MMP-1的水平非常显著低于模型组(P<0.01),TIMP-1水平较模型组显著上升(P<0.01)。结论:川芎嗪能明显降低OA软骨退变的程度,明显降低OA软骨中MMP-1的水平,增加TIMP-1的水平,具有保护和修复早期OA关节软骨的作用,可延缓OA的病理过程,有可能成为防治OA的良好药物。     

益肾填精助孕方药对肾虚胚胎着床障碍小鼠子宫内膜MMP-9及TIMP-3蛋白表达的影响

目的:观察益肾填精助孕方药仙子益真胶囊对肾虚胚胎着床障碍模型小鼠子宫内膜腺上皮细胞、腔上皮细胞和基质细胞MMP-9及TIMP-3的蛋白表达影响,探讨其可能作用机制。方法:建立肾虚胚胎着床障碍小鼠模型,分别予仙子益真胶囊低剂量、中剂量、高剂量、戊酸雌二醇片及生理盐水灌胃,免疫组化法检测MMP-9和TIMP-3的蛋白表达。结果:MMP-9蛋白及TIMP-3蛋白在模型组与正常组的子宫内膜腺上皮细胞、腔上皮细胞中表达有显著性差异(P<0.05)。MMP-9蛋白及TIMP-3蛋白在模型组与仙子益真胶囊各组的子宫内膜腺上皮细胞、腔上皮细胞中表达有显著性差异(P<0.05)。MMP-9蛋白及TIMP-3蛋白在仙子益真胶囊低、中剂量组小鼠子宫内膜腺上皮、腔上皮表达与戊酸雌二醇片组比较无显著性差异。TIMP-3蛋白在仙子益真高剂量组小鼠子宫内膜腺上皮、腔上皮表达与戊酸雌二醇片组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:益肾填精助孕方药可以改善着床障碍小鼠子宫内膜MMP-9、TIMP-3的表达,从而调节滋养细胞对子宫内膜的侵入程度,促进胚胎着床。