冬虫夏草多糖提取工艺的优化

自从日本学者千原进行多糖研究以来 ,从一些真菌中提取生物活性物质 ,尤其是真菌多糖成了人们的研究热点 [1]。据药理学及临床研究表明 ,冬虫夏草多糖可以增强免疫力、抗肿瘤及降血糖等 [2～ 4] 。随着人们保健意识的增强 ,对于虫草多糖的研究及开发也日益升温 ,但由于天然冬虫夏草资源的稀少 ,为解决严重的供需矛盾 ,人们采用液体深层培养法来生产虫草菌丝体 ,以替代天然冬虫夏草 [5]。在虫草多糖的生产过程中 ,涉及到虫草多糖的提取问题 ,为使虫草多糖提取的质和量达到最佳化 ,本实验采用常用的乙醇沉析法从乙醇添加量、p H值及时间 3个…     

凉山虫草与冬虫夏草中多糖的含量比较研究

目的比较凉山虫草与冬虫夏草在多糖含量上的差异,为凉山虫草的资源开发利用提供依据。方法采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为对照品,测定凉山虫草与冬虫夏草中多糖含量。结果凉山虫草样品多糖含量分别为1．30％、1．44％,冬虫夏草样品多糖含量分别为2．02％、2．27％。结论凉山虫草中含有丰富的多糖成分,含量低于冬虫夏草。     

毛细管区带电泳定性分析蒙山九州虫草菌丝体和发酵液多糖水解液组分

目的建立蒙山九州虫草菌丝体和发酵液多糖水解液组分的定性分析方法。方法蒙山九州虫草菌丝体和发酵液多糖水解成单糖后,用α-萘胺进行衍生,得到α-萘胺衍生单糖。采用50μm（i．d．）×57 cm未涂层石英毛细管,以75 mmol／L硼砂（pH 10．5）为背景电解质,于200 nm处进行紫外检测,操作温度25℃,分离电压8 kV。采用标准品对照进行定性分析。结果蒙山九州虫草发酵液多糖和菌丝体多糖水解后主要含有葡萄糖、甘露糖和半乳糖,另外还含有少量阿拉伯糖。结论该方法样品用量少、时间短、操作简单,可以作为单糖定性分析的常规方法。     

比色法测定人工虫草菌丝体多糖含量

采用硫酸－蒽酮比色法测定人工虫草（北冬虫夏草菌培养体）中的多糖含量,为开发应用其药用价值提供可靠而简便的方法和依据。用分光光度比色法于波长630nm处测定人工虫草菌丝体多糖含量,结果菌丝体多糖含量为50．1％（以粗多糖中葡萄糖含量计算）,平均回收率98．2％。     

至灵胶囊中多糖的测定

冬虫夏草Cordyceps sinensis（Burk.）Sacc系寄生在鳞翅目蝙蝠蛾昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体,是我国传统名贵的强壮滋补品.天然虫草及虫草菌丝体中所含的虫草多糖具有广泛药理作用.至灵胶囊系采用青海产天然冬虫夏草中分离出虫草菌种经人工培养液体发酵制得.本实验对至灵胶囊中多糖进行提取,并采用硫酸-苯酚法测定粗多糖中多糖的量.     

水提法和微波助提法在蛹虫草多糖提取中的应用

目的:探讨蛹虫草菌丝体多糖提取方法的应用。方法:利用水提法和微波助提法提取蛹虫草菌丝体中多糖成分,利用苯酚-硫酸法测定其多糖的含量。结果:水提法粗多糖的提取率为22.26%,微波助提法的提取率为15.16%。结论:菌丝体粗多糖提取过程中应用传统水提法提取率高,但其工艺复杂、耗时,微波助提法工艺简便、快速。     

蛹虫草与冬虫夏草的含量测定研究

目的:对冬虫夏草及蛹虫草进行含量测定研究.方法:利用紫外分光光度法对野生冬虫夏草和蛹虫草的主要成分多糖进行含量测定.结果:冬虫夏草与蛹虫草的多糖含量有较大差异,冬虫夏草多糖含量为32.37%,蛹虫草为6.32%.结论:本研究为蛹虫草作为冬虫夏草"代用品"提供一定的理论根据.     

辽阳产人工北虫草中虫草素含量的测定

目的通过一定有效的实验方法测定辽阳产人工北虫草中的虫草素含量。方法使用不同方法对实验北虫草进行提取并使用HPLC法测定,以虫草素标准品测定标准曲线,测定使用不同提取方法提取的北虫草样品中虫草素的含量。结果在甲醇浓度20%料液比1∶30、提取时间30 min条件下提取效果最好。在以水∶甲醇∶甲酸=95∶4∶1为流动相的情况下使用HPLC法测得样品中虫草素含量最高,含量为0.14%。结论本实验方法可对人工培育冬虫夏草中的虫草素含量进行测定。并且经过分析认为,实验中使用的辽宁省辽阳地区出产的人工培育冬虫夏草质量较好,其生产工艺值得推广。     

香棒虫草化学成分的测定及药用价值探讨

对香棒虫草 Cordyceps barnesii Thwaites的基本养分 (水、粗蛋白、粗脂肪、总糖 )、氨基酸、矿质元素、虫草酸、虫草素和虫草多糖等成分进行了测定 ,并以虫草测定结果作了比较 ,为香棒虫草的食用和药用提供依据。1　材料和方法实验用香棒虫草、冬虫夏草来源 :香棒虫草Cordyceps barnesii Thwaites购自山西农业大学食用菌中心 ,产地 :山西。冬虫夏草 Cordycepssinensis( Berk) Sacc.购自北京同仁堂大药店 ,产地 :青海。2　实验方法2 .1　成分测定 :基本养分的测定 [1] ,样品需先经粉碎 (粒度为 80目 ) ;氨基酸的测定 ,采用自动色谱法 ;矿…     

不同预处理对冬虫夏草甘露醇含量测定的影响

[目的]为提高测定结果的准确性，对冬虫夏草甘露醇含量测定前常用的两种预处理方法（水提取法和醇提取法）进行多重分析比较。[方法]以经典的氧化还原滴定法为基础，对水提取法和醇提取法进行直接比较。交叉比较，结合比较，相对误差分析。[结果]水提取法的测出量达到冬虫夏草甘露醇实际含量的95%以上，且相对误差很小；醇提取法的测出量则不足其实际含量的70%，且相对误差较大。[结论]在冬虫夏草甘露醇含量的测定中。样品预处理采用水提取法的准确性和精确性均高于醇提取法。     

戴氏虫草和粉被虫草菌丝体发酵液对放射损伤小鼠体液免疫的影响

以６０Ｃｏγ射线放射损伤小鼠为动物模型,采用溶血素测定（ＨＣ５０）比色法测定戴氏虫草和粉被虫草菌丝体发酵液对γ射线辐射损伤小鼠的血清溶血素水平等的影响。同时测定了小脾指数和体重的变化。结果表明;在所试剂量条件下,戴氏虫草菌丝体发酵液可以降低γ射线辐射损伤小鼠血清溶血素的水平,但是不影响脾指数;而在一定剂量条件下,粉被虫草菌丝体发酵液可以恢复提高γ射线辐射损伤小鼠血清溶血清的水平,同时也能够恢复提高     

高含量多糖食用菌株的筛选

目的 利用生物技术培养菌丝体，筛选高产多糖食用菌株。方法 利用苯酚-硫酸法测定了红曲、虫草、羊肚菌、黄伞和灵芝菌丝体的含糖量。结果 黄伞菌丝体和灵芝菌丝体的多糖含量较高，是理想的高产多糖菌株。结论 该方法生产周期短，易于规模化生产，是生产真菌多糖的好方法。     

北虫草不同部位超氧化物歧化酶(SOD)酶活力的比较

目的:对北虫草菌丝体、子座的超氧化物歧化酶(SOD)酶活力进行对比实验,在水提取和丙酮分级提取两种方法中选择效果更好的一种。方法:利用水、丙酮分别对北虫草不同部位的超氧化物歧化酶(SOD)进行提取,邻苯三酚自氧化法检测其酶活性。结果:北虫草菌丝体的SOD酶活性和蛋白含量均明显高于子座,并且丙酮分级提取的效果更优。结论:北虫草各部分的SOD酶活性和蛋白含量各不相同,不同提取方法效果也有差异。     

北冬虫夏草子实体培养条件的探索

目的模拟自然条件刺激的方法诱导北虫草产生子实体。方法利用正交设计的方法培养北虫草子实体。结果找到了培养子实体的比较合适的温度、湿度、光照时间、昼夜温差、接种量、营养液比例等条件,并发现了植物激素玉米素、吲哚乙酸有加快子实体生长及增加子实体多糖含量的作用。结论该方法缩短了北虫草子实体的培养周期。     

蛹虫草菌丝体与冬虫夏草抑制人胰腺癌PANC-1

目的 比较人工培养的蛹虫草菌丝体与天然冬虫夏草抑制人胰腺癌PANC-1细胞株增殖的活性,并探讨其作用机制. 方法 MTT法分析蛹虫草菌丝体和天然冬虫夏草对PANC-1细胞的增殖抑制作用,Hoechst33258染色检测细胞凋亡,Western blot分析细胞凋亡和自噬相关蛋白变化. 结果 蛹虫草菌丝体和天然冬虫夏草都能通过诱导细胞自噬而非凋亡途径,呈浓度依赖地降低胰腺癌PANC-1细胞的存活率.癌基因STAT3的总蛋白和磷酸化水平均明显降低.蛹虫草菌丝体处理后PANC-1细胞促存活蛋白Mcl-1和Survivin的表达水平明显降低,而冬虫夏草并无此作用. 结论 人工培养的蛹虫草菌丝体与天然冬虫夏草相比,具有相似或更强的体外抗胰腺癌细胞增殖活性.     

桑黄菌丝体多糖对胶原诱导性关节炎大鼠的治疗作用

[目的]研究桑黄菌丝体多糖对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的治疗效果,并探讨其作用机制.[方法]采用永提醇沉法提取桑黄菌丝体多糖.将60只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、桑黄菌丝体多糖低（1 00 mg· kg-1）、中（200 mg·kg-1）、高（400 mg·kg-1）剂量组,每组10只.给药期间采用足趾肿胀容积法测定大鼠非致炎足关节肿胀程度.30 d后麻醉大鼠,截取非致炎足做关节组织病理切片,显微镜下观察.ELISA法检测血清中白介素-17（IL-17）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-10（IL-10）的表达水平.[结果]与模型组比较,阳性对照组和桑黄菌丝体多糖各剂量组均能显著抑制非致炎足足趾肿胀（P＜0.05）,改善关节组织病理情况,降低IL-17、TNF-α、IL-1β的表达（P＜0.05）,升高IL-10的含量（P＜0.05）.[结论]桑黄菌丝体多糖通过抑制炎症细胞因子IL-17、TNF-α、IL-1β的表达,促进抑炎因子IL-10的表达对CIA大鼠起到治疗作用.     

分光光度法测定咳尔康口服液中多糖的含量

[目的]建立咳尔康口服液中多糖含量的测定方法。[方法]采用改良的苯酚-硫酸法,以葡萄糖为对照品,考察方法的线性、稳定性及加样回收率。通过检测葡萄糖的含量,反映样品中多糖的含量。[结果]葡萄糖浓度在18.2～91.0mg.ml-1范围呈线性关系(R2=0.9952);平均回收率99.94%;相对标准偏差RSD=1.10%。[结论]运用改良的苯酚-硫酸法测定三批咳尔康口服液中多糖的含量分别为36.32,30.90,32.75mg.mL-1,方法简便,重现性好,可以作为咳尔康口服液中多糖成分的质量控制方法。     

虫草素抑制人胃癌细胞MKN-28运动侵袭能力研究

[目的]探讨虫草素对人胃癌细胞MKN-28体外迁移、侵袭能力的影响及其可能作用的分子机制。[方法]CCK8法检测虫草素对MKN-28细胞的增殖抑制作用,体外迁移、侵袭实验观察虫草素对人胃癌细胞MKN-28迁移、侵袭能力的影响,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测虫草素作用24 h后MKN-28细胞Ezrin蛋白,基质金属蛋白9(MMP9)信使核糖核酸(mRNA)表达变化。[结果]200~800μg/mL虫草素可明显抑制MKN-28胃癌细胞增殖,体外迁移实验显示虫草素组细胞划痕闭合约18%,对照组细胞划痕闭合约25%,而表皮生长因子(EGF)组闭合约48%。虫草素组显著低于另两组(P0.05)。体外侵袭实验结果表明虫草素组穿过人工基底膜的细胞数明显减少(P0.05);虫草素组Ezrin和MMP9的表达明显下调(P0.05)。[结论]虫草素可能通过下调Ezrin及MMP9表达抑制人胃癌细胞MKN-28细胞的迁移与侵袭能力,从而发挥其抑制肿瘤生长的作用。     

冬虫夏草及其制剂治疗慢性肾病的研究及进展

[目的]对冬虫夏草及其制剂在治疗慢性肾脏病方面的疗效研究加以综述。[方法]通过检索阅读古今中外文献，了解冬虫夏草及其制剂对慢性肾脏病的治疗作用。[结果]冬虫夏草及其制剂能明显减少慢性肾脏病患者的蛋白尿，降低血肌酐水平，显著改善肾小管的纤维化，延缓肾功能衰退。[结论]冬虫夏草及其制剂对慢性肾脏病有明显的治疗作用。