基于标准曲线的两台PCR仪检测结果的可比性分析

目的 分析同一实验室2台实时荧光定量PCR仪标准曲线相关参数的可比性.方法 常规条件下,使用同一批号试剂,将HBV DNA检测标准品与待测标本、室内质控在2台实时荧光定量PCR仪上同时进行扩增,比较标准曲线的斜率、截距及Ct值,分析检测结果的一致性.结果 作为单一检测系统,相同批号标准品在同一批号检测试剂的多批次实验中,2台仪器均有良好重复性,2台实时荧光定量PCR仪之间的测定结果差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 实验室存在多台实时荧光定量PCR仪时,可通过分析标准曲线的相关参数来监测不同仪器间检测结果的一致性,保证检测结果的准确可靠.     

HBV DNA定量PCR检测对联合用药治疗慢性无症状HBsAg(+)携带者的临床意义

目的 探讨HBV DNA定量PCR检测对临床应用复肝宁联合香菇多糖片联合治疗慢性无症状HBsAg(+)携带者(ASC)的临床指导意义.方法 采用Light Cycler实时荧光定量PCR仪对门诊82例患者进行血清HBV DNA检测;分别观察用药后6个月和12个月的HBV DNA结果并进行统计学分析.结果 治疗后6个月和...     

荧光定量PCR与普通定性PCR检测乙型肝炎血清HBV DNA结果的比较

目的　探讨荧光定量聚合酶链反应 (PCR)与普通定性 PCR检测血清 HBV DNA结果的差异。方法　同时采用荧光标记 (Ampli Sensor)定量 PCR方法及普通定性 PCR方法对 10 0例乙型肝炎血清样品进行 HBV DNA检测 ,并分析其相关性 ,比较其差异。结果　 10 0例荧光定量 PCR方法检测 HBV DNA阳性率为 74.0 % (74/ 10 0 ) ,定性 PCR方法检测 HBV DNA阳性率为 5 2 .0 % (5 2 / 10 0 ) ,两种方法的 HBV DNA检出率比较具有显著性差异 (P<0 .0 1)。结论　荧光定量 PCR与普通定性 PCR相比具有一定的优势 ,完全可以取代定性 PCR方法 ,尤其适用于使用抗病毒药物的患者的疗效观察和病情预测     

乙型肝炎病毒核酸荧光定量及血清标志物与肝功能检测的临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者 HBV DNA 检出情况及其与血清病毒标志物及肝功能在临床应用的意义.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ‐PCR)检测296例不同血清学类型的 HBV 感染者血清中的 HBV DNA ,同时检测 HBV 血清标志物与肝功能.结果99例 HBeAg (+)标本中 HBV DNA 阳性率为100%,平均 HBV DNA 含量为1.21×107 copy/mL ,其 HBV DNA 检出率和含量与 HBeAg(-)模式的检出情况比较差异有统计学意义(P<0.01);HBsAg (+)与 HBsAg (-)模式比较,HBV DNA 检测结果差异有统计学意义(P<0.01);肝功能正常组与肝功能异常组 HBV DNA 检出率比较差异有统计学意义(P<0.01).58例 HBsAg (-)且肝功能又正常的标本中检出了4例 HBV DNA 阳性.结论实时 FQ‐PCR 定量检测 HBV DNA 与 HBV 血清标记物及肝功能指标联合应用可使诊断更准确,治疗更合理.     

两种荧光定量PCR 仪检测HBV、HCV核酸结果的一致性

目的 探讨不同荧光定量PCR仪检测肝炎病毒 DNA 及RNA结果的一致性。 方法 参照美国NCCLS EP9-A2文件,以MJ Opticon 2为参比仪器,ABI 7300为实验仪器,检测HBV DNA 及 HCV RNA,分析结果的相关性及预期偏倚,评价两种仪器检测结果的一致性。 结果 MJ Opticon 2 及ABI 7300检测HBV DNA 及 HCV RNA具有良好的相关性 （rHBV=0.995;rHCV=0.993）,预期偏差在可接受范围内。 结论 MJ Opticon 2 及ABI 7300检测结果具有较好的一致性,可用于同时检测HBV DNA或HCV DNA。     

荧光定量PCR仪检测HBV DNA结果比对分析

目的对Roche Light Cycler 480Ⅱ型荧光定量PCR仪(Roche 480)和ABI 7500检测乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)结果进行比对和偏倚评估,探讨不同检测系统间检测结果的可比性和偏倚的可接受性。方法按照美国临床实验室标准化委员会EP9-A2标准要求,以Roche 480为参比仪器,ABI 7500为实验仪器,对患者HBV DNA项目进行检测,通过比较这两种荧光定量PCR仪器间的系统误差,判断检测结果的可比性。结果Roche 480及ABI 7500检测HBV DNA具有良好的相关性(r=0.993 1),偏差在可接受范围内,系统误差临床可接受。结论 Roche 480及ABI 7500检测结果具有较好的一致性,可同时用于肝炎病毒DNA的检测。     

慢性乙型肝炎患者胃液和胃黏膜中HBV DNA检测

目的探讨慢性乙型肝炎患者胃液、胃黏膜中是否有乙肝病毒（HBV）DNA存在。方法随机对102例慢性乙型肝炎患者进行胃液分析和胃黏膜活检。采用酶联免疫吸附法检测其静脉血乙肝病毒标志物（HBV-M）;PCR法检测血清和胃液中HBV DNA;采用原位分子杂交法检测其胃黏膜中的HBV DNA。结果慢性乙型肝炎患者胃液、胃黏膜中有HBV DNA存在。胃黏膜中HBV DNA主要呈胞浆型分布。胃液中HBV DNA阳性率与血清HBV DNA载量有关,而胃黏膜中HBV DNA阳性率与慢性乙型肝炎患者血清中HBV DNA复制状态比较,无显著统计学差异（P〉0.05）。结论慢性乙型肝炎患者胃液、胃黏膜中有HBV DNA存在。     

实时荧光定量PCR检测HBV—DNA在诊断乙型肝炎中的价值

目的：分析实时荧光定量PCR（Real Time PCR）检测HBV—DNA在诊断乙型肝炎病毒（HBV）中的作用。方法：分别用实时荧光定量PCR和ELISA方法检测389份临床病人血清，并用t检验分析比较HBV—DNA阳性结果。结果：在血清学标志物组合模式中，多种组合都可检测出HBV—DNA含量，尤其是在传统认为没有HBV感染的血清中也可检测到一定程度的HBV—DNA含量。结论：实时荧光定量PCR检测HBV—DNA是乙肝病毒在体内复制和传染的可靠指标，特别是在反映HBeAg阴性的乙型肝炎患者是否有病毒复制的诊断中有重要意义。     

HBV血清标记物不同组合模式与荧光定量结果之间的关系

目的：对HBV血清标记物不同组合模式与HBVDNA定量结果进行对比分析。方法：采用ELISA方法检测乙肝病毒血清标记物,荧光定量PCR检测HBV—DNA,比较二者关系。结果：HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组、HB—sAg、HBeAg阳性组及HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb阳性组HBV—DNA检出率和平均水平含量均较高。结论：荧光定量PCR检测HBV—DNA能准确反映体内HBV真实感染和复制情况,同时进行HBV血清标记物的检测与HBV—DNA荧光定量PCR的检测,更有利于HBV临床感染上的诊断、对治疗方案的选择及疗效评价。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA定量检测的临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者病毒复制水平与HBV标志物(HBV-M)模式及肝损害程度的关系。方法180例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA定量采用荧光标记定量PCR方法检测,HBV-M检测采用ELISA法。结果血清HBV DNA定量与HBV-M模式有关,血清HBeAg阳性组HBV DNA定量(106.35±1.84)显著高于HBeAg阴性组(104.73±1.88)(P<0.01),轻、中度乙肝患者HBV DNA定量(105.58±1.92,106.27±2.05)与重度患者HBV DNA定量(105.73±1.90)相比较差异无统计学意义,且不同HBV DNA水平患者的TB il、ALT、AST差异无统计学意义。结论血清HBeAg的存在影响HBV DNA的水平变化;肝损害程度与HBV DNA定量无显著关系;同时血清HBV DNA定量与TB il、ALT、AST水平无明显关系。     

慢性乙型肝炎病毒感染患者DNA载量与机体免疫状态的关系

目的探讨慢性HBV感染患者DNA载量与机体免疫状态的关系。方法将该院2017年3月至2018年12月门诊及住院的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者120例分为5个处理组,并以体检健康者30例作为健康对照组,用流式细胞仪检测各组患者淋巴细胞亚群状况,用荧光定量PCR仪检测HBV DNA载量。结果与健康对照组比较,HBV感染的处理组的CD3+、CD4+、CD8+均有明显升高,差异有统计学意义(P0.05),且随着HBV DNA载量的升高而升高,各处理组的CD4+/CD8+较健康对照组有明显降低,差异有统计学意义(P0.05),且随着HBV DNA载量的升高呈下降趋势。结论慢性HBV感染患者免疫状态与DNA载量有关,HBV DNA载量越高,机体免疫反应越活跃,机体细胞免疫逐步出现紊乱。     

乙型病毒性肝炎患者血清HBV标志物检测分析

目的 探讨乙型肝炎患者血清乙肝病毒标志物(HBV-M)的临床意义.方法 利用聚合酶链反应(PCR)技术对1000例血清样品进行HBV DNA定性检测,其中100份样品采用荧光标记(Ampli5ensor)定量方法.结果 定性PCR与免疫荧光定量PCR检测结果基本一致,在不同HBV-M模式中均可检出HBV DNA,其中HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性组HBV DNA检出率明显高于其他各组(P<0.01).结论 除HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性者外,其余HBV-M的各项表现形式中,均可存在不同程度的HBV复制,对HBV-M临床意义的认识需进行观念更新.     

实时定量PCR技术在角膜移植供体乙型肝炎病毒筛查中的应用

目的:探讨采用实时定量PCR技术对角膜移植材料进行HBV DNA筛查的可行性.方法:采用实时定量PCR技术对22例角膜移植供体血样和球外筋膜、角膜、色素膜中HBVDNA进行定性和定量分析.比较血样标本和眼组织中检测HBV DNA的特异度、敏感度及不同眼组织中HBV DNA载量的差异.结果:在18例HBV阳性和4例HBV阴性的供体材料中,血样、球外筋膜、角膜和色素膜组织HBV DNA检测的敏感度分别为83％ (15/18)、100％(18/18)、83％ (15/18)和78％ (14/18),检测的特异度均为100％.对球外筋膜、角膜和色素膜HBVDNA的定量分析显示,单位质量色素膜中HBV DNA的载量最高,球外筋膜和角膜HBV DNA载量比较差异无统计学意义.结论:应用实时定量PCR技术检测球外筋膜中HBV DNA可以作为一种角膜移植供体病原体筛查的检测手段.     

实时荧光PCR与COBAS Amplicor PCR-ELISA定量检测血清HBV DNA的比较

目的研究实时荧光聚合酶链反应(PCR)与COBAS Amplicor PCR-酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测血清标本中乙型肝炎病毒(HBV)DNA水平的相关性。方法采用实时荧光定量PCR与COBAS AmplicorPCR-ELISA平行检测110例HBV携带者和40名健康体检者的血清标本,比较2种方法检测结果的相关性和差异程度。结果实时荧光PCR与COBAS Amplicor PCR-ELISA定量检测血清HBV DNA相关性较好,相关系数为0.944,对高浓度标本检测结果的差异性更小。结论我们采用的实时荧光PCR检测血清标本HBV DNA与COBAS Amplicor PCR-ELISA具有较好的相关性,可以为临床提供可靠的结果。     

实时荧光PCR与COBAS Amplicor PCR-ELISA 定量检测血清HBV DNA的比较

目的研究实时荧光聚合酶链反应（PCR）与COBAS Amplicor PCR-酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测血清标本中乙型肝炎病毒（HBV）DNA水平的相关性。方法采用实时荧光定量PCR与COBAS AmplicorPCR-ELISA平行检测110例HBV携带者和40名健康体检者的血清标本,比较2种方法检测结果的相关性和差异程度。结果实时荧光PCR与COBAS Amplicor PCR-ELISA定量检测血清HBV DNA相关性较好,相关系数为0.944,对高浓度标本检测结果的差异性更小。结论我们采用的实时荧光PCR检测血清标本HBV DNA与COBAS Amplicor PCR-ELISA具有较好的相关性,可以为临床提供可靠的结果。     

乙肝患者血清HBV外膜大蛋白与HBV DNA的关系

目的:通过对乙型肝炎(乙肝)患者血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)和HBV DNA的检测,探讨二者在判断乙肝病情和HBV复制情况时的相关性及其在临床上的意义。方法:采用荧光定量PCR方法对238份乙肝患者血清的HBV DNA进行检测,采用酶联免疫吸附试验,对上述标本进行HBV-LP和HBV血清免疫学标志物(HBV-M)模式的检测。结果:HBV-LP检出率与HBV DNA的检出率差异有显著性(P<0.05),不同HBV-M模式的HBV DNA与HBV-LP的检出结果差异有显著性(P<0.05),HBV DNA拷贝数与HBV-LP的表达有相关性(r=0.677,P<0.001)。结论:血清中HBV-LP的含量与HBV DNA的拷贝数具有较好的相关性,但HBV-LP尚不能完全代替HBV DNA的检测来反映HBV复制情况。     

产妇血浆和乳汁中HBV DNA定量检测研究

目的 进一步了解乙型肝炎产妇的母乳中HBV DNA含量及其传染性，更好地指导母乳喂养。方法 利用荧光实时定量PCR检测技术，对66例乙肝血清学检测阳性的产妇进行血浆及乳汁中HBV DNA的定量检测。结果 66例产妇血浆和乳汁中HBV DNA的检出率分别为66．7％（44／66）和53．O％（35／66），其HBV DNA含量的对数值具有良好的相关性（r=0．794，n=66，P〈0．01），HBeAg（＋）与HBeAb（＋）两组间比较血浆及乳汗HBV DNA的含量，两者存在统计学差异（P〈0．01）。HBeAg（＋）组含量高于HBeAb（＋）组。结论 乳汁与血浆中HBV DNA含量具有较好的相关性，血浆中HBV DNA高拷贝的产妇，最好不要进行母乳喂养。产妇血浆中HBeAg与乳汁及血浆中HBV DNA含量都具有明显关系，它的存在提示血浆及乳汁中的HBV DNA含量较高。     

加提取液后不同振荡混匀时间对HBV DNA检测结果的影响

目的 探讨在PCR定量检测HBV DNA过程中,加入提取液后的振荡混匀时间对检测结果 的影响,以选择适当的混匀时间.方法 选择10份HBV DNA阳性标本,分为4组,在加入提取液后,每组标本分别混匀0 s(不混匀)及10、60、180 s,其他步骤完全按说明书操作,对不同混匀时间组HBV DNA定量结果 进行统计分析.结果 在加入提取液后,分别混匀10、60、180 s,其HBV DNA检测结果 差异无统计学意义(P>0.05);加提取液后不混匀组检测结果 最低,与其他各组检测结果 差异有统计学意义(P<0.01).结论 HBV DNA定量检测中,加入提取液后必须振荡混匀,混匀时间在10 s左右即可,不必将沉淀完全混匀.     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒前S1（PreS1）抗原检测在乙型肝炎诊断中的临床意义。方法对346例携带乙型肝炎病毒（HBV）患者血清采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法进行乙肝5项、HBV PreS1抗原检测；HBV DNA采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）法；丙氨酸氨基转移酶（ALT）按试剂盒说明书操作进行检测，并对结果进行回顾性分析。结果346例HBV患者血清中乙肝标志物不同模式与HBV PreS1抗原、HBV DNA及ALT阳性检出结果，在各组模式中，第1组PreS1抗原阳性检出率最高为70．83％。第1组与第2、3组模式比较，经X^2检验，P〈0．005，差异有统计学意义；第2组与第3组模式比较，经X^2检验，P〉0．1，差异无统计学意义。PreS1抗原与HBV DNA二者之间结果具有较好的一致性，同时存在着一定的交叉阳性和交叉阴性现象。PreS1抗原的存在与肝功能的损害也有一定的关系。结论PreS1抗原与HBV呈不同程度相关性，是病毒感染复制的指标，较乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）敏感，对临床上判断HBV复制和疾病预后有重要的参考价值。     

DNA芯片检测肝组织及血清中乙型肝炎病毒DNA的临床研究

目的：研究DNA芯片检测乙型肝炎和肝硬化患者肝组织及血清中乙型肝炎病毒（HBV）DNA的应用价值。方法：用点样仪将聚合酶链反应（PCR）扩增的HBV DNA探针制成基因芯片。对15例慢性乙型肝炎病人的血清和肝活检组织，99例乙型肝炎后肝硬化肝组织，分别用基因芯片、原位分子杂交、免疫组织化学和雅培试剂检测HBV DNA、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)、乙型肝炎表面抗原（HBsAg)和乙型肝炎e抗原（HBeAg)。结果：用基因芯片对15份HBsAg,HBeAg阳性的乙型肝炎患者血清进行检测，HBV DNA均阳性，阳性率符合率为100％；15份肝活检组织标本，免疫组化法检测HBcAg阳性15例，原位分子杂交法和基因芯片检测HBV DNA均阳性14例，阳性率93％。99份肝炎后肝硬化患者肝组织标本，HBcAg阳性67份，HBV DNA阳性53份，基因芯片检测HBV DNA阳性46份，阳性率分别为69％、88％。32例HBcAg、HBV DNA阳性的肝组织中，基因芯片检测HBV DNA均为阴性。结论：肝炎基因诊断芯片可检测肝组织及血清中HBV DNA，诊断准确率高，假阳性率低。