介绍一种新瑞──姬氏染色法

本文采用一定量的表面活性剂与瑞－姬氏染色液进行联合使用，并对染色时间与着色情况进行观察，经门诊使用，其结果十分满意，现介绍如下：1试剂配制取瑞氏粉1．4克，姬姆萨氏粉1．0克，中性住油10毫升，3％过氧化氢1．0毫升，依次加入500毫升甲醇中，再加入Tween－20、1．0～20毫升，充分混匀，并不定时振搞．第二天即可使用，长久保存。2染色方法将制好的血片待于后，先加入染液使覆盖子拉个血股，接后加入2滴缓冲液（也可以加人蒸馏水代替），使与染液混合，经互～2分钟染色，用清水冲击集液待自然干燥或者用滤纸吸干，油镜下分类。3结…     

白血性白血病与白细胞直方图关系的观察

我们应用Hemalaser－3型三分类血液分析仪观察了25例白血性白血病中间细胞的比例与白细胞直方图的改变现将结果报告如下。1材料与方法1．1对象：25例白血病患者均为我院住院或门诊病人，都经骨髓穿刺确诊，其中急淋8例、急非淋15，慢粒2例。1．2方法：用法国Sebla公司生产的Hemalaser－3型Sebia三分类血液分析仪。要求检测病人血液所用的试剂均由Sebia公司配套提供。每例血片用瑞氏染色后，油镜下分类100个白细胞。2结果按照该仪器使用参数，中间细胞正常范围0．12以下。超过0．12，必须用显微镜镜拉。结果8例急淋，中间细胞在0．12以下者…     

眼轴长度及性别对近视患者角膜曲率的影响

目的探讨影响近视患者中央角膜曲率（Kmean）及球镜屈光度的因素。方法2008年3月～8月，使用角膜地形图测量157例（313眼）近视患者Kmean和角膜后表面高度。用A超测量眼轴长度和中央角膜厚度．验光测出球镜屈光度。分析可能影响Kmean及球镜屈光度的多个因素。其中男79例（157眼），女78例（156眼）；年龄18-45岁，中位年龄20岁。近视病程1～30年。近视球镜屈光度（-5．65±2．74）D。结果眼轴长度、中央角膜厚度、角膜后表面高度、眼压、Kmean和球镜屈光度分别为：（26．00±1．04）mm、（540．50±31．02）um、（26．96±6．05）um、（17．05±2．48）mmHg（1mmHg=0．133kPa）、（43．30±1．46）D、（-5．65±2．27）D。Kmean的影响因素有：眼轴长度（β1=0．411，P=0．000）、性别（βi=-0．278，P=0．000）、中央角膜厚度（βi=-0．180，P=0．000）（Kmean（D）=63．9790．599×眼轴长度（mm）-0．813×性别（男=1，女=0）-0．009x中央角膜厚度（um），R=0．583，F=25．804，P=0．000）]。球镜屈光度的影响因素有：眼轴长度（βi=-0．911，P=0．000）、Kmean（βi=-0．477，P=0．000）和性别（βi=0．183，P=0．000）[球镜屈光度（D）=76．5851．990×眼轴长度（mm）0．714×Kmean（D）＋0．801x性别（男=1，女=0），R=0．837，F=117．295，P=0．000）]。结论眼轴长度、中央角膜厚度和性别都对Kmean有影响，眼轴增长是近视的主要原因。     

防止细菌污染油镜的简易方法

在细菌形态学显微镜检查中,使用后的油镜头不能用物理或化学方法进行消毒处理。我们用无色透明薄膜(涤纶薄膜为佳)贴于未干的染色玻片上,并在薄膜上加香柏油一滴,再用油镜观察,即可有效地防     

用液体石蜡进行油镜观察

在多年的临检工作中,我们经过反复实践,采用液体石蜡作为滴剂进行油镜观察,效果理想。介绍如下:(1)液体石蜡价格低,易于获得;(2)不污染镜头;(3)油镜观察后,用纱布轻擦即可除去镜头及片子上的石蜡,不需用二甲苯;(4)不使片子脱色,便于片子保存。用液体石蜡进行油镜观察@孙明山$沛县华佗医院!江苏221600液体石蜡;;油镜观察     

2型糖尿病与线粒体tRNAleu(UUR)基因变异

目的探讨线粒体tRNA^leu（UUR）基因3243（A→G），3256（C→T），3290（T→C）3个位点的突变与武汉地区2型糖尿病的关系。方法采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）对326名个体（156例2型糖尿病患者，170例健康对照）的线粒体tRNA^leu（UUR）基因3243（A→G），3256（C→T），3290（T→C）3个位点进行筛选，对突变位点用直接测序方法进行确证。结果两组均未检出3243（A→G），仅在糖尿病组检出3290（T→G）和3256（C→T）突变各1例。两组间突变频率差异无统计学意义。结论线粒体tRNA^leu（UUR）基因3243（A→G），3256（C→T），3290（T→C）突变可能不是武汉地区2型糖尿病的突变热点。     

2型糖尿病线粒体ND1基因3个新突变位点的分析

目的 探讨线粒体DNA tRNA Leu（UUR）基因和ND1基因点突变（np 3243、3316、3394和3593）与湖北人群2型糖尿病的相关性。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP），克隆和测序的分析方法，对184例2型糖尿病患者和210名健康对照进行筛选，并用DNAMAN、Primer、mfold和Antherprot软件对检出的突变位点进行分析和二级结构预测。结果 实验组检出3316（G→A）突变6例（3．3％），3394（T→C）突变5例（2．7％），3593（T→C）突变1例（0．5％），并发现3个尚未见报道的新突变位点：3606（A→G）、3618（T→C）和3688（G→C），未检出3243（A→G）突变；对照组只检出3316（G→A）突变1例（0．5％）。两组间仅3394（T→C）突变率差异有统计学意义（P〈0．05）。3606（A→G）和3618（T→C）突变分别为亮氨酸、苯丙氨酸的无意义突变，其二级结构均与野生型ND1同；3316（G→A）突变（丙氨酸→苏氨酸），3394（T→C）突变（酪氨酸→组氨酸），3593（T→C）突变（缬氨酸→丙氨酸），3688（G→C）突变（丙氨酸→脯氨酸），均引起ND1因DNA和蛋白质二级结构的改变，其中3394（T→C）突变型变化最显著。结论 线粒体DNA ND1基因3394（T→C）突变以及3688（G→C）突变伴随3316（G→A）突变，可能与2型糖尿病的发生发展有关。     

EDTA致假性血小板减少一例

假性血小板较罕见，原因有；一是使用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝剂且血中含EDTA依赖性抗体，二是标本中含血小板自身抗体的冷凝集素．最近我们发现一例因EDTA所致的假性血小板减少。现报道如下。1方法1．1仪器法　　采集静脉血1．0ml加入盛有EDTA·K（15g／dl）20μl的硅化试管中，于MedonicCA－610型血细胞分析仪，按操作规则进行分析，全套试剂由Medonic公司提供．1．2手工法　　用许汝和稀释液按《全国临床检验操作规程》（第二版）的操作步骤进行计数．1．3涂片镜检法　将抗凝血及非抗凝血分别推片，在显微镜下观察血小板有无簇…     

介绍一种白前与再障的早期鉴别方法

本文采用血液浓集涂片法，对全血细胞减少或任一二系血细胞减少的20例患者进行检查，其中有二例查出幼稚细胞，经骨髓穿刺检查，诊断为骨髓增生异常综合症（MDS）。1材料与方法1·1ACD保养液葡萄糖3g，拘檬酸钠1.33g．构檬酸0.47g，加蒸馏水100ml。1．2检查对象全血细胞减少或任一、二系血细胞减少的患者。1．3方法取ACD保养液1．0ml于试管内，抽静脉血4．0ml，于盛有保养液的试管中，然后以2000r／min离心5min，弃去上清液，用滴管吸取白细胞层放入小试管中，然后以3000r／min离心5min，弃去上清液，吸白细胞层制片，干后瑞氏染色油复…     

颈部肿块穿刺细胞学检查105例分析

本文采用细针穿刺肿块进行细胞学诊断，对我院1989年6月～1993年5月间105例颈部肿块病人检查，现作总结报告；1检查方法将7～9号针头利人肿块，反复抽吸，并将吸出物作谅片，用瑞一姬氏染葱杂色．镜检时首先用低倍镜观察全片，可疑细胞再用高倍镜或油镜观察作最后判断。2检查结果查出恶性肿瘤36例，与病理组织学检查结果的符合率为91．7％（33／36），其中淋巴结转移癌25例（不符合2例），淋巴瘤5例，甲状腺癌3例（不符合1例）；良性肿瘤及病变69例，其中增生性淋巴结炎25例，慢性淋巴结炎20例，甲状腺瘤10例，淋巴结结核5例，诞腺炎3例，诞…     

应用液态基因芯片技术对132例β-地中海贫血基因检测分析

目的用液态基因芯片技术检测深圳东部地区人群中β-地中海贫血分析常见类型。方法采用液态基因芯片技术，使用Luminex100多功能悬浮点阵检测仪及Lumi2 nex Data Collectorvisionl．7数据收集软件检测并通过突变标本与正常标本的莹光强度比值（Mutan／Normal）分析深圳东部地区人群5637例标本。结果发现132例携带β-地中海贫血突变基因，携带率为2．34%。其中常见点突变模式中CD41／42（TCTT）突变61例（占46．2％），IVS2—654（C→T）29例（21．9％），-25（A→G）突变14例（10．6％），-13（A→T）突变11例（8．3％），CD71／72（＋A）5例（3．8％），-29（A→G）突变杂合3例（2．27％），28（A→G）复合CD41／42-TCTT突变7例，其他少见杂合点突变2例，常见单点突变β-地中海贫血患者共123例为93．18％，少见模式和多点杂合突变共9例，为6．82％。     

低值血小板总数与血小板分布密度的关系

目的探讨血小板总数与血涂片血小板分布密度的关系。方法取抗凝静脉血，经SysmexXE-2100全自动血细胞分析仅测定、SP—1000i推片机推片、染色后，选取血小板计数在90X]09／L以下的标本手工法计数，将手工法和血细胞分析仪法计数结果相近的标本的血涂片在显微镜下复检。观察连续的50个视野，记录每一个视野内血小板数量及零视野数目。结果150例血小板计数在90×109／L以下的标本中，血小板总数〈20×109／L，每油镜视野平均血小板数0—3个，零视野教目占20—50％；血小板总数在20～40×10^9／L，每油镜视野平均血小板数2—5个，零视野数目占10—16％；血小板总数在41～60×10^9／L，每油镜视野平均血小板数4—7个，零视野数目〈5％；血小板总数在61～90×10^9／L，每油镜视野平均血小板数5-10个，无零视野。结论对真性血小板降低（〈90X109／L）的标本，直接显微镜复检时，将每一视野血小板的数量和零视野数结合起来可较好地评估血小板数量。     

用液体石蜡进行油镜观察

在多年的临检工作中,我们经过反复实践,采用液体石蜡作为滴剂进行油镜观察,效果理想.介绍如下:(1)液体石蜡价格低,易于获得;(2)不污染镜头;(3)油镜观察后,用纱布轻擦即可除去镜头及片子上的石蜡,不需用二甲苯;(4)不使片子脱色,便于片子保存.     

人Regucalcin cDNA真核表达载体的构建及表达

目的构建人regucalcin（RGN）全长cDNA的真核表达载体，观察其在人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2细胞）中表达。方法用RT-PCR技术扩增获得人HK-2细胞RGN全长cNDA，将扩增的产物连接入pMD18-T克隆载体上。将重绢质粒转化人大肠杆菌DHSa内并提取质粒，双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确，再用双酶切方法将RGN基因定向连接到真核表达载体DECFP-NI中，构成pEGFP-RGN，将pEGFP-RGN转化人大肠杆菌DHSa内并提取质粒，双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确。再用双酶切方法将RGN基因与EGFP定向连接到真核表达载体pcDNA3．1（＋）-zeocin中，构建真核表达pcDNA3．1-RGN-EGFP-zeo的重组体。将pcDNA3．1-RGN．EGFP-zeo转化人大肠杆菌DHSa内并提取质粒，双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确，用脂质体转染入HK-2细胞。荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察pcDNA3．1-RGN-EGFP-zeo表达情况。结果RGNcDNA全长是897bp。以此构建的pcDNA3．1-RGN-EGFP-zeo真核表达载体，经DNA测序与GenBank中的人RGNcDNA序列一致。荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察到pcDNA3．1-RGN-EGFP-zeo转染的细胞中有绿色荧光蛋白的表达。结论本实验成功构建了pcDNA3．1-RGN．EGFP．zeO真核表达质粒，并在HK-2细胞中表达。     

内镜的保养及常见故障的排除

内镜是一种精密的医疗仪器，品种繁多，性能不尽相同。使用者应熟悉其基本构造及各部件的性能，正确地操作，精心地保养、定期检查，才能防止故障发生，延长使用寿命。现根据我们的经验介绍如下：1内镜的保养1．1使用前的准备及检查是保证临床诊断与治疗工作顺利进行的重要条件。1．1．1主机和光源电源应连接在带有地线的电源插座上，电源线插头及插座不能随意乱接，以免损坏主权。主机不宜与吸引器、高频电灼器连接在同一电源上，避免启动时造成电压波动，干扰电子影像。1．1．2镜身的维护（1）从镜柜中取出内镜时，应一手拿住控制部，另一…     

1型糖尿病大鼠心肌病变及转化生长因子β1和结缔组织生长因子表达的变化及意义

目的探讨不同病程糖尿病模型大鼠心肌的病理变化及转化生长因子β1（TCF-β1）和结缔组织生长因子（CTCF）的表达变化及意义。方法腹腔注射链尿佐菌素（65mg／kg）建立SD大鼠1型糖尿病模型，分别于4、12、24周检测心肌羟脯氨酸含量（HPC），Masson染色观察胶原纤维容积分数（CVF）及血管周围胶原面积（PVCA），用免疫组织化学法对心肌胶原蛋白（Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ）、TGF—β1和CTGF在心肌的分布及表达进行半定量分析，心肌光镜与透射电镜观察，并与同龄正常大鼠进行比较。结果①与对照组相比，糖尿病组大鼠心肌纤维化指标HPCI4周：（134．67±37．86）、（184．30±31．26）μg/g，12周：（151．17±21．59）、（202．80±40．06）μg／g，24周：（169．67±48．27）、（250．17±53．96）μg/g，P均〈0．05]、CVF[4周：（3．38±0．70）％、（5．68±0．93）％，12周：（4．76±1．34）％、（11．17±1．65）％，24周：（6．08±0．88）％、（13．36±0．85）％，P均〈0．05]、PVCA[4周：（26±13）％、（58±18）％，12周：（36±15）％、（93±33）％，24周：（54±44）％、（154±57）％，P均〈0．05]、Collagen Ⅰ[4周：（1．33±0．33）×10^3、（4．55±0．74）×10^3，12周：（2．16±0．11）×10^3、（6．06±0．73）×10^3，24周：（3．00±0．32）×10^3、（7．20±0.18）×10^3，P均〈0．05）、Collagen Ⅲ[4周：（1．56±0．23）×10^3、（3．42±1．40）×10^3，12周：（2．93±0．40）×10^3、（5．58±1．29）×10^3，24周：（3．25±0．26）×10^3、（4．20±0．17）×10^3，P均〈0．05]表达均明显增高。电镜发现糖尿病组心肌细胞肌丝稀疏，线粒体肿胀，间质胶原增生。②与对照组相比，糖尿病组TGF-β1[4周：（1．15±0．14）×10^3、（2．13±0．49）×10^3，12周：（2．96±0．24）×10^3、（5．28±0．24）×10^3，24周：（3．25±0．65）×10^3、（4．41±0．73）×10^3，P〈0．05]和CTGF的表达[4周：（2．28±0．86）×10^3、（5．98±1．38）×10^3，12周：（3．92±0．91）×10^3、（6．47±0．50）×10^3，24周：（4．54±1．01）×10^3、（7．85±1．45）×10^3，P均〈0．05]表达均明显增高。TGF-β13个月时达高峰，6个月时减少；CTGF随病程进展逐渐增高（F=4．06，P〈0．05）。结论早期糖尿病大鼠模型已出现心肌纤维化改变，糖尿病心肌纤维化与TGF-β1、CTGF表达增强有关。     

基因芯片技术检测结核分支杆菌耐利福平基因突变的研究

目的建立基因芯片检测结核分支杆菌耐利福平基因突变，结合基因测序和常规药物敏感性试验进行比较，探讨其实用价值。方法根据结核菌rpoβ基因突变特点，设计不同的寡核苷酸探针，点样制备可检测rpoβ基因突变的芯片，检测利福平（Rifompicin，RFP）株的rpoβ变异情况。结果137株临床分离结核菌，49株耐RFP，占35．8％，平均MIC为179．6±135．0ug／mL。Rpop突变率为95．7％（47／49），主要为点突变。突变点依次为531 Ser（TCG）→Leu（TTG）（40．8％）、531 Ser（TCG）→Trp（TGG）（12．2％）、526 His（CAC）→Tyr（TAC）（6．1％）、526His（CAC）→Asp（GAC）（6．1％）。526 His（CAC）→Asn（AAC）（6．1％）、526 His（CAC）→Pro（CCC）（8．2％）、516Asp（GAC）→Val（GTC）（12．2％）、533 Leu（CTG）→Arg（CGG）（4．1％）和513 GIn（CAA）→Pro（CCA）（2．1％）。结论本研究建立的检测结核菌rpoβ基因突变的基因芯片技术敏感性高，特异性强，可应用于结核菌耐RFP基因的检测。     

UF-100尿沉渣分析仪与相差显微镜在血尿来源鉴别中的比较

目的 评价UF-100与相差显微镜在血尿来源鉴别中的价值。方法 选取肾内科门诊病例95例和住院病例86例，分别用UF-100与相差显微镜检查分析尿液中红细胞的信息。结果 对于门诊来源病例和住院来源病例，UF-100检查的敏感性（100％和96．8％）高于相差显微镜（87．9％和85．5％），P〈0．05；而相差显微镜的特异性（72．6％和91．7％）高于UF-100（51．6％和58．3％），P〈0．05。结论 UF-100与相差显微镜结合使用是血尿来源鉴别的最好策略。     

乳酸杆菌和线索细胞对细菌性阴道病的诊断231例分析

目的：探讨细菌性阴道病（BV）患者阴道乳酸杆菌的变化以及CTB染色涂片发现线索细胞与传统的Amsel，s标准法在诊断BV中的应用价值。方法：我院门诊患者231例，在按Amsel＇s标准法操作的同时行CBT染色，在油镜下观察乳酸杆菌的数量以及查找线索细胞。结果：共检出62例BV患者，其中乳酸杆菌＋＋＋＋者无（0％），＋＋＋者1例（1．61％），＋＋者1例（1．61％），＋者9例（14．52％），82．26％的BV患者乳酸杆菌消失。用CBT染色寻找线索细胞阳性44例，敏感性71．0％；特异性98．2％；阳性预测值93．2％；阴性预测值98．4％。结论：在常规的Amsel＇s法的同时，行CBT染色，油镜下观察线索细胞的同时结合乳酸杆菌缺失的特点，有望提高检出率。     

表观扩散系数在诊断小脑原发肿瘤的应用价值

目的：表观扩散系数（Apparent diffusion coemcient，ADC）能反映肿瘤细胞的微观状态，本文探讨其对小脑原发肿瘤的诊断价值。方法：对44例经手术病理证实的小脑原发肿瘤的MRI资料进行回顾性分析，包括11例血管母细胞瘤，12例毛细胞型星形细胞瘤，11例髓母细胞瘤，6例室管膜瘤，2例淋巴瘤，2例脉络丛乳头状瘤。全部病例均行MRI常规扫描，弥散加权成像（Diffusion-weighted imaging，DWI）及ADC值测量，对前4种肿瘤的绝对ADC值、相对ADC值在Stata9．0上进行单因素方差分析及Bonferronitt检验。结果：不同肿瘤间的绝对ADC值及相对ADC值均有差异（P〈0．001），血管母细胞瘤的ADC值【（1．97±0．214）×10^-3mm^2/s）】要明显高于毛细胞型星形细胞瘤【（1．643±0．223）×10^-3mm^2／s]（P=0．001），髓母细胞瘤的ADC值【（0．698±0．124）×10^-3mm^2/s】明显低于室管膜瘤【（1．062±0．148）×10^-3mm2／s】（P=0．003），毛细胞型星形细胞瘤则明显高于室管膜瘤（P〈0．001）；脉络丛乳头状瘤亦有较高的ADC值，而淋巴瘤有较低的ADC值。在髓母细胞瘤、室管膜瘤、毛细胞型星形细胞瘤及血管母细胞瘤这4种肿瘤中，取〈0．8×10^-3mm^2/s、（0．9-1．2）×10^-3mm^2／s、（1.3-1．7）×10^-3mm^2/s、〉2．1×10^-3mm^2／s分别作为上述肿瘤的ADC值的界值时，可获得100％的特异性。结论：ADC值是诊断小脑肿瘤的简便而实用的工具。