p53家族新成员p63,p73与头颈部肿瘤

p53是研究较为广泛的抑癌基因，随着p53的广泛和深入研究，其家族成员p63与p73陆续被发现后，即成为人们关注的热点。本文就p63、p73的表达类型、结构和功能及其与头颈部肿瘤的相关性作一综述。     

rAd-p53联合放化疗治疗晚期头颈部鳞状细胞癌

p53基因是迄今为止发现与人类肿瘤相关性最高的基因,在头颈部癌中,p53基因在喉癌、上颌窦癌、唾液腺癌、鼻咽癌等中均可见到阳性表达,而以复制缺陷型重组腺病毒为载体的p53基因替代疗法作为一种肿瘤治疗的新方法在头颈部鳞状细胞癌（鳞癌）中取得了很好的疗效,且临床应用安全。自2006年3月至2006年12月,我科应用重组人p53腺病毒（recombinant adenovirus—p53,rAd—p53,商品名为今又生）注射液对14例局部晚期或复发性头颈部鳞癌联合放化疗进行治疗,获得了较好的近期疗效,报道如下。     

p14^ARF基因抑制喉癌细胞生长及其对内源性p53表达的影响

目的 探讨p14^ARF对喉癌细胞生长及其对内源性p53表达的影响，为喉癌致癌的分子机理和基因治疗提供理论基础。方法 采用基因转染技术，将全长野生型p14^ARF互补DNA（complementary DNA,cDNA）转染到人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中，利用流式细胞仪、聚合酶链的 （polymerase chain reaction,PCR）和Western-Blotting等方法研究其对细胞周期、内源性野生型p53表达的影响。结果 转染p14^ARFcDNA48h后，处在G0－G1和G2－M工 细胞皆增加了1倍。同时Western-Blotting分析结果表明，内源性野生型p53表达明显上升。结论 p14^ARF基因能上调Hep-2细胞中内源性野生型p53的表达并阻滞细胞于G0－G1和G2－M期，从而抑制其 生长。     

喉癌p53基因异常的临床意义

目的p53基因异常是恶性肿瘤发生发展中常见的现象,但其临床意义仍存在争议。回顾性研究喉癌p53蛋白过度表达,并分析其与临床病理特征和致癌危险因素之间的关系,以探求p53基因异常可能的致病机制和预后判断方面的意义。 方法 以100例手术切除的喉癌标本为研究对象,收集并记录诊断时的临床参数和致癌危险因素,用免疫组化法检测p53蛋白表达。 结果100例喉癌标本中p53蛋白的阳性表达率为66％;检测中发现p53蛋白表达与年龄、性别、饮酒程度、肿瘤部位、临床分期和病理分级等临床病理参数之间无关联(P>0.05)。 结论p53基因异常与喉癌的发生发展有关,与喉癌预后无关。     

p63与头颈部鳞癌

随着p53基因的广泛和深入研究,p53家族的新成员p63与p73陆续被发现.本文就p63的表达类型、结构、功能及与头颈部肿瘤的相关性作一综述.p63基因定位于染色体3q27-29,与p53有高度的同源性,与p53不同的是其可以编码多种蛋白质.发现p63主要表达鳞状上皮源性的恶性肿瘤.     

p63基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

p63基因是由Osada于1998年发现的另一个p53基因家族成员，定位于3q27-3q29。p63与p53蛋白具有非常相似的结构和功能，目前已被认为是一个候选抑癌基因。我们应用原位杂交方法分别检测喉鳞状细胞癌、癌旁增生组织、非典型增生组织和声带息肉中的p63基因表达程度，藉以探讨     

p53、p63、p73在鼻腔鼻窦恶性肿瘤中表达的临床意义

目的:探讨p53、p63、p73在鼻腔鼻窦恶性肿瘤中表达的临床意义及相关性。方法:用免疫组织化学方法检测67例鼻腔鼻窦恶性肿瘤、36例癌旁组织和36例鼻腔鼻窦的非癌组织中p53、p63和p73的表达。结果:p53、p63在鼻腔鼻窦恶性肿瘤中的阳性表达率明显高于癌旁和非癌组织(均P<0.01),p53与p63在鼻腔鼻窦恶性肿瘤中的表达存在正相关(P<0.01);p73在鼻腔鼻窦恶性肿瘤、癌旁和非癌组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:p53与p63在鼻腔鼻窦恶性肿瘤的发生发展过程中可能存在相关性,是鼻腔鼻窦恶性肿瘤发生过程中的重要因素之一,而p73在鼻腔鼻窦恶性肿瘤的发生过程中可能不发挥作用。     

反转录病毒介导的野生型p53基因诱发人喉癌细胞凋亡的实验研究

为探讨抗癌基因在肿瘤治疗中作用的可能性，以反转录病毒N2A为载体，将p53cDNA及顺式作用元件反向插入N2A两端LTR间的XhoⅠ位点，获得了野生型p53基因反转录病毒重组体。将该病毒重组体转染单向性包装细胞系ψ－2和双向性包装细胞系PA317）筛选后扩增有抗性的细胞克隆，用其产生的新鲜病毒颗粒感染p53基因表达异常的人喉癌细胞系（Hep2）。发现有前病毒整合的受体细胞，细胞染色质浓缩周边化，细胞肿胀，出现凋亡小体，基因组DNA电泳图谱呈阶梯状改变。结果表明反转录病毒介导的野生型p53基因能不同程度地诱导人喉癌细胞凋亡。     

P53蛋白及CD44变异体在喉癌中的研究进展

p53基因是一种肿瘤抑制基因，当其缺失或突变时则成为许多肿瘤的始因之一，而肿瘤的转移能力与CD44的异常表达明显相关，研究表明，p53蛋白和CD44变异体在喉癌组织中的表达有助于了解喉癌的发生、发展、分化程度及预后，对喉癌的治疗提供了生物学依据。     

肿瘤的多药耐药与p53

P糖蛋白（P-glycoprotein，P-GP，ABCBl）是肿瘤多药耐药中机制发现最早的。随着研究的不断深入，人们发现它的转录和表达与p53抑癌基因有一定的联系。一些研究表明野生型p53可以下调或者抑制P-GP启动子，而突变型p53可以激活或者上调P-GP启动子。     

Survivin基因在喉癌组织中的表达

目的探讨Survivin基因在喉癌组织中的表达,并分析与p53基因的表达、微血管形成以及临床病理因素的关系。方法应用免疫组化SP法检测Survivin、p53、CD34蛋白在40例喉癌组织中的表达情况,并与临床病理资料一起进行统计分析。结果Survivin蛋白在正常喉黏膜组织中不表达,40例喉癌组织中23例表达阳性,占57.5%。在P53蛋白表达阳性、阴性的喉癌组织标本中,Survivin蛋白阳性率分别为73.1%(19/26)和28.6%(4/14)(P=0.007)。Survivin蛋白阳性表达的病例中,平均瘤内微血管密度明显高于Survivin蛋白阴性表达的病例(P<0.001)。Survivin蛋白异常表达与喉癌临床分期、病理分级、颈淋巴结病理转移有关。结论Survivin基因在喉癌中存在高表达,并与p53基因突变、肿瘤微血管形成关系密切,Survivin异常表达可能在喉癌发生、发展及转移过程中发挥重要的抗凋亡作用。     

喉癌中maspin与p53表达的相关性

目的 观察喉癌中maspin和p53蛋白的表达,探讨maspin和p53在喉癌发生、发展中的作用。方法 采用免疫组化法检测78例喉鳞癌组织中maspin和p53蛋白。结果 在喉癌中maspin阳性表达率为55.1%(43/78),maspin表达下降与病理分化程度低、淋巴结转移有关。p53阳性表达率为58.9%(46/78)。在maspin阳性表达的43例喉癌中,p53阳性表达率为79.1%,maspin阴性表达的喉癌中,p53阳性表达率为34.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示,maspin在喉癌组织中的表达与p53呈负相关性,有统计学意义(rs=-0.381, P=0.006)。结论 maspin在喉癌的发生发展中起一定抑制作用。喉癌中maspin表达与p53表达呈负相关,maspin可能是p53的效应基因。     

p14ARF基因抑制喉癌细胞生长及其对内源性p53表达的影响

目的探讨p14ARF对喉癌细胞生长的抑制作用及其对内源性p53表达的影响,为喉癌致癌的分子机理和基因治疗提供理论基础。方法采用基因转染技术,将全长野生型p14ARF互补DNA(complementaryDNA,cDNA)转染到人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中,利用流式细胞仪、聚合酶链反应（polymerasechainreaction,PCR)和Western-Blotting等方法研究其对细胞周期、内源性野生型p53表达的影响。结果转染p14ARF基因的Hep-2细胞的生长受到明显抑制,其克隆形成能力为转染空载体的57％。细胞分析表明,转染p14ARFcDNA48h后,处在G0-G1和G2-M期的细胞皆增加了1倍。同时Western-Blotting分析结果表明,内源性野生型p53表达明显上升。结论p14ARF基因能上调Hep-2细胞中内源性野生型p53的表达并阻滞细胞于G0-G1和G2-M期,从而抑制其生长。     

肿瘤的多药耐药与p53

P糖蛋白(P-glycoprotein,P-GP,ABCBl)是肿瘤多药耐药中机制发现最早的。随着研究的不断深入,人们发现它的转录和表达与p53抑癌基因有一定的联系。一些研究表明野生型p53可以下调或者抑制P-GP启动子,而突变型p53可以激活或者上调P-GP启动子。     

鼻咽癌细胞中MDM2基因的扩增与表达及其与p53的表达、EB病毒潜伏感染、细胞增生的关系(英文)

目的：明确鼻咽癌（NPC）细胞中小鼠双微粒体基因（MDM2）的扩增与表达情况及其作用。方法：应用斑点杂交、半定量逆转录一多聚酶链反应技术、原位杂交、免疫组化分别对NPC、慢性鼻咽炎症粘膜CINE）进行MDM2基因扩增与表达的检测;运用免疫组化、PCR分别对NPC、CINE中p53表达、PCNA和Ki67指数、EB病毒DNA进行检测;同时分析MDMZ的过表达与p53表达、PCNA和Ki67指数、EB病毒潜伏感染、NPC各临床病理参数的关系。结果：3．1％的NPC有MDM2基因的扩增,30.8％有MDM2mRNA高表达,30.4％有MDM2蛋白的过表达;MDM2的过表达与p53表达（p＜0.05）、NPC颈淋巴结转移相关（p＜O．05）,而与EBV潜伏感染,PCNA和Ki67指数、NPC的T分期、NPC病人的年龄、性别、EBVCA-IgA滴度无关。结论：MDM2基因在NPC组织中的主要活化方式是过表达而不是扩增;MDM2基因可能通过与p53相互作用而NPC的发生和转移过程中起着重要作用。     

喉癌中p53蛋白与VEGF表达的相关性研究

目的检测、比较分析喉癌中p53蛋白与VEGF的表达及平均瘤内血管密度的相关性.方法采用S-P免疫组织化学的方法检测62例喉癌术后标本中p53蛋白和VEGF的表达,并计算其平均瘤内血管密度;同时采用SPSS统计软件分析p53蛋白与VEGF的表达及瘤内血管密度的相关性.结果 62例喉癌中,33例p53蛋白阳性,38例VEGF阳性,平均瘤内血管密度为(34.58±11.23)mv;p53蛋白阳性的33例中,25例VEGF表达阳性,平均瘤内血管密度为(39.65±10.66)mv;29例p53蛋白阴性的病例中,13例VEGF表达阳性,平均瘤内血管密度为(30.45±11.76)mv;统计学处理发现p53蛋白阳性的病例中,VEGF表达的阳性率高于p53阴性的病例,平均瘤内血管密度高于p53阴性的病例.结论喉癌中VEGF的表达、平均瘤内血管密度与p53蛋白的表达呈正相关,mut-p53基因可能具有促进喉癌中VEGF表达、促进喉癌中微血管形成,进而促进喉癌细胞的侵袭与转移的作用.     

喉鳞状细胞癌手术切缘分子水平亚健康与预后关系研究

目的：从分子水平判定喉鳞状细胞癌（LSCC）切除范围的彻底性及与预后的关系。方法：用免疫组织化学方法检测23例LSCC患者手术切缘组织中癌基因EGFR和抑癌基因p53、p27以及与凋亡有关的Bcl-2蛋白的表达情况，并通过随访观察其与肿瘤复发的关系。结果：23例LSCC患者中20例手术切缘组织细胞病理检测为阴性，其中p53阳性3例（15％），p27阳性11例（55％），Bcl-2阳性7例（35％），EGFR阳性3例（15％）。有4例肿瘤局部复发，其p27均为阴性；2例Bcl-2阳性；p53和EGFR均为阴性。结论：用免疫组织化学方法检测LSCC手术切缘EGFR、p53、p27、Bcl-2水平来判断手术范围是可行的，其中p27蛋白表达较为重要，但应同时检测多种基因。     

重组人p53腺病毒注射液联合化疗治疗喉癌

目的:观察重组人p53腺病毒注射液(rAd2p53)瘤内注射联合顺铂加紫杉醇方案化疗与单纯化疗对喉癌动物模型的治疗效果,试图为此方法的临床应用提供实验室依据。方法:利用喉癌Hep-2细胞系小鼠背部注射建立喉癌的荷瘤动物模型,实验组在荷瘤部位瘤内注射重组人p53腺病毒注射液并静脉注射顺铂加紫杉醇;对照组1单纯瘤内注射p53腺病毒注射液;对照组2单纯静脉注射顺铂加紫杉醇,观察肿瘤治疗前后瘤体大小变化。结果:基因联合化疗治疗组肿瘤生长明显受抑制,疗效显著优于单纯基因及单纯化疗组。结论:重组人p53腺病毒注射液(rAd2p53)联合顺铂加紫杉醇方案化疗可显著提高喉癌治疗效果。     

生长抑制基因1在喉鳞状细胞癌中的突变检测及与p53蛋白表达关系的研究

目的:研究喉鳞状细胞癌组织中生长抑制基因1(ING1)基因的突变情况,并探讨p33ING1b与p53蛋白表达的关系。方法:抽提33例石蜡固定喉鳞状细胞癌组织DNA,PCR扩增ING1第2外显子序列,测序检测突变情况;免疫组织化学法检测喉鳞状细胞癌p33ING1b蛋白与p53蛋白的表达水平,并分析两者之间的关系。结果:喉鳞状细胞癌组织中ING1基因无突变现象,但2例组织中出现编码区第170个密码子核苷酸多态性位点,由GGG变为AGG;免疫组织化学检测结果显示p33ING1b、p53蛋白表达与喉鳞状细胞癌临床病理参数之间无相关性。但配对χ2分析显示p33ING1b、p53蛋白表达有明显差异,在p53阳性的病例中,p33倾向于阴性表达。结论:喉鳞状细胞癌中ING1基因的突变较少见,在正常生理环境中,p33ING1b可能与野生型p53蛋白协同发生作用。     

凋亡抑制基因Livin在喉癌组织中的表达及其与p53、Bcl-2表达的相关性研究

目的　探讨凋亡抑制基因Livin在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）组织中的表达及其与p53和Bcl-2表达的关系,探讨Livin在LSCC 中的作用机制。方法　收集LSCC标本42例,声带息肉组织20例,采用免疫组织化学SP法检测LSCC组织和声带息肉组织中Livin、p53和Bcl-2蛋白的表达。结果　LSCC中Livin表达阳性率为71.4%（30/42）,显著高于声带息肉组织（χ 2=27.679,P <0.01）。临床分期Ⅲ+Ⅳ期Livin阳性表达率显著高于Ⅰ+Ⅱ期（χ 2=7.087,P <0.01）;有淋巴结转移者的Livin阳性表达率高于无淋巴结转移者（χ 2=5.458,P <0.05）。Livin蛋白的表达与p53蛋白表达呈正相关（r =0.665,P <0.05）,与Bcl-2蛋白表达呈正相关（r =0.657,P <0.05）。结论　Livin在LSCC组织中异常表达,有望成为LSCC诊断和基因治疗的新靶点。凋亡相关基因p53与Bcl-2基因的异常表达在喉癌癌变中起协调作用。