尿激酶型纤溶酶原激活物与类风湿关节炎

关节正常结构和功能的破坏是慢性炎性关节病的一个主要特征,类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)滑膜衬里细胞的过度增殖及大量炎性细胞的浸润导致血管翳形成,最终导致关节软骨和骨的破坏,这些被破坏的软骨和骨组织被认为是由于过度增殖的滑膜细胞分泌大量的蛋白裂解酶而引起的.参与基质降解过程的蛋白裂解酶有四类:金属蛋白酶(明胶酶、胶原酶);胱氨酸蛋白酶(如组织蛋白酶B、D、H、L);天冬氨酸蛋白酶(如组织蛋白酶D);丝氨酸蛋白酶(如纤溶酶原激活剂及它们所激活的产物纤溶酶).     

尿激酶型纤溶酶原激活物系统与肿瘤关系的研究进展

尿激酶型纤溶酶原激活物系统中的某些成分可作为人类肿瘤的预后标志,其中尿激酶型纤溶酶原激活物、其受体和抑制因子尤为重要。学者们对许多肿瘤的浸润、转移和预后与尿激酶型纤溶酶原激活物、其受体和抑制因子的含量之间的相关性进行了研究,结果显示,尿激酶型纤溶酶原激活物、其受体和抑制因子与肿瘤的浸润、转移有明显相关性,可作为预测患者生存情况的指标。     

尿激酶型纤溶酶原激活物与骨性关节炎研究进展

骨性关节炎（Osteoarthritis,OA）是一种多发于老年人的慢性进行性骨关节疾病,是以软骨退行性变为核心,累及骨质、滑膜、关节及关节囊外其他结构的不同程度的炎性病变。骨关节炎的发生发展是一种长期、慢性、渐进的病理过程,与年龄、免疫反应、骨内压升高、酶对软骨的降解、细胞因子等有关。目前骨性关节炎研究中以丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶与软骨退变最为密切,其中属于丝氨酸蛋白酶家族的尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase—type plasminogen activator,uPA）在骨性关节炎的发生发展中发挥着重要作用。     

尿激酶型纤溶酶原激活物在毛囊中的表达

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator,uPA)在毛囊发育过程中的原位表达及在体外培养的毛囊细胞中的表达。方法 用免疫细胞化学（immunocytochemistry,ICC)和原位杂交（in situ hybridization,ISH)技术研究了人及小鼠在毛囊生长周期的不同时期uPA的表达；体外培养小鼠毛囊外根鞘（outer root sheath,ORS)细胞并用ICC方法研究了ORS细胞uPA的表达。结果 在毛囊生长期的早期（即毛囊形成期），毛囊角质形成细胞（keratinocyte,Kc)表达uPA，而其它时期均不表达；体外培养的ORS有uPA表达。结论 uPA与Kc的快速增殖和迁移相关，在毛囊的发育中起重要作用。     

尿激酶型纤溶酶原激活物系统与软骨降解

正常的关节软骨具有耐磨、传导关节负荷、吸收震荡和润滑关节的作用。软骨由软骨细胞、基质、胶原纤维和水份构成,基质和胶原纤维由软骨细胞合成。由于关节炎性病变,软骨进行性降解,最终导致进行性的关节软骨和骨的破坏,目前关节炎研究领域的最新进展已经受到广泛关注的是与细胞外基质成分降解相关的几种酶系统,而在关节软骨破坏的病理生理过程中发挥重要作用的两种蛋白酶为金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶系统。近年来研究表明,尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase—type plasminogen activator,uPA）介导的细胞外基质蛋白裂解作用与炎性关节疾病中关节软骨和骨的破坏密切相关。本文就近年来的研究进展作一综述。     

重组尿激酶型纤溶酶原激活物对实验性肺血栓栓塞症内源性纤溶的影响

目的探讨重组尿激酶型纤溶酶原激活物（ru-PA,又称外源性u-PA）不同用药方案对实验性肺血栓栓塞症内源性纤溶的影响。方法通过颈外静脉注入^125碘（^125I）-标记人纤维蛋白原的大鼠加热血凝块,建立大鼠肺血栓栓塞症（PTE）模型。按随机原则将70只大鼠分成三大组：①假手术组;②PTE溶栓治疗对照组,含4个亚组：PTE 2 h组,PTE 1 d组,PTE 3 d组和PTE 5 d组;③PTE后3 d溶栓组,含2个亚组：多次用药组和单次用药组。用药后2 h处死大鼠,取血、肺及心脏,测量每分钟γ放射性。以10%甲醛固定肺组织,制成组织切片,行苏木精-伊红（HE）染色、Masson染色及原位杂交。结果PTE 2 h、1 d、3 d及5 d组血管栓塞部位内皮细胞u-PA、u-PAR、PAI-1 mRNA及t-PAmRNA的表达均阳性,假手术组均为阴性。定量分析示：①PTE 2 hu-PA及u-PAR mRNA表达最低,3 d最高（P均=0.000）,5 d与1 d比较,差异无统计学意义（P=0.745及0.642）。②PTE 2 h PAI-1的mRNA表达最低（P均=0.000）,PTE 1 d与3 d、5 d组比较,差异无统计学意义（P=0.579及0.757）。③各组间t-PA mRNA表达差异无统计学意义（F=2.0,P=0.127）。④经相关分析,PTE 2 h、1 d、3 d及5 d组u-PAR mRNA与u-PA mRNA表达呈正相关（r=0.700,P=0.024;r=0.658,P=0.039;r=0.666,P=0.035;r=0.774,P=0.009）。多次用药组血管栓塞部位u-PA mRNA表达及溶栓率明显高于单次用药组及对照组（P均〈0.001）,单次用药组明显高于对照组（P均=0.000）。多次用药组u-PAR mRNA表达明显高于对照组（P=0.001）,但与单次用药组比较,差异无统计学意义（P=0.063）。结论外源性u-PA的溶栓效果及对PTE内源性纤溶的影响与不同的用药方案有关。外源性u-PA可作用于u-PA系统,促进内源性u-PA及u-PAR的合成,加强纤溶作用。     

尿激酶型纤溶酶原激活物在女性乳腺癌中的研究

尿激酶型纤溶酶原激活物不仅存在于正常的乳腺组织中,同时还存在于乳腺癌、子宫内膜癌、宫颈癌及卵巢癌等肿瘤组织中。本文旨在通过对尿激酶型纤溶酶原激活物在女性乳腺癌中的研究进展的阐述,更多地了解尿激酶型纤溶酶原激活物与癌细胞浸润转移的关系及其可能的作用机制。     

尿激酶型纤溶酶原激活物对系膜细胞增殖及α-肌动蛋白表达的影响

目的:研究尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)对高糖诱导系膜细胞(MC)增殖及α-肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法:MC分组:对照组(5 mmol/L D-葡萄糖),高糖组(30 mmol/L D-葡萄糖)和uPA组(30 mmol/L D-葡萄糖+不同浓度uPA).分别用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期情况;激光共聚焦观察α-SMA表达.结果:高糖刺激MC增殖率明显增加,uPA呈剂量依赖性的阻止细胞由G0/G1期进入S期,抑制MC增殖.高糖增加α-SMA表达,随着uPA浓度增加,核周α-SMA表达较高糖组明显减少(P＜0.01).结论:uPA抑制高糖诱导的系膜细胞增殖和表型转化,对糖尿病肾小球硬化有一定的治疗作用.     

肾细胞癌尿激酶型纤溶酶原激活物表达的研究

目的　探讨尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)与肾细胞癌生物学行为之间的关系。方法　应用免疫组织化学方法检测 2 5例肾细胞癌组织中uPA蛋白水平的表达。结果　随着肾细胞癌分期的增高和转移的出现 ,uPA表达明显增高。结论　uPA表达在肾细胞癌组织中明显增高 ,uPA与肾细胞癌浸润转移密切相关     

肝细胞癌尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体的表达

目的 研究尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其受体（uPAR）与肝细胞癌（HCC）的关系以及在HCC侵袭转移中的作用。方法 应用原位杂交方法分别检测52例HCC、42例硬化组织和23例正常肝组织中uPA、uPARmRNA的表达。结果 HCC是uPA、uPARmRNA的阳性表达分别为31／52，34／52，明显高于肝硬化组及正常肝组织组（P＜0．05），HCC组包膜侵犯者uPA、uPARmRNA的阳性表达分别为25／34，28／34，与无侵犯者（6／18，6／18）相比，P＜0．01；转移组uPA、uPARmRNA的阳性表达分别为21／26，23／26，与无转移者（10／26，11／26）相比，P＜0．01）结论 uPA、uPARmRNA在HCC中的表达明显升高，uPA、uPARd 表达水平的增高与HCC侵袭转移密切相关。     

尿激酶型纤溶酶原激活物生物传感器的构建及鉴定

目的:构建含有增强型青色荧光蛋白-尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)作用底物(substrate)-黄色荧光蛋白变体(YPet)融合蛋白的真核表达载体(ECFP-uPA substrate-linker-YPet),即uPA的生物传感器。方法:以Src-biosensor为模板,Primer Premier 5.0软件设计YPet引物,设计时5'端引入uPA底物序列及Linker,两端连接酶切位点及保护碱基。以pMD^TM-18T为中间载体,通过基因工程方法构建含有ECFP-uPA substrate-linker-YPet的真核表达载体。然后转染293T细胞,24 h后观察转染效率和融合蛋白表达情况,在荧光显微镜下,应用MetaFlour FRET 4.6软件观察并测量uPA生物传感器荧光共振能量转移(FRET)。结果:经过PCR和双酶切鉴定,克隆片段和酶切片段均与uPA substrate分子大小相符。细胞转染后转染效率达40%。免疫荧光检测,uPA生物传感器在293T细胞膜表达,用重组人uPA(rhuPA)刺激转染细胞可以检测到FRET现象。结论:成功构建uPA生物传感器,该生物传感器能够作为活细胞分子探针用于研究uPA的时空变化。     

胃癌患者尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体的测定

目的 检测胃癌患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活物（u-PA）及其受体（u-PAR）水平,并探讨其与胃癌分类及分级的关系.方法 收集32例胃癌患者和32例正常对照组,采用ELISA法测定血浆u-PA和u-PAR,并对胃癌患者血浆u-PA和u-PAR与胃癌分类及分级进行Pearson相关分析.结果 胃癌患者血浆u-PA和u-PAR水平明显高于正常对照组,血浆u-PA水平为（1291±484）ng/L,高于正常对照组（1035±268）ng/L（t=2.618,P=0.012） 血浆u-PAR水平为（1240±443）ng/L,高于正常对照组（870±266）ng/L（t=4.053,P=0.000）.经Pearson相关分析胃癌患者血u-PA与胃癌分类及分级相关.结论 血浆尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体水平在胃癌患者中明显升高,其中血浆u-PA水平与胃癌分类及分级相关.     

尿激酶型纤溶酶原激活物在鼻咽癌的表达及临床意义

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA)在鼻咽癌组织中的表达情况，临床意义以及Ⅳ型胶原的分布形式。方法 应用免疫组织化学SP，对石蜡包埋的80例鼻咽癌标本和30例慢性鼻咽炎（对照组）标本进行检测。结果 （1）uPA阳性表达率鼻咽癌组织（80．0％）显著高于对照组（16．7％）（P＜0．01）；（2）鼻咽癌组织中uPA阳性表达率在Ⅲ-Ⅳ期（85．90％）高于Ⅰ-Ⅱ期（56．3％）（P＜0．05），有颈部淋巴结转移（87．3％），高于无转移（64．0％），（P＜0．05）；鼻咽癌组织中uPA阳性表达级别Ⅲ-Ⅳ期明显高于Ⅰ-Ⅱ期（P＜0．01），有颈部淋巴结转移也明显高于无转移（P＜0．01）。（3）鼻咽癌组织中Ⅳ型胶原分布均呈崩解缺失型，未见包裹型。结论 uPA在鼻咽癌组织扩散中起重要作用，它与鼻咽癌病期进展和颈部淋巴结转移关系密切，可作为判断鼻咽癌恶性度和估计患者预后的生物学指标。     

中期因子和尿激酶型纤溶酶原激活物在胃癌中的表达及临床意义

目的 检测胃癌组织中中期因子(MK)、尿激酶型纤溶酶原激活物(UPA)的表达,探讨MK、UPA与胃癌的侵袭、转移的关系,并与MK、UPA的相关性进行分析.方法 应用免疫组织化学两步法检测60例胃癌组织(胃癌组)中MK、UPA的表达,并以20例胃癌旁(距离肿瘤边缘5 cm)的正常组织标本作为对照组.结果 胃癌组织中的MK、UPA的表达率分别为63.33%、51.67%,对照组的MK、UPA的表达率分别为25.00%、10.00%,2组比较差异有统计学意义(P＜0.05).浸润全层的MK、UPA的表达高于浸润黏膜层、肌层的胃癌(P＜0.05);低分化的MK、UPA的表达高于中分化胃癌(P＜0.05);有淋巴结转移的MK、UPA的表达高于无淋巴结转移胃癌(P＜0.05).MK与UPA的表达呈正相关(r=0.579,P＜0.001).结论 MK、UPA的表达与胃癌的侵袭、转移密切相关,二者联合检测可作为判断胃癌发展及预后的分子指标.     

卡托普利对内皮细胞分泌组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

目的研究转换酶抑制剂卡托普利对内皮细胞组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响.方法培养肺静脉内皮细胞(ECV304),分别用肿瘤坏死因子(TNF)-α(浓度为5、10、25、50、100μg/L)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)(5、10、25、50、100 nmol/L)刺激,在50μg/L TNF-α刺激的基础上用卡托普利(20、50、100、200 nmol/L)共育,用ELISA的方法检测培养上清中的t-PA和PAI-1的浓度.结果各浓度的TNF-α和AngⅡ刺激24 h后PAI-1的浓度明显增加,与空白对照相比P＜0.05,而t-PA的差异则无统计学意义;各浓度的卡托普利明显抑制TNF-α(50μg/L)诱导的PAI-1分泌增多,P＜0.05,而t-PA的变化不明显.结论TNF-α和AngⅡ可以增加内皮细胞PAI-1的分泌,卡托普利可以抑制TNF-α诱导PAI-1的分泌,而t-PA则不受TNF-α、AngⅡ和卡托普利等因素影响.     

低氧对人鼻咽癌细胞尿激酶型纤溶酶原激活物系统表达的影响

[摘要] 目的 研究低氧微环境对鼻咽癌细胞（CNE-2Z）尿激酶型纤溶酶原激活物（u-PA）系统表达的影响。方法 以混合气体（5% CO2, 95% N2, O2<0.1%）置换法处理24 h,建立CNE-2Z细胞体外低氧培养模型。RT-PCR检测PAI-1、u-PA、u-PAR在CNE-2Z细胞的mRNA表达;酶联吸附法（ELISA）测定PAI-1和u-PA蛋白表达;细胞免疫化学方法检测u-PAR蛋白表达。结果 低氧处理后,CNE-2Z细胞u-PA系统中PAI-1 mRNA和蛋白表达均显著增加（P<0.05）;细胞裂解液中u-PA蛋白含量降低（P<0.001）,但u-PA mRNA含量无显著变化（P＞0.05）;而对u-PAR mRNA和蛋白表达均无显著影响（P＞0.05）。结论 低氧能影响人鼻咽癌细胞CNE-2Z u-PA系统的表达,主要表现为上调PAI-1的表达,并可能通过促进u-PA/u-PAR复合体内吞降解的机制降低u-PA蛋白表达,但对u-PAR的表达不产生显著影响。低氧可能通过影响u-PA系统的表达而改变CNE-2Z细胞的侵袭转移能力。     

可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体在肾脏病中的研究进展

可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（suPAR）是尿激酶型纤溶酶原激活物系统的组成部分,是尿激酶型纤溶酶原激活物受体（uPAR）的可溶形式,作为一种新的诊断生物标志物,在各种炎性疾病、心脑血管疾病、亚临床器官损害、自身免疫性疾病及肿瘤等多种疾病的发生发展及预后评估中发挥重要作用。近年来国内外研究发现suPAR 与多种肾脏疾病有关。该文主要阐述了suPAR 的结构、功能,与肾疾病的发生机制以及对suPAR 在原发性肾病综合征、糖尿病肾病、IgA 肾病、慢性肾脏病、APOL1 风险变异、急性肾损伤等多种肾脏病中的研究进展进行综述。     

可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体在脓毒症中的研究进展

炎症生物标志物对脓毒症的诊断和预后评估有很大意义,现有的文献显示可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)可以作为脓毒症的诊断及预后判断的新型炎症生物标志物,本文就近年来suPAR在脓毒症诊断及评估预后等方面的研究做简要综述。     

重组尿激酶型纤溶酶原激活物治疗大鼠实验性肺血栓栓塞症的探讨

目的观察在不同时间窗重组尿激酶型纤溶酶原激活物(ru-PA)的溶栓效果,并与重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)的溶栓效果比较。方法通过颈外静脉注入125I标记人纤维蛋白原的大鼠加热血凝块,建立不同时间大鼠的肺血栓栓塞症(PTE)模型。按随机原则将60只大鼠分成三组:①对照组:再分为PTE2h对照组和PTE3d对照组;②PTE2h溶栓组:再分为ru-PA2h组和rt-PA2h组;③PTE3d溶栓组:再分为ru-PA3d组和rt-PA3d组。PTE2h对照组及溶栓组于处理后2h处死大鼠,PTE3d对照组及溶栓组于处理后48h处死大鼠,留取血标本检测血浆纤维蛋白原(FIB)及α2-抗纤溶酶(α2-AP)水平。取血、肺脏及心脏,测量每分钟γ放射性(cpm)。结果(1)rt-PA2h组的溶栓率明显高于ru-PA2h组,ru-PA2h组又明显高于PTE2h对照组(P均=0.000);其血浆FIB、α2-AP水平明显低于ru-PA2h组(P=0.002,P=0.001)及PTE2h对照组(P=0.003,P=0.002),后两组比较差异无统计学意义(P=0.811及0.700)。(2)ru-PA3d组的溶栓率明显高于rt-PA3d组,rt-PA3d组又明显高于PTE3d对照组(P均=0.000);三组间血浆FIB及α2-AP水平比较,差异无统计学意义(P=0.655,P=0.751)。结论(1)ru-PA1mg/kg溶栓对全身纤溶系统无明显影响,而rt-PA1mg/kg溶栓早期影响全身纤溶系统;(2)体内血栓存在的时间影响ru-PA的溶栓效果,ru-PA对新鲜血栓栓塞的即刻溶栓作用不及rt-PA,但对较陈旧血栓栓塞的溶栓效果强于rt-PA。     

胃癌患者尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体检测的临床意义

目的研究胃癌患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活物（u—PA）及其受体（u—PAR）检测的临床意义。方法用ELISA方法测定30例胃癌患者和30例正常人血浆中u—PA和u—PAR含量。结果患者术前血浆中u—PA和u—PAR含量与对照组比较差异有显著性（P〈0．01）；术后患者血浆中u—PA和u—PAR已与对照组之间没有统计学意义（P〉0．05）；已转移者u—PA和u—PAR含量显著高于未转移者（P〈0．05）；而浸润侵袭达到或超过浆膜层的u—PA和u—PAR含量高于只累及黏膜下层者（P〈0．05）。结论胃癌患者血浆中u—PA和u—PAR水平显著异常，可作为评估胃癌转移浸润的参考指标。