单个核细胞源性一氧化氮在急性脑梗死中的作用

目的：探讨单个核细胞参与缺血性脑损伤的机制。方法：用镀铜镉法分别测定急性脑梗死组和高血压组外周血及单个核细胞体外经脂多糖（LPS）和植物血浆素（PHA）诱生的硝酸盐和亚硝酸盐（NO3^-/NO2^-）的水平。结果：急性脑梗死组血清及外周血单个核细胞诱生的NO3^-/NO2^-水平高于高血压组（均P＜0．05），单相核细胞诱生的NO3^-和NO2^-水平与神经障碍的严重程度呈正相关（P＜0．01），而血清NO3^-/NO2^-水平与神经障碍的严重程度负相关（P＜0．01）。结论：一氧化氮（NO）在缺血性脑损伤的病理过程中的作用具有双重性，可能与其来源有关，单个核细胞源性的NO以损伤为主；单个核细胞可能通过分泌NO参与缺血性脑损伤的病理过程。     

一氧化氮与缺血性脑损伤

缺血性脑损伤以其高发病率、高死亡率及高致残率严重威胁人类的健康，越来越受到医学界的重视。其发病机制较复杂．目前认为一氧化氮(NO)与缺血性脑损伤的发生有着密切关系。本文就NO与缺血性脑损伤的关系作一综述。     

缺血性脑卒中患者血液中单个核细胞DNA损伤与修复的研究

本研究应用碱性单细胞凝胶电泳技术(SCGE)对缺血性脑卒中患者急性期、恢复期血液中单个核细胞的DNA损伤与修复情况进行检测,并与同龄健康对照比较,以判断缺血性脑卒中患者DNA的损伤水平及与病程的关系。     

经冠状动脉骨髓单个核细胞移植治疗缺血性心脏病二年随访

目的观察经冠状动脉自体骨髓单个核细胞（BMMC）移植治疗缺血性心脏病的长期效果及安全性。方法76例缺血性心脏病病人。其中BMMC移植者52例,包括急性心肌梗死（AMI）26例,慢性缺血性心力衰竭（CIHF）26例,对照24例（AMI10例,CIHF14例）。对照组：常规治疗（药物及介入治疗）;移植组：在常规治疗基础上加经冠状动脉自体BMMC移植。细胞移植方法：于髂后上嵴抽取骨髓,梯度密度法分离获得BMMC,将细胞悬液调为2×10^6/ml浓度,超选择性经梗死相关冠状动脉气囊充盈下高压注入BMMC,重复注入6—8次,或经冠状动脉选择性移植,气囊未充盈下高压注入移植细胞。随访观察临床及实验室指标,二维超声心动图,正电子发射体层心肌显象。结果52例完成2年随访。AMI病人BMMC移植后1年左室射血分数（LVEF）比术前增加了5．8％（53．9％±2．9％vs59．7％±1．5％,P〈0．05）,2年增加了3．8％（57．7％±1．7％,P〉0．05）,对照组LVEF减低,但差异无统计学意义。左室舒张末容量（LVEDV）、左室收缩末容量（LVESV）无显著改善。移植组2年心肌代谢缺损区与3个月比较无变化;BMMC移植组与术前相比差异有统计学意义（P〈0．05）。CIHF病人BMMC移植后1年、2年LVEF与术前比较分别增加了8．8％、9．2％（P〈0．01）,LVESV下降20．4％、27．8％（均P〈0．05）,2年心肌代谢缺损区与3个月比较无变化;对照组心功能明显恶化。Holter检测未发现新的心律失常。结论BMMC治疗可明显改善CIHF病人的心功能。而对AMI病人并无左室收缩功能改善的长期效果,仅限制了心室重塑。     

骨髓单个核细胞冠脉内移植治疗缺血性心脏病的临床观察

目的:观察自体骨髓单个核细胞经冠脉内移植治疗缺血性心脏病的可行性和疗效。方法:选择急性心肌梗死和已失去介入或冠脉搭桥机会的晚期缺血性心脏病(IHD)所致心力衰竭患者20例,抽取骨髓后密度梯度离心法分离出骨髓单个核细胞,经外周动脉穿刺注入冠脉。结果:自身骨髓单个核细胞冠脉内移植,对缺血、梗死心肌的恢复和改善患者心功能有一定的近期疗效。结论:该方法在临床上简易、可行,不良影响少。     

经皮穿刺经心外膜骨髓单个核细胞移植治疗犬严重缺血性心力衰竭

目的:探讨超声引导下,在犬缺血性心力衰竭模型经皮穿刺心外膜下心肌自体骨髓单个核细胞移植,修复心肌、再生血管、改善心功能的可能性、安全性及效果.方法:成年雄性家犬,体质量20～30 kg,经皮穿刺球囊封堵前降支建立犬心肌梗死模型手术后10 d,行超声心动图检查确立EF＜40%为严重缺血性心力衰竭(共14条).随机实验分组:细胞移植组(n=6)及生理盐水注入组(对照组,n=8).细胞移植术前1 d分离骨髓单个核细胞,以DAPI标记.23G超声引导穿刺针尾部连接电极,穿刺入心外膜下心肌,监测电极显示ST段抬高,即注入细胞悬液1.3×106/ml,改变方向,每一点分别注射0.2 ml,共10点.于术前及术后3个月行超声心动图及组织学检查.结果:荧光显微镜下可见到大量新生细胞,并可见发出绿色荧光的丝状肌丝肌管.光镜下见大量移植的单个核细胞生长,移植细胞间及与宿主细胞间均有闰盘连结.细胞移植组心肌梗死区域肉眼可见大量血管,小血管数量明显增加,心功能明显改善,与术前相比,每博输出量增加16.7 ml,EF增加14.7%,左室内径缩小6%.而对照组3个月后,梗死区室壁变薄,仅见纤维瘢痕组织,心腔扩大,心功能明显恶化.移植细胞组术中及术后均安全.结论:犬严重缺血性心力衰竭模型在超声引导下,经皮穿刺,经心外膜自体骨髓单个核细胞移植修复心肌、再生血管、改善心功能是可行、安全、有效的.     

一氧化氮合酶在缺血性脑损伤中的作用

近年研究发现一氧化氮 ( Nitric oxide,NO)和一氧化氮合酶 ( Nitric oxide synthase ,NOS)在脑缺血中具有重要而复杂的作用。随着研究的深化 ,特别是近年药理学方面的进展和基因技术的应用 ,其作用机制被不断阐明 ,为治疗脑缺血损伤拓展出新的思路。脑缺血时 NO的生成和 NOS的表达脑缺血时不仅影响 NO的生成 ,而且影响编码 NOS的基因表达。缺血各期均有 NO的升高 ,早期由 n NOS和e NOS上调所致 ,晚期则由 i NOS产生。应用卟啉微感受器直接测其较稳定的代谢产物亚硝酸盐 ( NO2 ) ,在神经元、突触体小胶质细胞、星行胶质细胞等众…     

冠状动脉搭桥术同期行自体骨髓单个核细胞移植治疗缺血性心脏病的临床研究

9.1±85.5)%较对照组(24.8±12.3)%减小(t=2.10,P<0.05).结论:CABG同期行自体BMMC移植治疗心肌梗死安全有效,并能够在CABG恢复心肌血运的基础上缩小心肌缺血梗死面积,改善心功能.     

正常与脑梗死后大鼠来源的骨髓单个核细胞治疗缺血性脑卒中的效果对比

目的 对比正常与梗死后大鼠来源的骨髓单个核细胞(Nor-BMM NCs;Isch-BMMNCs)移植治疗大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠的疗效及对血管新生效应的影响.方法 线栓法制作大鼠MCAO模型;梯度离心法分别提取Nor-BMMNCs及Isch-BMMNCs;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测常氧及低氧条件下体外培养BMMNCs的上清液中VEGF、bFGF、Ang-1的表达水平;MCAOld后行股静脉1 × 107BMMNCs或PBS输注并行mNSS;细胞移植后14 d行TTC染色及免疫荧光检测.结果 低氧条件下培养1 d后,Isch-BMMNCs组分泌促血管因子的量[VEGF:(114.2±10.6) pg/ml,bFGF:(133.6 ± 19.7) pg/ml,Ang-1:(131.3±21.9) pg/ml]明显高于Nor-BMMNCs组[VEGF:(96.0±12.6) pg/ml,bFGF:(107.1±19.6) pg/ml,Ang-1:(103.0±17.0) pg/ml],差异有统计学意义(P＜0.05);mNSS评分显示,在细胞移植后10d,Isch-BMMNCs组神经缺损症状明显改善,与Nor-BMMNCs组及PBS组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞移植14 d后,Isch-BMMNCs组微血管数目及脑梗死体积[(372.5±40.1)支/mm2,(18.7±4.5)％]与Nor-BMMNCs组[(314.0 ±40.1)支/mm2,(26.5±7.2)％]及PBS组[(222.3 ±56.7)个/mm2,(34.5±6.3)％]比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Isch-BMMNCs治疗缺血性脑卒中的价值明显高于Nor-BMMNCs,可能与其分泌促血管因子能力增强有关.     

从脐血单个核细胞诱导树突状细胞

探讨了从脐血单个核细胞定向诱导 DC的方法以进一步研究树突状细胞的功能与特性。从脐血中获取单个核细胞 ,在培养液中加入 GM- CSF、TNF- α、IL- 3、IL- 4,培养 1 4d后流式细胞仪分析细胞表面标志 CD1 a;培养末期加入 LPS,流式细胞仪分析细胞表面标志 CD83及 HLA- DR。发现用 GM- CSF+TNF-α+IL - 4可获得 ( 3 6 .79± 3 .1 5 ) % CD1 a+ 细胞 ,LPS可使 CD83及 HLA- DR的比例从 ( 0 .5 7± 0 .5 6 ) %及 ( 40 .2 7± 6 .3 3 ) %分别升至 ( 3 2 .79± 1 2 .90 ) %及 ( 95 .5 2± 3 .45 ) %。实验证明脐血单个核细胞作为另一种主要来源 ,经特定细胞因子诱导可生成大量 DC,并能通过 LPS刺激 DC成熟     

胰岛素抗急性缺血再灌注肾损伤的作用研究

目的 :研究胰岛素 (insulin ,Ins)对家兔急性缺血再灌注性肾损伤的影响。方法 :采用钳夹肾动脉的方法建造急性肾缺血再灌注肾损伤模型。实验动物分为三组 :对照组、单纯缺血再灌注 (IR)组、胰岛素处理 (Ins -IR)组。胰岛素处理组再灌注的同时给予胰岛素溶液 (含Ins 3UI/kg ,葡萄糖 1.5 g/kg ,k+ 0 .4mg/kg) ,对照组和IR组给予等量生理盐水。分别观察三组动物缺血再灌注 2h ,4 8h后 ,血清尿素氮 (BUN)、血糖、血清及肾组织中丙二醛 (MDA)、肾组织一氧化氮 (NO)含量变化 ,以及肾组织超微结构改变。结果 :肾缺血再灌注 4 8h后 ,IR组血清尿素氮较对照组显著升高 (P <0 .0 0 1) ,而Ins-IR组与对照组无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;IR组血清及肾组织中MDA含量较对照组显著升高 (P <0 .0 5 ) ,胰岛素处理后MDA含量明显降低 (P <0 .0 5 ) ;缺血再灌注 2h后 ,肾组织中NO含量即明显降低 (P <0 .0 0 1) ,胰岛素处理后 ,NO水平升高至正常水平。缺血再灌注 2h后 ,三组动物血糖均较术前增高 ,但以IR组增高更为显著 ,与对照组比较P <0 .0 5 ,Ins-IR组与对照组无差异。电镜结果显示 ,对照组超微结构正常 ,IR组肾组织呈变性和坏死改变 ,Ins -IR组肾组织轻度变性。结论 :胰岛素具有抗家兔急性缺血再灌注性肾损伤的作用 ,其作用     

雷公藤多甙对肾性蛋白尿患者外周血单个核细胞作用的研究

通过琼脂糖凝胶电泳, Ｈ Ｅ 染色和流式细胞仪检测用雷公藤多甙治疗肾性蛋白尿患者 ２ 周后外周血单个核细胞的凋亡情况。经治疗后患者外周血单个核细胞在形态上出现典型的细胞核固缩、碎裂,琼脂糖凝胶电泳显现特征性的“梯状”带,流式细胞仪上出现亚二倍体峰。提示雷公藤多甙能诱导肾性蛋白尿患者外周血单个核细胞的凋亡。     

重型颅脑损伤患者血浆NO、ET水平变化及异丙酚对其影响

目的：探讨重型颅脑损伤患者开颅手术麻醉期间血浆一氧化氮(NO)，内皮素(ET)含量、一氧化氮合成酶(NOS)活性变化及静脉麻醉剂异丙酚(PRO)对其影响。方法：重型颅脑损伤患者40例。根据麻醉方法不同随机分为观察组(PRO组)和对照组(γ—OH组)。观察自麻醉诱导前至开颅手术去骨瓣后1，3，6，12，24h(用T0～T5表示)诸指标水平变化。并以40例健康者作为术前对照。结果：术前患者血中NO，NOS，ET均高于正常对照组，其中NOS，ET显著增高。随开颅手术时间的延长，γ—OH组NOS(T3)NO(T5)ET(T1-T5)呈显著性升高。PRO组NO，NOS自始至终呈降低趋势。N0S(T1)，NO(T2)，ET(T2)时达到正常水平。结论：重型颅脑损伤患者术前存在NO，ET间含量平衡，临床麻醉剂量的PRO具有NOS、ET抑制剂特性。     

慢性乙型肝炎病人血液单核细胞中HBV标志物的检出

本文报告在慢性乙型肝炎38例的外周血单核细胞(PBMC)和T、B淋巴细胞中检测到HBV标志物阳性29例(76.3％)。其中17例病人的PBMC中HBsAg,HBeAg和HBV-DNA阳性者分别为4,2和14例。21例病人分离出T,B淋巴细胞,其中T细胞中HBsAg,HBeAg与HBV-DNA阳性分别为2,2和1例;B细胞中分别为3,6,1例。血清HBV标志物阳性的病人其PBMC中这些标志物的检出率(13/15例)明显高于血清抗HBc和抗HBe阳性的稳定期病人(3/7例)。提示HBV可能感染和损害慢性乙型肝炎病人的淋巴细胞,这也许是乙型肝炎病人免疫功能异常的原因之一。     

强啡肽在高压氧治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的变化

目的：观察高压氧治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBI）后脑内强啡肽A1-13水平的动态变化规律。方法：7d龄SD大鼠左侧顼总动脉结扎联合低氧吸收形成HIBI。在HIBI后施以高压氧治疗（A）。并设HIBI＋常氧高压氮组（B）、单纯HIBI组（c）、假手术组（D）和正常组（E）。观察各组处理后不同时间左侧皮层、海马、纹状体和血浆强啡肽Al-13免疫活性物质（ir-DynAl-13）含量的变化。结果：ir—DynAl一13含量，1次处理后与B组比较，A组皮层、海马含量均显著降低（P〈0．01），但皮层与D组比较仍显著高（P〈0．05）；7次处理后与B组比较。A组皮层、海马含量仍显著降低（P〈0．05）。1次处理后与B或c组比较，A组血浆ir-DyaAl-13含量显著降低。结论：强啡肽Al-13参与新生大鼠HIBI的病理生理过程，通过逆转中枢强啡肽Al-13水平的异常改变是高压氧治疗新生大鼠HIBI的机制之     

IL－2和IL－6基因在急性移植物抗宿主病患者外周血单个核细胞中的表达

目的：研究ＩＬ－２及ＩＬ－６在急性ＧＶＨＤ中的表达状态。方法：采用细胞原位杂交方法，对骨髓移植后发生急性ＧＶＨＤ患者的外周血单个核细胞检测其ＩＬ－２和ＩＬ－６的表达水平，测定积分光密度值。结果：ＩＬ－２表达在急性期与缓解后比较，ｔ＝５．９９，Ｐ＜０．００１，差异非常显著；ＩＬ－６表达在急性期与缓解后比较，ｔ＝３．５９，Ｐ＜０．０１，差异显著。结论：ＩＬ－２和ＩＬ－６在急性ＧＶＨＤ时表达升高，在缓解后降低，其表达状态有助于探讨ＧＶＨＤ的免疫病理损害机理。     

重症肌无力患者外周血单个核细胞中癌蛋白的表达和NK亚群的状况

作者在非胸腺瘤性重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞中检查了C-myc、kiras和Ha-ras三种癌蛋白的表达和自然杀伤细胞(NK)亚群的状况.结果发现,MG患者外周血淋巴细胞和单核细胞中上述三种癌蛋白的阳性率均极显著地高于健康对照组,而患者NK细胞中的Leu 7,11c~+亚群细胞数则显著地低于对照组,提示NK亚群的改变可能与癌蛋白的表达有关.作者认为癌蛋白的高度表达可能与MG患者容易并发胸腺瘤的事实相关.     

癌—睾丸抗原SSX-2基因在儿童急性淋巴细胞性白血病外周血单个核细胞中的表达

目的：探讨癌—睾丸抗原SSX-2基因在儿童急性淋巴细胞性白血病（ALL）外周血单个核细胞中的表达,为判断ALL预后提供理论依据。方法：采用逆转录—聚合酶链反应,对51例ALL患儿外周血单个核细胞进行SSX-2mRNA检测,并进行SSX-2基因表达与临床特征的相关性分析;以30例非肿瘤患儿为对照组。结果：ALL初治患儿SSX-2 mRNA表达率为34.78%,对照组无一例表达。ALL初治组表达率明显高于对照组（P〈0.05）,ALL初治组表达率高于ALL完全缓解组表达率7.14%（P〈0.05）。SSX-2基因的表达与儿童ALL性别、年龄、初诊时外周血白细胞数、免疫分型以及临床危险分级无关（P〉0.05）。结论：儿童ALL患者SSX-2mRNA表达率较高,SSX-2mRNA表达可能与儿童ALL的发生、发展有关;SSX-2基因检测对儿童ALL近期疗效的评估、指导临床治疗有一定意义。     

香烟烟雾提取物对兔气道平滑肌细胞毒性损伤及对一氧化氮生成的影响

目的探讨吸烟对气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的影响。方法分别以０、５％、１０％和３０％的香烟烟雾提取物（ＣＳＥ）孵育兔ＡＳＭＣ，测定其细胞存活率、丙二醛（ＭＤＡ）含量、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出及一氧化氮（ＮＯ）稳定代谢终产物亚硝酸盐（ＮＯ－２）水平。用ｏｎｅｗａｙＡＮＯＶＡ检验及直线回归作统计学分析。结果在４８ｈＣＳＥ显著增加了ＡＳＭＣ的ＮＯ－２释放（１０％、３０％ＣＳＥ分别较对照组增加７５．７％和１１５．３％，Ｐ＜０．０１）；降低了细胞存活率，增加了细胞ＭＤＡ含量和ＬＤＨ漏出（Ｐ均＜０．０１），毒性损伤指标与ＮＯ－２的释放高度相关（ｒ分别为－０．７２１、０．７０６和０．７７３，Ｐ均＜０．０１）。结论吸烟可能对ＡＳＭＣ具有直接损伤作用，ＣＳＥ可能通过ＮＯ介导气道炎症损伤过程。     

米托蒽醌为主的化疗联合造血因子动员和大容量采集外周血干细胞

目的 :探讨米托蒽醌 (MIT)为主的化疗联合粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)和粒 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM -CSF)对自体外周血干细胞 (APBSC)的动员效果。方法 :MA动员方案 :MIT 10mg·m-2 ·d-1静脉滴注 ,第 2、3天 ;阿糖胞苷 (Ara -C) 2 g/m2 静脉滴注 ,每 12h 1次 ,第 1、2天。MOED方案 :MIT6～ 8mg·m-2 ·d-1,第 1～ 3天静脉滴注 ;长春新碱 (VCR) 1.4mg/m2 ,第 1天静脉滴注 ,足叶乙甙 (VP16) 10 0mg/d ,第 1～ 5天静脉滴注 ;地塞米松 (DXM ) 6mg·m-2 ·d-1,第 1～ 5天静脉滴注。当白细胞 (WBC)降至最低点开始回升时 ,皮下注射G -CSF 5ug·kg-1·d-1或G -CSF 3ug·kg-1·d-1(早 6 :0 0 ) GM -CSF 3ug·kg-1·d-1(晚 6 :0 0 )至采集结束。WBC恢复至 (8.0 2± 3.6 5 )× 10 9/L、CD 3 4 细胞 (1.6 8± 0 .79) %时 ,开始用CS 30 0 0plus血细胞分离机连续 2d采集APBSC。当累计采集的单个核细胞 (MNC)达到 5× 10 8/kg以上时停止采集。结果 :2 0例患者连续采集APBSC 2次 ,共采集到MNC(4.6 7± 2 .11)× 10 8/kg、CD 3 4 细胞 (7.86± 2 .14 )× 10 6/kg、CFU -GM(2 .86± 2 .10 )× 10 5/kg。无严重毒副反应。 18例接受自体外周血干细胞移植 (APBSCT)者造血功能均获得满意重建。结论 :以MIT为主的化疗联