SLE患者外周血中CD4＋CD25＋CD127^low/-标记的调节性T细胞与临床表现和实验室指标相关性研究

目的：探讨CD4＋CD25＋CD127low/-标记的调节性T细胞（Treg）在系统性红斑狼疮发病机制电的作用。方法：用流式细胞仪检测45例系统性红斑狼疮（SLE）患者和45例年龄、性别相匹配的健康志愿者外周血CD4＋T细胞中Treg的百分比,同时分析SLE患者外周血中的CD4＋CD25＋CD127low/-标记的Treg与其临床表现、实验室指标的相关性。结果：SLE患者外周血CD4＋T细胞中Treg百分比与健康对照组比较差异无统计学意义。在SLE患者中,Treg的百分比与抗核小体抗体呈正相关（r=0．299,P=0．046）,有光敏感的SLE患者中Treg较无光敏感组增高（P=0．017）,余均无统计学差异。结论：SLE患者外周血中以CD4＋CD25＋CD127low/-标记的Treg中可能因含有部分无免疫抑制活性的效应性T细胞而特异性差,因此可能不适合用于临床免疫抑制治疗。     

卵巢癌患者腹水及外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞含量及抑制功能的研究

目的:分析并探讨卵巢癌患者腹水及外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞含量及抑制功能。方法:选取2012年2月至2015年2月期间在我院和宁波市鄞州第二医院接受治疗的卵巢癌患者56例,采集腹水标本56例,外周血标本56例。使用流式细胞术检测CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)的表达。采用1.5μmol/L的羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记CD4~+CD25-T细胞,观察CFSE标记效果,计算抑制率。结果:研究结果显示,56例腹水患者CD4~+CD25~+T cells/CD4~+T cell为(28.34±13.27)%,56例外周血标本CD4~+CD25~+T cells/CD4~+T cell为(14.56±4.36)%。腹水和外周血标本CD4~+CD25~+T cells/CD4~+T cell含量有显著差异(P0.05)。腹水Treg抑制功能比外周血Treg强,经统计学检验,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:腹水Treg含量及抑制功能比外周血Treg强,提示卵巢癌腹腔内相对容易发生免疫逃逸,而Treg升高可能参与促进肿瘤复发。     

银屑病和白癜风患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测

目的: 检测CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在白癜风和银屑病患者外周血中的表达.方法: 用流式细胞术检测19例白癜风患者、18例银屑病患者及19名正常人外周血中CD4+CD25+Treg的表达水平.结果: 白癜风患者的CD4+CD25+Treg表达率为(1.056±0.662)%,低于正常对照组(2.022±0.98)%,差异有统计学意义(P＜0.05);银屑病患者的CD4+CD25+Treg为(1.761±1.396)%,与正常人无显著性差异(P＝0.177).结论: CD4+CD25+Treg细胞在白癜风患者外周血中数量明显减少.     

扁平苔藓患者外周血CD4+CD25+Treg细胞的检测

目的:检测扁平苔藓患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的数量及FOX3 mRNA的表达.方法:采用流式细胞术对25例扁平苔藓患者和25例健康对照者外周血CD4+CD25+Treg细胞进行检测,并通过RT-PCR方法检测FOXP3转录因子在外周血单个核细胞的表达.结果:泛发性扁平苔藓和口腔扁平苔藓患者外周血CD4+CD25+ Treg细胞数分别为(2.68±2.21)%和(2.38±2.67)%,均低于健康对照者(7.87±1.77)%;扁平苔藓患者的FOPX3表达水平也低于健康对照(P<0.05).结论:CD4+CD25+ Treg细胞数量和功能下降,可能通过导致扁平苔藓患者免疫功能紊乱参与了扁平苔藓的发病.     

活动性皮肌炎CD4+CD25+CD127lo/-调节性T细胞的检测

皮肌炎(DM)是一种自身免疫性结缔组织病.CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)是存在于人胸腺和外周血中的一类具有免疫抑制作用的T细胞亚群,该细胞数量减少或者功能异常均可导致自身免疫性疾病的发生.转录因子Foxp3是Treg细胞的特征性检测分子.研究发现,表面标志CD127(IL-7αR)的表达与Foxp3呈负相关,可以代替Foxp3作为Treg细胞的检测标志[1].为研究Treg细胞在活动性DM患者发病机制中的作用,我们分别对17例活动性DM患者和正常人对照外周血中的CD4+CD25+、CD4+CD25+CD127lo/-T细胞的百分比进行检测,同时与患者血清肌酸激酶(CK)含量进行相关性分析.并对其中7例住院患者给予糖皮质激素联合免疫抑制剂治疗,观察治疗后10 d,20 d CD4+CD25+和CD4+CD25+CD127lo/-T细胞百分比的变化.     

梅毒血清固定患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例及功能的研究

目的:通过检测梅毒血清固定患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比例和功能的改变,探讨Treg在梅毒血清固定现象形成中的作用.方法:收集梅毒血清固定患者26例,正常对照23例,利用流式细胞术分别检测外周血Treg比例及Treg内Foxp3、细胞毒性T淋巴细胞抗原(CTLA)-4及白介素(IL)-10的定量表达情况.结果:梅毒血清固定组患者外周血Treg比例明显高于正常对照组(P＜ 0.01);且Treg内转录因子Foxp3及功能性分子CTLA-4和IL-10的表达量也明显高于正常对照组(P＜ 0.05或P＜0.01).结论:梅毒血清固定患者外周血Treg比例和功能的异常,可能是导致该现象形成的重要原因之一.     

系统性红斑狼疮患者外周血中T细胞CD4CD25的表达

目的了解CD4,CD25在系统性红斑狼疮患者外周血T细胞中的表达水平及其临床意义。方法用流式细胞术检测30例正常人和30例活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中T细胞CD4,CD25的表达水平,根据CD25表达荧光强度>100者为T细胞CD4+CD25+bright,并与SLE活动指数评分(SLEDAI)进行相关分析。结果SLE患者外周血T细胞CD4+CD25+表达率为(8.82±2.98)%,显著低于对照组(12.24±5.71)%(P<0.05);患者组T细胞CD4+CD25bright表达率为(1.56±0.76)%,低于对照组(2.23±1.22)%(P<0.05),差异有统计学意义;SLE患者外周血T细胞CD4+CD25+、T细胞CD4+CD25bright表达率与SLEDAI评分两者之间无相关性;r分别为-0.156,-0.153,P均>0.05)。结论SLE患者外周血中T细胞CD4+CD25+减少,其可能在发病机制中起一定的作用,低水平T细胞CD4+CD25bright在SLE发病中的确切作用机制有待进一步阐明。     

系统性红斑狼疮患者CD4~+ CD25~+调节性T细胞及其细胞因子的改变

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)及其细胞因子的改变。方法用流式细胞仪直接免疫荧光法检测SLE患者外周血CD4+CD25+T细胞的百分率,FoxP3+分子表达,细胞因子IL-10,TGF-β1的表达。结果 SLE患者活动期组、稳定期组、健康对照组CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的百分率分别是(3.57±1.45)%,(5.14±1.63)%,(6.03±1.96)%。活动期患者明显低于稳定期患者和健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。CD4+CD25+FoxP3+T细胞、CD4+CD25-FoxP3+T细胞占CD4+T细胞的百分率,活动期患者明显高于稳定期患者和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CD4+CD25+FoxP3+T细胞与疾病的活动指数(DAI)正相关(r=0.659,P<0.05);而CD4+CD25-FoxP3+T细胞与DAI无统计学相关性(r=0.184,P>0.05)。活动期患者CD4+CD25+IL-10+细胞明显高于稳定期患者和健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。然而CD4+CD25-TGF-β+细胞在活动期患者、稳定期患者和健康对照组之间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 SLE患者外周血中Tr细胞数量减少,分泌的IL-10增加,TGF-β减少,可能导致细胞免疫抑制功能减弱,自身免疫耐受平衡被打破,出现激活的自身反应性T细胞增多;此外,T淋巴细胞激活增多,还可辅助B细胞产生更多相关抗体,表现出多种临床症状。     

斑秃患者外周血CD4~+ CD25~+ Treg细胞计数及TGF-β_1的表达

目的通过检测斑秃患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞计数、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平,探讨斑秃的发病机制。方法采用流式细胞技术检测50例未治疗的斑秃患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞的水平变化,ELISA法检测血清中TGF-β1含量,并进行相关性分析,以30例健康者作为正常对照。结果斑秃患者组外周血CD4+CD25+Treg细胞占T淋巴细胞的比率和血清TGF-β1浓度均低于正常对照组(P均<0.01),且重型患者组显著低于正常对照与局限型患者组(P<0.01),局限型患者组低于正常对照组(P<0.05)。斑秃患者外周血CD4+CD25+Treg细胞水平,血清中TGF-β1含量均与SALT评分呈显著负相关(r=-0.566,-0.471;P均<0.01),而两者呈显著正相关(r=0.584,P<0.01)。结论斑秃患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞与血清中TGF-β1呈一定相关性,且两者与斑秃病情的严重程度相关;CD4+CD25+Treg细胞的数量减少和TGF-β1表达降低可能与斑秃的细胞免疫失调有关。     

寻常型银屑病患者外周血CD4~+CD25~+及CD8~+CD25~+细胞的检测

目的研究进展期寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+和CD8+CD25+调节性T细胞的数量变化及其在银屑病免疫病理学发病机制中的作用。方法应用流式细胞术对进展期寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+和CD8+CD25+调节性T细胞进行检测。结果进展期寻常型银屑病外周血CD4+CD25+细胞及CD8+CD25+调节性T细胞数量与正常对照组相比,均显著降低(P<0.05,P<0.005),而CD4+CD25+/CD8+CD25+比值无显著性差异(P>0.05)。结论寻常型银屑病的发病与CD4+CD25+和CD8+CD25+调节性T细胞的同步降低有关,与二者的比值无关。     

大败毒胶囊对梅毒血清固定患者外周血Treg/Th17比例及CD4~+ CD25~+ T细胞水平的影响

目的:探讨大败毒胶囊对梅毒血清固定患者外周血Treg/Th17及CD4~+CD25~+T细胞水平的影响。方法:随机双盲法将60例梅毒血清固定患者分为对照组与观察组,每组30例,对照组采取常规苄星青霉素治疗,观察组在对照组基础上加以大败毒胶囊口服,比较两组临床疗效、治疗前后Treg细胞、Th17细胞、Foxp3及CD4~+CD25~+T细胞比例变化情况。结果:观察组随访12个月临床治愈率、总有效率分别为83.33%、93.33%,均显著高于对照组的0.00%、43.33%,差异有统计学意义(P0.0001)。观察组末次随访时Treg细胞、Th17细胞、Foxp3、CD4~+CD25~+T细胞比例与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:大败毒胶囊治疗梅毒血清固定疗效明确,能显著纠正外周血Treg细胞/Th17细胞失衡现象,降低CD4~+CD25~+T细胞比例,临床值得推广。     

系统性红斑狼疮患者CCR7+CD8+CD45RO+T细胞诱导CD4＋T细胞向Th2分化

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CCR7 CD8 CD45RO 记忆性T细胞对CD4 T细胞的诱导分化作用及其与SLE发病的关系。方法流式细胞仪、实时定量RT-PCR和RNA印迹检测同系CCR7 CD8 CD45RO T细胞和树突细胞协同刺激CD4 T细胞分泌细胞因子。结果活动期SLE患者CCR7 CD8 CD45RO 记忆性T细胞诱导CD4 T细胞表达Th2类细胞因子:白介素4的表达效率显著高于正常人对照组和非活动期SLE患者组(P<0.01),1型调节性T细胞(Tr1)源性细胞因子:白介素10和转化生长因子β的表达效率均低于正常对照组和非活动期SLE患者组(P<0.01);而活动期和非活动期SLE患者干扰素γ的表达效率显著低于正常人对照组(P<0.01)。结论活动期SLE患者外周血CCR7 中央型记忆性T细胞可与树突细胞相互作用,诱导同系CD4 T细胞向Th2分化,发挥CCR7-CD45RO 效应性记忆性T细胞的功能。     

散发型白癜风患者外周血CD4~+/CD8~+T细胞比值及CD4~+CD25~+T细胞的检测

目的检测散发型白癜风患者外周血CD4+/CD8+T细胞比值及CD4+CD25+调节性T细胞水平,探讨其与散发型白癜风发病的关系。方法散发型白癜风患者29例,男13例,女16例。通过流式细胞仪对散发型白癜风患者外周血CD4+/CD8+T细胞比值及CD4+CD25+调节性T细胞水平进行检测,并与20例健康人相比较。结果与健康对照组相比,散发型白癜风患者外周血中CD4+/CD8+T细胞比值的差异无统计学意义(P0.05),而CD4+CD25+调节性T细胞水平明显减少,差异有统计学意义(P0.05),但在不同病程的患者中CD4+CD25+调节性T细胞数量的差异无统计学意义(P0.05)。结论散发型白癜风患者外周血中存在CD4+CD25+调节性T细胞水平下降,可能与散发型白癜风的发生发展有一定关系。     

白芍总苷联合环磷酰胺治疗系统性红斑狼疮及对外周血CD4^+CD25^+T细胞表达水平的影响

目的探讨白芍总苷联合环磷酰胺治疗系统性红斑狼疮(SLE)及对外周血CD4^+CD25^+T细胞表达水平的影响。方法研究对象为我院确诊的系统性红斑狼疮患者74例,按随机数字表法分为对照组和研究组,对照组37例予以环磷酰胺联合糖皮质激素治疗,研究组37例在对照组基础上予以白芍总苷治疗,测定所有患者治疗前后血清学指标,同时进行随访,记录不良反应及复发率状况。结果相对于治疗前,2组治疗后IgA、IgG、IgM,CD40^+,血清人可溶性血管细胞黏附因子(sVCAM)-1、白细胞介素(IL)-18,血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶(MMP)-3含量均降低,C3、C4,CD4^+CD25^+,MMP-9含量均升高,差异有统计学意义(P<0.05);相对于对照组,研究组治疗后IgA、IgG、IgM,CD40^+,sVCAM-1、IL-18,VEGF,MMP-3含量较低,C3、C4,CD4^+CD25^+,MMP-9含量较高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组复发率18.92%(7/37)低于对照组复发率40.54%(15/37),2组间复发率对比,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,观察组总有效率为显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白芍总苷联合环磷酰胺治疗系统性红斑狼疮疗效确切,CD4^+CD25^+T细胞表达率提高,值得推广。     

慢性荨麻疹患者外周血中CD8~+CD28~-T细胞检测结果分析

目的:探讨CD8~+CD28~-T细胞在慢性荨麻疹患者致病机制中的作用。方法:收集临床慢性荨麻疹(CU)病例83例,同时设立对照组64例进行比较。应用ELISA法检测研究对象血清中抗Ig E抗体、抗FcεRⅠ抗体浓度,流式细胞仪检测外周血中CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD8~+CD28~-、CD4~+CD25~+T细胞比例,分析检测结果。结果:83名CU中,23例抗Ig E抗体为阳性,占27.7%(27/83);31例抗FcεRⅠ抗体为阳性,占37.3%(31/83)。CU患者外周血CD8~+T细胞比例、CD8~+CD28~-T细胞比例低于正常对照组(P0.05),CD4~+/CD8~+比值、CD4~+CD25~+T细胞比例均高于对照组(P0.05)。结论:CU患者机体外周血CD8~+CD28~-T细胞、CD4~+CD25~+T细胞比例与对照组相比存在差异,CD8~+CD28~-T细胞比例降低也可能是CU致病机制之一。     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞与IL-17在梅毒血清固定患者外周血中的表达及意义

目的:观察梅毒血清固定患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和IL-17的表达及意义。方法:采用三色流式细胞术及免疫酶联吸附法测定18例梅毒血清固定患者和18例对照者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和IL-17的表达水平。结果:梅毒血清固定患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的含量明显高于对照组(t=6.29,P<0.01);IL-17的含量与对照组比较差异无统计学意义(t=-1.68,P=0.102)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞表达水平增高造成的免疫抑制可能与梅毒血清固定有关;IL-17的表达水平可能与梅毒血清固定无关。     

银屑病患者外周血调节性T细胞的检测

目的 检测不同类型银屑病患者外周血中调节性T细胞（Treg）的水平。方法 用流式细胞仪和单克隆荧光抗体检测20例寻常性银屑病、15例脓疱性银屑病和10例红皮病性银屑病患者外周血中CD4+CD25bright调节性T细胞百分率，对寻常性银屑病患者中的10例进行了CD4+CD25hi-intCD127low/-调节性T细胞百分率的检测。结果 红皮病性银屑病组CD4+CD25bright调节性T细胞比例高于其他组（P < 0.01）；寻常性银屑病患者组CD4+CD25hi-intCD127low/-调节性T细胞在CD4+ T细胞中比例为4.39% ± 0.84%，正常人对照组为3.83% ± 1.68%，两组进行Mann-Whitney U检验，差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 CD4+CD25bright调节性T细胞可能与红皮病性银屑病的发病有关。     

外周血及蜕膜组织中CD4~+ CD25~+调节性T细胞比例和炎症因子原因不明复发性流产的关系研究

目的:探究外周血及蜕膜组织中CD4~+CD25~+调节性T细胞比例以及相关炎症因子对原因不明复发性流产的影响。方法:选取2014年5月至2015年5月就诊于我院门诊的原因不明复发性流产(URSA)患者90例为观察组,并选取同期在妇产科门诊手术室的行人工流产手术的正常患者90例为对照组;分析两组患者的一般资料、外周血及蜕膜组织中CD4~+CD25~+调节性T细胞比例、调节性T细胞特异调节因子Foxp3和EBi3的表达以及血清炎症因子(包括TNF-α、IL-2、IL-6、IL-10)水平,研究其相关性。结果:与正常妊娠组相比,反复流产组外周血及蜕膜组织中Treg细胞比例明显降低,Foxp3和EBi3因子mRNA的表达水平明显降低,且无论URSA患者或者是正常对照组,蜕膜中各因子的表达均高于外周血中的表达,外周血TNF-α、IL-2水平明显升高,而IL-6和IL-10水平要明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:蜕膜中各因子的表达均高于外周血中的表达提示妊娠过程的主要免疫反应部位是"母-胎界面",Treg细胞比例、Treg细胞因子和Th2型因子IL-6、IL-10水平可能参与妊娠的维持,调控"母-胎界面"局部免疫耐受。对于复发性流产的发病过程具有一定的影响作用。     

系统性硬皮病CD4~+ T细胞中CD70 mRNA及蛋白表达水平的观察

目的:研究系统性硬皮病(SSc)患者外周血CD4+ T细胞中CD70的表达水平。方法:应用密度梯度离心法分离17例SSc患者(女性12例,男性5例)和13例对照者(女性8例,男性5例)的外周血单个核细胞,磁珠分选CD4+ T细胞。RT-PCR检测CD4+ T细胞中CD70 mRNA的表达水平;流式细胞术检测CD70蛋白在CD4+ T细胞的表达水平。结果:与对照组相比,SSc患者CD4+ T细胞中CD70mRNA和CD70蛋白表达均明显升高(P=0.001;P=0.007)。结论:CD70在SSc的发生发展中可能起着重要作用。     

系统性硬皮病CD4+T细胞中CD70mRNA及蛋白表达水平的观察

目的:研究系统性硬皮病(SSc)患者外周血CD4+T细胞中CD70的表达水平.方法:应用密度梯度离心法分离17例SSc患者(女性12例,男性5例)和13例对照者(女性8例,男性5例)的外周血单个核细胞,磁珠分选CD4+T细胞.RT-PCR检测CD4+T细胞中CD70 mRNA的表达水平;流式细胞术检测CD70蛋白在CD4+T细胞的表达水平.结果:与对照组相比,SSc患者CD4+T细胞中CD70 mRNA和CD70蛋白表达均明显升高(P=0.001;P=0.007).结论:CD70在SSc的发生发展中可能起着重要作用.