生物检材中复方芬太尼的气相色谱和气相色谱/质谱检测

目的：建立生物检材中复方芬太尼的气相色谱（GC）和气相色谱/质谱检测方法（GC/MS法）。方法：检材经10%氢氧化钠调pH=10,乙醚萃取,气/质联用法定性,气相色谱内标法定量检测生物检材中复方芬太尼。结果：GC/MS法分析芬太尼的选择离子m/z为245,146;异丙嗪的选择离子m/z为284,72。GC检测的回归方程、线性检测范围、相关系数、回收率、最低检出浓度分别为：心血中芬太尼为Y=23.376X＋0.516 8（μg/mL）,（0.1~220）μg/mL,0.985,（98.5±3.5）%,0.1μg/mL,异丙嗪为Y=16.537X＋0.158 4（μg/mL）,（0.12~200）μg/mL,0.974,（97.50±2.0）%,0.12μg/mL;肝组织中芬太尼为Y=82.236X＋0.413 4（μg/mL）,（0.1~220）μg/g,0.975,（95.6±0.75）%,0.1μg/g,异丙嗪为Y=40.437X＋0.134 2（μg/mL）,（0.12~200）μg/g,0.964,（94.8±0.15）%,0.12μg/g。染毒家兔心血及心、肝、脾、肺、肾和脑中芬太尼的含量依次为：（24.39±6.43）μg/mL及（84.96±1.03）,（73.82±1.73）,（55.74±2.07）,（42.64±1.38）,（35.94±2.87）,（10.15±7.05）μg/g,异丙嗪的含量依次为：（146.69±2.43）μg/mL及（204.96±13.03）,（213.32±1.73）,（115.74±3.07）,（95.64±5.38）,（195.34±2.87）,（170.15±1.05）μg/g。结论：生物检材中GC/MS法选择性好,定性准确,GC检测简便,快速,灵敏,定量结果准确,可用于芬太尼麻醉意外中毒的临床快速检验诊断和芬太尼滥用中毒死亡案件的法医学鉴定。     

高效液相紫外法测定胰腺炎患者血浆中维生素C浓度

目的建立一种反相高效液相紫外检测法来测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度。方法将胰腺炎患者血浆样本经预处理后用反相高效液相色谱（HPLC）仪进行浓度测定。色谱条件为KromasilC18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇和5％偏磷酸（15：85）,pH=4．0,检测波长为245nm,流速为1．0mL／min。柱温39℃。结果在上述色谱条件下,血浆中的VC得到良好分离,线性范围2．5～500μg/mL,日内差异和日间差异分别为0．22％和0．97％;回收率为98．64％。测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度平均测定值为11．31μg／mL,明显低于健康人测定值23．67μg／mL。结论该方法能更简单、快速、准确、灵敏测定胰腺炎患者血浆中维生素C的浓度。     

高效液相色谱——紫外、荧光双检测器同时测定人尿中犬尿氨酸和犬尿喹啉酸

目的建立高效液相色谱（HPLC）同时测定人尿中犬尿氨酸（KYN）和犬尿喹啉酸（KYNA）方法。用KYNA／KYN比值评价人体犬尿氨酸氨基转移酶（KAT）活性。方法采用HPLC测定KYN、KYNA,分析柱为安捷伦HCC18反相色谱柱;流动相为10mmol／L乙酸钠-乙酸缓冲液：7％乙腈=93：7;流速1mL／min;检测器波长：紫外365nm,荧光344nm（激发）／398nm（发射）。结果KYN和KYNA保留时间分别为6．9和11．5min。水溶液标准与标准加入工作曲线斜率差异无统计学意义（KYN：P=0．4068;KYNA：P=0．6462）。KYN和KYNA的平均回收率分别为98．74％±7．53％、95．17％±8．17％;稳定性试验的变异系数（CV）分别为3．35％和0．88％;精密度CV分别为2．73％和2．79％;最低检测限分别为0．4和0．2μmol／L。30份健康成年人尿样的KYNA／KYN比值为2．45±1．54。尿中KYNA与KYN含量呈正相关关系（r2=0．3758,P〈0．001）。结论测定方法灵敏、准确、稳定。KYNA／KYN比值评测KAT活性具有简便、实用等特点,可用于相关疾病的临床辅助诊断和基础研究。     

高效液相色谱法测定复方苯硝那敏片中维生素B6含量

目的：建立HPLC同时测定复方苯硝那敏片中维生素B6含量的方法。方法：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（150mm×4．6mm，4.6μm）。流动相：乙腈-水-三乙胺（100：900：1，含0．01mol／L庚烷磺酸钠，用冰醋酸调pH值3．5），流速：1ml／min，检测波长260nm。结果：维生素B6的保留时间为4.6min，与相邻峰的分离度大于1．5。以峰面积对进样量（μg）线性回归，回归方程：y=251．4x＋2．403，线性范围：0．1684～2.021μg,r=0.9998，维生素B6回收率为100.1％。结论：本方法精密度、准确度好，操作简便，可用于复方苯硝那敏片中维生素B6含量测定。     

用高效液相色谱法测定血清醋氨酚浓度及临床意义

用高效液相色谱（HPLC）测定血清醋氨酚浓度的方法，以β－羟乙基茶碱为内标，用乙腈沉淀血清蛋白，采用国产不锈钢色谱柱（150mm×5mm），流动相组分为乙腈／醋酸缓冲液＝7／93（V／V），用254nm固定波长检测器进行检测。最低检出浓度为5μg／ml。血清醋氨酚浓度至少在25～400μg／ml范围内成线性相关，相对回收率平均为98.7％，批内及批间变异分别为1．06％和3．45％，该方法操作简单、快速、准确，可在一小时内报告结果，适于临床上醋氨酚中毒的急诊测定，可及时为临床医生的诊断提供可靠的实验室依据。     

反相高效液相色谱法测定珍菊降压片中盐酸可乐定的含量

目的建立反相高效液相色谱法（RP—HPLC）测定珍菊降压片中盐酸可乐定的含量。方法采用RP—HPLC法,Kromasil-C8色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相：0．22％辛烷磺酸钠溶液-甲醇-磷酸（540：460：1,用1mol／L氢氧化钠溶液或磷酸调pH至3．0）;检测波长为220nm,外标法计算含量。结果盐酸可乐定在1．5—15．0μg／ml范围内呈良好线性关系（r=0．9999）,平均加样回收率为99．58％,RSD=1．16％（n=6）。结论RP—HPLC法简便、快速、准确,可用于珍菊降压片中盐酸可乐定的含量控制。     

高效液相色谱法测定肾宝合剂中淫羊藿苷的含量

目的建立高效液相色谱法（HPLC）测定肾宝合剂中淫羊霍苷的含量测定方法。方法色谱柱为DiamonsilC18,5μm,4.6 mm×250 mm,流动相为乙腈-水（27∶73）,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为270 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果肾宝合剂中淫羊藿苷的含量测定标准曲线回归方程为：Y=2.188 217×104X-2 415.6,r=0.999 8;线性范围为：1.04～8.32μg.mL-1;回收率为97.8%,RSD为0.6%。结论 HPLC测定肾宝合剂中淫羊霍苷的含量重...     

去甲万古霉素血药浓度测定

目的：建立测定去甲万古霉素血药浓度的方法。方法：采用反相高效液相色谱法，分析柱为Kromasil C18色谱柱，流动相为甲醇-0．05mol／L磷酸二氢钾缓冲液（pH=3．2），比例为14：86，紫外检测波长外280nm，实验数据用HW-2000色谱工作站处理，以蜂面积定量。结果：该方法在3．645μg／ml-69．984μg／ml间线性关系良好，相关系数=0．9998（n=5），血浆最低检测浓度为3．645μg／ml（S／N≥3），日内、日间RSD均〈10％。结论：此方法简便，快速、准确，适用于临床血药浓度监测。     

高效液相色谱法测定鼠脑组织中氨甲喋呤浓度

目的：建立高效液相色谱法(HPLC法)测定鼠脑组织中氨甲喋呤(MTX）浓度的方法。方法：脑组织样加入高氯酸,残渣经流动相溶解后测定,检测波长为306nm。结果：相关系数r=0．9997;线性范围：10．0～0．078125μg．ml^-1;最低定量浓度为0．078125μg．ml^-1;日内RSD≤7．00％,日间RSD≤6．44％,萃取回收率RSD为3．28％～5．48％。结论：本方法简便、可靠,灵敏度高,可用于氨甲喋呤在大鼠脑组织内的检测和药代动力学研究。     

应用反相高压液相色谱内标法测定血清和尿中肌酐

目的评价以5-氟尿嘧啶（5-Fluorouracil，5-Fu）作内标的反相高压液相色谱（highpressure liquid chromatography，HPLC）测定血清和尿中肌酐（ereatinine）的方法，拟初步推荐其作为肌酐测定的候选参考方法，同时对3种常规肌酐测定试剂进行评定。方法首先对以5-Fu作内标的反相HPLC测定血清和尿中肌酐的方法进行了方法学评价。进一步以该方法为对比方法，分别采用Jaffe动力学法、酶法、干化学法测定试剂对85份新鲜血清和94份新鲜尿液标本进行测定，对测定结果进行相关和偏差分析。结果以5-Fu作内标的反相HPLC，其线性范围达2210μmol／L，批内变异系数（n=5）〈2．5％，日间变异系数（n=10）〈4．5％，回收率96．3％～102．4％。血清肌酐含量〈150μmol／L时（n=53），HPLC与各种方法间的相关系数分别为0．9314、0．9421、0．9284。血清肌酐含量〉150μmol／L时（n=32），HPLC与各种方法间的相关系数分别为0．9877、0．9841、0．9934。结论拟推荐以5-Fu作内标的反相HPLC作为肌酐测定的候选参考方法；肌酐酶偶联肌氨酸氧化酶法可作为常规测定方法。     

酶联免疫吸附法检测血清舒芬太尼血药浓度的应用价值

目的探讨应用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清舒芬太尼浓度及其在产妇镇痛分娩、婴儿脐带血血药浓度监测中的应用价值。方法应用ELISA两步法定量检测舒芬太尼浓度,拟合标准曲线,测定检测限,并检测自控椎管内镇痛分娩产妇和婴儿脐带血血清样本各48份,分别检测用药1、3、5h和脐带血的血药浓度。结果此方法绘制的舒芬太尼标准曲线为：Y=420.375 X＋32.043,1h血清舒芬太尼浓度为（0.087±0.013）μg/mL,3h舒芬太尼浓度为（0.026±0.011）μg/mL,5h舒芬太尼浓度为（0.011±0.050）μg/mL,脐带血血药浓度为（0.040±0.029）μg/mL。结论 ELISA方法测定人血舒芬太尼简便、快捷,血药浓度1h达峰值,分娩镇痛效果理想,可用于临床药动学研究。婴儿脐带血药物浓度极低,未见药物不良反应。     

HPLC法测定杯苋甾酮的血药浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定杯苋甾酮在家兔血浆中的药物浓度。方法血浆样品用乙腈提取,流动相为乙腈20g、水80g、磷酸二氢钠1.20g,流速1mL/min,检测波长243nm。结果家兔口服给药后血浆中可检出杯苋甾酮,杯苋甾酮在0.565～9.040μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9990(n=5),日内RSD为±3.9%,日间RSD为±7.3%;血浆最低检测浓度为0.28μg/mL。结论本法快速、准确、重现性好,为该药物的药代动力学研究提供依据。     

瑞舒伐他汀对代谢综合征患者血清血管生成素-2和超敏C反应蛋白的影响

目的观察瑞舒伐他汀对代谢综合征（MS）患者血清血管生成素-2（Ang-2）和超敏C反应蛋白（hs-CRP）的影响及其安全性。方法将80例MS患者分为治疗组40例和对照组40例。两组均给予降压治疗,同时治疗组加用瑞舒伐他汀10mg／d口服,疗程8周。对照组不用任何调脂药。治疗前和治疗后8周分别检测血清Ang-2、hs-CRP浓度及肝、肾功能,比较两组治疗前、后各相关指标的差异。结果（1）治疗组治疗8周后Ang-2和hs-CRP浓度较治疗前显著降低[（1．81±0．47）μg／L降至（0．30±0．01）μg／L,（6．32±1．28）mg／L降至（2．02±0．26）mg／L;t=9．02、t=5．75,P均〈0．01];而对照组上述指标在治疗前后比较差异均无统计学意义[（1．80±0．45）μg/L与（1．79±0．48）μg／L,（6．28±1．34）mg／L与（6．20±1．42）mg／L;t=0．19、t=0．23,P均〉0．05]。（2）治疗8周后治疗组的Ang-2和hs-CRP浓度与对照组相比明显降低[（0．30±0．01）μg／L与（1．79±0．48）μg／L,（2．02±0．26）mg／L与（6．20±1．42）mg／L;t=2．34、t=2．58,P均〈0．05]。（3）治疗组不良反应少,安全性好。结论瑞舒伐他汀可降低MS患者血清Ang-2和hs-CRP浓度,改善胰岛素抵抗,其安全性良好。     

川芎嗪干预长春新碱抑制骨髓基质细胞增殖的研究

目的探讨川芎嗪(LH)促进小鼠骨髓基质细胞(BMSC)生长及干预长春新碱(VCR)抑制小鼠BMSC增殖的作用。方法①LH5、10、20、40μg/mL,以及VCR2.5、5、10、15μg/mL分别与BMC共同培养14d,测定细胞增殖。②LH5、10、20、40μg/mL与BMC预培养1h后再分别加入终浓度为5μg/mLVCR继续培养     

HPLC法测定注射用硫酸头孢噻利的含量

目的：建立硫酸头孢噻利含量测定的反相高效液相色谱方法。方法采用HPLC-UV法测定,对乙酰氨基酚为内标,Kromasil C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）为分析柱,50 mmol·L^-1磷酸二氢钠溶液-乙腈（90：10）,流速为0.8 mL·min^-1,检测波长为254 nm。结果头孢噻利在20～640μg·mL^-1检测浓度范围内呈良好线性关系（r=0.9999）,平均回收率为（99.19±0.64）%;日内差异RSD≤0.78%（n=5）,日间差异RSD≤1.83%（n=5）。结论该方法操作简便、灵敏、准确,适用于头孢噻利的含量检测。     

尿毒症脑病大鼠脑组织多巴胺、5-羟色胺含量变化及发病机制的探讨

目的研究急性肾功能衰竭及并发脑病时脑组织中多巴胺、5-羟色胺含量变化,从而探讨尿毒症脑病的发病机制。方法成年健康Wister大鼠36只,随机分为两组：正常对照组（12只）、模型组（24只）。模型组大鼠给予顺铂10mg／kg连续两日腹腔注射,诱导急性肾功能衰竭,按设定的分组标准据其临床表现再将模型组大鼠分为尿毒症组和尿毒症脑病组。高效液相-电化学检测法分别检测上述三组大鼠大脑额叶皮质内多巴胺、5-羟色胺两种单胺类神经递质的含量;自动生化仪检测三组大鼠的血肌酐值。结果尿毒症组、尿毒症脑病组血肌酐值（205．67-4-27．69tmaol／1,304．50±66．17tnnol／1）明显高于正常对照组（97．00±27．44tanol／1）,差别有统计学意义（P〈0．05）。尿毒症脑病组肌酐值明显高于尿毒症组,差别有统计学意义（P〈0．05）;尿毒症组大鼠脑组织中多巴胺含量（0．74±0．10μg／g）、5-羟色胺含量（0．36±0．11μg／g）低于正常组（0．78±0．11μg／g,0．38±0．11μg／g）,差别没有统计学意义（P〉0．05）。尿毒症脑病组多巴胺含量（0．65±0．09μg／g）、5-羟色胺含量（0．24±0．09μg／g）低于正常组,差别有统计学意义（P〈0．05）。尿毒症脑病组多巴胺、5-羟色胺浓度低于尿毒症组,差别有统计学意义（P〈0．05）;尿毒症脑病组多巴胺、5．羟色胺含量与血肌酐值无线性相关（r=-0．347;-0．277,P〉0．05）。结论顺铂10mg／kg连续两日腹腔注射可以成功建立大鼠急性肾功能衰竭动物模型。急性。肾功能衰竭无神经系统并发症时脑组织中多巴胺、5-羟色胺-浓度无变化,并发神经系统症状时含量降低,因此多巴胺、5-羟色胺可能参与了尿毒症脑病的发生。急性肾功能衰竭时血肌酐值越高,越容易并发神经系统症状。急性。肾功能衰竭并发脑病时,并非血肌酐值越高,脑组织中多巴胺、5-羟色胺浓度越低,二者无线性相关性。     

钴对表达在爪蟾卵母细胞上P2X4受体介导的ATP-激活电流的调制

目的 研究钴对P2X4受体介导的ATP-激活电流（ⅠATP）的调制作用.方法 应用双微电极电压钳技术,记录细胞外液加CoCl2对表达在爪蟾卵母细胞上的大鼠颈上神经节P2X4受体介导的ⅠATP的调制作用.结果 0.1 ～30 μmol/L浓度范围的钴离子对P2X4受体介导的ⅠATP呈明显的增强效应,钴浓度越高,ⅠATP幅值越大,0.1μmol/L、0.3μmol/L、1μmol/L、3μmol/L、10 μmol/L、30 μmol/L的钴离子使ⅠATP增加的百分比分别为：12.1±4.6,30.4±5.1,49.3±6.8,70.9±7.2,104.2±16.7,145.8 ±20.1（P ＜0.01）;ⅠATP的量-效曲线在钴离子的作用下向左上移位;应用1 μmol/L钴离子加ATP的混合液同时灌流细胞,可导致ATP的EC50从（15.6±1.9）μmol/L降低到（8.1 ±0.6）μmol/L（P ＜0.01）;即使是高浓度的钴,仍然对ⅠATP表现出明显的增强作用;当ATP浓度不变,钳制电位变化（-140 ～ 60 mV）时,钴离子对P2X4受体介导的ⅠATP的增强作用无明显变化.结论 钴对P2X4受体介导的ⅠATP的增强效应呈浓度依赖性而非电压依赖性.钴与通道蛋白胞外环的作用位点可能与锌和镉不同.     

HPLC测定肾衰泄浊颗粒中大黄素、大黄酚的含量

目的建立肾衰泄浊颗粒中大黄素、大黄酚的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法（HPLC）测定大黄素、大黄酚的含量,用YWG-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15）为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为35℃。结果大黄素在0.04-0.40μg范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为100.36%,RSD为0.82%;大黄酚在0.048-0.480μg范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为102.45%,RSD=1.05%。结论该方法简便、准确、重复性好,可作为该制剂含量测定方法。     

HPLC法测定枣仁安神颗粒中丹酚酸B的含量

目的：建立以高效液相色谱法测定枣仁安神颗粒中丹酚酸B含量的方法。方法：色谱柱为phenomenex Lu-nar C18（150 mm×4.6 mm id,5μm）,流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水（30∶10∶1∶59）,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为286 nm。结果：丹酚酸B进样量在0.1664～1.6640μg范围内与峰面积分值呈良好的线性关系（r=0.9999）;平均加样回收率为99.95%,RSD=0.09%（n=9）。结论：本方法操作简便,准确,可用于该制剂中丹酚酸B的含量测定。