细胞衰老与p16INK4a的转录调控

抑癌基因p16~(INK4a)可特异地抑制CDK4及CDK6,在抑制细胞生长、促进细胞衰老等方面发挥重要的生物学作用。由于p16~(INK4a)功能的重要性,近年来,针对p16~(INK4a)转录调控方面的研究取得了一系列进展,发现了一系列正性和负性调控元件和转录调控因子,如:E47、Id1、Jun B、Bmi-1、RREB等,为进一步认识细胞增殖规律以及衰老进程具有重要的理论意义。     

Th1和Th2细胞在体内的分化

近年来 ,人们对Th1/Th2细胞在体内的分化及其调控等方面有了许多新的认识。本文就Th1/Th2细胞在体内的分化来源、基因转录和信号调节、影响因素、表面标志及应用方面作一综述 ,这对进一步探讨免疫系统及其功能具有重要意义。     

Th1和Th2细胞在体内的分化

近年来，人们对Th1/Th2细胞在体内的分化及其调控等方面有了许多新的认识。本文就Th1/Th2细胞在体人的分化来源、基因转录和信号调节、影响因素、表面标志及应用方面作一综述，这对进一步探讨免疫系统及其功能具有重要意义。     

Th1/Th2分化的转录调节

Th1/Th2平衡在机体免疫反应调节中具有关键性作用。许多普遍性转录因子和细胞特异性转录因子参与了对Th1/Th2分化的转录调节 ,对这些转录因子在Th1/Th2分化中作用的研究 ,将有助了解免疫性疾病的发病机理和探索新的治疗方法。     

Th1／Th2分化的转录调节

Th1/Th2平衡在机体免疫反应调节中具有关键性作用。许多普遍性转录因子和细胞特异性转录因子参与了对Th1/Th2分化的转录调节，对这些转录因子在Th1/Th2分化中作用的研究，将有助了解免疫性疾病的发病机理和探索新的治疗方法。     

幽门螺杆菌对AGS细胞p53、p21WAF1/CIP1和p27KIP1基因转录的影响

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物(Cyclin-dependent kinase inhibitors，CDKIs)负调控CDKs活性，主要有p16^INK4a和p15^INK4b及p21^WAF1/CIP1和p27^KIP1等两类。p53基因亦可调控细胞周期及凋亡，异常的细胞凋亡与消化道等肿瘤密切相关。本文采用MP-RT-PCR检测了cag-A^ ／CagA^ 和cagA^-／CagA^- Hp菌株感染前后AGS细胞p53、p21^WAF1/CIP1和p27^KIP1转录水平的改变，以期了解肋诱导细胞癌变和细胞周期阻滞的关系及可能的机制。     

CUTL1与肿瘤

CUTL1又称CDP,Cut,Cux,属于同源框异型盒转录因子家族,参与细胞的生长、分化和发育,并参与许多细胞基因的转录调节。CUTL1在髓性增生性疾病,卵巢肿瘤中存在杂和性缺失,在子宫平滑肌瘤,胰腺癌和乳腺癌中表达有增高。CUTL1为TGFβ信号转导通路的一个靶标,介导TGFβ的促迁移活性并在促进细胞运动和肿瘤细胞侵袭性生长方面发挥重要作用。     

014 Th1和Th2细胞在体内的分化

近年来，人们对Th1／Th2细胞在体内的分化及其调控等方面有了许多新的认识。本文就Th1／Th2细胞在体内的分化来源、基因转录和信号调节、影响因素、表面标志及应用方面作一综述，这对进一步探讨免疫系统及其功能具有重要意义。     

Pax5对B细胞分化发育调控作用的研究进展

转录因子Pax5在B细胞定向分化发育过程中发挥重要调控作用。B细胞定向分化发育相关的转录因子如PU.1、干扰素调节因子4(Interferon regulatory factor 4,IRF4)、IRF8和NF-κB结合在Pax5基因5’上游增强子区,转录因子EBF、STAT5结合在Pax5基因5’上游启动子区,从而共同促进Pax5基因的表达。表达的Pax5蛋白不仅通过IgH的V(D)J片段染色质的甲基化和乙酰化修饰来调节IgH V(D)J重排,并且通过B细胞特异性基因(mb-1、VpreB、λ5、CD19、BLNK等)表达调控B细胞的定向分化发育。若Pax5基因缺失,影响组蛋白H3-K9的修饰,导致B细胞向非B细胞分化。总之,Pax5在B细胞定向分化发育中起到重要调控作用。     

p21调控胃癌POLD1基因的初步机制探究

目的 分析p21调控胃癌POLD1基因表达的初步机制,以探索基于降低胃癌POLD1基因表达并阻断癌细胞恶性增殖的分子靶点。方法 利用生物信息学软件Cytoscape、String分析p21与POLD1基因的相互关系;干扰胃癌细胞中p21基因的表达,采用荧光定量PCR及Western blot法检测POLD1基因及细胞周期调控因子CDK2、CDK4、p53、PCNA的表达变化,采用免疫共沉淀实验分析p21与POLD1基因编码的蛋白p125之间的相互作用。结果 生物信息学分析发现,p21通过CDK2、PCNA与POLD1直接关联,并与CDK4等细胞周期因子间接相关。干扰胃癌细胞中p21的表达后,POLD1、CDK2、CDK4表达上调,而p53表达下调。免疫共沉淀实验未检测到p21与p125直接相互作用。结论 p21能负调控胃癌中POLD1基因的表达,这种调控作用与细胞周期调控因子CDK2、CDK4、p53、PCNA等密切相关。     

转录因子PU.1在造血分化中的作用

PU 1是Ets转录因子家族成员 ,主要在造血系统如髓细胞和B淋巴细胞中表达 ,调节大量髓系基因的转录从而调节造血系统的分化 ,近期研究发现其功能的阻断与急性髓细胞性白血病 (acutemyeloidleukemia ,AML)的发生有关。     

细胞周期调控基因——p21~(CIP1/WAF1)

p21~(CIPWAF1)基因编码的产物是一种细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白。它通过调控细胞周期的进程,参与细胞的生长、分化、衰老及死亡。在细胞DNA损伤反应及肿瘤的发生、发展中也占有一席之地。本文对p21基因的发现、基因及蛋白质结构、生物化学特性、生物学特性以及研究前景作一概述。     

转录因子EGR—1及其抑癌作用的研究进展

EGR 1是一具有 3个锌指结构的转录因子。其基因Egr 1的转录和表达受多种因素调控。EGR 1能与许多基因的启动子区类似或相同于SP1和WT1的DNA序列结合 ,与WT1或SP1竞争或协同调控目的基因的转录。Egr 1在多种恶性肿瘤细胞中转录及表达减低或缺失 ,这是由于这些细胞缺乏转录和表达潜力。外源高表达EGR 1能抑制一些肿瘤的生长和恶性表型 ,其作用与下调bcl 2及激活TGFβ1 ,FN ,p2 1和FAK的表达有关。故认为该基因是一具基因治疗价值的Ⅱ类抑癌基因。Egr 1基因启动子的放射可诱导性也被用于一些肿瘤的治疗研究。     

cyclinD1过表达对子宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞增殖及上皮间质转化的影响北大核心CSCD

目的 探讨cyclin D1过表达对子宫颈鳞癌SiHa细胞增殖、分化的影响及其他信号分子的变化情况.方法 采用PCR法扩增cyclin D1基因全长,构建cyclin D1-pcDNA3.1质粒转染人乳头状瘤病毒16阳性的SiHa细胞,筛选cyclin D1稳定过表达细胞株.采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法和Western blot分别检测转染细胞cyclin D1 mRNA和蛋白表达.采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法绘制细胞生长曲线,采用RT-PCR法和Western blot检测转染细胞CK7、E-cadherin、波形蛋白、Snail基因的mRNA和蛋白表达;采用RT-PCR法检测增殖分化相关基因CDK4、CDK2、p21、p27、cyclin E、Rb、E2F、E6/E7、Ki-67基因的mRNA表达水平.对细胞同步化处理,用RT-PCR法检测细胞周期不同时间点cyclin D1及p21基因的mRNA表达情况.结果 成功构建cyclin D1稳定过表达的G-3细胞株.生长曲线及Ki-67 mRNA升高（P〈0.05）提示G-3细胞增殖速度加快,G-3细胞中波形蛋白、Snail基因和蛋白表达明显增加（均P〈0.05）,E-cadherin、CK7基因和蛋白表达明显降低,提示转染细胞发生了上皮间质转化.cyclin D1过表达后,CDK4、CDK2、p21、p27、cyclin E表达增加,Rb、E2F、E6/E7、p16表达无明显改变,p21与cyclin D1表达趋势基本一致,在细胞周期不同时间点表达存在波动性.结论 转染诱导cyclin D1过表达可促进SiHa细胞增殖和上皮间质转化,这一过程中伴随着CDK4、CDK2、p21、p27、cyclin E基因表达的上调.cyclin D1过表达时,p21表达量也增高,可能通过影响波形蛋白表达参与了对SiHa细胞上皮间质转化的调控.     

人类XBP1基因5′上游DNA序列的转录激活功能分析

目的分析人类转录因子X-盒结合蛋白1（X-box binding protein Ⅰ，XBP1）基因启动子在不同细胞系中转录活性的差别，研究其转录调控机制。方法在对XBP1基因进行生物信息学分析的基础上，设计6种XBP1启动子缺失突变体，分别包括剧XBP1基因5’上游-1039～66bp、-859～66bp、-623～66bp、-351～66bp，-227—66bp、-227～-45bp，针对每一种缺失突变体构建相应的氯霉素乙酰转移酶（chloramphenicol acetyltansferase，CAT）报告基因载体，再分别瞬时转染K562、HepG2、NIH-3T3和LO2细胞，应用报告基因CAT瞬时表达系统，检测XBP1每一种缺失突变体在K562、HepG2、NIH-3T3和LO2 4种不同细胞中的活性差异，并进一步确定脚，基因启动子的具体调节部位。结果成功获得XBP1基因启动子6种缺失突变体的正确克隆和6种相应的报告基因载体p1—XBP1p，p2-XBP1p，p3-XBP1p，p4-XBP1p，p5-XBP1p，p6-XBP1p，每一种报告基因转染K562、HepG2、NIH-313和LO2 4种不同细胞系后，p4-XBP1p和p5-XBP1p在K562、HepG2细胞中的转录活性均高于其它报告载体，p5-XBP1p在HepG2细胞中转录活性最高；而6种报告基因载体在NIH-3T3小鼠成纤维细胞中不具有转录活性。结论。XBP1基因的转录激活能力在不同细胞中有所差异，其表达活性具有一定的细胞类型特异性，与细胞类型和细胞状态密切相关；XBP1基因启动子的-227～66bp区域是该启动子的核心部位，而且核心启动子区包括ATG翻译起始密码子的下游部位，这一部位是转录活性的重要部位，一旦缺失，XBP1基因启动子会丧失活性。     

089 Th1／Th2分化的转录调节

Th1／Th2平衡在机体免疫反应调节中具有关键性作用。许多普遍性转录因子和细胞特异性转录因子参与了对Th1／Th2分化的转录调节，对这些转录因子在Th1／Th2分化中作用的研究，将有助了解免疫性疾病的发病机理和探索新的治疗方法。     

富含亮氨酸重复序列的结合蛋白1的研究进展

富含亮氨酸重复序列相互作用蛋白1 (LRRFIP1)是一种转录抑制因子,存在于多种动物和人的组织细胞中,在表皮生长、肿瘤及脑血管病中表达明显升高,具有转录抑制作用、参与信号通路调控及参与血小板细胞骨架的组成部分,也是miRNA调节的靶基因,并起着重要作用.对LRRFIP1的结构特点、分布与功能及其机制进行综述.     

E2F-1诱导细胞凋亡研究进展

E2Fs转录因子具有调控细胞增殖、分化和凋亡相关基因转录的重要作用。迄今为止,在哺乳动物中已确定的E2F转录因子家族成员有7个,即E2F-1、E2F-2、E2F-3、E2F-4、E2F-5、E2F-6和E2F-7,每个E2F家族成员都有特定的功能。近年来,许多研究表明E2F-1具有特异性地诱导细胞凋亡的功能,其诱导凋亡作用与P53、P73、APAF-1、CASPASE-3、CASPASE-7、BCL-2家族、DIP、SIVA和NF-κB等因子有关。根据诱导细胞凋亡是否依赖于P53,E2F-1诱导凋亡机制分为P53依赖性和P53非依赖性方式。因此,E2F-1已成为肿瘤基因治疗的新靶点。     

髓细胞白血病—1基因及其产物研究进展

髓细胞白血病-1(myeloid cell lekemia-1,MCL-1)基因是高度可调节的分化早期活化基因,属于抗凋亡基因家族成员,其编码产物Mcl-1蛋白与正常和异常造血细胞的生存及分化有密切关系.细胞外调节蛋白激酶通路、Janus激酶/信号转导与转录活化因子(JAK/STAT)通路、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸激酶Akt通路等多个信号转导途径参与了正常和异常造血细胞内MCL-1表达的调控.