胃癌及癌前病变组织中c_erbB_2癌基因产物的表达

目的探讨ｃｅｒｂＢ２癌基因产物的表达与胃癌发生及胃癌生物学行为的关系．方法应用抗ｃｅｒｂＢ２癌基因蛋白（Ｐ１８５）的单克隆抗体，采用免疫组化ＡＢＣ方法对正常胃粘膜（ｎ＝９）、各级胃粘膜异型增生（轻度ｎ＝１０，中度ｎ＝６，重度ｎ＝７）、早期胃癌（ｎ＝１８）及进展期胃癌（ｎ＝３０）进行研究，并与胃癌类型、大小、有无淋巴结转移等作了比较分析．结果正常胃粘膜为阴性，仅在腺体颈部偶见Ｐ１８５蛋白的弱阳性表达．在异型增生病变中则有较高的表达率，并随异型增生程度的增加，表达率逐渐升高，轻、中、重度异型增生表达率分别为５０％，８３３％，８５７％．Ｐ１８５蛋白在早期及进展期胃癌中的表达率分别为２２２％和５６７％．重度异型增生表达率显著高于早期胃癌（Ｐ＜００５），进展期胃癌表达率显著高于早期胃癌（Ｐ＜００５），淋巴结转移组的表达率高于淋巴结未转移组（５９３％ｖｓ２３８％，Ｐ＜００５），但Ｐ１８５蛋白的表达与胃癌组织学类型及胃癌肿块大小无相关性（Ｐ＞００５）．结论ｃｅｒｂＢ２癌基因有可能参与正常胃粘膜的增殖、修复及癌变过程，Ｐ１８５蛋白阳性的肿瘤可能具有更强的浸润及转移能力．     

胃Hp感染与癌前病变癌基因和抑癌基因表达的关系

目的研究Ｈｐ感染与胃癌及癌前病变中ｃｍｙｃ，ｐ２１，ｐ５３增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的相互关系，以探讨Ｈｐ可能的致癌机制．方法经内镜和病理诊断明确的病变者共１２０例，包括慢性浅表性胃炎（ＣＳＧ）、肠上皮化生、不典型增生、胃癌各３０例．以ＡＢＣ免疫组化法检测上述标本中ｃｍｙｃ，ｐ２１，ｐ５３，ＰＣＮＡ的表达，以改良Ｇｉｅｍｓａ法检测Ｈｐ．各组比较用χ２检验．结果肠型胃癌Ｈｐ阳性率为８３３％（２０／２４），弥漫型６例中Ｈｐ阳性１例．非贲门部胃癌阳性率为７３９％（１７／２３），贲门癌７例中阳性３例．胃癌Ｈｐ阳性率（６６７％）与ＣＳＧ（３３３％）比较差异非常显著（Ｐ＜００１）．各组Ｈｐ阳性的ｃｍｙｃ，ｐ２１，ｐ５３，ＰＣＮＡ与其Ｈｐ阴性者作相应比较均有显著或非常显著性差异（Ｐ＜００５～００１）．结论Ｈｐ感染与肠型胃癌的关系更密切，更容易发生于非贲门部．Ｈｐ感染可增加细胞的增殖活性，并通过使抑癌基因失活及癌基因激活而引起胃癌     

胃粘膜癌变过程中幽门螺杆菌感染与p53,c-erbB-2基因表达的研究

目的探讨胃粘膜癌变过程中幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,Ｈｐ）感染与ｐ５３,ｃｅｒｂＢ２基因表达的关系．方法浅表性胃炎１６例,肠上皮化生２２例,异型增生１４例,早期胃癌１８例及进展期胃癌４０例作为研究对象．用ＷａｒｔｈｉｎＳｔａｒｙ银染色法检测Ｈｐ,用免疫组化Ｓｐ法检测ｐ５３和ｃｅｒｂＢ２的基因表达产物．结果Ｈｐ,ｐ５３,ｃｅｒｂＢ２在浅表性胃炎的检出率各为５００％,００％,００％;在肠上皮化生的检出率各为５９１％,２２７％,１３６％;在异型增生的检出率各为８５７％,６４３％,２８６％;在早期胃癌的检出率各为１６７％,３３３％,１１１％;在进展期胃癌的检出率各为５０％,５２５％,５５０％;在癌旁粘膜的Ｈｐ检出率为８６７％;在癌前病变中,Ｈｐ阳性组的ｐ５３,ｃｅｒｂＢ２表达率均高于Ｈｐ阴性组．结论Ｈｐ感染参与了胃癌前病变的发生与发展;Ｈｐ感染可引起野生型ｐ５３基因失活和ｃｅｒｂＢ２基因激活,从而导致胃粘膜的癌变．     

胃癌c—erbB—2及增殖细胞核抗原表达与预后的关系

目的：探讨胃癌ｃｅｒｂＢ２及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达与预后的关系。方法：应用免疫组化ＡＢＣ法对１０３例胃癌胃镜活检组织进行检测。结果：分别有１９例与５３例出现ｃｅｒｂＢ２阳性表达及高ＰＣＮＡ阳性标记（＞３５６１％），两者表达与胃癌大体类型、进展程度、组织类型、分化程度及有无伴淋巴结及肝转移情况密切相关。高ＰＣＮＡ阳性标记者ｃｅｒｂＢ２表达阳性率高，５年生存率低；高中分化胃癌中，ｃｅｒｂＢ２表达阳性者５年生存率显著低于阴性者。结论：提示ｃｅｒｂＢ２与ＰＣＮＡ表达检测可作为胃癌预后估计的独立指标     

幽门螺杆菌相关胃溃疡的细胞增殖与凋亡研究

目的观察Ｈｐ感染对胃溃疡（ＧＵ）患者胃粘膜上皮细胞增殖与凋亡的影响,进而对溃疡发生机制进行探讨．方法标本取自内镜下胃粘膜活检,细胞凋亡检测采用Ｔｕｎｅｌ方法,细胞增殖检测采用免疫组化ＬＳＡＢ方法测定增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）．结果ＧＵＨｐ＋患者细胞凋亡指数（ＡＩ）明显高于Ｈｐ－患者（Ｐ＜００５）,但比较两者的增殖细胞指数（ＰＣＮＡＬＩ）,无显著性差异（Ｐ＞００５）;慢性浅表性胃炎Ｈｐ＋患者ＡＩ,ＰＣＮＡＬＩ明显高于Ｈｐ－患者（Ｐ＜００５）,ＧＵＨｐ＋患者的ＡＩ／ＰＣＮＡＬＩ比值为１５４１,明显高于其他各组（Ｐ＜００５）．结论Ｈｐ感染能诱导ＧＵ患者胃粘膜上皮细胞凋亡增加,出现细胞凋亡与细胞增殖平衡失调,促进溃疡形成     

消化性溃疡及糜烂性胃炎患者前列腺素及血栓素与幽门螺杆菌的关系

目的探讨消化性溃疡及糜烂性胃炎与前列腺素、血栓素及幽门螺杆菌的关系．方法用放免技术，测定消化性溃疡（ｎ＝５３）、糜烂性胃炎（ｎ＝５５）患者及正常人（ｎ＝５４）血浆中前列腺素（６ｋｅｔｏＰＧＦ１α）、血栓素（ＴＸＢ２）的含量，并胃粘膜活检组织学查幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）．结果溃疡组及糜烂性胃炎组ＴＸＢ２含量及ＴＸＢ２／６ｋｅｔｏＰＧＦ１α的比值均明显高于对照组（Ｐ＜００１），两组的６ｋｅｔｏＰＧＦ１α的含量与对照组无差异（Ｐ＞００５）．两组患者中Ｈｐ（＋）与Ｈｐ（－）之间的６ｋｅｔｏＰＧＦ１α，ＴＸＢ２的含量及ＴＸＢ２／６ｋｅｔｏＰＧＦ１α的比值均无差异（Ｐ＞００５）．结论ＴＸＡ２与ＰＧＩ２失衡可能与溃疡的发病密切相关，而Ｈｐ的存在对前列腺素的含量无肯定作用     

大肠癌P53蛋白PCNA和CEA的表达与淋巴结转移的关系

目的研究大肠癌Ｐ５３蛋白、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和ＣＥＡ的表达与淋巴结转移的关系．方法应用链霉菌素生物素（ＳＰ）免疫组化法，观察４４例大肠癌Ｐ５３，ＰＣＮＡ的阳性率和ＣＥＡ的表达型式．结果大肠癌Ｐ５３阳性率为５２３％；大肠癌Ｐ５３阳性表达与性别、年龄及肿瘤的部位、分化程度和浸润深度无关（Ｐ＞００５）；大肠癌Ｐ５３阳性者其淋巴结转移率较阴性者高（１４／２３，６０９％ｖｓ６／２１，２８６％，Ｐ＜００５）；Ｐ５３阳性表达及有淋巴结转移者其细胞增殖活性分别较Ｐ５３阴性表达及无淋巴结转移者高（５５９±１７ｖｓ３７９±１４，Ｐ＜００５；５６２±１５ｖｓ３９６±１７，Ｐ＜００５）；Ｐ５３阳性表达及有淋巴结转移者其ＣＥＡ表型均以胞质型和间质型为主（２１／２３，９１３％ｖｓ１３／２１，６１９％，Ｐ＜００５；１９／２０，９５０％ｖｓ１５／２４，６２５％，Ｐ＜００５）．结论检测Ｐ５３和ＰＣＮＡ表达及ＣＥＡ表型对判断大肠癌的恶性程度，预测其淋巴结转移趋势和预后及指导临床治疗有重要价值．     

C-myc,Bcl-2与胃癌生物学行为和细胞凋亡

目的探讨癌基因Ｂｃｌ２，Ｃｍｙｃ的表达变化与胃癌生物学行为和细胞凋亡的关系．方法采用免疫组化ＬＳＡＢ法，检测６０例原发性胃癌组织（男３８例，女２２例，年龄３７岁～７５岁）癌基因Ｂｃｌ２，Ｃｍｙｃ蛋白的表达变化；在普通光学显微镜下对受检组织的ＨＥ片进行形态学测量和凋亡细胞计数．结果受检组织６０例中，Ｃｍｙｃ阳性表达３７例（６２％），其表达与分化程度和临床分期呈显著性相关，且Ｃｍｙｃ阳性组织细胞凋亡指数（０７±０３）明显高于阴性组织（０３±０２）；所检标本中，Ｂｃｌ２阳性表达率为６８％（４１／６０），其中高分化胃癌的阳性表达率明显高于低分化胃癌（３２％ｖｓ９％）（Ｐ＜００５），阳性Ｂｃｌ２组织与阴性Ｂｃｌ２组织比较，前者凋亡指数明显低于后者（０４±０３ｖｓ０９±０５）（Ｐ＜００５）．结论Ｃｍｙｃ与Ｂｃｌ２基因的异常表达是胃癌生物学行为的重要影响因素，二者在胃癌形成过程中均起着一定的作用，并对细胞增生与凋亡有重要调节作用．     

幽门螺杆菌感染与胃粘膜增殖细胞核抗原表达的关系

目的探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染对胃粘膜细胞增殖活性的影响．方法采用免疫组化法，观察３４例Ｈｐ阳性的慢性胃病患者（男１９例，女１５例）胃窦粘膜增殖细胞核抗原标记指数（ＰＣＮＡＬＩ），同时以１２例Ｈｐ阴性的慢性胃病患者作对照，并对Ｈｐ阳性患者进行抗Ｈｐ治疗，４周后复查ＰＣＮＡＬＩ．结果Ｈｐ感染胃窦粘膜ＰＣＮＡＬＩ较无Ｈｐ感染显著增高（２９０２±１０２３比１４３１±６８７，Ｐ＜００１）；Ｈｐ根除（ｎ＝２４）后胃窦粘膜ＰＣＮＡＬＩ由２８１１±１１５降至１７６８±９６５（Ｐ＜００１），而Ｈｐ未根除（ｎ＝１０）时则无显著降低（２９１７±８１４→２４４２±７４４，Ｐ＞００５）．Ｈｐ感染时胃粘膜ＰＣＮＡＬＩ与炎症程度正相关（Ｐ＜００５），但与Ｈｐ菌量无相关（Ｐ＞００５）．结论Ｈｐ感染可增加胃粘膜细胞增殖活性，从而增加胃癌发生的危险性，根除Ｈｐ后可纠正这一变化，对预防胃癌发生可能有重要意义．     

胃癌及胃癌前病变患者中医证型与病理及Hp感染的关系

目的研究胃癌及胃癌前病变患者中医分型与病理组织学及Ｈｐ感染的关系．方法选取资料完整的慢性胃病患者之病理及临床资料２０３例进行中医分型、Ｈｐ检测和ＰＣＮＡ染色，对胃癌前病变（ｎ＝１３４）胃癌（ｎ＝３３）及对照组（浅表性胃炎，ｎ＝３６）等各组进行比较分析．结果中医分型与病理改变有一定的相关性，在浅表性胃炎中以寒热夹杂型为主，胃癌及胃癌前病变中以脾胃虚寒为主，而寒热夹杂型较少，在胃癌及胃癌前病变患者中未发现Ｈｐ感染与中医分型有明显关系，胃癌及癌前病变组Ｈｐ感染率（６２４％，６６７％～７９８％）明显高于对照组（３４１％），且发病年龄Ｈｐ阳性者明显低于Ｈｐ阴性者（４９９％ｖｓ５６７，４６１～５３８ｖｓ５３８～６２０，Ｐ＜００５），ＰＣＮＡＬＩ随病变程度的加重而升高（γ＝０９５１，Ｐ＜００２５）．结论Ｈｐ感染与胃癌及胃癌前病变的发生有密切关系．ＰＣＮＡＬＩ是反应胃粘膜病变严重程度的较客观的定量指标     

Whole-genome analysis reveals molecular innovations and evolutionary transitions in chromalveolate species

The chromalveolates form a highly diverse and fascinating assemblage of organisms, ranging from obligatory parasites such as Plasmodium to free-living ciliates and algae such as kelps, diatoms, and dinoflagellates. Many of the species in this monophyletic grouping are of major medical, ecological, and economical importance. Nevertheless, their genome evolution is much less well studied than that of higher plants, animals, or fungi. In the current study, we have analyzed and compared 12 chromalveolate species for which whole-sequence information is available and provide a detailed picture on gene loss and gene gain in the different lineages. As expected, many gene loss and gain events can be directly correlated with the lifestyle and specific adaptations of the organisms studied. For instance, in the obligate intracellular Apicomplexa we observed massive loss of genes that play a role in general basic processes such as amino acid, carbohydrate, and lipid metabolism, reflecting the transition of a free-living to an obligate intracellular lifestyle. In contrast, many gene families show species-specific expansions, such as those in the plant pathogen oomycete Phytophthora that are involved in degrading the plant cell wall polysaccharides to facilitate the pathogen invasion process. In general, chromalveolates show a tremendous difference in genome structure and evolution and in the number of genes they have lost or gained either through duplication or horizontal gene transfer.     

血管紧张素Ⅰ转化酶基因多态和2型糖尿病肾病相关性研究

血管紧张素Ⅰ转化酶（ＡＣＥ）基因多态和２型糖尿病肾病（ＤＮ）的关系。方法用ＰＣＲ技术检测１０２例中国汉族２型糖尿病患者ＡＣＥ基因Ｉ／Ｄ多态基因型。结果ＤＮ组（ｎ＝３６）和无ＤＮ组（ｎ＝４９）相比,Ｄ型等位基因和ＤＤ基因型糖频率升高（分别为５９．７％ｖｓ３８．８％,Ｘ＾２＝７．３０,３３．３％ｖｓ１２．２％,Ｘ＾２＝５．５３）,有显著性差异（Ｐ〈０．０５）,病程≤５年合并ＤＮ组（ｎ＝１１）与病程〉５     

胃癌组织中Survivin、PTEN、P53基因的表达及意义

目的　探讨凋亡抑制基因 Survivin和抑癌基因 PTEN、P53在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展、临床病理特征之间的关系。方法　应用免疫组织化学链霉亲和素方法 (SABC) ,检测 Survivin、PTEN和 P53基因在 6 5例胃癌、2 6例不典型增生胃黏膜、10例浅表性胃炎和 30例正常胃黏膜组织中的表达。结果　胃癌组织中Survivin、PTEN、突变型 P53基因的阳性表达率分别为 70 %、4 8%、6 5 % ,不典型增生胃黏膜中分别为 4 2 %、85 %、31% ,Survivin和突变型 P53基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中不表达 ,PTEN基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中全部呈阳性表达。胃癌组织中 PTEN基因的表达与正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,胃癌组织、不典型增生胃黏膜以及正常胃黏膜中 Survivin和突变型 P53基因的表达差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。随临床分期增加、胃癌分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结的转移 ,突变型 P53基因的阳性表达率逐渐上升 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因的阳性表达率逐渐降低 (P<0 .0 5 )。在胃癌组织中 Survivin与突变型 P53基因的表达呈正相关 (P<0 .0 5 ) ,与 PTEN基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因与突变型 P53基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 )。结论　 Survivin、PTEN和 P53     

Ohno's dilemma: evolution of new genes under continuous selection

New genes with novel functions arise by duplication and divergence, but the process poses a problem. After duplication, an extra gene copy must rise to sufficiently high frequency in the population and remain free of common inactivating lesions long enough to acquire the rare mutations that provide a new selectable function. Maintaining a duplicated gene by selection for the original function would restrict the freedom to diverge. (We refer to this problem as Ohno's dilemma). A model is described by which selection continuously favors both maintenance of the duplicate copy and divergence of that copy from the parent gene. Before duplication, the original gene has a trace side activity (the innovation) in addition to its original function. When an altered ecological niche makes the minor innovation valuable, selection favors increases in its level (the amplification), which is most frequently conferred by increased dosage of the parent gene. Selection for the amplified minor function maintains the extra copies and raises the frequency of the amplification in the population. The same selection favors mutational improvement of any of the extra copies, which are not constrained to maintain their original function (the divergence). The rate of mutations (per genome) that improve the new function is increased by the multiplicity of target copies within a genome. Improvement of some copies relaxes selection on others and allows their loss by mutation (becoming pseudogenes). Ultimately one of the extra copies is able to provide all of the new activity.     

嗜肺军团菌htpA基因的克隆及其原核表达

目的克隆并检测嗜肺军团菌htpA基因在原核系统中表达情况,为进一步研究HtpA蛋白的免疫性能作必要的准备。方法采用聚合酶链反应(PCR)从嗜肺军团菌基因组DNA中扩得军团菌热休克蛋白A基因htpA,并将其定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建原核表达重组质粒pGhtpA,重组子经限制性内切酶分析、聚合酶链式反应及测序鉴定后,转化宿主菌大肠杆菌JM109,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定。结果扩增出了291bp完整的htpA基因,构建了原核表达重组质粒pGhtpA,并检测到约36kDa的GST-htpA融合蛋白质表达条带。结论成功克隆了嗜肺军团菌htpA基因并使HtpA蛋白在原核表达系统中得到了有效的表达,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础。     

运动性横纹肌溶解高反应者ACE／CK—MM基因多态性分析

目的探讨中国汉族运动性横纹肌溶解（ERB）高反应者（HR）ACE基因I／D多态性及肌酸肌酶（CK）-MM基因限制性酶切片段多态性的分布特点。方法采用PCR及限制性酶切多态性分析技术,对12例中国汉族ERBHR的ACE、CK-MM基因多态性进行检测、分析。结果本组12例ERBHR的ACE基因频率I为54％、D为46％,D等位基因频率较汉族正常人群高,但无统计学意义（P=0．146）;汉族正常人群与高加索正常人群相比,P〈0．01。本组ERBHR的CK-MM基因频率A为71％、G为29％,G等位基因频率较汉族正常人群高,但无统计学意义（P=0．078）;汉族正常人群与高索ERBHR的该基因频率高度一致（P=0．992）。结论汉族ERBHR人群ACED、CK-MMG等位基因频率均稍高于汉族正常人群。     

福州汉族献血者RHD和RHCE基因的多态性分析

目的：探讨福州市汉族献血者RHD和RHCE基因的多态性。方法：应用PCR-SSP等技术分析206名福州市汉族献血者的RHD和RHCE基因。用Arlequin3.5软件计算RHD、RHCE基因频率,检验Hardy-Weinberg平衡,计算最大可能性RH单倍型频率。结果：206名福州市汉族献血者都携带RhD抗原,都存在所检测的RHD基因第1、3、4、5、6、7、9和10外显子。206名献血者中,RHD、RHd、RHDel、RHCe、RHcE、RHce和RHCE基因频率分别为0.9660、0.0267、0.0073、0.6788、0.1667、0.0857和0.0688;DCe、DcE、Dce、DCE、dCe、dce、DelCe和DelcE单倍型频率分别为0.6580、0.1661、0.0733、0.0685、0.0145、0.0122、0.0065和0.0008。福州市汉族献血者RHD、RHEC各基因座基因频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P〉0.05）。结论：福州市汉族人群RHD、RHd、RHCe、RHcE、RHce和RHCE等基因和DCe、DcE、Dce、DCE、dCe、dce等单倍型都达到多态水平。在RhD血型阳性中国人中,可能有相当数量的人携带诸如RHd、RHD1227A、RHD207A、RHD710delC等基因。     

共表达HIV-1的gag-gp120与IL-2的pGPIL-2诱导小鼠产生细胞毒性T细胞的研究

目的 研究HIV-1CN融合基因与IL-2基因共表达基因质粒pGPIL-2诱导产生细胞毒性T细胞（CTL）。方法 脂质体介导共表达中国流行株HIV-1gag-gp120基因与IL-2基因的基因疫苗质粒pGPIL-2转染BHK-21细胞,以间接免疫荧光法鉴定其表达。取pGPIL-2免疫鼠脾细胞,检测pGPIL-2诱导的细胞毒性T细胞杀伤活性。结果 杀伤实验结果证明,经基因免疫获得的 CTL效应细胞,可杀伤 HIV-1CN 融合基因转染的靶细胞。结论 pGPIL-2可有效地诱导 CTL的产生,该研究结果为进一步设计中国流行株HIV-1基因疫苗提供了重要实验依据。