糖胺聚糖和蛋白聚糖对神经细胞及中枢神经系统的调节作用

糖胺聚糖及其与蛋白组成的蛋白聚糖属于体内糖复合物大分子。此文综述了它们对神经生长和中枢神经系统的调节作用。发现硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素、硫酸角质素、肝素和硫酸皮肤素等糖胺聚糖或蛋白聚糖对神经细胞生长能起到一定的调节作用,这对揭示它们在脑科学的生物学功能以及开发神经系统药物有着重大的意义。     

肌成束蛋白-1表达对肝癌细胞增殖及细胞骨架的影响

目的研究肌成束蛋白-1(Fascin-1)表达对肝癌细胞HepG2增殖能力和骨架结构的影响。方法采用RNA干扰技术抑制HepG2中Fascin-1表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;免疫荧光法检测Fascin-1表达下调后肌动蛋白微丝的改变。结果 RNA干扰可有效抑制HepG2中Fascin-1表达。Fascin-1蛋白表达下调可抑制细胞增殖,同时引起细胞微丝排列紊乱、断裂、网状结构消失呈絮状,部分细胞收缩。结论 Fascin-1下调引起的肌动蛋白微丝的破坏,一方面可能导致了癌细胞增殖抑制,另一方面可能通过影响细胞运动能力而降低细胞的迁移侵袭能力。     

不同正畸力值对哺乳期大鼠正畸牙周组织中HO-1 CC类趋化因子受体1及其配体的影响

目的 探讨不同正畸力值对哺乳期大鼠正畸牙周组织中血红素氧合酶(HO-1)、CC类趋化因子受体1及其配体的影响。方法 选择3月龄Wistar大鼠126只制备哺乳期大鼠模型,成功制备72只,按随机数字表法分为0N组、0.29N组、0.49N组及0.98N组,每组18只。每组依次给予0N、0.29N、0.49N及0.98N的正畸力,比较干预前1天及干预第1、3、7 天后4组大鼠的CC趋化因子受体1(CCR1)及其配体(CCL3、CCL5)mRNA相对表达量、HO-1表达及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)破骨细胞染色阳性面积。结果 干预第1、3天,0.29 N组、0.49 N组及0.98 N组CCR1、CCR3和CCL5 mRNA表达水平及破骨细胞染色阳性面积较0N组均明显增加(P<0.05),0.49N组及0.98N组上述指标水平较0.29N组均明显增加(P<0.05),而0.49N组与0.98N组这些指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 正畸干预可通过促进哺乳期大鼠牙周组织中HO-1、CCR1及其配体的表达发挥作用。     

血小板源性转化生长因子β1对胃腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨血小板源性转化生长因子β₁(TGFβ₁)对胃腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法 使用胃腺癌AGS和MKN-45两种细胞株,分别与健康人血小板、胃腺癌血小板、胃腺癌血小板+NCsiRNA、胃腺癌血小板+TGFβR1siRNA351共培养,进行CCK细胞增殖实验和划痕实验。另有一组未加入血小板为未处理组。结果 CCK增殖实验发现两株细胞的未处理组与健康人血小板组的OD值无差别(P> 0.05),胃腺癌血小板组的OD值均明显低于未处理组与健康人血小板组(P <0.05)。划痕实验表明两株细胞的未处理组、健康人血小板组、胃腺癌血小板+TGFβR1siRNA351组划痕面积无差异(P> 0.05),胃腺癌血小板组、胃腺癌血小板+NCsiRNA组划痕内面积均明显小于其他组(P <0.05)。结论 胃腺癌患者的血小板源性TGFβ₁在体外可以抑制胃腺癌细胞的增殖和促进胃腺癌细胞的迁移。     

Notch1对局灶性脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响

目的研究Notch1对脑局灶性缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响,为缺血性脑血管病临床治疗寻找新的靶点。方法 72只SD雄性成年大鼠随机分为等量4组:假手术组(Sham组),缺血再灌组(I/R组),Notch1抑制剂组(DAPT组),溶剂对照组(Vehicle组)。采用线栓法大脑中动脉阻塞(MCAO)模型制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血90 min为标准。Sham组仅分离血管,不插入线栓,Notch1抑制剂组或Vehicle组在模型建立再灌注恢复后立即向缺血对侧侧脑室分别注射DAPT或单纯溶剂(PBS+DMSO),每天1次,分别于术后1、3、7 d断头取脑,病理学观察缺血再灌注侧皮层损伤情况,TUNEL法检测神经细胞凋亡指数(AI),Weatern blot检测PARP裂解片段含量、Notch1活性片段NICD、Akt和Bad磷酸化水平。结果与Sham组相比,I/R组神经细胞凋亡指数及PARP裂解片段含量增加,NICD、磷酸化Akt及Bad水平升高,差异有明显统计学意义(P<0.05);与I/R组相比,给予Notch1抑制剂DAPT后,神经细胞凋亡指数及PARP裂解片段含量明显增加,NICD、磷酸化Akt及Bad水平明显下降,差异有显著性(P<0.05),而溶剂对照Vehicle组的各项指标无明显差异。结论 Notch1在脑缺血再灌注损伤中具有抑制神经细胞凋亡作用,其作用机制可能与增强Akt磷酸化水平,促进Bad失活有关。     

lncRNA SND1-IT1靶向miR-185-5p调控胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)葡萄球菌核酸酶结构域包含蛋白1内含子转录本1( SND1-IT1)靶向miR-185-5p对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人胃黏膜上皮正常细胞和胃癌细胞中lnc SND1-IT1和miR-185-5p的表达.将胃癌细胞AGS分为对...     

BCAT1基因在胃腺癌组织的表达及其对SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移影响机制探讨

探讨BCAT1基因在胃腺癌组织的表达及其对SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移的影响.收集2009年10月～2018年1月于都江堰市中医医院和绵阳市中心医院病理科确诊为胃腺癌患者的石蜡组织标本70例,经手术切除的癌组织为观察组,癌旁组织设为对照组.通过免疫组化检测观察组和对照组中BCAT1的表达水平,统计学软件分析BC...     

长链非编码RNA TUG1对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)TUG1对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SCC25和hOK细胞中TUG1的表达水平;沉默TUG1在SCC25细胞中的表达后,采用qRT-PCR检测不同组别细胞中TUG1水平,同时采用CCK-8法及Transwell法分别检测细胞增殖及迁移侵袭的能力;Western blot检测迁移侵袭相关蛋白的表达情况。结果与hOK细胞比较,SCC25细胞的TUG1表达水平明显升高(P<0.05);与si-NC及对照组比较,si-TUG1组细胞TUG1的表达水平明显降低(P<0.05);沉默TUG1后,SCC25细胞的增殖和迁移侵袭能力明显降低,迁移侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9及VEGF-C的表达水平明显降低(P<0.05)。结论 LncRNA TUG1在OSCC细胞中高表达,沉默TUG1能够抑制OSCC细胞的增殖和迁移侵袭能力。     

CC类趋化因子22、叉头框蛋白P1在急性髓系白血病外周血中的表达及对预后的预测价值

目的 探讨急性髓系白血病（AML）病人外周血中CC类趋化因子22(CCL22)、叉头框蛋白P1(FOXP1)表达水平及其预后预测价值。方法 选择2018年5月至2019年5月在孝感市中心医院、华中科技大学医学院附属同济医院及咸宁市中心医院确诊的68例AML病人设为观察组,另取同期健康体检者68例作为对照组,采用酶联免疫法测定外周血CCL22,FOXP1表达水平,分析其与临床特征的关系;采用Pearson法分析AML病人外周血中CCL22,FOXP1表达的相关性;采用Kaplan-Meier生存分析法分析CCL22,FOXP1表达与总体生存时间（OS）的关系;采用Cox比例风险回归模型分析病人预后死亡的影响因素。结果与对照组相比,观察组CCL22[(600.27±62.89)ng/L比（756.84±100.86）ng/L],FOXP1[(56.02±13.68)ng/L比（103.06±22.16）ng/L]表达均明显升高（t=10.86,14.90,均P<0.05）;CCL22,FOXP1表达水平与AML病人年龄、性别、染色体预后、血红蛋白（HGB）、血小板计数（PLT）、FM...     

肿瘤蛋白翻译控制 1的反义 RNA 1在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨肿瘤蛋白翻译控制 1的反义 RNA 1(TPT1-AS1)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和作用机制。方法收集于 2017年1月至 2018年12月在信阳市中心医院心胸外科行手术治疗的 46例肺癌组织和对应的癌旁组织,实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测组织中 TPT1-AS1和微小 RNA-671-5p(miR-671-5p)表达, Pearson相关性分析肺癌组织中 TPT1-AS1和miR671-5p表达的相关性。同时,于2019年5月至 2020年4月期间,通过体外培养肺癌细胞 A549,双荧光素酶报告基因实验验证了细胞中 TPT1-AS1和 miR-671-5p调控关系。另将 A549细胞分为对照组、小干扰 RNA阴性序列(si-NC)组、 TPT1-AS1小干扰 RNA(si-TPT1AS1)组、 si-TPT1-AS1+抑制剂阴性序列(anti-miR-NC)组和 si-TPT1-AS1+miR-671-5p抑制剂(anti-miR-671-5p)组,甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖, Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹实验检测细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)基质金属蛋白酶(MMP)-2和 MMP-9蛋白表达。结果肺癌组织中 TPT1-AS1表达量较癌旁组织显著升高［(1.88±0.12)(1.01±0.08)、P<0.05］,miR-671-5p表达量较癌旁组织显著降低［(0.45±0.04)(1.01±0.06)P<0.05］。Pearson相关性分析显示,肺癌组比织中TPT1-A,S1和 miR-671-5p呈负相(r= 0.63,P<0.05)。TPT1-AS1在A5比49细胞中负调,控 miR-671-5p表达。 si-TPT1-AS1组 A549细胞存活率、迁移数和侵袭数分别为(关53.24±2.81)%、(63.11±6.51)个和( 33.78±3.23)个,均低于 si-NC组［分别为( 98.78±2.57)%、(147.44±11.08)个和(101.67±9.95)个,均P<0.05］。CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白在 si-TPT1-AS1组的表达量分别为(0.43±0.05)(0.21±0.03)(0.43±0.04),较si-NC组均降低［分别为(0.86±0.04)(0.55±0.05)(0.48±0.07)均P<0.05］。si-TPT1-AS1+anti-miR-671-、5p组A549细、胞存活率、迁移数和侵袭数及 CyclinD1、MMP-2和M、MP-9蛋白表、达分别为(8,5.43±2.94)%、(125.78±10.59)个、(88.78±7.19)个、(0.75±0.03)、(0.48±0.03)、(0.43±0.04),较 si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组均升高［分别为(54.36±2.95)%、(63.78±6.48)个、(33.56±3.54)个、(0.41±0.03)、(0.22±0.03)、(0.21±0.04),均P<0.05］。对照组与 si-NC组、 si-TPT1-AS1组与 si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组各检测指标比较均差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺癌组织中 TPT1-AS1表达升高, miR-671-5p表达降低,且两者呈负相关。 TPT1-AS1可能通过靶向下调 miR-671-5p的表达促进肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

黄芩苷对皮肤鳞癌细胞生长和迁移能力的影响

目的探讨黄芩苷对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖及迁移能力的影响及其机制。方法 50 mg·L-1黄芩苷孵育A431细胞,Western blot检测细胞中cofilin-1蛋白的表达水平;设计合成cofilin-1特异性siRNA并转染A431细胞,使用CCK8法检测细胞增殖活性,细胞划痕试验检测细胞的迁移能力。结果 Western blot结果显示,与对照组相比,细胞cofilin-1蛋白表达下降了49.3%;单独黄芩苷处理和cofilin-1-siRNA沉默均可抑制A431细胞生长与迁移,合并cofilin-1-siRNA则明显增强黄芩苷的作用效能。结论黄芩苷可有效降低肿瘤细胞的增殖活性和迁移能力,cofilin-1基因可能成为增强药物作用的调控靶点之一。     

小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1对脐静脉内皮细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1(SENP1)对脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移及凋亡的影响。方法用20个感染复数的p LKO.1-SENP1-小发夹RNA(shRNA)-绿色荧光蛋白(GFP)干涉慢病毒(SENP1干涉组)和p PIG-U6-随机序列(scramble)-GFP对照慢病毒(GFP-SC对照组)感染HUVEC。病毒感染HUVEC 48 h后,用流式细胞仪检测慢病毒的感染效率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western蛋白质印迹法检测HUVEC内SENP1基因和蛋白表达水平。用CCK8试剂盒检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞的迁移能力,流式细胞仪分析细胞凋亡率。结果 GFP-SC对照组和SENP1干涉组感染效率均>97%。与GFP-SC对照组比较,SENP1干涉组HUVEC SENP1基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。CCK8法测定结果表明,SENP1干涉组HUVEC增殖能力较GFP-SC对照组明显降低(P<0.01)。SENP1干涉组细胞迁移过Transwell小室的细胞数量明显低于GFP-SC对照组(P<0.01)。用低浓度血清(含2%胎牛血清)培养基诱导细胞凋亡24 h,SENP1干涉组细胞凋亡率即已升高到GFP-SC对照组的2倍左右(P<0.05);诱导凋亡至48 h,SENP1干涉组细胞凋亡率升高到对照组的3.2倍左右(P<0.05)。结论 HUVEC内SENP1表达水平的降低不仅可以显著抑制细胞增殖和迁移能力,亦可促进细胞凋亡。     

SDF-1/CXCR4对大肠癌细胞株SW480增殖、迁移及侵袭的影响及意义

【摘要】目的探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其特异性受体CXC趋化因子受体4（CXCR4）对大肠癌细胞SW480增殖、迁移及侵袭能力的影响及意义。方法取对数生长期大肠癌细胞SW480分为对照组(未经任何处理)、SDF-1组（加入100μg/L SDF-1）、SDF-1＋AMD3100混合组(向细胞中加入1mg/L AMD3100,孵育2h后加入100μg/LSDF-1)、AMD3100组（加入1mg/L AMD3100）。免疫组化法检测SW480细胞中CXCR4蛋白表达情况;RT-PCR法检测SW480细胞中CXCR4mRNA的表达情况,以及外源性SDF-1和AMD3100作用后CXCR4mRNA表达水平的变化;MTT增殖实验、Transwell迁移及侵袭实验分别检测SDF-1以及AMD3100对SW480细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果SW480细胞中CXCR4蛋白呈阳性表达（阳性率80%）。SW480细胞中有CXCR4mRNA的表达,100μg/LSDF-1促使CXCR4mRNA表达水平进一步上调,且能被1mg/L AMD3100阻断。SDF-1组细胞增殖活性(0.847±0.039）高于对照组(0.624±0.011)和SDF-1＋AMD3100混合组(0.607±0.016),AMD3100组(0.456±0.032)低于对照组和SDF-1＋AMD3100混合组(F=108.030,P＜0.05)。Transwell小室迁移及侵袭实验中SDF-1组穿膜细胞数(个：98.7±5.8、33.7±6.2)均多于对照组(21.0±2.2、6.1±2.3)、SDF-1＋AMD3100混合组(18.5±8.4、8.5±2.8)和AMD3100组(12.1±3.2、2.1±1.0),后3组间比较差异无统计学意义。结论SDF-1/CXCR4生物轴可促进大肠癌细胞SW480的增殖、迁移及侵袭。     

甘草酸联合Notch1 siRNA对肺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响北大核心CSCD

目的研究甘草酸(GA)联合Notch1小干扰RNA(siRNA)对肺癌细胞(HCC827)增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法将HCC827细胞分为对照组(正常培养的细胞)、GA组(5.0 mmol·L^(-1) GA处理)、GA+si-NC组(5.0 mmol·L^(-1) GA处理转染si-NC的细胞)、GA+si-Notch1组(5.0 mmol·L^(-1) GA处理转染si-NC细胞)。用细胞计数(CCK-8)法、流式细胞术、Transwell实验检测各组细胞增殖、凋亡、迁移侵袭情况。结果对照组、GA组、GA+si-NC组、GA+si-Notch1组HCC827细胞活力(72 h)为1.00±0.12,0.70±0.09,0.63±0.04,0.46±0.06,迁移细胞数为136.00±8.88,60.00±8.96,66.00±6.08,34.00±3.21,侵袭细胞数为106.00±7.51,45.00±5.56,48.00±3.21,29.00±3.51,凋亡率分别为(6.31±0.83)%,(15.07±0.65)%,(14.87±0.47)%,(20.61±1.64)%,对照组与GA组比较、GA+si-NC组与GA+si-Notch1组比较,上述指标差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论甘草酸联合Notch1 siRNA1可抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。     

血清和脑脊液B细胞趋化因子-1的水平对临床孤立综合征转归的意义

目的探讨临床孤立综合征(CIS)患者血清及脑脊液中B细胞趋化因子-1(BLC-1/CX-CL13)浓度与病情变化的关系,与临床表现、磁共振成像(MRI)检查、诱发电位的相关性。方法入选CIS患者73例,包括脊髓型CIS患者20例,脑干型CIS患者18例和视神经型CIS患者19例,神经系统非炎性疾病(NND)16例。在患者发病期进行扩展残障状态量表(EDSS)评分、MRI检查、诱发电位检查,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清及脑脊液中CXCL13浓度。结果脊髓型CIS组、视神经型CIS组、脑干型CIS组血清及脑脊液CXCL13浓度与NND患者比较,差异有统计学意义(P<0.01);脑干型CIS组脑脊液CXCL13浓度高于脊髓和视神经型CIS组,差异有统计学意义(P<0.01);诱发电位异常组与正常组血清和脑脊液CXCL13浓度差异无统计学意义。血清与脑脊液CXCL13浓度呈正相关(r=0.750,P<0.01),血清及脑脊液CXCL13浓度与EDSS评分呈正相关(r=0.837,P<0.01;r=0.689,P<0.01)。结论 CXCL13浓度增高可导致CIS转化为多发性硬化(MS),对预测CIS的转归具有重要的临床意义。     

DERL1对人乳腺癌细胞ZR-75-1迁移和侵袭的影响

目的探讨DERL1 (Der1-like domain family,member1)对人乳腺癌细胞ZR-75-1迁移和侵袭的影响及其相关机制。方法将DERL1过表达或干扰质粒转入人乳腺癌ZR-75-1细胞中,实时荧光定量PCR检测DERL1 mRNA的表达;划痕愈合实验和Transwell实验分别检测DERL1对ZR-75-1迁移和侵袭能力的影响;实时荧光定量PCR和细胞免疫荧光分别检测ZR-75-1中E-cadherin mRNA和蛋白的表达情况。结果DERL1过表达质粒转染48 h后,细胞中DERL1表达水平较对照组明显上升(P <0. 01),同时细胞的迁移和侵袭能力均明显增强(P <0. 05),细胞形态由鹅卵石形上皮样转化为纺锤形间质样,且细胞中E-cadherin mRNA和蛋白水平明显降低(P <0. 05); DERL1干扰组细胞转染48 h后,与对照组相比,DERL1表达水平明显降低(P <0. 01),同时细胞的迁移和侵袭能力明显减弱(P <0. 05),细胞形态由纺锤形间质样转变回鹅卵石形上皮样,且细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达量明显升高(P <0. 05)。结论DERL1可促进人乳腺癌细胞ZR-75-1的迁移和侵袭,可能与其下调E-cadherin水平,促进ZR-75-1的上皮间质转化有关。     

康复治疗对颅脑损伤疗效及胰岛素样生长因子-1的影响

胰岛素样生长因子-1(IGF-1)是一种与机体组织分化、细胞增殖和成熟有关的重要细胞因子,对调节神经细胞的生长及促进神经细胞的修复有重要价值[1].康复治疗是建立在康复理论的基础上,认为颅脑损伤后中枢神经系统在功能上具有一定的可塑性,并在康复治疗适宜时再生[2].本研究通过对颅脑损伤康复期的患者应用规律性特定的康复治疗,并观察治疗前、后血清中IGF-1的变化,以期为临床诊疗提供理论支持.