芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞中Ang-2及其受体Tie-2表达的影响

目的:探讨芎芍胶囊对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)促血管生成素-2(Ang-2)及其受体Tie-2的分泌和mRNA表达的影响,以阐明其促进血管新生的可能机制。方法:芎芍胶囊高、中、低剂量含药血清处理HUVEC,倒置相差显微镜观察细胞生长状态;流式细胞术和MTT法观测HUVEC的增殖情况;ELISA法检测HUVEC分泌Ang-2和Tie-2的水平;RT-PCR法检测Ang-2及Tie-2的mRNA表达。结果:芎芍胶囊高、中、低剂量含药血清均有促进HUVEC增殖和Ang-2及Tie-2的表达,以及增加S期细胞比例作用。结论:芎芍胶囊含药血清能促进HUVEC的增殖及Ang-2、Tie-2的表达,可能是其促进血管新生的机制之一。     

芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞VEGF、Ang-2基因表达的影响

目的:观察芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)VEGF、 Ang-2基因表达的影响,探讨芎芍胶囊促血管新生的作用机制.方法:芎芍胶囊高、中、低不同剂量含药血清作用于HUVEC,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,MTT法观察细胞增殖情况,RT-PCR法检测VEGF、Ang-2 mRNA的表达.结果:芎芍胶囊含药血清各剂量组均有促HUVEC增殖作用(P<0.01),高剂量组具有显著促进VEGF表达作用(P<0.01);而中、低剂量组作用不明显;高、中剂量组具有明显抑制Ang-2表达作用(P<0.05～0.01),低剂量组的作用不明显.结论:芎芍胶囊可促进VEGF的表达,降低Ang-2的表达,其促血管新生作用机制与此两条通路有关.     

芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞PCNA表达的影响

目的通过观察芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨芎芍胶囊促内皮细胞增殖的分子机制。方法利用血清药理学方法制备芎芍胶囊含药血清,在体外干预培养HUVEC。MTT法检测芎芍胶囊对HUVEC增殖的影响,采用RT-PCR法测定PCNA的mRNA表达,ELISA法检测培养液中PCNA的蛋白含量。结果芎芍胶囊低、中、高剂量含药血清均有促进HUVEC细胞增殖的作用(P0.01);RT-PCR和ELISA法检测结果显示芎芍胶囊各剂量含药血清均有显著地促进PCNA的mRNA表达和蛋白表达的作用(P0.05),并具有明显的剂量依赖性。结论芎芍胶囊促进HUVEC增殖的作用机制可能与上调PCNA的表达密切相关。     

血府逐瘀汤对人脐静脉内皮细胞VEGF与PDGF分泌的影响

目的探讨血府逐瘀汤对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分泌血管内皮生长因子（VEGF）、血小板源性生长因子（PDGF）的影响及其与促进HUVEC增殖的关系。方法采用血府逐瘀汤合药血清体外干预HUVEC培养,通过MTT法和酶联免疫吸附分析（ELISA）法观察血府逐瘀汤对HUVEC的体外增殖和分泌VEGF、PDGF的影响作用。结果MTT检测结果显示血府逐瘀汤含药血清浓度为10％时对HUVEC具有显著增殖作用;ELISA检测结果显示血府逐瘀汤具有促进HUVEC分泌VEGF的作用,而对PDGF的分泌无明显的作用。结论血府逐瘀汤在一定剂量范围内能促进HUVEC增殖和促进HUVEC分泌VEGF,而对PDGF的分泌无明显促进作用;提示血府逐瘀汤可能通过促进HUVEC分泌VEGF而促进细胞增殖,从而起到祛瘀生新的作用。     

用血清药理学方法观察芎芍胶囊对兔胸主动脉平滑肌细胞增殖凋亡的影响

目的 :采用血清药理学方法观察芎芍胶囊对内皮素 (ET)致兔胸主动脉平滑肌细胞 (SMC)增殖凋亡的影响。方法 :分离正常兔胸主动脉SMC ,并传代培养 ,用ET造成胸主动脉SMC增殖模型。给正常兔灌胃芎芍胶囊混悬液 10天 ,制备含药血清 ,采用噻唑蓝 (MTT)比色法、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳法观察其对SMC增殖凋亡的影响。结果 :ET能明显促进SMC增殖 ,芎芍胶囊含药血清可减少S +G2 期SMC所占比例 ,对ET所致SMC增殖有明显抑制作用 ,并呈剂量依赖性 ,大剂量时尚可诱导SMC凋亡。结论 :芎芍胶囊可明显抑制ET所致SMC增殖 ,并有一定的诱导SMC凋亡的作用。这可能是其临床用于预防冠状动脉介入治疗后再狭窄的作用机制之     

芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌mRNA表达水平的影响

目的用RT-PCR检测中成药芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用。方法采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,SD大鼠分为模型对照组和芎芍胶囊高、中、低剂量组,灌胃给药,连续给药6周;RT-PCR法检测缺血心肌EGF、VEGF、TGF-β1、PDGF-A、PDGF-BB等促血管生成因子的表达。结果其中芎芍胶囊低、中、高剂量组VEGF、EGF与模型对照组比较均有统计学意义,高剂量组对VEGF的促进作用较中、低剂量组有统计学意义,中剂量组对EGF的促进作用较高、低剂量组有统计学意义,对照组对TGF、PDGF促进作用较高、中、低剂量组有统计学意义。结论芎芍胶囊具有促进心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生、提高心肌梗死大鼠心肌细胞VEGF、FGF、EGF蛋白的表达、具有保护心肌缺血性损伤的作用。     

血府逐瘀汤促血管新生中VEGF通路的作用研究

目的:探讨VEGF通路在血府逐瘀汤促血管新生中的作用.方法:运用血清药理学方法,以1.25％,2.5％,5％的血府逐瘀汤含药血清和空白血清诱导处理血管内皮细胞ECV304,分别采用MTT比色法,Boyden小室迁移法和体外成血管实验检测内皮细胞增殖、迁移和成血管能力,并通过酶联免疫法、免疫组化和RT-PCR检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2)分泌和表达的情况.结果:1.25％含药血清除了能提高体外成血管能力外,对其余指标均无影响;2.5％含药血清明显促进内皮细胞增殖、迁移及成血管,并能显著提高VEGF及VEGFR2的表达;5％含药血清仅上调胞内VEGF的表达,进而促进内皮细胞的迁移和黏附.结论:血府逐瘀汤通过上调VEGF-VEGFR2途径,诱导内皮细胞增殖、迁移和血管形成,部分说明了药物促血管新生的作用机制.     

养心颗粒含药血清对血管内皮细胞增殖的影响

目的：观察养心颗粒对血管内皮细胞增殖的影响,探讨其防治冠心病不稳定型心绞痛的作用机制。方法：将wistar大鼠35只随机分成空白对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、通心络组。采用MTT法检测养心颗粒含药血清对血管内皮细胞增殖的影响。结果：养心颗粒可促进血管内皮细胞的增殖,且养心颗粒高剂量组效果最好,与其它组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：养心颗粒可以改善血管内皮系统功能障碍,促进心肌缺血时血管内皮细胞的增殖。     

清热消积方含药血清对人胃癌细胞SGC-7901及牛血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的：观察清热消积方舍药血清对人胃癌细胞SGC-7901及牛血管内皮细胞增殖和迁移的影响。方法．帮l备清热消积方含药血清，SCC-7901细胞和牛血管内皮细胞体外培养，不同浓度含药血清进行干预，采用MTr法检测含药血清对SGC-7901细胞和牛血管内皮细胞增殖的影响；琼脂糖刮除法检测含药血清对牛血管内皮细胞迁移的影响。结果：清热消积方含药血清对人胃癌细胞SGC-7901的增值有明显的抑制作用，低、中及高剂量组的增值抑制率分别是7．4％、8．6％和16．3％，与对照组比较均有非常显著差异（P〈0．01）。并能抑制牛血管内皮细胞的增殖和迁移，低、中及高荆量组对牛血管内皮细胞增殖和迁移的抑制率分别为10．8％、11．2％、20．1％和15．5％、19．7％、30．2％，与对照组比较均有非常显著差异（P〈0．01）。结论：抑制肿瘤细胞增殖、抗肿瘤血管生成可能是清热消积方抗肿瘤和转移的作用机制之一。     

川芎抗血管内皮细胞凋亡作用的研究

目的观察川芎对内皮细胞凋亡的抑制作用.方法将含中药川芎的大鼠血清加入到培养的内皮细胞中,用MTT法和流式细胞仪观察细胞凋亡情况.结果含川芎的大鼠血清对内皮细胞凋亡有明显影响,可使体外培养的血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的凋亡数量减少.结论川芎对HUVEC的凋亡抑制作用为临床防治视网膜毛细血管闭塞提供了实验依据.     

中药芪红合剂含药血清对人外周血内皮祖细胞增殖的影响

目的观察中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血内皮祖细胞（EPCs）增殖的影响。方法将12只雄性Wistar大鼠随机分为中药芪红合剂组（低剂量组、中剂量组、高剂量组）和对照组,制备含药血清和空白血清。采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞,经激光共聚焦显微镜、流式细胞仪鉴定为EPCs。加入各实验血清组培养液培养EPCs,分别作用不同时间（24h、48h、72h）后,倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,噻唑蓝比色试验（MTT法）测定EPCs的吸光度值。结果与对照组比较,中药芪红合剂合药血清低、中、高剂量组EPCs增殖明显（P〈0．05）,且呈一定的量效、时效关系。在同一作用时间,低剂量芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖明显（P〈0．05）。在同一剂量组中,芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖随时间推移逐渐增强,于72h达到高峰（P〈0．05）。结论中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血EPCs的增殖具有一定的促进作用,可能是其防治血管内皮损伤及内皮功能障碍相关性疾病的作用机制之一。     

黄芪含药血清对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型细胞活性的影响

目的：观察养心汤方中单味中药黄芪不同浓度含药血清对H：O：诱导人脐静脉内皮细胞（HU—VEC）氧化损伤模型细胞增殖的影响及对损伤HUVEC的保护作用,以进一步研究养心汤对冠心痛不稳定型心绞痛的确切作用机制。方法：以浓度为1．03g·mL^-1的黄芪药液灌胃大鼠1周,于末次给药后取血离心制备含药血清。将HUVEC与不同剂量浓度（2％、4％、6％）单味黄芪含药血清、基础培养液、空白血清培养液一起培养,共分5组,培养24h后加入H2O2作用2h,通过MTT法及形态学方法观察不同浓度黄芪含药血清对H2O2损伤HUVEC生长活性变化。结果：黄芪含药血清2％、4％、6％各组细胞OD值均较H2O2模型对照组明显升高,与H2O2模型组相比较均有统计学意义（P〈0．01）,且2％、4％、6％组间比差异有统计学意义（P〈0．05）。形态学方面,黄芪含药血清可使细胞体积变小,间隙变大,但彼此之间存在联系,脱落细胞较少;皱缩的程度明显改善。结论：黄芪含药血清可以促进H2O2损伤人脐静脉内皮细胞的增殖,增强HUVEC抗氧化损伤能力,逆转和改善内皮功能障碍,具有一定剂量依赖关系。     

密蒙花方对缺氧状态下人血管内皮细胞的作用及机理研究

目的探讨密蒙花方对缺氧状态下人脐静脉血管内皮细胞（Human Umbilical Vascular Endothelial Cell，HUVEC）增殖的抑制作用。方法体外培养HUVEC，采用二氯化钴（Cocl2）建立细胞化学缺氧模型，采用WST-8法观察密蒙花方对缺氧状态下HUVEC的作用。并进一步采用流式细胞仪（Flow Cytometry，FCM）检测密蒙花方对缺氧状态下HUVEC增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）蛋白表达的影响。结果①在Cocl2所诱导的化学缺氧下，HUVEC增殖明显。密蒙花方可抑制缺氧状态下HUVEC的增殖，并呈剂量一效应关系；②密蒙花方对HUVEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用，低、中、高不同浓度的密蒙花方作用24h后，其PCNA蛋白表达率分别为（62．377±3．200）％，（43．707±3．195）％、（27．621±3．622）％与缺氧组（90．600±3．694）％比较差异有统计学意义（P〈0．01）；随着密蒙花方浓度升高，PCNA蛋白表达率下降，呈剂量-效应关系（P〈0．01）。结论上述结果提示，密蒙花方有抑制新生血管发生的作用，有望成为防治增殖性糖尿病视网膜病变的有效药物。     

芎芍胶囊及丹参对大鼠缺血心肌血管新生的作用

目的探讨中成药芎芍胶囊及丹参对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生的影响。方法采用开胸结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,清洁级（或SPF级）SD大鼠24只（雌雄各半）分为3组,即模型组、芎芍胶囊组、丹参组,每组8只,分别用生理盐水、芎芍胶囊、丹参按中剂量进行灌胃给药,连续给药。6周后采集血,分离样本,并按规定保存,用免疫组化评分法、血管新生相关因子检测法;检测各组缺血心肌内皮细胞生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、表皮细胞生长因子（EGF）、转化生长因子（TGF）、血小板源生长因子（PDGF）等促血管生成因子的表达。结果芎芍胶囊组对VEGF、EGF的促进作用较丹参组、对照组有统计学意义（P〈0.05）,其中芎芍胶囊组、丹参组对FGF的促进作用与对照组比较均有统计学意义（P〈0.05）,对照组对TGF、PDGF促进作用较芎芍胶囊组、丹参组有统计学意义（P〈0.05）。结论中药具有促进心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生、提高心肌梗死大鼠心肌细胞VEGF、FGF、EGF蛋白的表达、具有保护心肌缺血性损伤的作用。     

人参黄芪含药血清对人脐静脉内皮细胞活性的影响

目的:通过观察养心汤中君药(人参、黄芪)对人脐静脉内皮细胞增殖率的影响,探讨其防治冠心病不稳定型心绞痛的作用机制。方法:实验细胞分为空白血清组、模型组、参芪低剂量组、参芪中剂量组、参芪高剂量组5组。应用MTT法检测细胞活性。结果:H2O2培养液可使人脐静脉内皮细胞收缩变圆,细胞间隙增宽,部分细胞脱落。随参芪含药血清浓度的增加,细胞越成片贴壁生长,细胞形态和间隙越接近正常。经MTT法检测,与空白血清组相比,模型组增值率明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);各参芪组间比较,参芪高剂量组增殖率显著升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:参芪含药血清能预防H2O2对人脐静脉内皮细胞造成的损伤,并能够促进内皮细胞增殖,这可能是其防治冠心病不稳定型心绞痛的作用机制之一。     

超声下观察芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生的作用

目的探讨中成药芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用。方法采用开胸冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,清洁级（或SPF级）SD大鼠32只（雄性）分为空白组、模型组、芎芍组、丹参组,每组8只,分别用生理盐水、芎芍胶囊、丹参粉末进行灌胃给药,连续给药。6周后采集数据分离样本,通过二维超声观察大鼠心功能指标,以及大鼠心肌组织中外源性血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达。结果芎芍组、丹参组与模型组比较,左心室收缩末期内径（LVESD）、舒张末期内径（LVEED）、左心室射血分数（LVEF）差异均有统计学意义（P〈0.01）,芎芍组、丹参组与AMI组比较,VEGF、bFGF差异均有统计学意义（P〈0.01）。VEGF、bFGF与LVEF呈正相关（r值分别为0.813、0.589,P〈0.01）。结论芎芍胶囊较丹参更具有促进心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生,提高心肌梗死大鼠心功能,保护心肌缺血性损伤的作用。     

冠心病不同阶段患者血清对人脐静脉血管内皮细胞促增殖作用的实验研究

目的观察冠心病不同阶段患者血清对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖的影响。方法采集正常健康人群（正常组）、冠心病中高危人群（中高危组）、冠心病急性期患者（急性期组）、冠心病稳定期患者（稳定期组）的血清,分别作用于HUVEC,培养至24、48、72、96h检测吸光度值（OD值）。结果4组血清中加或不加5％胎牛血清,其对HUVEC增殖均有促进作用,正常组、中高危组、急性期组、稳定期组对HUVEC的促增殖作用呈逐渐增强趋势,稳定期组血清促增殖作用最强。结论心血管疾病在急性期后,随着病程和生存期的延长,其血清对HUVEC的促增殖作用逐渐增强。     

健骨颗粒含药血清对成骨细胞增殖的影响

目的：探讨健骨颗粒含药血清对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响。方法：采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以生理盐水大鼠血清为对照,运用MTT法、流式细胞术检测成骨细胞增殖情况及细胞周期分布。结果：与同浓度生理盐水血清相比,20%健骨颗粒含药血清能明显促进体外培养成骨细胞增殖（P〈0.05）,明显降低G0/G1期细胞分数（P〈0.01或P〈0.05）,提高S期、G2/M期细胞分数和增殖指数（P〈0.01或P〈0.05）。结论：健骨颗粒含药血清能推进体外培养成骨细胞细胞周期,从而促进成骨细胞增殖。     

通心络胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠血脂与冠状动脉粥样硬化的影响及其机理研究

目的：通过通心络胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠[ApoE（-/-）]冠状动脉斑块和心肌病理组织学及其胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、循环内皮细胞（CEC）、内皮素（ET）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP1）等指标的干预,探究其治疗冠状动脉脉粥样硬化（AS）的疗效机制。方法：将40只ApoE（-/-）小鼠作为实验组,建立冠状AS模型,随机分为模型组和辛伐他汀组等4组,后者分别给予辛伐他汀及高、中、低剂量的通心络胶囊进行干预56d;另选8只同系的小鼠作为正常对照组。观察各组小鼠冠状动脉斑块和心肌病理组织学及其血脂、CEC、ET、MMP-1、MMP-9、TIMP1等指标的变化。结果：模型组小鼠冠状动脉病变主要位于心肌内的小分支、心肌细胞、心肌间质,均分为6.33±1.48,辛伐他汀组均分为2.62±2.25,通心络胶囊低、中、高各剂量组均分分别为4.5±1.71、3.12±1.81、2.38±2.34;与模型组比较,通心络胶囊低剂量组P〈0.05,中、高剂量组和辛伐他汀组均为P〈0.01;通心络胶囊中、高剂量组与辛伐他汀组比较P〉0.05。模型组血清TC、TG和LDL-C均明显增高,HDL-C下降,与正常组相比P〈0.05;通心络胶囊中、高剂量组TC、TG和LDL-C均明显低于、HDL-C水平高于模型组P〈0.05或P〈0.01,与辛伐他汀组相比P〉0.05。模型组第28天开始,血中CEC显著增多,与正常组相比P〈0.01,与通心络胶囊高剂量组在造模后第28、56、84天相比P〈0.05或P〈0.01,与中剂量组在造模后第28、84天相比P〈0.05。与模型组小鼠血清ET含量相比,高于正常组P〈0.05,与通心络胶囊三个剂量组相比P〈0.01。通心络胶囊高剂量组MMP-1和MMP-9水平均低于模型组而TIMP1水平高于模型组P〈0.05或P〈0.01,中剂量组MMP-9水平低于模型组P〈0.05。结论：通心络胶囊具有降低血脂、抗冠状动脉粥样硬化和稳定斑块的作用,其机制可能与调脂、改善血管内皮细胞功能障碍（EDF）和抑制血管重构相关。