乌头碱通过ROS/JNK信号转导通路诱导骨肉瘤细胞凋亡的机制研究

目的 基于ROS/JNK信号转导通路探讨乌头碱诱导骨肉瘤细胞凋亡的机制.方法 MTT法测定乌头碱对人骨肉瘤143B细胞活力的抑制作用;Western Blot法检测乌头碱处理后143B细胞cleaved caspase-9、cleaved caspase-3和磷酸化JNK的表达水平;采用流式细胞术检测用乌头碱处理后143B细胞的凋亡及活性氧簇(ROS)的产生.结果 乌头碱可显著诱导143B细胞发生凋亡,产生ROS.乌头碱处理后143B细胞cleaved caspase-9、cleaved caspase-3、磷酸化JNK均显著上升.乌头碱有显著的体外抗骨肉瘤作用,能显著抑制143B细胞的活力.结论 乌头碱通过ROS/JNK信号通路诱导人骨肉瘤143B细胞发生凋亡,具有显著的抗肿瘤作用.     

新天然化合物Jaridonin通过诱导氧化应激选择性杀伤肿瘤细胞

目的研究化合物Jaridonin抗肿瘤作用的选择性并探讨其可能机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测Jaridonin抑制细胞增殖的作用;使用倒置荧光显微镜进行细胞形态学研究;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞内活性氧(ROS)水平;Western blot法检测Jaridonin对细胞凋亡通路相关蛋白表达的影响。结果 Jaridonin能明显抑制胃癌细胞MGC-803的增殖,且呈较好的浓度依赖性,而对人正常胃粘膜细胞GES-1的增殖没有明显影响;Jaridonin作用于MGC-803后明显引起Bax表达上调、线粒体膜电位下降、细胞色素C释放、caspase-3激活以至细胞凋亡,而对GES-1凋亡的影响并不明显;Jaridonin诱导MGC-803活性氧水平持续增加,而GES-1内活性氧水平先迅速上升,6h后下降至基础水平;外源性GSH几乎可以完全逆转Jaridonin对MGC-803的抑制作用。结论 Jaridonin选择性的抑制胃癌细胞的增殖并诱导线粒体途径参与的凋亡,其选择性机制可能与Jaridonin直接作用于氧化还原系统引起胞内活性氧水平升高有关。     

乌头碱通过ROS/JNK信号转导通路诱导骨肉瘤细胞凋亡的机制研究

目的 基于ROS/JNK信号转导通路探讨乌头碱诱导骨肉瘤细胞凋亡的机制.方法 MTT法测定乌头碱对人骨肉瘤143B细胞活力的抑制作用;Western Blot法检测乌头碱处理后143B细胞cleaved caspase-9、cleaved caspase-3和磷酸化JNK的表达水平;采用流式细胞术检测用乌头碱处理后143B细胞的凋亡及活性氧簇(ROS)的产生.结果 乌头碱可显著诱导143B细胞发生凋亡,产生ROS.乌头碱处理后143B细胞cleaved caspase-9、cleaved caspase-3、磷酸化JNK均显著上升.乌头碱有显著的体外抗骨肉瘤作用,能显著抑制143B细胞的活力.结论 乌头碱通过ROS/JNK信号通路诱导人骨肉瘤143B细胞发生凋亡,具有显著的抗肿瘤作用.     

ATP敏感性钾通道-Akt通路在硫化氢对抗高糖损伤H9c2心肌细胞中的作用

目的研究ATP敏感性钾通道(ATP-sensitive K+channel,KATP通道)-Akt通路在外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤中的作用。方法应用Western blot法检测心肌细胞Akt蛋白的表达水平;细胞计数盒测定心肌细胞存活率;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相测定凋亡细胞数量的变化;双氯荧光素染色荧光显微镜照相法检测胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;JC-1染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)。结果应用高糖(35 mmol·L~(-1),HG)处理H9c2心肌细胞0~24 h,其中3 h起磷酸化(p)-Akt蛋白表达水平开始明显下降,24 h p-Akt表达水平降至最低。在HG处理心肌细胞24 h前,应用50μmol·L~(-1)KATP通道开放剂吡拉地尔(pinacidil,Pin)和400μmol·L~(-1)硫氢化钠(NaHS,为H_2S的供体)预处理30 min均能明显地抑制HG对p-Akt表达的下调作用。应用1mmol·L~(-1)K_(ATP)通道阻断剂格列本脲(glibenclamide,Gli)预处理心肌细胞能阻断NaHS对HG下调p-Akt表达水平的抑制作用。此外,30μmol·L~(-1)Akt的抑制剂LY294002能明显阻断NaHS对抗HG损伤心肌细胞的保护作用,表现为细胞存活率和MMP降低,凋亡细胞数量、ROS生成增多。结论 K_(ATP)通道-Akt通路介导H_2S对抗高糖引起的心肌细胞损伤的保护作用。     

迷迭香酸类似物-11通过EGFR-JNK通路抑制人胃癌MGC-803细胞增殖和迁移

目的基于EGFR-JNK通路,探讨RAA-11对人胃癌MGC-803细胞增殖和迁移的抑制作用。方法 MTT法检测RAA-11对人胃黏膜上皮GES-1细胞和人胃癌MGC-803细胞活力的影响;划痕实验检测RAA-11对人胃癌MGC-803细胞迁移能力的影响;实时荧光定量PCR检测RAA-11对人胃癌MGC-803细胞EGFR mRNA表达的影响;Western blot检测RAA-11对人胃癌MGC-803细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2、Bax及通路蛋白EGFR、JNK、p-JNK表达的影响。结果 MTT结果表明,与人胃黏膜上皮GES-1细胞相比,RAA-11明显抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖(P<0.01),提示RAA-11对MGC-803细胞有选择作用;划痕实验结果提示,RAA-11能抑制人胃癌MGC-803细胞的迁移能力;实时荧光定量PCR结果提示,RAA-11降低了人胃癌MGC-803细胞EGFR mRNA的表达;Western blot结果提示,RAA-11上调人胃癌MGC-803细胞促凋亡相关蛋白caspase-3、Bax,并促进通路蛋白JNK、p-JNK的表达(P<0.01),下调抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,并降低了通路蛋白EGFR的表达水平(P<0.01)。结论 RAA-11通过作用于EGFR-JNK通路,抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖和迁移,并能够诱导其凋亡。     

吡那地尔对低氧低糖诱导神经细胞凋亡的抑制作用

目的　探讨ATP敏感性钾通道 (KATP)开放剂吡那地尔 (Pin)对低氧低糖再复氧诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡的影响。方法　用电镜和流式细胞分析技术 ,检测原代培养的大鼠皮质神经细胞凋亡。结果　低氧低糖再复氧可诱导大鼠皮质神经细胞凋亡。Pin ( 10 - 5,10 - 6 ,10 - 7mol·L- 1 ) 3个剂量组均能降低凋亡细胞百分率 ,以 10 - 5mol·L- 1 组效果最好。上述作用可被KATP特异性阻断剂格列苯脲 (Gli)所拮抗。结论　Pin对低氧低糖再复氧诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡有明显的抑制作用 ,提示KATP通道在调控细胞凋亡的过程中可能起着重要的作用。     

迷迭香酸衍生物RAD-9通过PI3K/Akt和p38 MAPK信号通路诱导胃癌MGC-803细胞凋亡

目的研究迷迭香酸衍生物RAD-9诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的作用及其机制。方法 MTT法观察RAD-9对胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞的凋亡;Hoechst 33258染色法观察RAD-9对MGC-803细胞核凋亡形态学的影响;Western blot检测RAD-9干预MGC-803细胞36 h后,对Akt、p-Akt、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3的影响。结果MTT结果显示,RAD-9呈时间、浓度依赖性抑制胃癌MGC-803细胞增殖;流式细胞术结果显示,RAD-9对胃癌MGC-803细胞有明显的促凋亡作用(P<0.01);Hoechst 33258染色实验结果显示,RAD-9干预胃癌MGC-803细胞36 h后,细胞核呈现典型凋亡形态学改变;Western blot结果显示,RAD-9干预胃癌MGC-803细胞36 h后,Bcl-2蛋白表达水平明显降低,Bax、caspase-3蛋白表达水平明显提高,Akt、p-Akt蛋白表达水平明显下调,p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。结论 RAD-9能抑制胃癌MGC-803细胞生长,且能诱导其凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt和激活p38 MAPK信号通路相关。     

埃他卡林对K_(ATP)通道亚型选择性作用的研究

目的建立特异性表达以K ir6.x和SUR亚单位组成的不同KATP通道亚型的细胞模型,研究KATP通道开放剂埃他卡林对KATP通道亚型的选择性作用特点。方法利用脂质体转染的方法将编码KATP通道亚单位K ir6.x-pcDNA3、SUR-pcDNA3基因和编码绿色荧光蛋白pEGFP-N1基因共同转染到HEK-293细胞中,免疫组化法鉴定细胞上K ir6.x和SUR蛋白的表达,并采用膜片钳全细胞记录技术,以KATP通道特异性激动剂吡那地尔和二氮嗪为对照,分析埃他卡林对特定刺激条件下对K ir6.x和SUR共同转染的细胞上诱发的钾电流的影响,并观察KATP通道特异性拮抗剂格列苯脲的阻断作用。结果在共同转入KATP通道两亚单位基因的HEK-293细胞上,有K ir6.x和SUR蛋白的表达。在共同表达K ir6.1/SUR2B的细胞上,埃他卡林(100μmol.L-1)、吡那地尔(100μmol.L-1)及二氮嗪(200μmol.L-1)均具有增强诱发电流的效应,给药前后-100 mV时电流值由(-88.0±30.8)pA分别增至(-2042.6±127.3)pA,(-1431.9±142.4)pA及(-1104.7±228.9)pA,三者的作用均能被格列苯脲所阻断。相同条件下,在共同表达K ir6.2/SUR2A的细胞上,埃他卡林和吡那地尔能增强诱发电流,此作用对格列苯脲敏感;而二氮嗪对该电流无影响。相反,在共同表达K ir6.2/SUR1的细胞上,二氮嗪能增强诱发电流,此作用对格列苯脲敏感;而埃他卡林和吡那地尔对该电流无影响。结论不同结构钾通道开放剂对不同亚型KATP通道作用不同,埃他卡林与吡那地尔作用相似,能选择性作用于K ir6.1/SUR2B和K ir6.2/SUR2A型KATP通道,对K ir6.2/SUR1型无影响。     

氯化钆对胃癌 MGC-803细胞增殖及凋亡的影响

目的：观察氯化钆（ Gdcl3）对胃癌细胞株MGC-803增殖及凋亡的影响。方法实验设对照组、10μmol· L－1 Gdcl3处理组及100μmol· L－1 Gdcl3处理组。不同浓度的Gdcl3对MGC-803处理24 h后,用MTT比色法观察Gdcl3对细胞活性的影响;用流式细胞术检测细胞凋亡率;用Caspase活性检测试剂盒来检测细胞Caspase3,8,9活性检测。结果与空白对照组相比,Gdcl3抑制MGC-803增殖,具有统计学意义差异（P＜0．05）;Gdcl3促进MGC-803凋亡（P＜0．05）;Gdcl3可增强MGC-803细胞Caspase-3,9的活性（P＜0．05）,对Caspase-8影响不明显。结论 Gdcl3抑制MGC-803增殖,促进癌细胞凋亡,可能主要通过线粒体途径来促凋亡。     

迷迭香酸类似物-11通过抑制ERK/MAPK通路诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡

目的对迷迭香酸类似物-11(rosmarinic acid analogue-11,RAA-11)诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡及其机制进行初步探究。方法 MTT法和克隆形成法观察RAA-11对人胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258染色法观察RAA-11对人胃癌MGC-803细胞核凋亡形态学的影响;流式细胞术检测RAA-11对人胃癌MGC-803细胞凋亡率的影响;Western blot观察RAA-11对人胃癌MGC-803细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2、Bax及通路蛋白ERK、p-ERK表达的影响。结果 MTT结果提示RAA-11可以抑制人胃癌MGC-803细胞增殖(P<0.01),且呈时间浓度依赖性;克隆形成实验结果提示,RAA-11能抑制人胃癌MGC-803细胞的集落形成能力;Hoechst 33258染色结果提示,RAA-11干预人胃癌MGC-803细胞48 h后,细胞核呈现典型凋亡形态学改变;流式细胞术结果提示,RAA-11对人胃癌MGC-803细胞有明显的促凋亡作用; Western blot结果显示,RAA-11上调人胃癌MGC-803细胞促凋亡相关蛋白caspase-3、Bax(P<0.01),下调抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平,并降低了通路蛋白ERK、p-ERK的表达水平(P<0.01)。结论 RAA-11能抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖,并能够诱导凋亡,其机制可能与抑制ERK/MAPK通路有关。     

北美海篷子三萜皂苷bigelovii E抑制mTOR信号通路诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的探究北美海篷子的bigelovii E诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用机制。方法使用MTT和集落克隆实验检测bigelovii E对肿瘤细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258荧光染色观察bigelovii E作用后细胞形态的改变;流式细胞仪分析bigelovii E对细胞凋亡、细胞线粒体膜电位、细胞ROS水平的影响;Western blot分析线粒体凋亡通路及其调控蛋白表达量的变化。结果 Bigelovii E对乳腺癌细胞MCF-7最敏感;bigelovii E对正常细胞HLF-1毒性较低;bigelovii E抑制乳腺癌MCF-7的集落形成;Hoechst 33258荧光染色检测到bigelovii E诱导的细胞凋亡形态;流式细胞仪检测到bigelovii E引起细胞凋亡和细胞线粒体膜电位下降,并使细胞内ROS水平升高;Western blot表明bigelovii E可通过抑制m TOR磷酸化水平,下调其下游靶点p70S6K、4-EBP的磷酸化水平,进而上调Bax,下调Bcl-xl、Mcl-1蛋白表达,促进线粒体凋亡通路,降低线粒体膜电位,诱发ROS,导致线粒体功能损伤,最终诱导细胞凋亡。结论 Bigelovii E通过m TOR通路调控线粒体凋亡通路,诱导细胞凋亡,具有良好的抗肿瘤效果。     

埃他卡林对心肌细胞损伤保护作用的药理学特征

目的研究KATP通道开放剂埃他卡林(iptakalim,Ipt)对心肌细胞氧化应激损伤的保护作用,并探究其作用机制。方法采用200μmol.L-1的过氧化氢(H2O2)损伤体外培养的乳鼠心肌细胞2 h,建立氧化应激心肌细胞损伤模型;以二氮嗪(diazoxide,Dia)作为阳性对照药物,采用生物化学法检测各处理组细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogen-ase,LDH)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及MTT法检测心肌细胞损伤程度,反映埃他卡林对该模型的影响。结果过氧化氢损伤后,细胞存活率降低,LDH释放量明显升高,SOD活力下降;埃他卡林预处理后,细胞培养液中LDH活性较过氧化氢处理组降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05),细胞存活率浓度依赖性升高(P<0.01)。该保护作用可被线粒体KATP通道阻断剂5-羟基癸酸酯(5-HD)拮抗,也可被KATP通道阻断剂格列本脲(glibenclamide,Gli)阻断。结论埃他卡林对H2O2造成氧化应激损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,其保护作用与线粒体膜和细胞膜的KATP通道激活有关。     

奥曲肽对人胃癌细胞株诱导凋亡的研究

目的 研究奥曲肽对人胃癌MGC-803细胞诱导凋亡的作用。方法 应用荧光显微镜、流式细胞仪研究奥曲肽对人胃癌MGC-803细胞诱导凋亡的作用。结果 奥曲肽作用人胃癌MGC-803细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化,细胞核固缩、染色质凝集成新月状紧贴于核膜周边,核碎裂、染色质片断化、凋亡小体形成等,流式细胞仪上出现亚二倍体凋亡峰。结论 奥曲肽对人胃癌MGC-803细胞有诱导凋亡作用。     

尼可地尔对心肌肥厚大鼠的保护作用及机制研究

目的:研究KATP通道开放剂尼可地尔(nicorandil,Nic)对甲状腺素诱发的大鼠心肌肥厚的作用。方法:采用大鼠连续10 d,ip,左旋甲状腺素(L-thyroxine,L-thy)造心肌肥厚模型,造模第3天开始Nic灌胃给药,共8 d。观察Nic对大鼠心重指数、组织形态学,心肌线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及Na -K -ATP酶、Ca2 -ATP酶活力的影响;用免疫组化方法测定Nic对心肌Fas,Bcl-2蛋白表达的影响。结果:与模型组相比,Nic显著降低大鼠的心重指数及改善病理改变,提高心肌线粒体中SOD活性,减少MDA含量,并显著增加Na -K -ATP酶、Ca2 -ATP酶活力;Nic明显抑制肥厚心肌Fas的表达,促进Bel-2的表达。KATP通道的阻滞剂格列苯脲可减弱Nic的上述作用。结论:Nic能显著抑制L-Thy诱发的大鼠心肌肥厚,对肥厚心肌具有明显的保护作用,这可能与Nic通过开放KATP通道从而抑制心肌细胞线粒体脂质过氧化,显著改善能量供应以及减少心肌细胞凋亡等有关。     

槲皮黄酮对高糖诱导的心肌H9c2细胞凋亡和氧化应激的抑制作用

摘要：目的:观察槲皮黄酮对高糖刺激心肌H9c2细胞凋亡和活性氧（ROS）水平的影响。方法:体外培养H9c2细胞,并将其分为对照组、高糖组(25 mmol·L-1)、高糖+槲皮黄酮低浓度组(25 mmol·L-1+50μmol·L-1)、高糖+槲皮黄酮中浓度组(25mmol·L-1+100μmol·L-1)和高糖+槲皮黄酮高浓度组(25 mmol·L-1+200μmol·L-1)。CCK8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA检测细胞内ROS水平,Western blot检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、p-PI3K、Akt（丝氨酸/苏氨酸激酶）和p-Akt蛋白表达;采用PI3K抑制剂LY294002和槲皮黄酮共同处理H9c2细胞后,检测了细胞凋亡率及ROS水平。结果:与对照组相比,高糖诱导的心肌H9c2细胞活力、PI3K和Akt磷酸化蛋白水平显著降低,细胞凋亡率和ROS水平显著增加（P<0.05）;槲皮黄酮可诱导高糖刺激的心肌H9c2细胞活力升高,细胞凋亡率和ROS水平降低,PI3K和Akt磷酸化蛋白水平明显上调（P<0.05）。LY294002能明显降低槲皮黄酮对H9c2细胞凋亡和ROS产生的抑制作用。结论:槲皮黄酮可通过调控PI3K/Akt信号通路改变高糖刺激心肌H9c2细胞活力的降低及凋亡率和氧化应激的增加。     

血根碱通过诱导活性氧促进HepG2细胞凋亡的机制研究

目的研究血根碱对Hep G2细胞中活性氧(ROS)调控细胞凋亡途径的影响。方法采用血根碱干预Hep G2细胞,MTT法检测血根碱对细胞活性的影响;DCFH-DA和DHE染色观察血根碱作用Hep G2细胞12 h后细胞内ROS的变化;Hoechst 33342和Annexin V/PI染色检测细胞凋亡;Rho123染色检测细胞线粒体膜电位;Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果随着血根碱药物浓度的增加,Hep G2细胞活力明显被抑制;血根碱可以明显提高Hep G2细胞内的ROS含量,并且降低线粒体膜电位,促进细胞凋亡;Western blot检测发现血根碱促进Bax、cleaved-caspase-3和细胞质Cyt-C的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达。结论血根碱通过升高细胞内ROS的含量,激活线粒体凋亡途径,进而促进Hep G2细胞发生凋亡。     

三碘甲状腺原氨酸及格列本脲对缺血再灌注损伤后未成熟心肌细胞凋亡的影响

目的通过三碘甲状腺原氨酸(T3)对缺血再灌注损伤后未成熟心肌细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法培养原代乳鼠未成熟心肌细胞,通过在缺氧复氧前给予T3或(和)格列本脲处理,用TUNEL检测法检测正常组、缺氧复氧处理组以及在缺氧复氧前给予T3或(和)格列本脲干预后心肌细胞凋亡情况。结果缺氧复氧前短期给予T3可减少心肌细胞凋亡,而这种保护作用可被格列本脲阻断。结论 T3可以对抗缺血再灌注对心肌细胞损伤的能力,而对心肌细胞凋亡这种保护作用与KATP通道相关。     

丹参酮I和二氢丹参酮I对人胃癌细胞MGC-803、乳腺癌细胞MCF-7的抗肿瘤活性研究

目的:比较研究丹参酮I和二氢丹参酮I对人胃癌细胞MGC-803、乳腺癌细胞MCF-7的抗肿瘤活性。方法:从白花丹参中分离、纯化丹参酮I和二氢丹参酮I成分,采用MTT法测定对肿瘤细胞的生长抑制作用,同时采用流式细胞仪检测细胞周期的改变以及凋亡情况。结果:丹参酮I、二氢丹参酮I对MCF-7几乎没有生长抑制作用,对MGC-803有很明显的生长抑制作用,同时可明显阻滞人胃癌细胞MGC-803的细胞周期,使细胞核裂解呈现碎片状而产生凋亡小体,且其凋亡率成明显的上升趋势。结论:丹参酮I、二氢丹参酮I通过诱导细胞凋亡,对MGC-803肿瘤细胞具有很好的抑制作用,而对MCF-7几乎没有活性。     

MAPK信号转导通路与肿瘤细胞凋亡

丝裂原活化的蛋白激酶（mitogen—activated protein kinase,MAPK）是一组可被多种信号激活的丝／苏氨酸激酶。经双重磷酸化激活后可参与细胞的多种生物活性,如调节基因转录,诱导细胞凋亡、调节细胞周期等。而MAPK对细胞凋亡的诱导作用,是近年来研究的重点,尤其是对肿瘤细胞凋亡的诱导作用,更是人们关注的焦点。现已发现p38,ERK5,ERK以及JNK4个亚族。其中ERK,JNK,p38MAPK三条通路与肿瘤细胞凋亡关系密切。细胞凋亡是在特定时空发生的、受机体严密调控的细胞“自杀”现象。在肿瘤细胞中,活化的p38可增强c—myc表达、磷酸化p53、参与Fas／Fasl介导的凋亡;可增强TNF-α表达;作用于Caspase家族的上游而诱导肿瘤细胞凋亡。某些作用丁p38通路的化疗药物,也是通过诱导凋亡,产生抗肿瘤作用。JNK信号转导通路参与多种凋亡反应,现阶段研究表明,JNK通路介导肿瘤细胞凋亡的机制是通过磷酸化Bcl-2和Bcl-xL,促进线粒体释放细胞色素C,进而激活Caspase级联反应,最终作用于Caspase-3,导致细胞凋亡。     

大黄酸对H_2O_2诱导HK-2细胞凋亡的保护作用及其机制研究

目的观察大黄酸对H2O2诱导HK-2细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 H2O2处理HK-2细胞建立氧化应激模型,实验过程中采用大黄酸进行预处理,MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,利用DHE荧光探针对细胞内ROS水平进行荧光染色强度的检测,通过Western blotting检测MAPK的磷酸化水平。结果 H2O2作用于HK-2细胞后,能够显著降低细胞活力,诱导HK-2细胞发生凋亡,增强HK-2细胞内ROS荧光强度,同时激活MAPK信号通路,增加p38和JNK的磷酸化。而加入大黄酸预处理后,可明显抑制H2O2对细胞活力及凋亡的影响,减少HK-2细胞内ROS的含量,抑制p38和JNK的磷酸化。结论大黄酸抑制H2O2诱导的HK-2细胞凋亡部分通过抑制JNK和p38 MAPK的磷酸化而发挥作用。