淋巴细胞经TCR－CD3活化增殖作用的分析

本文探讨了抗ＣＤ３单抗诱导的淋巴细胞活化增殖及有关影响因素。实验结果表明：①淋巴细胞内钙升高是淋巴细胞活化增殖的重要条件，ＣＤ３ＭｃＡｂ引起的早期胞浆游离钙迅速升高主要由内质网释放钙离子所致，而淋巴细胞增殖不仅需要细胞内钙释放，还需要细胞外钙内流；②ＧＴＰ结合蛋白是淋巴细胞激活过程的一重要环节，经Ｇ蛋白作用物霍乱毒素作用后，淋巴细胞ＤＮＡ合成显著降低；③新霉素和ＰＳＳ可抑制ＰＬＣ和ＰｋＣ的活性，对淋巴细胞ＮＤＡ合成造成剂量依赖性抑制作用。此外，抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成需要辅佐细胞的存在，高度纯化的Ｔ细胞对ＣＤ３ＭｃＡｂ的刺激不发生增殖反应。     

霍乱毒素对淋巴细胞活化增殖的影响及其机制

研究探讨霍乱毒素（ＣＴＸ）对淋巴细胞活化、增殖的影响及可能的作用机制。研究结果表明，　　ＣＴＸ可显著升高静息ＰＢＭＣ和／或ＣＤ３单抗激活的琳巴细胞内ｃＡＭＰ水平，该效应与ＣＴＸ抑制淋巴细胞增殖和ＩＬ－２的作用密切相关；　　ＡＣ激活剂Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ通过升高细胞内ｃＡＭｐ水平，对于ＣＤ３单抗激活的淋巴细胞增殖有明显的抑制作用；ＣＴＸ不能干扰ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ细胞的增殖效应，也不影响ＣＴＬＬ细胞内ｃＡＭＰ水平。实验结果提示，ＣＴＸ敏感的Ｇ蛋白亚类参与了ＣＤ３单抗对淋巴细胞活化的调节，ＣＴＸ的抑制作用与其升高细胞内ｃＡＭｐ水平有关。     

天花粉蛋白对T细胞活化的抑制作用与信息传导

目的 观察天花粉蛋白经由ＴＣＲ／ＣＤ３介导的信号传递途径抑制Ｔ细胞活化增殖的效应方法 用各种不同的刺激信号来激活外周血淋巴细胞，然后观察天花粉蛋白对其增殖抑制的影响。接着测定天花粉蛋白对ＣＤ３单抗刺激后Ｔ淋巴细胞内一些信号传导物质变化的影响。结果 天花粉蛋白抑制经由ＴＣＲ／ＣＤ３信号传导途径诱发的淋巴细胞增殖。进而发现细胞内游离钙离子的升高，蛋白激酶Ｃ的转位和细胞内蛋白酪氨酸磷酸化受天花粉蛋白的抑     

天花粉蛋白对T细胞活化的抑制作用与信号传导

目的观察天花粉蛋白经由ＴＣＲ／ＣＤ３介导的信号传递途径抑制Ｔ细胞活化增殖的效应。方法用各种不同的剌激信号来激活外周血淋巴细胞，然后观察天花粉蛋白对其增殖抑制的影响。接着测定天花粉蛋白对ＣＤ３单抗剌激后Ｔ淋巴细胞内一些信号传导物质变化的影响。结果天花粉蛋白抑制经由ＴＣＲ／ＣＤ３信号传导途径诱发的淋巴细胞增殖。进而发现细胞内游离钙离子的升高，蛋白激酶Ｃ的转位和细胞内蛋白酪氨酸磷酸化受天花粉蛋白的抑制。结论天花粉蛋白可通过ＴＣＲ／ＣＤ３的信号传导途径抑制Ｔ细胞增殖。     

AC－cAMP－PKA途径对淋巴细胞DNA合成的调节作用

以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动剂，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成为研究手段，探讨了ＡＣ－ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义。研究结果表明ＡＣ、ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激的反应中起着重要作用。在淋巴细胞活化早期细胞内ｃＡＭＰ出现一过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下。活化ＡＣ、升高细胞内ｃＡＭＰ水平可显著降低ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成，而ＰＫＩ却能在一定程度上促进淋巴细胞活化增殖。     

AC—cAMP—PKA途径对淋巴细胞DNA合成的调节作用

以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动机，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成的研究手段，探讨了ＡＣｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义，研究结果表明ＡＣ，ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激反应中起着重要作用，在淋巴细胞活化早期细胞内ｃＡＭＰ出现一过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下，活化ＡＣ，升高细胞内，ｃＡＭＰ水平可显著过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下，     

SRS－淋巴瘤小鼠淋巴细胞染色质理化性质的研究

本实验对正常及ＳＲＳ－淋巴瘤小鼠淋巴细胞染色质进行了化学组分、ＤＮａｓｅⅠ有限度消化、染色质附着蛋白释放，热变性的对比分析。结果表明：（１）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质的非组蛋白（ｎｏｎ－ｈｉｓｔｏｎｅｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＮＨＣＰ）和ＲＮＡ高于正常细胞，提示随着肿瘤的发生染色质转录活性和与转录相关的ＮＨＣＰ呈升高趋势；（２）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质的ＤＮａｓｅⅠ消化率明显高于正常淋巴细胞，提示肿瘤细胞含有较多优先被核酸酶消化的活性染色质；（３）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞较正常淋巴细胞蛋白释放量明显升高，提示参与活性染色质结合的ＮＨＣＰ与染色质活性位点及转录活性有密切相关；（４）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质比正常淋巴细胞增色效应明显，提示肿瘤细胞比正常细胞染色质结构疏松。     

低氧致肺动脉平滑肌细胞增殖及其作用机制初探

目的和方法：实验采用ＰＤＧＦ生物活性检测法，流式细胞术，「＾３Ｈ」－ＴｄＲ掺入以及细胞免疫线化等方法探讨了低氧状态下，血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）及其受体与肺动产滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）增殖间的相互关系。结果：低氧可以增强ＰＤＧＦ的活性，上调ＰＧＦ受体促进ＰＡＳＭＣ增殖以ＰＤＧＦ作为刺激嘲一步促进低氧的促增殖作用。结论：低氧状态下，ＰＡＳＭＣ的ＰＤＧＦ及其受体进一步活化，从而增强了ＰＤＧＦ自分泌、旁     

儿童T细胞活化时细胞内钙离子的变化

本文用钙指示剂Ｆｌｕｏ－３标记正常儿童外周血单个核细胞，经流式细胞仪分析了几种激活剂对Ｔ细胞内钙离子浓度的影响。结果表明：（１）静止期Ｔ细胞内钙离子浓度为１６２±８７ｎＭ，抗ＣＤ３单克隆抗体交联ＧＡＭＩｇ刺激后，Ｔ细胞内钙离子浓度上升；（２）用抗ＣＤ３单克隆抗体和ＩＬ－２或ＰＭＡ和ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ作用Ｔ细胞，细胞内钙离子浓度上升，但其浓度低于用抗ＣＤ３单克隆抗体交联ＧＡＭＩｇ刺激时的浓度；（３）去除抗ＣＤ３单克隆抗体和ＩＬ－２或ＰＭＡ和ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ对Ｔ细胞的作用，培养后细胞内钙离子浓度又恢复到静止状态，再加入抗ＣＤ３单克隆抗体交联ＧＡＭＩｇ刺激发现细胞内钙离子显著地升高；（４）钙离子阻断测定提示早期钙离子升高是Ｔ细胞内钙离子池释放的，而细胞外钙离子的流入对于维持钙离子持续上升是必要的。     

雷公藤抑制致敏小鼠CD4^＋T细胞核因子GATA3,NFAT的活性

目的 探讨致敏小鼠ＣＤ４＾＋Ｔ淋巴细胞核转录因子ＧＡＴＡ３、ＮＦＡＴ活性的变化及雷公藤内酯醇（ＴＰ）的作用。方法 采用卵蛋白（ＯＶＡ）致敏的方法建立模型；运用ｐａｎｎｉｎｇ法分离ＣＤ４＾＋Ｔ淋巴细胞；通过凝胶电泳迁移率实验（ＥＭＳＡ）对ＣＤ４＾＋Ｔ淋巴细胞核因子ＧＡＴＡ３、ＮＦＡＴ的ＤＮＡ结合活性及ＴＰ的作用进行检测，同时就ＴＰ的作用与地塞米松（ＤＭ）相比较。结果 正常小鼠ＣＤ４＾＋Ｔ淋巴细胞核因     

人DAF的分离纯化及结构与功能的初步研究

在建立Ｃ３转化酶衰变加速活性检测方法的基础上,成功分离纯化人红细胞膜衰变加速因子（Ｄｅ－ｃａｙ－ａｃｃｅｌｅｒａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＤＡＦ,ＣＤ５５）。以此作为免疫原,制备成功３株抗人ＤＡＦ单抗ＤＧ３、ＤＧ９和ＤＡ１１,分别作用于ＳＣＲ３、ＳＣＲ１和ＳＣＲ４,其中ＤＧ３可完全阻断ＤＡＦ对经典途径Ｃ３转化酶的促衰变加速活性。较系统观察了单独或联合使用抗人ＤＡＦ抗体与抗人ＣＤ３单抗对Ｔ细胞的活化作用,并证明：①针对ＳＣＲ３的不同单抗对Ｔ细胞活化有不同的作用;②抗人ＤＡＦ单抗与抗人ＣＤ３单抗可协同刺…     

细菌毒素的受体和信号核转导

已知内毒素脂多糖（ＬＰＳ）与细胞膜相互作用的信号转导中有５个受体蛋白和３种可溶性蛋白起作用。哺乳动物细胞存在２种ＣＤ１４,即膜ＣＤ１４（ｍＣＤ１４）和可溶性ＣＤ１４（ｓＣＤ１４）。在单核巨噬细胞和中性粒细胞等髓样细胞表达的为ｍＣＤ１４,即ＧＰＩ－ＣＤ１４,连接于细胞外侧膜。血管内皮细胞和上皮细胞等非髓样细胞不表达ＣＤ１４。ＬＰＳ诱导的细胞活化需要血清中ｓＣＤ１４的参与,其Ｃ端缺乏ＧＰＩ尾。研究发现一种能与ＬＰＳ类脂体Ａ结合的６０ｋＤ糖蛋白ＬＢＰ,有结合区和调节区。ｍＣＤ１４作为ＬＰＳ的受体有３…     

SRS—淋巴瘤小鼠淋巴细胞染色质理化性质的研究

本实验对正常及ＳＲＳ－淋巴瘤小鼠淋巴细胞染色质进行了化学组分，ＤＮａｓｅ Ｉ有限度消化，染色质附着蛋白释放，热变性的对比分析。结果表明：（１）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质的非组蛋白和ＲＮＡ高于正常细胞，提示随着肿瘤的发生染色质转录活性和与转录相关的ＮＨＣＰ呈升高趋势；（２）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质的ＤＮａｓｅ Ｉ消化率明显高于正常淋巴细胞，提示肿瘤细胞含有较多优先被核酸酶消化的活性染色质（３）ＳＲＳ－     

虎杖甙对正常人血管平滑肌细胞内钙和膜电位的调节作用

目的和方法：观察虎杖甙（ＰＤ）对人脐带动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）内游离钙、细胞膜电位的变化,以探讨ＰＤ对血管平滑肌的调节机制。用Ｆｌｕｏ－３－ＡＭ、ＤｉＢＡＣ４（３）标记培养的ＶＳＭＣ,在激光共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙和膜电位变化。结果：给ＰＤ（０５ｍｍｏｌ／Ｌ）１０ｍｉｎ后,ＶＳＭＣ内游离钙浓度升高５６％±５６％。当ＰＤ加入前用维拉帕米和ＥＧＴＡ预处理后,则游离钙不再升高;ＥＧＴＡ和肝素预处理也抑制ＰＤ的升钙作用,而ＥＧＴＡ和普鲁卡因预处理则使细胞内钙显著升高。ＰＤ还可使ＶＳＭＣ膜电位去极化,加入钠通道阻断剂河豚毒素（２５μｍｏｌ／Ｌ）可完全阻断ＰＤ的去极化作用：加甲氰咪胍、维拉帕米、优降糖和利及丁预处理不能阻断ＰＤ去极化作用。结论：：ＰＤ可通过细胞外钙内流来增加细胞内游离钙浓度,并促进细胞外钠离子内流而导致细胞去极化     

McAb共激活T细胞介导肝癌细胞前后的膜分子与TCRVβ基因的表达

Ｔ淋巴细胞活化是一个涉及多种膜表面分子和受体以及一系列相关多肽的复杂过程，为了使Ｔ细胞发挥更好的识别和杀伤癌细胞的功能，采用抗ＣＤ３、ＣＤ２８、ＣＤ８０（Ｂ７１）、ＣＤ２、ＣＤ５８ＭｃＡｂ分别刺激健康人ＰＢＬｓ后作用肝癌细胞，对作用前后ＰＢＬｓ用ＦＡＣＳ进行表型分析，结果发现：作用后ＣＤ３和ＣＤ８分子表达比作用前明显增高，而ＣＤ４分子无显著变化，同时基因家族采用ＲＴＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析ＴＣＲＶβ基因１～２０亚家族表达水平与特征，健康人ＰＢＬｓ分别加入ＩＬ２、ＰＨＡ、抗ＣＤ３和ＣＤ３＋ＣＤ２８、ＣＤ２８＋ＣＤ８０、ＣＤ２＋ＣＤ５８作用肝癌细胞（ＢＥＬ７４０２）前表达水平平均约为５％，作用ＢＥＬ７４０２后表达水平约为１３％～２５％，其特征为Ｖβ７增高，这提示在癌抗原的参与下ＭｃＡｂ共刺激的Ｔ细胞活化，ＴＣＲ接受ＡＰＣ相应抗原的刺激，具有该ＴＣＲ的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的Ｔ细胞克隆，发挥其识别和杀伤癌细胞的作用，这将为肿瘤生物治疗的研究提供分子免疫学依据。     

反义Gαq/11亚基ODNs对平滑肌细胞DNA合成和PC蛋白表达的影响

目的：探讨Ｇｑ蛋白介导血管活性多肽对ｖＳＭＣＤＮＡ合成及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）蛋白表达的影响。方法：用硫代修饰的Ｇαｑ／１１亚基反义寡聚脱氧核苷酸（Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ），以６μｍｏｌ／Ｌ的浓度加入含１０－７ｍｏｌ·Ｌ－１ＥＴ－１刺激无血清ＤＭＥＭ培养基中体外培养ｖＳＭＣ。用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定ｖＳＭＣＤＮＡ合成、免疫细胞化学技术检测ｖＳＭＣＰＣＮＡ蛋白表达。结果：Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ可明显抑制ｖＳＭＣＤＮＡ的合成，在１２ｈ，２４ｈ时抑制率分别为８４２％和８５３％；Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ亦明显降低ｖＳＭＣＰＣＮＡ蛋白的表达。而相同浓度的正义Ｇαｑ／１１ＯＤＮｓ只呈现少量抑制作用。结论：本实验提示Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ有可能进一步应用于由血管活性多肽刺激引起的ｖＳＭＣ增生性疾病如经皮冠脉腔内血管成形术（ＰＴＣＡ）后再狭窄的防治的研究     

肿瘤浸润淋巴细胞生物学性状初步研究

本研究发现，掺杂肿瘤细胞的早期ＴＩＬ培养上清液抑制自身淋巴结来源的淋巴细胞增殖作用；后期时，掺杂肿瘤细胞消失（即ＴＩＬ呈对数生长期），ＴＩＬ培养上清液却对自身淋巴结来源的淋巴细胞呈现生长刺激现象。首次发现消化酶对ＴＩＬ这些活力指标有影响。表型与淋巴细胞形态学对照研究时发现，初次分离的ＴＩＬ层细胞中，Ｇｉｅｍ－ｓａ染色的淋巴细胞比例为８３±６％；活细胞镜下计数淋巴细胞占７３±１２％；而ＦＡＣＳ分析ＣＤ３只有２３±８％，ＨＬＡＤＲ３１±２０％；是否属ＴＩＬ前体细胞，还须进一步研究。     

抗人CD4单链抗体的表达及其分离纯化

本研究将构建的抗人ＣＤ３单链抗体基因，克隆到融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１，用ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ＳｃＦｖ融合蛋白，并以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在Ｍｒ为５２０００左右出现的一条新生蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的４０％。经初步纯化和复性后，用ＧＳＴ亲和色谱纯化，再经凝血酶水解获得抗人ＣＤ３ＳｖＦｖ，竞争结合抑制实验证明，该表达产物具有ＣＤ３亲和活性。     

低丙种球蛋白血症病人PBMCs能产生BCGF和BCDF

低丙种球蛋白血症病人ＰＢＭＣｓ能产生ＢＣＧＦ和ＢＣＤＦ［英］／ＤａｖｉｄＳ…／／ＪＡｌｌｅｒＣｌｉｎＩｍｍｕ．－１９９４：９３（１）．－１２７～１３５正常Ｂ淋巴细胞的成熟要经过增殖期和分化期。两时期都受免疫细胞释放的ＢＣＧＦ（Ｂ细胞生长因子）和ＢＣＤ...     

抗人CD3单链抗体的表达及其分离纯化

本研究将构建的抗人ＣＤ３单链抗体基因，克隆到融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，用ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ＳｃＦｖ融合蛋白，并以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在Ｍｒ为５２０００左右出现一条新生蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的４０％。经初步纯化和复性后，用ＧＳＴ亲和色谱纯化，再经凝血酶水解获得抗人ＣＤ３ＳｃＦｖ，竞争结合抑制实验证明，该表达产物具有ＣＤ３亲和活性