湖北汉族人群C4限制性片段长度多态性的研究

用限制性内切酶ＴａｑＩ和Ｃ４基因５￣＇末端探针ｐＡＴ－Ａ检测５８份湖北地区健康献血员基因组ＤＮＡ的Ｃ４基因限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ），观察到７．０ｋｂ、６．０ｋｂ和５．４ｋｂ三种Ｃ４基因片段，它们共组成三种常见的Ｃ４基因ＲＦＬＰ表型，即Ａ：７．０５－４ｋｂ（频率为２４．１４％））；Ｂ：７．０－６．０ｋｂ（频率为２０．６９％）和Ｃ：７．０－６．０－５．４ｋｂ（频率为５５．１７％，在所检测的样本中未观察到６．４ｋｂ的Ｃ４基因片段。     

限制性片段长度多态性分析

不同个体在DNA结构上存在着差异,在不编码蛋白质的区域及没有重要调节功能的区域,DNA结构的个体差异更为明显。基因组中一个特定的基因座位(DNA序列)若存在两种或两种以上的状态(等位基因),而且其中任何一个等位基因在人群中的频率不低于1％,这一现象被称为多态性。DNA多态性本质上是染色体DNA中核苷酸数目或排列顺序的个体差异,这些差异多数为中性突变,不引起表型改变。DNA多态性可应用不同的方法进行检测,如DNA序列分析、PCR片段长度多态性(PCR-FLP),单链DNA构型多态性等。当DNA     

云南省彝族、傣族人群vWF基因Hha Ⅰ和Sma Ⅰ限制性片段长度多态性研究

为研究我国云南省彝族、傣族人群ｖＷＦ基因ＨｈａⅠ和ＳｍａⅠ限制性片段长度多态性特点，应用多聚酶链式反应技术结合ＨｈａⅠ和ＳｍａⅠ酶切分析研究了４４个彝族人７８条染色体、３９个傣族人８８条染色体等位基因的杂合情况。结果在彝族人ＨｈａⅠ＋ＨｈａⅠ－和ＳｍａⅠ＋ＳｍａⅠ－为０．３６０．６４；在傣族人中ＨｈａⅠ＋ＨｈａⅠ－和ＳｍａⅠ＋ＳｍａⅠ－为０．４３０．５７，且发现ＨｈａⅠ和ＳｍａⅠ在两民族中呈完全连锁，未发现ＨｈａⅠ＋／ＳｍａⅠ－或ＨｈａⅠ＋／ＳｍａⅠ－染色体。提示在我国彝、傣两少数民族中，在ｖＷＦ基因的５端均存在ＨｈａⅠ和ＳｍａⅠ的多态性位点，且具有较高的理论杂合率，可用于ｖＷＤ的遗传咨询和产前诊断。     

湖北地区汉族健康人群白细胞介素-1α基因启动子-889C/T位点多态性的研究

目的 :了解湖北地区汉族健康人群白细胞介素 1α基因 (IL 1A )启动子 -889位点的单核苷酸多态性 (SNP) ,比较其在不同种族间的分布特点。方法 :采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)分析的方法 ,检测 184名健康者IL 1A启动子 -889位点的SNP ,分析其基因型和等位基因频率。结果 :CC、CT、TT三种基因型 ,以C等位基因发生频率最高 ( 92 .4% ) ,T等位基因次之 ( 7.6% ) ;与挪威人群比较 ,其基因型和等位基因频率均存在极显著性差异 (P <0 .0 0 1) ,而与日本人群相比也有显著差异 (P <0 .0 5)。结论 :IL 1A启动子 -889位点存在SNP ,其在不同种族间的分布存在明显的差异 ,这种差异有可能是导致一些疾病在不同种族间的发病率和临床表现显著不同的因素之一     

低密度脂蛋白受体限制性片段长度多态性研究进展

低密度脂蛋白受体（LDL－R）基因突变是导致个体罹患家族性高胆固醇血症（FH）的主要病因。本文综述了LDL-R基因限制性片段长度多态性（RFLP）在FH诊断中的应用；正常人群中LDL-R基因RFLP对血清脂质水平的影响；并就LDL－R基因RFLP和其他疾病的关系作一简要介绍。     

动脉粥样硬化性脑梗塞患者载脂蛋白B基因的MspⅠ限制性片段长度多态性研究

为了解动脉粥样硬化性脑梗塞（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ，ＡＣＩ）与载脂蛋白代谢异常的关系，利用ＡｐｏＢｃＤＮＡ探针（ＬＢ１．５）检测了５４名ＡＣＩ患者和６２名正常对照者的载脂蛋白Ｂ（ＡｐｏＢ）基因ＭｓｐⅠ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）等位基因频率。结果显示，１１６份标本共出现２．３５ｋｂ（Ｍ１）和２．６０ｋｂ（Ｍ２）两条杂交片段。Ｍ２等位基因频率在ＡＣＩ（０．１５７）和对照者（０．０５６）之间存在明显差异（χ２＝７．１７，Ｐ＜０．０１）。Ｍ２基因的检出和基因频率的获得为进一步揭示ＡｐｏＢ基因区域在ＡＣＩ的脂类代谢中的作用提供了一个很好的遗传标记。还就不同基因型与血脂、脂蛋白水平的关系进行了讨论。     

福建地区汉族人群甘露糖结合蛋白基因多态性

目的探讨福建地区汉族人群甘露糖结合蛋白（MBP）基因多态性分布规律。方法应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性方法,对152例福建地区汉族健康人MBP基因第54号密码子多态性进行检测,并与其它人群比较。结果 MBP基因第54号密码子基因型频率为：GGC/GGC（71.1%）,GGC/GAC（28.9%）,GAC/GAC（0.0%）;等位基因频率为：GGC（85.5%）,GAC（14.5%）。结论福建地区汉族人群MBP基因多态分布与中国汉族、蒙古族、藏族、彝族和香港华人接近;与北欧人群和东欧人群显著不同。     

用DNA限制性片段长度多态性鉴定中国旋毛虫3个分离株

以旋毛虫国际标准虫株Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ（Ｔｓ）、Ｔ．ｎａｔｉｖａ（Ｔｎ）和Ｔ．ｎｅｌｓｏｎｉ（Ｔｎｅ）作对照，利用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）差异对分离自我国黑龙江省３株旋毛虫进行虫种归属鉴定。５种内切酶实验结果显示：黑龙江猪株（ＨＬ）与Ｔｓ酶切图谱相同；犬株（ＷＣ）与Ｔｎ酶谱相同；猫株（ＳＷ）与Ｔｎ的ＤｒａⅠ，ＰｓｔⅠ，ＨａｅⅢ酶谱相近，而与Ｔｎｅ酶谱差异显著。提示：黑龙江猪株系Ｔｓ；犬株系Ｔｎ；猫株在分类归属上似乎与Ｔｎ靠近。     

中国湖北地区汉族人群TNF遗传多态性研究

目的：探讨中国湖北地区汉族人群中TNF微卫星遗传多态性分布。方法：收集湖北地区164名无血缘关系健康个体的静脉血,提取DNA,应用PCR结合变性聚丙烯酰胺凝胶高压电泳和AgNO3染色,对TNF微卫星进行分型,并将PCR产物克隆及测序鉴定。结果：TNFb检测到7个等位基因,11种基因型;TNFe检测到4个等位基因,7种基因型。TNFb和TNFe位点多态信息含量（PIC）分别为0．67和0．33,两者基因型分布皆符合Hardy-Weinberg平衡定律。统计分析显示,中国汉族人群TNFb、TNFe等位基因频率分布与欧美白种人均有显著性差异（P＜0．05）。结论：TNFb和TNFe等位基因频率分布具有种族的差异性。     

限制性片段长度多态性分析拉米夫定治疗引起乙型肝炎病毒耐药基因变异的研究

目的　应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析方法 (PCRRFLP) ,研究拉米夫定治疗引起慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒耐药基因 (HBVDNA)变异。方法　收集 2 4 0例用拉米夫定治疗 5 2～ 78周慢性乙型肝炎患者的血清标本 ,应用PCRRFLP方法扩增HBV 5 5 2 ,5 2 8两个基因位点片段 ,用限制性内切酶NdeⅠ ,NlaⅢ酶切分析 ,同时测定HBVDNA含量 ,并用DNA序列分析测定 3例患者HBVDNAP区基因序列 (1例野毒株 ,1例M5 5 2V伴L5 2 8M变异 ,1例M5 5 2I变异 )。结果　 2 4 0例患者应用拉米夫定治疗 5 2～ 78周后 ,5 1例血清HBVDNA出现YMDD变异 ,其中M5 5 2V变异 38例 ,M5 5 2I变异 13例 ,L5 2 8M和M5 5 2V同时变异 2 6例 ,L5 2 8M和M5 5 2I同时变异 1例。与定量PCR比较 ,可以测定YMDD变异的最低含量为 1× 10 4 copies mlHBVDNA序列分析结果与RLFP测定一致。结论　PCRRLFP方法是一种快速、简便的检测HBVDNA聚合酶变异的方法 ,可以用来筛查大量的血清标本 ,适宜作为临床用来观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者检测HBV变异的方法     

北京地区汉族人群Ⅰ型胶原基因Sp1结合位点多态性的研究

目的　探讨北京地区汉族人群 型胶原 (collagen type α1 ,COL1A1)基因 Sp1结合位点多态性的分布规律。方法　用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析方法 ,对北京地区汉族 134名绝经后妇女和 43名健康男性的 COL 1A1基因 Sp1结合位点多态性进行了检测。结果　 134名绝经后妇女和 43名男性均为 SS基因型 ,即无多态位点。结论　中国汉族人可能缺乏或罕有 COL 1A1基因 Sp1结合位点多态性 ,与朝鲜人及日本人相同 ,而与高加索人种显著不同。     

应用限制性片段长度多态性分析技术研究乙醇脱氢酶2的基因多态型

分子遗传学技术的发展使得我们对与遗传有关疾病的认识达到了新的境界。通过产前对个体所携有的基因多态型的研究可以对某些疾病进行早期预测，从而达到预防、优生优育的目的。酒精脱氢酶２基因就是一个鲜明的例子，个体带有的基因型不同其表现型也不同，它与胎儿酒精综合征、胎儿酒精效应及酒精相关疾病存在着一定联系。为此本文采用限制性片段长度多态性分析技术研究酒精脱氢酶２的基因，根据基因的变化、筛选出敏感人群为胎儿酒精综合征的预防提供基础依据     

中国江苏地区汉族人群肿瘤坏死因子β遗传多态性研究

目的　探讨中国江苏地区汉族人群肿瘤坏死因子 β遗传多态性分布。方法　收集江苏地区 16 8名无血缘关系健康个体的静脉血提取DNA ,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性 (PCR -RFLP) ,对TNFβ基因多态性进行分析。结果　TNFβ检测到三个等位基因 ,其基因型频率分别为TNFβ 1/ 1=2 1 4 % ,TNFβ 1/ 2 =4 7% ,TNFβ 2 / 2 =31 5 % ,基因型分布符合Hardy-Weinberg定律。统计分析显示 :江苏地区汉族人群TNFβ等位基因频率分布与欧美白种人均有显著性差异(P <0 0 5 )。结论　TNFβ等位基因频率分布具有种族差异     

西藏藏族人群白细胞介素1β基因+3953 C/T多态性

目的:研究白细胞介素1β(IL-1β)第5外显子+3953位点核苷酸C/T多态性(SNP)在西藏藏族健康人群中的分布特点,并与其他不同种族进行比较.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,对125名西藏拉萨市藏族人群IL-1β +3953位点SNP进行检测,计算其基因型频率和等位基因频率,并结合文献与其他不同种族进行比较分析.结果:西藏拉萨市藏族人群IL-1β +3953位点基因型以CC 纯合子型最为多见,(频率为91.20%),CT杂合子型次之(8.00%),TT纯合子型很少(0.80%);其等位基因分布也是以C等位基因最为多见(95.20%),其次为T等位基因(4.80%).西藏藏族人群的等位基因频率分布与德国、西班牙人、高加索人的差异较大,具有统计学意义.而与亚洲人群包括日本人和湖北汉族、广西汉族、广西壮族差异无统计学意义.结论:西藏拉萨市藏族人群中IL-1β +3953位点以C等位基因为主,其SNP分布与其他种族之间存在差异.     

裂解酶片段长度多态性分析的应用现状及发展

裂解酶片段长度多态性分析是近年来出现的一种新型分子生物学技术。它通过裂解酶 对事先标记的待测 DNA作特异性酶切 ,产生一组特异性 DNA片段 ,经显影后形成一级结构依赖性的结构指纹图谱而检测 DNA序列变化 ,其灵敏度、特异性和社会经济效益均等同于或优于 SSCP、RFL P和 DNA直接测序等方法 ,具有广阔的发展应用前景。本文介绍了该方法的技术原理 ,在遗传学基因突变筛查和基因分型等领域的应用现状以及近期取得的技术改进     

RT-PCR结合限制性片段长度多态性分析对我国汉坦病毒进行基因分型的研究

用电脑软件分析ＨＦＲＳＶ 囊膜糖蛋白编码基因的Ｍ 节段,寻找不同型别间病毒株Ｍ 节段的限制性内切酶酶切位点的差异。结果发现,ＨＴＮ 型７６１１８ 株和ＳＥＯ 型Ｒ２２ 株Ｍ 节段１１９９～１４９７ 间的酶切位点,可用于进行限制性内切酶基因多态性分析,以确定ＨＦＲＳＶ 的型别。根据上述结果,合成一对引物,建立ＲＴ／ＰＣＲ 方法,分别用Ｒｓａｌ、Ｔａｑ １ 和ＨｉｎｄＩＩＩ３ 种内切酶对扩增片段进行酶切分型。用此方法分析了从我国不同地区、不同宿主分离的毒株１９ 株,及国际标准毒株１ 株。结果表明,９ 株可定为ＨＴＮ 型,８ 株可定为ＳＥＯ 型,３ 株无法确定其型别。此２０ 个毒株曾用血清学方法分型,仅１１ 株分型成功。分型成功率ＲＴＰＣＲ／ＲＦＬＰ法与血清学方法分别为８５％ 和５５％ ,前者比后者高３０ ％ 。     

汉族人群胆固醇酯转运蛋白基因和C反应蛋白基因多态性与非瓣膜性房颠的关联

目的 研究胆固醇酯转运蛋白(cholesteryl ester transfer protein,CETP)基因TaqIB、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)基因1444C/T单核苷酸多态性(single nonucleotide polymorphism,SNP)与汉族非瓣膜性房颤的相关.方法 选取非瓣膜性房颤患者147例、病例对照147例,应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性鉴定基因型.结果 CETP TaqIB(P=0.005,OR=0.614,B=-0.488)和CRP 1444C/T(P=0.003,OR=2.428,β=0.887)遗传多态性在病例组和对照组间差异有统计学意义.根据性别分组:女性组,吸烟、CETP TaqIB、CRP 1444C/T病例对照间差异有统计学意义;男性组,体重指数和CETP Taq IB病例对照间差异有统计学意义.结论 中国汉族CETP TaqIB (B2等位基因为保护性因子)和CRP1444C/T(T等位基因为危险因子)多态性可能与非瓣膜性房颤相关.吸烟、CRP 1444C/T多态性可能增加女性非瓣膜性房颤遗传易感性;肥胖可能增加男性非瓣膜性房颤遗传易感性.     

湖北汉族人群甘露糖结合凝集素基因外显子1多态性与SLE关联性的研究

目的：分析湖北汉族人群甘露糖结合凝集素(Mannose-Binding LectionL或Mannose-Binding Protein,MBL或MBP)基因外显子1多态性，探讨其与系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)的易感性关系。方法：采用异源双链杂交技术对111例健康正常人和41例SLE患者的MBL基因外显子1多态性进行分析。结果：①共检测出两种等位基因：野生型A和变异型B(在54位密码子由GGC→GAC)，未检出变异型C、D等位基因。②正常对照中A等位基因及B等位基因的基因频率分别为0．910和0．090，符合Hardy-Wernberg定律；与此前在日本人中报道的A及B等位基因频率0．767和0．233相比，变异型B的等位基因频率明显低于后者(P＜0．05)。③SLE病人组中B等位基因频率为0．146，高于正常对照组，但差异无显著性意义。结论：在湖北汉族人群中MBL基因外显子1具有遗传多态性，而且与已知其他人群的分布频率有一定差异。MBL基因外显子1的遗传多态性并不与系统性红斑狼疮相关联。     

中国汉族人群LDL受体基因NcoⅠ多态性及其与血清高胆固醇的相关性研究

目的研究低密度脂蛋白(LDL)受体基因外显子18中NcoⅠ限制性片段多态性在中国正常人群及血清高胆固醇患者中的频率分布,分析基因型与血清高胆固醇之间的相关性.方法应用多聚酶链反应结合限制性酶切方法,对50名健康体检者和50例血清高胆固醇患者进行LDL受体基因多态性检测.PCR后直接用限制性内切酶酶切检测基因多态性.结果在正常对照组中,A1等位基因的频率为0.66,A2等位基因的频率是0.34;在血清高胆醇组中,A1等位基因出现的频率是0.49,A2等位基因的频率是0.51.两组基因频率差异具有显著性(P＜0.05).结论中国南方汉族人群LDL受体基因中存在着NcoⅠ多态性位点,NcoⅠ多态性位点与血清高胆固醇相关联.     

载脂蛋白AI—CⅢ基因区域DNA多态性与动脉硬化性脑梗塞关系…

为探讨载脂蛋白ＡＩ－ＣⅢ基因区域ＤＮＡ多态性与动脉硬化性脑梗塞的关系，作者利用重组ＤＮＡ技术，对５９名正常血脂汉族个体和４４名动脉硬化性脑梗塞患者载脂蛋白ＡＩ－ＣⅢ基因区域ＤＮＡ多态频率和特征进行了分析，发现Ｓ２和Ｍ２２种多态性片段，正常人群等位基因频率为０．１５７和０．１９５，而在ＡＢＩ患者中分别为０．３６４和０．４８９。