IL－3基因疗法对化疗造血损伤的恢复作用

白细胞介素３（ＩＬ－３）是一种具有很强造血调控作用的细胞因子，本实验观察了成纤维细胞介导的ＩＬ－３基因疗法对大剂量环磷酰胺体内注射后造血功能损伤小鼠的恢复作用。结果表明：接受ＩＬ－３基因疗法的实验小鼠外周血白细胞和血小板数量降低程度减弱，回升速度加快，其脾脏和骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＭＫ、ＣＦＵ－Ｓ水平显著地高于对照小鼠，可见成纤维细胞介导的ＩＬ－３基因疗法可显著地降低大剂量化疗后造血损伤程度，并能显著地促进受损的造血功能尽快恢复，提示若将ＩＬ－３基因疗法与大剂量化疗联合应用将提高肿瘤治疗的效果。     

应用IL—2和IL—3联合基因疗法对骨髓移植后造血及免疫…

以大剂量化疗后骨髓功能严重损伤再给予同基因骨髓移植的小鼠为实验模型，动态观察了联合应用成纤维细胞介导的ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法对同基因骨髓移植后实验小鼠骨髓造血免疫功能重建的影响。结果表明，ＩＬ－２基因疗法对造血重建无明显效果，ＩＬ－３基因疗法对免疫重建无明显作用，但联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法能显著加快骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ及ＣＦＵ－Ｅ恢复过程及提高骨髓细胞ＮＫ、     

应用IL-2和IL-3联合基因疗法对骨髓移植后造血及免疫功能重建的影响

以大剂量化疗后骨髓功能严重损伤再给予同基因骨髓移植的小鼠为实验模型，动态观察了联合应用成纤维细胞介导的ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法对同基因骨髓移植后实验小鼠骨髓造血免疫功能重建的影响。结果表明，ＩＬ－２基因疗法对造血重建无明显效果，ＩＬ－３基因疗法对免疫重建无明显作用，但联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法能显著加快骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ及ＣＦＵ－Ｅ恢复过程及提高骨髓细胞ＮＫ、ＬＡＫ活性和ＣｏｎＡ刺激的骨髓细胞增殖反应。提示联合应用成纤维细胞介导的ＩＬ－２和ＩＬ－３基因疗法能显著加快骨髓移植后造血及免疫重建过程，从而有可能提高骨髓移植成功率。     

白细胞介素3基因疗法和白细胞介素6基因疗法的联合造血调控作用

研究了成纤维细胞介导的ＩＬ－３基因疗法，ＩＬ－６基因疗法以两者联合后对造血系统的影响。结果发现，单用ＩＬ－基因疗法的小鼠白细胞总数，中性粒细胞，骨髓ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵ－ＭＫ等显著上升，但血小板上升程度经，单用ＩＬ－６基因疗法的小鼠血小板，中性粒细胞，骨髓ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵ－ＭＫ上晚为显著。     

成纤维细胞介导白细胞介素6基因疗法对化疗导致的造血损伤的恢复作用

研究了成纤维细胞介导的人白细胞介素６（Ｉｎｔｅｔｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）基因疗法对预先体内注射１５０ｍｇ／ｋｇ５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）所造成的造血损伤小鼠模型的治疗作用。结果发现，外周血血小板数量在移殖高分泌ＩＬ－６成纤维细胞后第１０天开始持续上升，第２２天血小板数量恢复到化疗前水平，中性粒细胞数量也显著增高，但对白细胞恢复没有明显的促进作用。骨髓和脾脏ＣＦＵ－ＧＭ及ＣＦＵ－ＭＫ在体内移殖高分泌ＩＬ－６成纤维细胞后，体外动态观察发现：骨髓和脾脏ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ在第４～７天左右数量为０，在第１０天左右数量开始上升，于第１６天左右数量显著增高，对ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ具有明显的恢复作用，ＣＦＵ－Ｓ数量也显著增高。表明成纤维细胞介导的白细胞介素６基因疗法能显著治疗化疗导致的造血损伤，可望为肿瘤放、化疗导致的机体造血损伤提供新的治疗途径。     

成纤维细胞介导白细胞介素6基因疗法对化疗导致的造血损伤的…

研究了成纤维细胞介导的人白细胞介素６（Ｉｎｔｅｔｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）基因疗法对预先体内注射１５０ｍｇ／ｋｇ，５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）所造成的造血损伤小鼠模型的治疗作用，结果发现，外周血血小板数量在移植高分泌ＩＬ－６成纤维细胞后第１０天开始持续上升，第２２天血小板数量恢复到化疗前水平，中性粒细胞数量也显著增高，但对白细胞恢复没有明显的促进作用，骨髓和脾脏ＣＦＵ－ＧＭ及ＣＦＵ－ＭＫ在体内移植     

联合应用IL-2基因疗法和IL-3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免疫功能的增强作用

以大剂量化疗后给予同基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型，动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后荷瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＦＮ－γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促进机体某些免疫功能恢复而增强ＢＭＴ后的抗肿瘤作用。     

联合应用IL—2基因疗法和IL—3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免 …

以大剂量化疗后基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型。动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后葆瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＮＦ＿γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促     

白细胞介素—11对小鼠骨髓造血的影响

白细胞介素－１１（ＩＬ－１１）是一种新的造血生长因子，于１９９０年基因克隆成功。本文对ＩＬ－１１的造血调节作用进行了初步的研究，探讨了ＩＬ－１１及其与其它造血因子协同对小鼠骨髓造血祖细胞增殖的促进作用。结果表明，ＩＬ－１１单独对骨髓集落的形成无显著的促进作用，但与多系集落刺激因子ＩＬ－３一起则具有很强的协同作用，能明显促进小鼠骨髓Ｍｅｇ－ＣＦＵ和Ｍｉｘ－ＣＦＵ的形成。     

白细胞介素－11对小鼠骨髓造血的影响

白细胞介素－１１（ＩＬ—１１）是一种新的造血生长因子，于１９９０年基因克隆成功．本文对ＩＬ—１１的造血调节作用进行了初步的研究，探讨了ＩＬ—１１及其与其它造血因子协同对小鼠骨髓造血祖细胞增殖的促进作用．结果表明，ＩＬ—１１单独对骨髓集落的形成无显著的促进作用，但与多系集落刺激因子ＩＬ－３一起则具有很强的协同作用，能明显促进小鼠骨髓Ｍｅｇ—ＣＦＵ和Ｍｉｘ－ＣＦＵ的形成．     

造血生长因子促进RV介导LacZ-NeoR基因在人骨髓造血细胞中转染的机制

目的：本文探索了不同组合的造血生长因子ＳＣＦ、ＩＬ３及ＩＬ６对逆转录病毒（ＲＶ）介导的ＬａｃＺ－ＮｅｏＲ双标志基因转染人骨髓造血细胞转染效率、表达水平的影响及其相关机理。方法：采用ＲＶ转染人骨髓非粘附造血细胞（ＮＡＢＭＣ）及经ＳＣＦ、ＩＬ３及ＩＬ６不同组合预激４８ｈ后的ＮＡＢＭＣ。经荧光素二－β－Ｄ－半乳糖呋喃苷脂（ＦＤＧ）标记的半乳糖苷酶、Ｇ４１８ＲＣＦＵ－ＧＭ及ＰＣＲ／Ｓｏｕｒｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测ＮｅｏＲ和ＬａｃＺ基因的表达。结果：早期造血生长因子（ＨＧＦｓ）的预激明显改善了ＲＶ介导的ＬａｃＺ－ＮｅｏＲ基因在人骨髓造血细胞中的转染效率与表达水平,ＳＣＦ＋ＩＬ３＋ＩＬ６＞ＳＣＦ＋ＩＬ３＞ＩＬ３＋ＩＬ６＞ＳＣＦ＋ＩＬ６。氚标记脱氧胸苷（３Ｈ－ＴｄＲ）自杀及５－溴脱氧尿苷－碘化丙啶（ＢｒｄＵ－ＰＩ）双标流式细胞仪（ＦＣＭ）检测显示,ＨＧＦｓ预激后人骨髓造血细胞及ＣＦＵ－ＧＭ的Ｓ期比例显著提高。结论：ＳＣＦ＋ＩＬ３＋ＩＬ６的联合预激可显著改善ＲＶ介导的外源基因在人骨髓造血细胞中的转染效率与表达水平,这可能与ＨＧＦｓ预激后明显提高人骨髓造血细胞及ＣＦＵ－ＧＭ的Ｓ期比例密切相关     

成纤维细胞介导的人白介素6基因疗法增强机体免疫功能的实验研究

通过研究成纤维细胞介导的人ＩＬ－６基因疗法对机体免疫功能的影响，结果发现，高分泌ＩＬ－６成纤维细胞克隆体内移植后，能显著提高淋巴细胞增殖反应、ＩＬ－２和ＩＦＮ－ｒ产生水平以及ＮＫ和ＬＡＫ细胞的杀伤活性，当与ＩＬ－２合用时，对ＮＫ和ＬＡＫ活性的增强作用更加明显，表明成纤维细胞能显著增强机体免疫功能，可望为肿瘤生物治疗、造血功能重建等开辟新的途径。     

重组人IL－6对大鼠急性白血病细胞体外增殖的抑制

我们已报道重组大鼠ＩＬ－３和小鼠ＧＭ－ＣｓＦ对ＬＴ１２白血病细胞的增殖有不同程度的抑制活性。本研究发现重组人ＩＬ－６在１０００～５０００Ｕ／ｍｌ呈剂量依赖性抑制ＬＴＩ２白血病祖细胞集落形成及ＤＮＡ合成。５０００Ｕ／ｍｌ对ＣＦＵ－Ｌ的抑制率达５２．９％，而对ＤＮＡ合成则为４１．３％，此外，ＩＬ－６还明显增加ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦ对ＬＴ１２细胞的抑制活性，对ＣＦＵ－Ｌ的抑制强弱依次为ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３＋ＧＭ－ＣＳＦ、及ＩＬ－６＋ＩＬ－３，ＩＬ－６＋ＩＬ－３＋ＧＭ－ＣＳＦ三因子的结合并不能增加抑制效应；对ＤＮＡ合成的抑制作用为ＩＬ－６＋ＩＬ－３＋ＧＭ－ＣＳＦ＞ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＞ＩＬ－３＋ＧＭ－ＣＳＦ＞ＩＬ－６＋ＩＬ－３。提示上述造血因子除刺激正常造血外，在白血病的治疗中可能具有一定意义。     

rhGM—CSF／IL—3融合蛋白对人骨髓造血祖细胞体外培养的研究

研究了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３融合蛋白对人骨髓造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ、ＢＦＵ－Ｅ）集落形成的影响，结果表明ｒｈＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３能显著促进ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ、ＢＦＵ－Ｅ集落的形成，分别与ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３单独或联合用药比较，差异有显著性（Ｐ〈０．００１），ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ＝ＧＥＭＭ、ＢＦＵ－Ｅ集落的形成对融合蛋白均有剂量依赖性，培养体系浓度在５￣１０ｎ     

IL-2基因修饰成纤维细胞对肝癌荷瘤小鼠的治疗实验

目的研究双顺反子逆转录病毒载体介导ＩＬ－２基因转导成纤维细胞对小鼠肝癌的治疗作用。方法利用双顺反子逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ／ＩＬ－２将ＩＬ－２基因转导小鼠成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３，然后将分泌ＩＬ－２的成纤维细胞与６０Ｇｙγ射线照射的肝癌Ｈ２２细胞皮下植入三天前５×１０５或２．２×１０５肝癌Ｈ２２细胞皮下注射的ＢＡＬＢ／ｃ鼠。结果分泌ＩＬ－２的成纤维细胞治疗组能明显增加荷瘤小鼠的生存率（Ｐ＜０．０２５），抑制肿瘤生长（Ｐ＜０．０５），在肿瘤植入第７０天无肿瘤形成的小鼠再次注射１×１０６Ｈ２２细胞仍然不发生肿瘤。５１Ｃｒ释放试验表明来自照射Ｈ２２与分泌ＩＬ－２成纤维细胞混合液注射的小鼠脾细胞与５１Ｃｒ标记的Ｈ２２细胞共培养后，５１Ｃｒ特异释放明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结论实验结果表明ＩＬ－２基因修饰的成纤维细胞能诱导针对肝癌的特异免疫反应。     

人参总皂甙诱导造血生长因子生成的实验研究

为探讨人参“补气生血”的现代生物学机理，采用造血祖细胞体外培养，造血生长因子生物活性检测等技术，研究人参总皂甙（ＴＳＰＧ）对造血生长因子的诱导生成作用。结果表明，经ＴＳＰＧ诱导分别制备的脾细胞、巨噬细胞、成纤维细胞和骨髓基质细胞的培养上清对髓系造血祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ）的体外集落增殖均有显著刺激作用。ＴＳＰＧ也能促进脾细胞、成纤维细胞和巨噬细胞分泌ＩＬ－６；刺激脾细胞产生     

IL-4基因转染瘤苗体内抗肿瘤转移作用及其免疫机理的初步研究

将白细胞介素４（ＩＬ－４）基因转染Ｂ１６黑色素瘤细胞，筛选出高分泌克隆，体外扩增后经丝裂霉素Ｃ灭活制备成瘤苗，用以治疗实验性肺转移荷瘤小鼠，同时用低剂量白细胞介素２（ＩＬ－２）及低剂量环磷酰胺（Ｃｙ）辅助治疗。结果发现，经ＩＬ－４基因转染瘤苗治疗后荷瘤小鼠肺部转移结节明显减少，存活期明显延长，辅以ＩＬ－２治疗后效果更佳；同时辅以ＩＬ－２及Ｃｙ则治疗效果最佳。体内免疫功能研究发现，经ＩＬ－４基因转染瘤苗治疗后小鼠脾淋巴细胞诱导的ＣＴＬ及腹腔巨噬细胞杀伤活性明显升高，但脾脏ＮＫ及经诱导的ＬＡＫ活性变化不明显。脾淋巴细胞经诱导后分泌的细胞因子（包括ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ、ＧＭ－ＣＳＦ）中，ＴＮＦ和ＧＭ－ＣＳＦ在治疗各组有所升高。本实验结果表明，ＩＬ－４基因转染瘤苗能有效地激活体内抗肿瘤免疫功能并具有显著的抗肿瘤转移效果，将其与低剂量ＩＬ－２和低剂量Ｃｙ联合应用时抗肿瘤转移效果更佳。     

造血生长因子促进RV介导LacZ—Neo^R基因在人骨髓造血细胞中 …

目的：本文探索了不同组合的造血生长因子ＳＣＦ、ＩＬ３及ＩＬ６对逆转录病毒（ＲＶ）介导的ＬａｃＺ－Ｎｅｏ＾Ｒ双标志基因转染人骨髓造血细胞转染效率、表达水平的影响及其相关机理。方法：采用ＲＶ转染人骨髓非粘附造血细胞（ＮＡＢＭＣ）及经ＳＣＦ、ＩＬ３及ＩＬ６不同组合预激４８ｈ后的ＮＡＢＭＣ。经荧光素二－β－Ｄ－半乳糖呋喃苷脂（ＦＤＧ）标记的半乳糖苷酶、Ｇ４１８＾ＲＣＦＵ－ＧＭ及ＰＣＲ／Ｓｏｕｒｔｈｅｒｎ－     

成纤维细胞介导的白细胞介素4基因疗法的建立

成纤维细胞介导的白细胞介素４基因疗法的建立上海第二军医大学免疫学教研室上海２００４３３于益芝，曹雪涛，杨嗣坤，徐志工，叶天星本室继成功地建立了成纤维细胞介导的ＩＬ－６基因治疗模型并证明确能增强体内免疫功能后〔１，２〕，又将白细胞介素４（Ｉｎｔｅｒｌｅ...     

骨髓基质细胞系BMSC1自发分泌多种细胞因子

骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）及其分泌的细胞因子在造血细胞分化发育过程中起重要作用。应用特异性细胞因子依赖株检测了自建的小鼠骨髓基质细胞株ＢＭＳＣ１的细胞因子分泌情况。实验说明ＢＭ－ＳＣ１细胞能自发分泌高水平的ＩＬ－６，中等水平的ＩＬ－７及较低水平的ＧＭ－ＣＳＦ，未检测到化学趋化因子。此细胞上清对骨髓造血干细胞有明显的促集落形成效应，所形成的集落以ＣＦＵ－ＧＭＭ及ＣＦＵ－ＧＭ为主，其促集落形成作用呈现剂量依赖关系。上述结果表明，骨髓基质细胞能够产生多种类型的细胞因子从而对于细胞骨髓内分化发育成Ｐｒｏ－Ｔ细胞可能起重要作用。