转化生长因子β及其受体在翼状胬肉中基因表达的定量检测

目的：定量检测转化生长因子-β（Transforming Growth Factor-β,TGF-β）及其受体在翼状胬肉和正常球结膜组织中的表达水平,探讨其在翼状胬肉病变发生发展过程中的作用。方法：随机选取翼状胬肉患者30例,手术切除翼状胬肉组织,并留取患眼角膜上缘上方的正常球结膜组织作为自身对照,实时荧光定量PCR技术分析翼状胬肉和正常球结膜组织中TGF-β1、TGF-β2及其I型和Ⅱ型受体相对于内参照基因18S的相对mRNA含量。结果：TGF-β1在正常球结膜和翼状胬肉组织中平均表达水平分别为4．26×10^-7±1．45×10^-7和10．67×10^-7±7．47×10^-7,TGF-β2在正常球结膜和翼状胬肉组织中表达水平分别为1．08×10^-10±0．68×10^-10和8．23×10^-11±6．63×10^-11。TGF-βI型受体在正常球结膜和胬肉组织中平均表达水平分别为0．003015±0．0036和0．000379±0．000281,TGF-βⅡ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平分别为5．33×10^-5±5．05×10^-5和1．002×10^-5±9．04×10^-6。TGF-β1在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为2．9±2．8,差异有统计学意义（P〈0．01）。TGF-β2在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为7．5±1．4,差异有统计学意义（P〈0．01）。TGF-βI型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。TGF-βⅡ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中表达水平明显降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：TGF-β1和TGF-β2在胬肉组织中表达水平均高于正常球结膜组织。TGF-β1在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均远高于相应组织中的TGF-β2表达,但是TGF-β2在胬肉中表达水平升高变化幅度高于TGF-β1。TGF-βI型和Ⅱ型受体在胬肉组织中表达水平均低于正常球结膜组织。TGF-I型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均高干相应组织中的TGF-βⅡ型受体表达,提示胬肉组织中I型、Ⅱ型受体表达的降低可能导致TGF-β分泌的增加,从而导致翼状胬肉病变的发生发展,提示转化生长因子-β及其受体在翼状胬肉病变发生发展中可能起着重要的作用。     

大鼠视网膜中转化生长因子β1和β2基因表达的定量检测(英文)

目的:定量检测转化生长因子-β1(Transforming growth factor β1,TGF-β1)和转化生长因子-β2(TGF-β2)在大鼠正常视网膜中的表达水平,探讨TGF-β1和TGF-β2在视网膜中表达的差异及其意义。方法:分离取出大鼠正常视网膜,抽提RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析TGF-β1和TGF-β2的mRNA含量。结果:大鼠视网膜RNA保持完好未被降解,能够用于表达水平分析。大鼠视网膜中TGF-β2相对于β-actin的基因表达水平为0.0378±0.009,TGF-β1为0.0008±0.0003,前者明显高于后者,统计学上差异有显著性(t=12.37,P<0.001),说明在视网膜中TGF-β的表达以TGF-β2为主,TGF-β2和TGF-β1的比值为55.00±26.61。结论:实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达。TGF-β在视网膜中以TGF-β2表达为主,提示可能是TGF-β2在视网膜病变中起主导作用。     

转化生长因子-β受体Ⅰ/Ⅱ在大鼠视网膜中基因表达的定量检测

目的:定量检测转化生长因子-(受体Ⅰ(transforming growth factor-(typeⅠreceptor,TβRⅠ)和受体Ⅱ(TβRⅡ)基因在大鼠视网膜中的表达水平,探讨TGF-(不同受体在视网膜中表达的差异及其意义。方法:分离取出大鼠视网膜,抽提RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析视网膜中TβRⅠ和TβRⅡ的mRNA含量。结果:TβRⅠ相对于18S的mRNA含量是0.00034±0·00013,TβRⅡ相对于18S的mRNA含量是0.0001±0·00005,差异有统计学意义(P<0.01)。在大鼠视网膜中以TβRⅠ表达为主,TβRⅠ和TβRⅡ比值的平均值为3·9±1.7。结论:实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达,TβRⅠ的mRNA在视网膜中的表达明显高于TβRⅡ,提示这可能是与TβRⅠ及TβRⅡ本身结构特点和在TGF-β信号转导过程中的不同作用有关。当TβRⅠ/TβRⅡ比例改变时,可影响细胞对TGF-β的应答反应,可能是增殖性视网膜病变的发生机制之一。     

大鼠视网膜中转化生长因子β1和β2基因表达的定量检测

目的：定量检测转化生长因子-β1（Transfimning growth factorβ1，TGF-β1）和转化生长因子-β2（TGF-β2）在大鼠正常视网膜中的表达水平，探讨TGF-β1和TGF-β2在视网膜中表达的差异及其意义。方法：分离取出大鼠正常视网膜，抽提RNA并逆转录，实时荧光定量PCR技术分析TGF-β1和TGF-β2的mRNA含量。 结果：大鼠视网膜RNA保持宅好未被降解，能够用于表达水平分析。大鼠视网膜中TGF-β2相对于β-actin的基因表达水平为0．0378±0．009，TGF-β1为0．0008±0．0003．前者明显高干后者，统计学上差异有显著性（t=12．37，P〈0．001），说明在视网膜中TGF-β的表达以TGF-β2为主，TGF-β2和TGF-β1的比值由55．00±26．61。 结论：实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达。TGF-β在视网模中以TGF-β2表达为主，提示可能是TGF-β2在视网膜病变中起主导怍用。     

转化生长因子-β与翼状胬肉

转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-beta,TGF-β)具有多种生物学作用,翼状胬肉中也有其异常表达。TGF-β在翼状胬肉发病中的作用主要表现为:①能促进翼状胬肉上皮细胞,成纤维细胞的增殖和新生血管形成。②能促进多种细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的合成。③对翼状胬肉中的炎症和免疫反应也有介导作用。     

实时荧光定量PCR检测大鼠视网膜中TGF-β受体Ⅰ和受体Ⅱ的基因表达

本研究通过实时荧光定量PCR（RTQ-PCR）技术定量分析转化生长因子β受体Ⅰ，（TβR-Ⅰ）和受体Ⅱ（TβR-Ⅱ）基因在正常成年大鼠视网膜中的表达，探讨TGF-β及其受体在维持正常视网膜稳态和视网膜增生性病变中的作用机制。     

实时荧光定量PCR检测糖尿病大鼠视网膜中转化生长因子β受体-1和受体-2基因表达

目的:定量检测转化生长因子β受体-1(TransformingGrowthFactor-βreceptortype1,TβR1)和转化生长因子β受体-2(TransformingGrowthFactor-βreceptortype2,TβR2)编码基因在糖尿病大鼠视网膜中不同时相点的动态表达水平,以探讨转化生长因子β及转化生长因子β受体在糖尿病视网膜病变(DR)中的作用。方法:选择健康成年SD大鼠28只,随机分为正常对照组(CON)和糖尿病组(DM)。利用链尿佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病视网膜病变模型,制备RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析TβR1和TβR2在不同时相点相对于内参照基因18s的相对mRNA含量。结果:TβR1在4,12wk时相对于18s的mRNA含量分别为0.000493±0.000133和0.000608±0.000232。TβR2在4,12wk时相对于18s的mRNA含量分别为0.000166±0.000057和0.000113±0.000049。TβR1基因表达水平随着病变进展呈上升趋势,TβR2在4wk时表达量较正常增加,到12wk时表达量又减少,逐渐恢复到正常水平。结论:糖尿病大鼠视网膜中TβR1和TβR2基因表达水平变化可能影响TGF-β信号的转导过程,TGF-β及其受体介导的信号转导通路在糖尿病视网膜病变中具有重要作用。     

TGF-β1、TGF-βRⅡ及Smad4蛋白在原发性翼状胬肉中的表达

目的研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、转化生长因子-β1Ⅱ型受体(transforming growthfactor-β1receptorⅡ,TGF-βRⅡ)和Smad4蛋白在原发性翼状胬肉组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法检测56眼翼状胬肉头部组织及8眼正常结膜组织中TGF-β1、TGF-βRⅡ及Smad4蛋白的表达,阳性表达率用阳性细胞占细胞总数百分率的平均值表示,利用统计学软件SPSS13.0分析本研究结果。结果TGF-β1在胬肉头部侵入角膜缘≤1mm、2~3mm和≥4mm翼状胬肉组和正常结膜组的阳性表达率利用分别为(21.08±3.63)%、(20.12±2.68)%、(21.55±3.07)%、(12.36±1.97)%;TGF-βRⅡ的表达率分别为(15.35±9.37)%、(21.07±10.96)%、(15.48±8.80)%、(33.77±9.31)%,Smad4蛋白的表达率分别为(14.38±4.02)%、(13.05±3.50)%、(13.13±4.10)%、(38.69±5.70)%,TGF-β1在各翼状胬...     

血管内皮生长因子受体-1在初发与复发翼状胬肉中的表达

目的探讨血管内皮生长因子受体-1(vascular endothelial growth factor receptor-1,VEGFR-1)在初发与复发翼状胬肉中的表达差异及其相关性。方法用免疫组织化学方法检测初发和复发翼状胬肉组织中VEGFR-1(各30例)的表达,并与20例正常角膜缘结膜组织对照。结果 VEGFR-1主要位于复发翼状胬肉血管内皮细胞,多样本比较秩合检验(Kruskal-Wallis法,即H值检验)结果显示:正常结膜、初发和复发翼状胬肉中VEG-FR-1表达差异有统计学意义(χ2=21.75,P=0.000)。按α=0.05水准,复发翼状胬肉中的表达最多(平均秩为50.83),其次为初发胬肉(平均秩为36.77),正常结膜组织表达最少(平均秩为25.05)。结论 VEGFR-1在复发胬肉中更高表达,提示血管组织增生可能是翼状胬肉复发的重要因素。     

兔转化生长因子-β2基因的克隆及其表达的检测

目的　克隆兔转化生长因子 β2 (TGF β2 )基因 ,并获得其在兔重要脏器及角膜中的表达。方法　利用不同物种的相似序列设计相关引物 ,制备兔肝组织的RNA并逆转录 ,RT PCR技术获得TGF β2 基因蛋白编码区序列后克隆 ,RT PCR半定量及荧光定量PCR检测TGF β2 在兔重要脏器及角膜中的表达。结果　成功地克隆了兔TGF β2 的蛋白编码区序列 ,测序证实和人、大鼠及小鼠具有高度的同源性 ,含有TGF β2 的保守结构域 ,TGF β2 基因在兔心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肾上腺和角膜组织中均有不同程度表达。结论　利用同源序列克隆进化上保守的基因是简捷快速的方法。获得兔TGF β2 的基因有助于进一步研究其在机体重要脏器纤维化、肿瘤以及角膜疾病中的作用     

TGF-β1和HSP-47在翼状胬肉中的表达及其意义

目的：研究转化生长因子β1（transforming growth factor -β1, TGF-β1）和热休克蛋白47（heat shock protein 47,HSP-47）在翼状胬肉和正常结膜组织表达的差异,从而探讨它们在翼状胬肉发生、发展中的作用,为翼状胬肉的治疗提供新的方向。 方法：采用免疫组化方法比较翼状胬肉和正常结膜组织中TGF-β1和HSP-47的表达差异。 结果：TGF-β1在翼状胬肉的鳞状上皮细胞中的表达水平明显高于正常结膜组织,在其基质层和内皮层有中等量表达,同时,在翼状胬肉纤维层的炎性细胞和血管内皮细胞中TGF-β1也有明显表达。与此相反,在正常结膜组织中TGF-β1表达较弱。 HSP-47在翼状胬肉的固有层高表达,在上皮细胞表达较弱,在正常结膜组织中则未见明显表达。 结论：相比正常结膜组织,TGF-β1和HSP-47均在翼状胬肉组织中有较高水平的表达,因此推测二者在诱导翼状胬肉的发生、发展中起着重要的作用。     

翼状胬肉相关致病因子的研究进展

翼状胬肉(ptergium)是在多种因素和因子的共同作用下形成的眼表疾病,主要的发病机制与紫外线照射及辐射后所引起的一系列改变有关,具体过程至今仍不明确。血管内皮生长因子(VEGF)升高、炎症反应加重、新生血管的产生、氧化应激反应、上皮-间质细胞转化(EMT)、抑癌基因失活等是目前公认的翼状胬肉发病的原因,但各个因素及因子的具体作用过程仍有待研究。探究其具体相关因素及其在翼状胬肉发病过程中的作用,有助于为临床诊治提供靶向治疗方案及有效预防措施。     

翼状胬肉患者泪液中表皮生长因子的含量分析

目的研究表皮生长因子（EGF）在翼状胬肉发生发展中的作用。方法用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测60例单眼不同时期翼状胬肉患者患眼与对侧健康眼泪液中EGF的含量,并进行统计学分析。结果静止期翼状胬肉患眼组泪液中EGF的含量与对照组的差别无统计学意义（P〉0.05）;进行期翼状胬肉患眼组泪液中EGF的含量与对照组的差别有统计学意义（P〈0.01）;进行期翼状胬肉组泪液中EGF的含量与静止期翼状胬肉组的差异有统计学意义（P〈0.05）。结论翼状胬肉的发展可能与泪液中的EGF水平有关。     

转化生长因子β及其受体与白内障发生的关系

随着对晶状体上皮细胞形态学及分子水平的研究,人们发现生长因子,尤其是转化生长因子β(transforming growthfactor β,TGF-β)对白内障的发生、发展起重要作用,并有望对其治疗提供新的线索.本文拟对这一方面的研究进展作一综述.     

人翼状胬肉组织HMG-CoA还原酶和LDL受体基因的表达

目的:研究LDL-R基因和HMG-CoA-R基因在翼状胬肉组织中的表达。方法:随机选取原发性和复发性翼状胬肉组织各10例,正常结膜组织10眼。实时荧光定量PCR技术分析结膜中HMG-CoA-R和LDL-R的相对mRNA含量。结果:原发性和复发性翼状胬肉中的HMG-CoA-R及LDL-R的mRNA水平均明显高于正常球结膜组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:HMG-CoA-R和LDL-R基因可能参与翼状胬肉的发病过程。     

表皮生长因子受体家族在翼状胬肉上皮内的异常表达

目的 了解表皮生长因子受体（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＧＦＲ）家族的ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２及ＥｒｂＢ３蛋白在翼状胬肉上皮内的表达。方法 用免疫荧光组织化学及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ地１５例初发期翼状胬肉患者切除的翼状胬肉组织进行ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２及ＥｒｂＢ３蛋白的检测,并与正常人结膜组织进行对照。结果 免疫荧光组织化学染色显示,在正常结膜上皮中,ＥＧＦＲ蛋     

翼状胬肉患者手术前后泪膜功能的变化(英文)

目的:通过观察翼状胬肉患者行翼状胬肉转位术前后泪膜功能的变化,分析翼状胬肉手术治疗与患者泪膜功能的关系。方法:对20例20眼翼状胬肉患者行胬肉转位术,于术前1d;术后1,2,4,6wk分别进行泪液分泌(SchirmerI)试验、泪膜破裂时间(break-uptime,BUT)检查。结果:翼状胬肉眼手术前后比较:术前和术后不同时间的SchirmerI试验结果差异无显著性;术后6wkBUT值较术前延长(P<0.05)。结论:翼状胬肉转位术可使患者泪膜功能得到一定程度的改善。     

基质金属蛋白酶-1及其抑制剂和转化生长因子-β1在翼状胬肉中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶1(matrixmetalloproteinase1,MMP1)及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子1(tissueinhibitorofmetalloproteinase1,TIMP1)和影响两者作用的转化生长因子β1(transforminggrowthfoctorβ1,TGFβ1)在翼状胬肉头部组织中的表达及意义。方法采用免疫组化技术检测MMP1、TIMP1及TGFβ1在翼状胬肉头部(22例)和正常结膜(12例)中的表达。结果MMP1与TGFβ1在翼状胬肉头部组织中的阳性表达率显著高于正常结膜(P<0.01),而TIMP1的表达差异无显著性(P>0.05)。经Spearman等级相关分析可知,翼状胬肉中MMP1与TGFβ1阳性表达间存在正相关(r=0.625,P<0.01);TIMP1与TGFβ1阳性表达间无相关性(r=-0.0512,P>0.05)。结论MMP1,TIMP1及TGFβ1可能积极参与翼状胬肉发生、发展过程中的基质重构与角膜Bowman’s膜的破坏。     

TNF-α及其Ⅰ型受体(P55)在翼状胬肉中的表达

目的：检测不同翼状胬肉组织中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）及其Ⅰ型受体P55的表达变化,探讨TNF-α及P55在翼状胬肉发病机制中的作用。方法：免疫组织化学方法（PV）检测翼状胬肉（72眼）及胬肉旁结膜组织（30眼）中TNF-α及其受体P55的表达,分析与翼状胬肉临床病理特征的关系。结果：TNF-α在翼状胬肉和胬肉旁结膜组织中的阳性表达率分别为65.3%（47/72）,26.7%（8/30）,差异有显著统计学意义（χ2=12.706,P〈0.01）。P55在翼状胬肉和胬肉旁结膜组织中的阳性表达率分别为56.9%（41/72）及16.7%（5/30）,差异有显著意义（χ2=13.875,P〈0.01）。TNF-α在复发性胬肉的阳性表达率高于初发性胬肉（χ2=6.547,P=0.011）,表达强度差异比较无统计学意义（F=1.288,P=0.393）; 进展期胬肉阳性表达率高于静止期胬肉（χ2=4.082,P=0.043）,表达强度比较无统计学意义（F=0.489,P=0.708）。P55在复发性胬肉的阳性表达率高于初发性胬肉（χ2=9.907,P=0.002）,表达强度比较无统计学意义（F=1.175,P=0.424）; 进展期胬肉的阳性表达率明显高于静止期胬肉（χ2=11.140,P=0.001）,表达强度比较无统计学意义（F=0.665,P=0.621）。结论：TNF-α及P55在翼状胬肉中的阳性表达率随着发病状态和临床分期的进展而变化。TNF-α及P55表达与临床分类、临床分期、患者工作生存状况相关。TNF-α及P55在翼状胬肉不同发病状态及临床分期的表达强度无明显差异。     

翼状胬肉中MMP-2,TIMP-2和TGF-β1的表达意义

目的:探讨MMP-2及其抑制剂TIMP-2和影响它们作用的TGF-β1在翼状胬肉中的表达及意义。方法:采用Maxvision免疫组化技术检测在20例翼状胬肉和10例正常球结膜中MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的表达,并比较两组中表达的差异。结果:MMP-2和TGF-β1在翼状胬肉中的表达的阳性率显著高于正常球结膜中它们的阳性表达率(z=-4.618,-4.376,P<0.01),而TIMP-2在两组中的表达差异无显著性(z=-1.319,P>0.05)。经Spearman等级相关检验分析,在翼状胬肉中,MMP-2和TGF-β1的阳性表达率存在正相关(r=0·686,P<0.01);而MMP-2和TGF-β1与TIMP-2阳性表达率之间无相关(r=-0.410,-0.143,P>0.05)。结论:TGF-β1介导的MMP-2和TIMP-2表达失衡在翼状胬肉的发生、发展及侵犯角膜过程中发挥着重要的作用。