红细胞-代血浆对失血性休克犬外周血单个核细胞核转录因子-κB活性的影响

目的 评价红细胞-代血浆(贺斯)对犬失血性休克的疗效及其对外周血单个核细胞中核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响.方法 18只健康成年犬随机分成3组(n=6):贺斯组(A组)、全血组(B组)和红细胞-贺斯组(C组).采用Wiggers改良法制作犬可逆性休克模型,放血使平均动脉血压降至5.33~6.6kPa(40~50mm Hg),并维持60min.各组以10mL·kg-1·min-1速率分别输注不同成分的液体进行治疗.分别于休克前、休克60min和休克治疗60min测血流动力学指标(MAP、HR、CO),同时检测外周血单个核细胞中NF-κB活性. 结果 (1)各组休克60min时血流动力学指标均明显低于休克前(P<0.05),且各组外周血单个核细胞NF-κB活性均明显升高(P<0.05).(2)与休克60min比较,休克治疗60min时,各组血流动力学指标均有不同程度地恢复,外周血单个核细胞NF-κB活性均明显降低,其中红细胞-贺斯组恢复最佳(P<0.05). 结论红细胞-贺斯能显著降低外周血单个核细胞NF-κB活性,达到良好的休克治疗效果.     

大鼠失血性休克后单个核细胞释放细胞因子的变化

目的:探讨失血性休克对单个核细胞释放细胞因子的影响.方法:建立大鼠失血性休克模型,采用抗体双夹心ELISA法检测门静脉血、小肠、脾脏单个核细胞分泌的肿瘤坏死因子(TNF-α)与白介素6(IL-6).结果:在内毒素(LPS)刺激下,休克组动物的小肠与门静脉血单个核细胞释放的TNF-α量在复苏后4 h和24 h低于假手术组动物.结论:失血性休克能使小肠单个核细胞在复苏后4 h和24 h对内毒素的刺激呈现低反应.     

外周血单个核细胞TLR4及血清IP-10在慢性乙型肝炎的表达及意义

目的:探讨外周血单个核细胞Toll样受体4 (Toll like receptor 4,TLR4)和血清中IFN-Y诱生蛋白10 (Interferon γ-in-ducible protein 10,IP-10)在慢性乙型肝炎中的作用.方法:应用流式细胞仪检测40例慢性乙型肝炎患者及正常人的血液单个核细胞表面的TLR...     

冻融抗原冲击致敏的树突状细胞诱导产生肺癌特异性免疫应答的实验研究

目的:利用树突状细胞递呈肿瘤抗原的特性提高细胞毒T淋巴细胞(CTLs)对肺癌细胞的杀伤活性。方法:外周血单个核细胞体外经GM-CSF和IL-4诱导产生树突状细胞,负载A549肺癌细胞裂解物的同时加入新型热休克蛋白(Hsp70L1),不同分组分别诱导自体CTLs产生。用细胞毒试验和ELISA测定CTLs杀伤活性和细胞因子的分泌。结果:A549冻融抗原致敏的DCs增加CTLs增殖,上调CTLs中CD3 和CD8 T细胞群及Th1型细胞因子的分泌;诱导的CTLs对A549细胞产生特异性杀伤;在加入Hsp70L1后效果更加明显。结论:DCs能有效呈递肺癌冻融抗原。诱导产生抗原特异性CTLs,加入免疫佐剂热休克蛋白后CTLs杀伤活性进一步增强。提示DCs在肺癌疫苗和过继免疫治疗中具有广阔的应用前景。     

热休克对心肌细胞中αB-晶状体蛋白移位及表达的影响

采用热休克对新生大鼠心肌细胞进行处理 ,观察αB 晶状体蛋白在细胞内的分布及其表达变化。结果 :①Western blot显示热休克后胞浆中可溶性αB 晶状体蛋白迅速移位至细胞内的不溶性结构中 ,2h左右基本复位 ;②免疫双荧光细胞化学显示热休克导致αB 晶状体蛋白在细胞浆内发生分布变化 ,而HSC70从胞浆向胞核移位 ;③免疫电镜定量分析进一步证实αB 晶状体蛋白在热休克时主要移向Z线及核膜等细胞骨架部位 ;④Northern blot显示热休克诱导心肌细胞αB 晶状体蛋白mRNA的表达增加。热休克处理使αB 晶状体蛋白迅速移位至细胞骨架 ,表明其在心肌预适应早期相中可能发挥保护作用。而αB 晶状体蛋白的诱导表达 ,可能是心肌预适应延迟相保护的重要机制之一。     

维持性血透对尿毒症患者外周血单个核细胞凋亡的影响及其机制

目的 观察维持性血透对尿毒症外周血单个核细胞凋亡的影响以及BCL广2和PCNA蛋白表达的变化.方法 实验分为尿毒症血透组和健康对照组,分离透析前、透析后及对照组外周血单个核细胞,流式细胞仪检测各组外周血单个核细胞发生细胞凋亡情况以及凋亡相关蛋白BCL-2和PCNA的表达变化.结果 尿毒症组透析前、后单个核细胞凋亡率较健康对照组均明显增多(P<0.01),尿毒症组透析后较透析前增多(P<0.05).PCNA蛋白表达各组无明显变化.尿毒症组透析前、后单个核细胞BCL-2蛋白表达较健康对照组明显降低(P<0.01),透析后更明显(P<0.01).结论 尿毒症患者单个核细胞存在着较高的凋亡率.维持性血透可通过抑制抗凋亡蛋白BCL-2表达,进一步促进单个核细胞凋亡,影响细胞免疫功能.     

HSP27在大鼠磨牙钻磨后牙髓的表达

目的 研究热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)在成年大鼠磨牙受到钻磨刺激后不同时间牙髓组织中的表达特点及定位情况. 方法 建立大鼠牙髓炎模型,用免疫组织化学方法检测热休克蛋白27在大鼠上颌磨牙钻磨后3 d,6d,9 d的表达. 结果 热休克蛋白27在牙髓炎晚期成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞、血管壁及内皮细胞中表达逐渐减弱.结论 热休克蛋白27的表达与牙髓炎症发生发展的程度有关,提示热休克蛋白27在牙髓损伤修复期可能是参与牙髓损伤修复的细胞因子之一.     

结直肠癌细胞外泌体的制备及其促单核细胞增殖作用

目的：从结直肠癌细胞系中分离鉴定外泌体,初步研究结直肠癌来源的外泌体潜在的免疫学特性,为外泌体在结直肠癌免疫学治疗中的应用提供依据。方法： 超速离心法从HCT116和SW480 2种结直肠癌细胞系培养上清中分离提取正常细胞外泌体和热休克细胞外泌体,进一步用220 nm的滤膜进行纯化获得纯度较高的外泌体。采用透射电镜观察所提取外泌体表征形态,聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析细胞和外泌体的蛋白组成,检测外泌体促进外周血单个核细胞（PBMCs）的增殖功能。结果：透射电镜下正常的外泌体和细胞热休克获得的外泌体形态相近,均呈现典型的圆形或椭圆形外泌体结构,直径为50~100 nm。聚丙烯酰胺凝胶电泳,结直肠癌细胞裂解物与结直肠癌细胞系来源外泌体的蛋白组成不同,与未处理和经热休克处理的结直肠癌细胞比较,外泌体对PBMCs的增殖有更强的促进作用（P<0.05）,热休克作用可使外泌体诱导的PBMCs的增殖程度显著升高（P<0.05）。结论 ：超速离心法和滤膜过滤方法可有效地从结直肠癌细胞系中提取外泌体,细胞裂解物和外泌体的蛋白组成差异可能是造成免疫学特性差异的主要原因,将细胞经热休克处理可增强外泌体的免疫原性。     

人颊癌BCaCD885细胞加热后细胞膜HSP70的动力学变化与热耐受性的关系

目的探讨肿瘤细胞热耐受性与细胞膜热休克蛋白表达的关系。方法采用流式细胞仪检测了人颊癌BCaCD885细胞经43．5℃加热40min后2，4，6，8，12，24，48及72h细胞膜热休克蛋白70的表达动力学，并与相隔不同时间接受2次43．5℃，40min加热的BCaCD885细胞产生的热耐受性情况进行比较。结果加热后直至6h时细胞膜热休克蛋白70的表达才有较明显的升高，约在12h时达到高峰，尔后开始下降，到72h时基本恢复到对照组的水平。细胞膜热休克蛋白70表达水平和细胞热耐受性的消长有一定的相关性，相关系数为0．840。结论热休克蛋白70在细胞热耐受性形成过程中具有较重要的作用，结果可为肿瘤临床热疗和免疫治疗提供参考。     

特应性皮炎患者外周血中HSP60、TLR4、NF-κBp65的表达

目的 研究热休克蛋白60(HSP60)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κBp65(NF-κBp65)在特应性皮炎(AD)患者外周血中的表达水平及其与疾病发病的关系.方法 分别应用逆转录PCR法、免疫细胞化学法及酶联免疫吸附试验法检测17例AD患者外周血单个核细胞中TLR4 mRNA、NF-κBp65及血清中HSP60的水平,15例正常人作对照.结果 与正常人对照组相比,TLR4 mRNA、HSP60 及NF-κBp65在AD患者外周血中过度表达,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HSP60、TLR4、NF-κBp65 在AD患者外周血中的表达水平均升高,其表达上调可能与AD发病有关.     

乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒DNA的检测及临床意义

目的：研究乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ检测的临床意义。方法：用聚合酶链反应技术检测６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ。结果：６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率分别为４３．３％，４５％；同时检测血清中ＨＢｅＡｇ，其阳性率为２８．２％；外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检测率与血清乙肝病毒ＤＮＡ具有一致性；急性肝炎患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率为２０％，慢性肝炎和肝炎肝硬变分别为５６．７％，４０％，外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检出率在急性肝炎和慢性肝炎之间有显著差异。结论：外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的存在与乙型肝炎的慢性化有关     

检测脐血单个核细胞中HBV-DNA的意义

目的：探讨新生儿脐血单个核细胞中HBV-DNA和血清中HBV-DNA对早期诊断宫内感染的意义。方法：采用ELISA和PCR方法测定40例HBsAg阳性的孕妇外周血、新生儿脐血血清及脐血单个核细胞中的HBV-DNA。结果：脐血单个核细胞中HBV-DNA阳性率明显高于脐血清,二者具有显著性差异(P<0．001)。结论：外周血单个核细胞感染可能是HBV母婴传播的另一条重要途径;检测脐血单个核细胞中HBV-DNA对早期诊断HBV宫内感染将更有价值。     

骨髓单个核细胞热休克蛋白27表达在多发性骨髓瘤中的临床价值

目的：探讨骨髓单个核细胞热休克蛋白27（HSP27）表达与多发性骨髓瘤（MM）临床特征的关系。方法收集初治多发性骨髓瘤患者86例,复发难治患者27例,对照组为非血液系统恶性肿瘤患者,根据治疗方案的不同,MM患者分为初治组、复发难治常规化疗组及含硼替佐米化疗组。分别于化疗前、化疗后1、2、3疗程检测骨髓单个核细胞HSP27的表达率及蛋白水平。结果化疗前各组HSP27表达量及蛋白水平趋势为：复发难治组大于初治组大于对照组。初治组中Ⅲ期患者的HSP27明显高于Ⅱ期患者。含硼替佐米化疗方案可明显降低HSP27的表达及蛋白水平,含硼替佐米化疗方案抑制HSP27的表达力度明显优于常规化疗组。化疗后1个疗程HSP27的表达量小于1的患者,其死亡率、复发率明显低于HSP27表达量大于1的患者,且复发时间明显延后。结论骨髓单个核细胞HSP27的表达及蛋白水平与多发性骨髓瘤的分期、治疗应答、预后相关。     

乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒DNA的检测及临床意义

目和：研究乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ检测的临床意义。方法：用聚合酶链反应技术检测６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ。结果：６０例乙肝患者血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率分别为４３．３％，４５％，同时检测血清中ＨＢｅＡｇ，其阳性率为２８．２％，外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检测率与血清乙肝病毒ＤＮＡ具有一致性；急性肝炎患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的     

实时荧光定量PCR方法对3种不同标本中巨细胞病毒检出率的比较

目的比较患者血清、晨尿及外周血单个核细胞中real-time PCR检测(实时PCR检测)巨细胞病毒(CMV)的检出率。方法对血清HCMV-IgM检测(胶体金标免疫层析法)阳性疑似病例,应用real-time PCR检测其血清,晨尿和外周血单个核细胞中的HCMV-DNA,比较3种不同标本检测的阳性率。结果血清标本CMV-DNA阳性检出率为4.76%,晨尿沉渣标本阳性检出率为18.18%,外周血单个核细胞分离液标本阳性检出率20.93%,3者之间均有统计学差异。结论 Real-timePCR法检测HCMV-DNA以外周血中单个核细胞中检出率最高,其次为晨尿沉渣标本,血清标本检出率最低。     

阻断单核细胞趋化蛋白-1可缓解病毒性心肌炎心肌病变

目的　研究单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)在B3型柯萨奇病毒 (CVB3)诱导病毒性心肌炎 (VMC)发病中的作用及其机制。方法　CVB3腹腔注射BALB/c小鼠 ,随机分 3组 :VMC组 (A组 )、抗体阻断组 (B组 )、羊IgG对照组 (C组 ) ,并设未感染生理盐水对照组 (D组 )。比较各组小鼠心脏重量和体重的比值 (HW/BW )、心肌组织病理学积分 (PS)、心肌组织病毒载量、血清CK MB水平和心肌浸润的单个核细胞变化。流式细胞术分析单个核细胞表面CCR2 ,趋化试验分析病毒性心肌炎小鼠外周血单个核细胞对MCP 1的趋化性。结果　与A组相比 ,B组血清CK MB水平降低 (P <0 .0 1)、PS减少 (P <0 .0 5 ) ,但是HW /BW和CVB3载量未呈明显改变 (P>0 .0 5 ) ;B组小鼠心肌浸润的单个核细胞减少 ,下降 2 2 %～ 5 6 % ,平均下降 39% ;与D组相比 ,B组CK MB、PS、HW /BW和CVB3载量均明显升高。而与A组相比 ,C组CVB3载量、血清CK MB水平、HW/BW和心肌组织病理学积分均未呈明显改变。同时发现 ,A组小鼠心肌组织浸润的单个核细胞中CCR2 细胞为 70 .2 9% ,外周血单个核细胞中CCR2 的细胞占 33.76 % ;B组小鼠心肌组织浸润的单个核细胞中CCR2 细胞下降 ,为 4 4 .37%。体外经MCP 1趋化的病毒性心肌炎外周血单个核细胞中CCR2 细胞占 86 .5 5 % ,而未趋     

重症肌无力患者外周血单个核细胞Fas及血清sFas、TNFα检测

目的:探讨外周血淋巴细胞凋亡与重症肌无力(MG)发生的关系.方法:收集20例MG患者及20例健康献血者的外周血,分离单个核细胞和血清,用流式细胞仪测定单个核细胞膜Fas,用双抗体夹心ELISA法测定血清中sFas、TNFα水平.结果:MG患者血清sFas、TNFα水平较对照组高(P＜0.01);单个核细胞表面Fas分子的表达率低于对照组(P＜0.05).结论:MG患者单个核细胞膜Fas分子和血清sFas、TNFα水平异常,可能与疾病的发生有关.     

热休克蛋白及黏附分子在乳腺癌患者中的表达变化研究

目的:研究与分析热休克蛋白及黏附分子在乳腺癌患者中的表达变化情况。方法:选取本院2013年1月-2016年12月期间的60例乳腺癌患者作为观察组,同时期的60例乳腺良性疾病患者作为对照组。统计两组的血清和组织热休克蛋白及黏附分子表达情况,并比较观察组中不同分期与分化程度者的表达情况。结果:观察组的血清及组织热休克蛋白及黏附分子各项指标表达情况均明显高于对照组,且观察组中分期较高与分化程度较低者的血清及组织热休克蛋白及黏附分子各项指标表达情况均明显高于分期较低与分化程度较高者,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:热休克蛋白及黏附分子在乳腺癌患者中呈现高表达状态,且不同分期与分化程度者之间存在明显差异,故认为具有一定的临床检测价值。     

检测脐血单个核细胞中ＨＢＶ—ＤＮＡ的意义

目的：探讨新生儿脐血单个核细胞中HBV－DNA和血清中HBV－DNA对早期诊断宫内感染的意义。方法;采用ELISA和PCR方法测定40例HBsAg阳性的孕妇外周血,新生儿脐血血清及脐血单个核细胞中的HBV－DNA。结果：脐血单个核细胞中HBV－DNA阳性率明显高于脐血清,二者具有显著性差异（P＜0．001）。结论 外周血单个核细胞感染可能是HBV母婴传播的另一条重要途径;检测脐血单个核细胞中HBV－DNA对早期诊断BV宫内感染将更有价值。     

MiR-21在慢性阻塞性肺疾病患者外周血清和单个核细胞中的表达及临床意义

目的：通过研究miR-21在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者外周血清及单个核细胞中的表达,探讨miR-21在COPD发病中的意义及机制。方法：将研究对象分为健康对照组(n=41)和COPD组(n=49),收集两组外周血清,分离其外周血单个核细胞并收集临床资料。运用实时荧光定量PCR法检测各组外周血清及单个核细胞中miR-21的表达水平。分析COPD组miR-21与肺功能的关系,并对miR-21与COPD患者一秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)进行相关性分析。结果：COPD组外周血清及单个核细胞中miR-21表达水平较健康对照组增高;COPD外周血清及单个核细胞中miR-21差异表达与肺功能相关;COPD患者miR-21表达水平与FEV1呈正相关。结论：COPD患者外周血清及单个核细胞中miR-21表达升高可能与COPD发病过程及病情严重程度相关。