多胺及其与生物分子的相互作用

多胺是包括腐胺、精胺、精脒的直链小分子有机碱，其显著特征是多价阳离子，故易于与带负电荷的生物分子结合，包括生物大分子ＤＮＡ，ＲＮＡ以及小分子物质核苷酸。多胺与生物分子的相互作用对其多效生物学功能起重要作用。     

多胺在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及意义

目的： 研究多胺、鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰基转移酶（SSAT）在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及机制。方法: 异丙肾上腺素（ISO）皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,应用反向高效液相色谱（RP-HPLC）、RT-PCR和Western blotting结合图像分析系统,分别检测ISO作用不同时点大鼠心肌组织多胺含量、ODC和SSAT mRNA和蛋白的表达。结果: 与对照组比较,心脏重量参数在ISO注射后7 d时显著增加,ISO注射后1 d时腐胺含量增加（P<0.05）,5 d、7 d时显著增加（P<0.01）;精脒含量在ISO注射后3 d时开始增加,ISO注射后7 d时增加显著（P<0.01）,精胺含量略有增多（P<0.05）,总多胺池显著增加。心肌组织ODC和SSAT的 mRNA表达在ISO注射后1 d时升高(P<0.05或P<0.01）,并持续在较高水平。心肌组织ODC和SSAT的蛋白表达分别在ISO注射后1 d和ISO注射后5 d时升高,ISO注射后7 d时显著升高（P<0.01）。结论: 大鼠心肌组织多胺含量增加和ODC、SSAT的表达增强可能参与ISO所致心肌肥厚的病理过程。     

MicroRNA在乳腺癌治疗中的应用进展

乳腺癌是最常见的癌症之一,尽管临床上对乳腺癌的治疗取得了较大的进展,然而固有的或后天获得的耐药性以及肿瘤的迁移和浸润会导致患者的治疗效果不理想最终死亡仍是目前函待解决的难题.和大多数肿瘤的发生发展一样,无论是乳腺肿瘤细胞的异常增殖、迁移和浸润还是多药耐药性(MDR),都与其细胞内特定基因的表达异常密切相关.目前也有很多研究发现肿瘤的发生发展与microRNA的异常表达有着密切的关系.因此,为了更好地理解乳腺癌发生发展的分子机制,进一步研究microRNA在乳腺癌中的作用功能十分必要.就microRNA在治疗乳腺癌中的应用做一综述,力求为今后选择控制肿瘤发展的新策略提供有效的思路.     

调控因子在巨核细胞分化中的重要作用

巨核细胞生成经历了骨髓多能干细胞向巨核细胞的分化决定以及巨核系祖细胞的继续分化和发育成熟。这一过程涉及多个基因有序开启和关闭的复杂而又精密的调控,包括胞质、胞核的一系列变化。在髓系细胞分化过程中,红系细胞和巨核系细胞是由同一种前体细胞分化而来,其分化机制目前还未完全被揭示。转录水平的调控是巨核细胞分化研究的重点,文章主要对巨核细胞分化过程相关转录因子的研究进展进行综述。     

多胺在RNA和蛋白质代谢中的生物学效应

多胺在RNA和蛋白质代谢过程中具有许多复杂的生物学效应:可激活RNA聚合酶;与RNA结合形成复合物而使之稳定;激活或抑制不同体系的RNA水解酶;通过影响核糖体的重建、mRNA合成及稳定性、tRNA的活化及蛋白质合成因子等调节蛋白质的合成;并可减少翻译中出现的“误译”从而提高蛋白质合成的准确性.本文简扼评述了近年该领域的研究进展。     

全降解高分子冠状动脉支架临床研究进展及境内临床试验建议

与冠状动脉金属支架相比,全降解高分子冠状动脉支架由高分子材料制成,在预定的时间内降解而降低持续性机械牵拉、异物炎性反应等风险,且能在预定时间内维持满足临床应用的机械性能,似乎成为未来支架产品的发展方向。文章结合该类产品的临床研究进展,对境内临床试验的开展提出了初步建议;该类产品开展确证性临床试验前需完成可行性试验研究,以6个月的晚期管腔丢失和30 d、180 d主要心脏不良事件为指标评估产品初步的安全性和可行性;境内确证性试验建议可由两个试验组成,其主要研究终点分别为12个月晚期管腔丢失和24个月靶病变失败率,确证性试验总样本量在符合统计学原则基础上不少于1 000例。     

Ⅳ型胶原在膀胱癌中的表达及意义

基膜是阻止肿瘤细胞侵袭转移的天然屏障。正常的基膜是由Ⅳ型胶原等成分构成的一致密网状结构 ,研究表明Ⅳ型胶原的降解程度与恶性肿瘤的浸润转移相关〔1,2〕。膀胱癌是泌尿系中最常见的恶性肿瘤 ,近年来在这方面的研究报道不多。本研究应用免疫组化方法检测Ⅳ型胶原在膀胱癌中的表达 ,探讨它在膀胱癌浸润转移中的作用及其临床意义。1　材料与方法1 1　材料　原发性膀胱癌组织标本 6 5例 ,男 5 0例 ,女 15例 ;年龄 2 6～ 84岁 ,平均 5 7 91岁 ;单纯性移行细胞癌 6 0例 ,混合有鳞癌 5例 ;按ＷＨＯ分级系统 :Ｇ1级 2 0例 ,Ｇ2 级2 5例 ,Ｇ3 级…     

TEIF蛋白在软组织肉瘤中的表达及意义

目的 观察TEIF蛋白在软组织肉瘤组织中的表达及与类型、分级的关系。方法通过原核表达TEIF蛋白免疫制备多克隆抗体,免疫印迹鉴定。以组织芯片-免疫组织化学（En Vision法）检测166例软组织肉瘤和28例良性肿瘤及瘤样病变标本TEIF蛋白表达。结果制备多克隆抗体经Western印迹鉴定与TEIF具有特异结合性。免疫组织化学显示166例软组织肉瘤中TEIF蛋白阳性97例,阳性率为58％（97／166）,高于良性肿瘤及瘤样病变（11％,3／28）（P＜0．05）。阳性主要分布为：滑膜肉瘤94％（16／17）、原始神经外胚叶瘤（PNET）91％（21／23）,两者高于隆突性皮肤纤维肉瘤43％（6／14）、黏液性纤维肉瘤38％（6／16）、恶性外周神经鞘膜瘤36％（8／22）、脂肪肉瘤32％（6／19）（P＜0．05）,而与恶性纤维组织细胞瘤75％（15／20）、横纹肌肉瘤（7／10）、平滑肌肉瘤64％（9／14）差异无统计学意义（P〉0．05）。同时,TEIF蛋白的弥漫阳性表达（≥2＋）多存在于PNET和滑膜肉瘤,分别为83％（19／23）和76％（13／17）。在法国癌症中心联盟（FNCLCC）分级中,19例Ⅰ级肉瘤中TEIF阳性表达为32％（6／19）,44例Ⅱ级肉瘤阳性率为48％（21／44）,两者中2＋以上阳性分别为11％（2／19）、32％（14／44）,而70例Ⅲ级肉瘤中TEIF阳性表达为84％（59／70）和2＋以上阳性为70％（49／70）。Ⅲ级组的TEIF阳性率（及2＋以上阳性率）显著高于Ⅱ级组和Ⅰ级组（均为P＜0．05）,而后两者间则差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 TEIF蛋白表达存在于软组织肉瘤,尤其高表达于PNET、滑膜肉瘤,并与肉瘤的组织学分级有关。     

基因表达系列分析及在移植耐受研究中的应用进展

基因表达系列分析（SAGE）是一种能够快速、详细、准确地反映生物体内在不同的发育期及生理病理状态下基因表达水平的高效技术。SAGE不需要已知基因序列,可以发现新的转录本,可以对组织、细胞进行基因表达的定量定性研究,在生物学及医学研究中得到了广泛的应用。     

Gas2基因在肝细胞癌中的表达及意义

已知Ｇａｓ2在细胞周期阻滞时特异性表达 ,并因其被证实参与细胞凋亡而引起人们的关注[1] 。我们对肝细胞肝癌(ＨＣＣ)和癌旁及正常肝组织中Ｇａｓ2的原位表达作对比观察 ,结合ＨＣＣ中细胞增殖及凋亡状况 ,分析Ｇａｓ2在ＨＣＣ发生、发展中的可能作用。一、材料与方法1.标本处理 :36例ＨＣＣ及相应癌旁组织取自 1999年复旦大学附属中山医院首次住院手术患者 ,另有 8例正常组织 ,取自同期因良性肿瘤而部分切除的肝手术标本。2 .原位杂交检测Ｇａｓ2ｍＲＮＡ :探针由上海肿瘤研究所提供 (与ＧｅｎｅＢａｎｋ的Ｇａｓ2ｍＲＮＡ序列有 98.6 %同…     

淫羊藿甙抑制肿瘤细胞端粒酶活性及其调节机制的研究

目的 :探讨中药单体淫羊藿甙 (ICA)抑制肿瘤HL 6 0细胞端粒酶活性及作用机制。方法 :采用MTT法 ,NBT染色法 ,TRAP PCR ,RT PCR法和流式细胞术。结果 :ICA显著抑制HL 6 0细胞端粒酶活性 ,且端粒酶活性下降与细胞表面粒细胞分化抗原CD11b表达率呈负相关 ;诱导HL 6 0细胞向粒细胞方向分化 ;改变HL 6 0细胞周期各时相的分布 ,表现为G0 /G1期细胞逐渐增多 ,S期细胞逐渐减少 ;上调分化相关基因p2 1、下调增殖相关基因c mycmRNA和蛋白表达水平。结论 :阐明了ICA显著抑制HL 6 0细胞端粒酶活性 ,并从基因 蛋白 细胞效应水平揭示了其调节端粒酶活性的可能机制。     

多种粘附分子基因在原发性肝癌的表达及其临床意义

目的:探讨多种粘附分子基因在原发性肝癌中的表达及其临床意义。方法:取64例用RT-PCR法半定量检测肝癌粘附分子的基因表达情况,分析其临床意义。结果:(1)原发性肝癌各粘附分子的表达率分别为:E-钙粘蛋白 90.62%、细胞间粘附分子-1 93.75%、粘附分子CD44 50.00%、粘附分子CD_44V 96.88%、整合素α₅ 100%、整合素β₁ 100%,CD44与其他粘附分子表达率的差异显著。(2)肝癌组织各粘附分子E-钙粘蛋白 、细胞间粘附分子-1 、粘附分子CD44、粘附分子CD_44V 、整合素α₅、整合素β₁ mRNA的表达量分别为:1.24±0.54、0.96±0.37、0.62±0.73、0.86±0.33、 0.97±0.49、1.41±0.24,其中粘附分子CD44与E-钙粘蛋白、整合素β₁的表达量差异显著。(3)肝癌分期与粘附分子基因mRNA表达量的关系显示:E-钙粘蛋白、粘附分子CD44的表达量随分期增高而下降,其中粘附分子CD44Ⅰ-Ⅱ期和Ⅳ期的表达量差别显著;细胞间粘附分子-1、粘附分子CD_44V,整合素α₅、整合素β₁的表达量随分期增高而增高,其中细胞间粘附分子-1Ⅰ-Ⅱ期和Ⅳ期的表达量差别显著。(4)肝癌粘附分子基因mRNA表达量与临床病理生理特点相关分析显示:肝癌粘附分子基因mRNA表达量与肿瘤大小、有无转移、有无包膜和结节数目有关,与AFP水平、肝硬化情况、肝功能状况无关。结论:肝癌粘附分子基因mRNA的表达存在明显的差异,粘附分子CD44表达缺失率高。肝癌粘附分子基因mRNA的表达与肿瘤大小、有无转移、结节数目、有无包膜相关。     

Effects of Lactobacillus rhamnosus GG on proliferation and polyamine metabolism in HGC-27 human gastric and DLD-1 colonic cancer cell lines

Previous in vitro and in vivo studies have suggested that lactobacilli can exert antiproliferative effects on the gastrointestinal epithelium. However, their role in affecting the cellular proliferative mechanisms is not completely clear. The aim of this study was to investigate the effects of increasing concentrations of Lactobacillus rhamnosus strain GG (L. GG) homogenate on cell growth and proliferation (by MTT, [³H]-thymidine incorporation and polyamine biosynthesis) in neoplasms originating from different gastrointestinal tracts. Thus, HGC-27 human gastric cancer cells and DLD-1 human colonic adenocarcinoma cells were evaluated. Besides, in order to verify which bacterial fraction was involved in the antiproliferative effects, the cytoplasm and cell wall extracts were tested separately. Gastric HGC-27 and colonic DLD-1 cells showed significant differences in their proliferative behavior, in particular in their polyamine profile and biosynthesis. Notwithstanding, one and the other proved to be sensitive to the growth inhibition by the highest concentrations of bacterial homogenate. Both HGC-27 and DLD-1 cells were resistant to the bacterial cell wall fractions, whereas increasing cytoplasm fraction concentrations induced an evident antiproliferative effect. These data suggest that cytoplasm extracts could be the responsible for L. GG action on proliferation in these two cell lines from gastric and colonic neoplasms.     

小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞过程中基因表达情况和电生理特性研究

目的： 探讨小鼠胚胎干细胞在体外分化心肌样细胞过程中αMHC、Anf、MLC2v基因的表达情况以及分化的心肌样细胞的电生理特点。 方法： 将转染PαMHC-EGFP小鼠D3胚胎干细胞系,体外诱导分化心肌样细胞，应用RT-PCR检测0 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d拟胚体（EB）细胞中αMHC、Anf、 MLC2v基因的表达情况，同时应用膜片钳技术，观察心肌样细胞的电生理特性。 结果： 在EB形成的7d和8d可见EB内出现有绿色荧光蛋白表达的心肌样细胞群；RT-PCR结果显示αMHC基因表达在EB体形成第7 d，而在10 d、14 d跳动的心肌样细胞中该基因表达增强（P<0.05），而Anf、 MLC2v基因的表达仅出现在心肌样细胞；膜片钳记录的心肌样细胞动作电位显示,73.5%（n=34）的细胞记录到典型心房肌细胞动作电位［APD90=（78.4±3.1）ms］；20.5%细胞表现为起搏细胞动作电位［APD90=（112.6±5.5）ms］；1个细胞显示了典型的心室肌细胞动作电位的特征（APD90=200 ms）。 结论： 在心肌样细胞分化的早期可见αMHC、Anf、 MLC2v基因的表达，这3种基因可为心肌发育过程中的特征性基因并对心肌发育起调节作用。而此干细胞系分化的心肌样细胞主要为心房肌细胞和起搏细胞。     

抗菌肽及其模拟物的临床应用研究进展

抗菌肽,作为一种新型的抗生素替代药物,近年来得到了极大关注。本文概述了抗菌肽及其模拟物的抗菌特性及优势特点,着重阐述了其临床研究进展和临床应用面临的挑战。抗菌肽具有不同于传统抗生素的独特抗菌机制,能够杀灭多重耐药菌且不易诱导产生抗药性,数十种抗菌肽已进入了临床试验阶段,但是毒性作用、不稳定性及成本昂贵使其临床应用受到限制。针对上述缺陷,研究者尝试合理改造抗菌肽的结构,并着手研发抗菌肽模拟物。相信在未来,抗菌肽及其模拟物会在对抗耐药菌方面发挥重要的作用。     

带绿色荧光蛋白标签的人era真核表达载体的构建及人Era对细胞形态和细胞周期的影响

目的:构建人era真核表达载体并初步研究这一人类新基因对体外培养细胞形态和细胞周期的作用。方法:构建带绿色荧光蛋白(EGFP)标签的人era真核表达载体,转染体外培养细胞NIH3T3,用荧光显微镜观测和流式细胞仪进行分析。结果:无论EGFP融合于人Era的C端或N端,融合蛋白均表达于细胞浆接近核膜处,细胞形态无明显变化,细胞周期检测S期细胞所占百分数降低。结论:人era可能参与细胞周期调控,为阐明人era的功能提供了资料。