改良纸片相邻法检测革兰阴性菌诱导性β—内酰胺酶

本实验采用改良纸片相邻法，以头孢西丁为诱导剂，头孢哌酮和头孢噻甲羧肟分别为靶β-内酰胺药物。检测1996年7月～1997年3月临床分离出的193株常见革兰阴性杆菌诱导型β-内酰胺酶的情况。发现有81菌株42％（81／193）出现诱导型β-内酰胺酶（即所谓的截平现象），其中能达到Sander判定为诱导株标准的有24株菌，占12．4％。临床常见革兰阴性杆菌中易产生诱导性肝内酸胶酶以阴沟肠杆菌、黄杆菌、铜绿假单胞菌多见。利用诱导剂一靶β-内酰胺药物的纸片相邻法与革兰阴性菌的日常药敏的有机结合，可使临床实验室在报告药敏结果同时予以报告产诱导酶的情况，以供临床用药时参考。     

诱导型Ampc β-内酰胺酶的检测及意义

肠杆菌科的某些菌种及铜绿假单胞菌在三代头孢治疗过程中，易产生诱导型Ampcβ-内酰胺酶，并可筛选出持续高产的Ampc酶突变株导致对青霉素，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ代头孢菌素类和头霉烯类抗生素耐药，而常规药敏不易发现，我们从146株革兰氏阴性杆菌中检出诱导型Ampc酶72株(49．3％)，现将结果报告如下：     

肠杆菌科细菌两种β-内酰胺酶测定及耐药性监测

目的对我院及本地区肠杆菌科细菌产β-内酰胺酶及其耐药性的情况进行研究分析。方法将我院分离出的202株肠杆菌科细菌,采用MicroScan autoSCAN-4型全自动细菌鉴定分析仪作细菌鉴定和药敏试验,同时用复合纸片法鉴定超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),用头孢西丁三维试验法检测AmpCβ-内酰胺酶(AmpC-BLA)。结果202株肠杆菌科细菌中,高产ESBLs的细菌74株占36.6%,高产AmpC-BLA的细菌39株占19.3%;产β-内酰胺酶菌对18种常用抗菌药物耐药率明显高于非产酶菌株。结论2种β-内酰胺酶菌的耐药性非常严重且各具特点,各临床实验室应重视β-内酰胺酶的检测,这对指导临床合理使用抗生素具有十分重要的意义。     

临床评价VITEK2高级专家系统对常见细菌β内酰胺耐药表型的检测和分析

目的 评价VITEK2高级专家系统(AES)对临床常见细菌β内酰胺耐药表型的检测和分析。方法 用VITEK2 AES检测并分析已知耐药表型的葡萄球菌、大肠埃希菌、克雷伯菌和阴沟肠杆菌共124株。结果 VITEK2 AES耐甲氧西林葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌产超广语β内酰胺酶[ESBLs(TEM型、SHV型或CTX—M型)]、阴沟肠杆菌产诱导型AmpC酶或高产AmpC酶、ESBLs均能正确检测。对9株同时产ESBLs和高产AmpC酶阴沟肠杆菌检测，其中1株正确，其余8株只报告高产AmpC酶。结论 VITEK2 AES能够对临床菌株中重要的β内酰胺耐药表型准确检测，并能根据所测耐药表型对某些影响临床抗菌药物治疗的药敏结果进行修订。对阴沟肠杆菌某些耐药表型的分析、判断有待进一步改进。     

阴沟肠杆菌β-内酰胺酶的检测与分型

目的：了解该地区临床细菌感染分离的标本中阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药性以及细菌产β-内酰胺酶的类型。方法在该地区医院通过细菌培养分离阴沟肠杆菌88例，用纸片扩散法进行药敏测定；通过改良三维实验检测临床耐药菌高产β-内酰胺酶及其分型。结果在研究菌株中，有17例菌株单产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），占19．32％。有20例菌株单产AmpC酶，占22．73％。有5例菌株同时产AmpC酶和ESBLs ，占5．68％。有47例菌株AmpC酶和ESBLs均不产生，占52．27％。结论该地区临床分离的阴沟肠杆菌存在普遍耐药，将近一半的耐药菌产AmpC酶或/和ESBLs ，尚有52．27％的菌产生其他β-内酰胺酶。     

310株革兰阴性杆菌β—内酰胺酶检测及药敏结果分析

目的 分析６种常见革兰阴性杆菌的β－内酰胺酶类型，分布及耐药状况。方法 酸法检测青霉素酶和头孢菌素酶；头孢他啶、头孢他啶／克拉维酸和头孢噻肟、头孢噻肟／克拉维酸双纸片检测超广谱β－内酰胺酶；Ｋ－Ｂ法做药敏试验。结果 总产酶率４０．７％，阴沟肠杆菌产酶率最高，同时产青霉素酶和头孢菌素酶的菌株占产酶株的３４．９％，６种革兰阴性杆菌不产酶株对三代头孢均较敏感。鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌对用舒     

济南地区革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的现状及药敏检测

目的：了解济南地区耐第三代头泡菌素的革兰阴性杆菌中AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的状况，并对18种抗菌药物作药敏试验，比较产酶菌与非产酶菌对18种抗菌药物的耐药率。为临床治疗产酶菌引起的感染提供理论依据。方法：应用头泡西丁三维试验检测AnpC酶。应用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散确证法检测ES-BLs。以K—B琼脂扩散法做药敏试验。对AmpC阳性进行质粒接合试验。结果：在受检的250株革兰阴性杆菌中，53株(21．2％)产AmpC酶，98株(39．2％)产ESBLs，6株(2．4％)同时高产AmpC ESBLs酶。53株AmpC酶阳性菌中，6株临床分离菌的耐药质粒接合转移成功。产酶菌对头孢吡肟、亚胺培南和阿米卡星耐药率低。在7种喹诺酮类抗菌药物中，左氧氟沙星及加替沙星的耐药率较其他喹诺酮类低。结论：济南地区革兰阴性杆菌耐药性的产生，是由于细菌产生AnpC酶和ES-BLs引起的，以ESBLs为主。AmpC酶既可以染色体介导也可以质粒介导，以染色体介导为主。治疗产2种β内酰胺酶的细菌引起的感染亚胺培南为首选，头孢吡肟、左氧氟沙星、加替沙星和阿米卡星可作为选用药物之一。     

肿瘤患者医院感染病原菌分布及其耐药性研究

目的 通过细菌耐药性检测,调查甘肃省肿瘤医院近两年来临床分离病原菌的分布与耐药现状,为临床合理选用抗菌药物治疗感染性疾病提供参考依据.方法 药敏试验采用纸片扩散法(K-B法),并对肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株、葡萄球菌属甲氧西林耐药株进行分别检测,依据CLSI2009年标准判断检测结果,数据用上海新和实验室管理软件进行分析.结果 2010年1月至2011年12月我院共分离出病原菌2 230铢,其中Gˉ杆菌占40.45%(902/2230),G+球菌占28.88%(644/2230),真菌占30.36%(677/2230);白色假丝酵母菌、大肠埃希菌和凝固酶阴性葡萄球菌分别为真菌、G-杆菌和G+球菌的首位.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs) 菌株分别为49.71(169/340)%和24.23%(47/194),阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株占17.82%(18/101),铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶(MBL)菌株占12.0%(6/50);甲氧西林耐药株分别占金黄色葡萄球菌(SAU)和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的26.28(36/137)%和66.52%(155/233),未发现万古霉素MRSA和MRCNS耐药株;万古霉素、碳青霉烯类药物仍然分别是G+球菌和肠杆菌科细菌最敏感的药物.结论 本院肿瘤患者医院感染以白色假丝酵母菌位居第一,对抗真菌药物敏感率较高;细菌耐药性以产ESBLs酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌、产AmpC酶阴沟肠杆菌、产金属β-内酰胺酶(MBL)铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)比较严重,其他细菌也分别存在不同程度的耐药情况,临床微生物实验室应继续加强耐药性监测调查,为临床合理选用抗菌药物提供依据.     

165株肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶状况及耐药性分析

目的了解江都地区肠杆菌科细菌产β-内酰胺酶的类型及耐药状况,并比较不同产酶茵对常规抗菌药物的耐药率。方法利用琼脂纸片扩散（K—B）法按美国国家临床实验室标准委员会（CLSI）规定检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,用头孢西丁敏感试验筛查AmpC酶并做三维确证试验。结果在165株肠杆菌科细菌中,41株产ESBLs（24．9％）,22株产AmpC酶（13．3％）,8株同时产ESBLs和AmpC酶（4．9％）。不同产酶菌对13种抗菌药物耐药率明显不同,亚胺培南耐药率最低,哌拉西林／他唑巴坦、头孢吡肟次之。结论治疗产ESBLs和（或）AmpC酶的肠杆菌科细菌感染,亚胺培南等碳青霉烯类药物为首选,哌拉西林／他唑巴坦、头孢吡肟、头孢哌酮／舒巴坦及阿米卡星为备选药物。     

湖北省21所医院产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科流行率及耐药性变迁

[目的]调查临床分离的产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科流行率及耐药性变化趋势。[方法]对湖北省21所医院2005年—2009年分离的肠杆菌科细菌资料进行分析,统计其中产超广谱β-内酰胺酶细菌分离率及耐药性变化,使用K-B法进行药敏试验,纸片扩散表型确证法进行检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测。[结果]临床分离的肠杆菌科细菌22 069株中共分离出产ESBLs菌株10036株,产ESBLs肠杆菌科细菌分离率从2005年的30.06%增加到2009年的57.17%,检出率上升明显;产ESBLs肠杆菌科主要为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,分别占产ESBLs肠杆菌科56.27%和27.67%;菌株检出来源主要为尿液和痰标本;除碳青酶烯类抗菌药物外,产ESBLs菌对其他类抗菌药物均不同程度耐药且耐药性上升趋势明显。[结论]产ESBLs细菌检出率及耐药率近年大幅上升,应高度重视ESBLs检测,控制其传播和流行。     

产酶的革兰阴性杆菌对抗生素的耐药性分析

目的：探讨G^-杆菌的产酶情况与耐药模式,并比较产酶菌与非产酶菌对9种抗生素的耐药率。方法：应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用美国国家临床实验室标准委员会（NCCLS）表型筛选和确认试验检测超广谱酶β内酰胺酶（ESBLs）菌株,以K-B琼脂扩散法做药敏试验。结果：在149株G^-杆菌中,16株（10.7%）产AmpC酶,32株（21.1%）产ESBLs,2株（2.0%）同时产AmpC酶和ESBLs。产酶株对亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率低。结论：产AmpC酶和产ESBLs的G^-杆菌为多重耐药菌株,治疗产2种β内酰胺酶细菌引起的感染亚胺培南为首选,头孢吡肟和阿米卡星可作为选用药物之一。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的明确阴沟肠杆菌产头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,分析细菌产酶与药物耐药间的关系,指导临床合理用药。方法非重复阴沟肠杆菌共174株采用Microscan walkaway-40SI全自动细菌鉴定与药敏分析仪进行细菌鉴定及药敏试验;采用多底物协同-拮抗法(MSSAT)检测ESBLs和AmpC酶。结果 174株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶92株(52.87%),其中高诱导型25株,部分去阻遏型33株,完全去阻遏型22株;同时产AmpC酶和ESBLs 54株(31.03%);单产ESBLs 1株(0.57%);AmpC酶和ESBLs均不产有27株(15.52%);阴沟肠杆菌产酶株的耐药率明显高于不产酶株的耐药率(P0.05),同时产AmpC酶和ESBLs菌株的耐药率高于单产AmpC酶株的耐药率(P0.05);产AmpC酶和ESBLs菌株对头孢曲松、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率均高于92.0%,对氨曲南耐药率高达88.9%,对阿米卡星耐药率较低(14.8%),对亚胺培南耐药率为0%。结论阴沟肠杆菌以产AmpC酶为主,单产ESBLs菌株少,同时产AmpC酶和ESBLs的菌株对三代头孢菌素、单环类、青霉素类具有高度耐药性,对碳青霉烯类药物敏感;碳青霉烯类抗菌药物依然是治疗多重耐药阴沟肠杆菌感染的首选。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的了解我院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌对临床常用抗生素的耐药情况，为临床治疗和控制ESBLs菌感染提供依据。方法从2003．1-2005．3我院住院部各科室患者送检的标本中分离出肺炎克雷伯菌和太肠埃希氏菌共229份（同一患者同一菌株只入选一次），其中肺炎克雷伯菌59例，大肠杆菌170例，采用Microscan-walkaway96全自动微生物分析仪NC21板进行细菌鉴定及12种抗菌药物的药敏测定，抑酶剂增强纸片法进行ESBL检测。结果产ESBLs菌56株，非产ESBLs菌173株，总检出率为28．14％（56／229），其中产ESBLs肺炎克雷伯杆菌12株，检出率为20．34％（12／59），产ESBLs大肠杆菌44株，检出率为25．88％（44／170）。产ESBLs菌与非产ESBLs菌对亚胺培南100％敏感。除亚胺培南、哌拉西林／他巴唑坦、阿米卡星外，产ESBLs菌对其他9种抗菌药物的耐药率均高于非产ESBL菌，其中，对阿莫西林、氨曲南、头孢曲松、头孢他啶均100％耐药。产ESBLs菌对喹诺酮类抗生素环丙沙星的耐药率为69．6％，作为产ESBL菌感染用药应慎重考虑。结论产ESBLs菌对常用抗生素耐药率较高．碳烯青霉素类抗生素亚胺培南是治疗产ESBL细菌感染的首选药物。     

228例尿路感染大肠埃希菌的耐药性分析

目的了解尿路感染患者尿液中大肠埃希菌的耐药性及产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）情况,指导临床合理用药。方法应用Microscan Autoscan-4微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验,并用纸片扩散法表型确证试验检测ESBLs。结果大肠埃希菌产ESBLs检出率为39．0％;对亚胺培南的耐药率为0;产酶菌株对抗菌药物的耐药率大部分高于不产酶菌株。结论大肠埃希菌产ESBLs株与非产ESBLS株对抗菌药物的耐药程度不一致,ESBLs的检测对于指导临床治疗非常重要。临床医生应根据药敏结果选择敏感性抗菌药物进行治疗。     

SARS患者细菌感染与药敏分析

[目的]探讨SARS病人细菌感染及药敏情况。[方法]对从SARS病人血、咽痰分泌物、尿、便等标本中分离出的菌株进行细菌鉴定及药敏检测。[结果]共检测出169株细菌。革兰阳性球菌74株，其中血浆凝固酶阴性的葡萄球菌47株，肠球菌25株，链球菌2株；革兰阴性杆菌58株，其中肠杆菌科17株，非发酵菌属41株；分离出1株流感嗜血杆菌；真菌36株。47株血浆凝固酶阴性葡萄菌中43株为耐甲氧西林革兰阴性葡萄球菌(MRS)，药物敏感率分别为70．2％(四环素)，91．5％(利福平)，100％(万古)，对所有的头孢类，β-内酰类、喹诺酮类、大环内酯类都耐药。25株肠球菌对万古敏感率为100％，60％(利福平和毒霉素)，56％(氨苄青霉素)，20％(四环素)，其它抗菌药物耐药。17株肠杆菌科的细菌抗菌药物敏感率较高，100％(丁胺卡那)，82．4％(头胞西丁)，复达欣、头孢唑肟、氧哌嗪青霉紊都在70％以上，在4株大肠埃希菌、6株肺炎克雷伯菌和2株产酸克雷伯菌中只有1株大肠埃希菌产超光谱β-内酰胺酶；41株非肠杆菌科的细菌的抗菌药物敏感率不到40％。36株真菌的药物敏感率都比较高。[结论]SARS病人易引起继发感染，并且有些细菌的耐药性非常高。     

517株革兰阴性杆菌分布及耐药性分析

目的了解临床常见革兰阴性杆菌分离及分布情况和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的耐药特点,指导临床合理用药。方法使用半自动微生物分析仪和药敏卡进行药敏及ESBLs检测。结果在517株革兰阴性杆菌中分离出大肠埃希菌128株,其中产ESBLs的大肠埃希菌28株,铜绿假单胞菌105株,不动杆菌属92株,肠杆菌属92株,肺炎克雷伯菌69株,其中产ESBLs肺炎克雷伯菌10株,枸橼酸杆菌属17株,摩氏摩根菌14株。大肠埃希菌引起再发性尿路感染首选亚胺培南,对肠杆菌科除阴沟肠杆菌和产气肠杆菌应首选第3代头孢菌素。铜绿假单胞菌作用较强的抗菌药物依次为亚胺培南、庆大霉素、头孢他啶、妥布霉素。在临床用药中应高度重视细菌多重耐药性的问题。结论大肠埃希菌引起再发性尿路感染首选亚胺培南。对非产ESBLs株除阴沟肠杆菌和产气肠杆菌应首选第3代头孢。对多重耐药菌株铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌应根据药敏试验结果合理选用抗菌药物。对产ESBLs菌株的治疗,以亚胺培南为最佳。     

本地区常见革兰阴性杆菌种类及其耐药性分析

目的：探讨、总结本地区细菌苗种分布及其耐药现状。收集894株革兰阴性杆菌，分析其菌种分布、耐药性。方法：细菌分离、培养按常规方法。菌种鉴定采用MicroScanWalkAWay-40、Vitek-32全自动微生物分析仪，药敏实验采用微量液体稀释法，超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测采用纸片确证试验，高产AmpC β-内酰胺酶检测采用Thomson推荐的液体稀释法。结果：在894株革兰阴性杆菌中，分离出大肠埃希菌340株、铜绿假单胞菌152株、肺炎和产酸克雷伯菌101株、不动杆菌66株。超广谱β-内酰胺酶检出率：大肠埃希菌28．3％、克雷伯菌39．6％；高产AmpCβ-内酰胺酶检出率：铜绿假单胞菌为45．7％、变形杆菌为13．1％，枸橼酸杆菌为72．4％、沙雷菌为27．3％、肠杆菌屑为49％。在革兰阴性杆菌中。亚胺培南、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦药物敏感性较高。结论：本地区革兰阴性杆菌菌种分布以大肠埃希占首位。超广谱-内酰胺酶检测结果分别是：大肠埃希菌为28．3％，克雷伯菌为39．6％；高产AmpCpβ-内酰胺酶检出率分别是；铜绿假单胞菌为45．5％、变形杆菌为13．1％、枸橼酸杆菌为22．4％、沙雷菌为27．3％、肠杆菌属为49％。在革兰阴性杆菌中，亚胺培南、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦可以作为首选药物。     

阴沟肠杆菌超广谱β—内酰胺酶、诱导酶的检出与耐药相关性的分析

目的：了解阴沟肠杆菌超广谱β－内酰胺酶和诱导酶的产生和分布情况。并分析产酶特性和耐药表型的相关性。方法：用纸片扩散确证法和相邻纸片法对104株阴沟肠杆菌进行超广谱β－内酰胺酶及诱导酶的检测，用VITEK全自动药敏分析系统和K－B琼脂扩散法检测其对20种抗生素的耐药性。结果：104例阴沟肠杆菌中，检出超广谱β－内酰胺酶阳性株77株，占74％，诱导酶阳性株26株，占25％，13株两种酶同时阳性。超广谱β－内酰胺酶阳性株主要集中在几个病区，诱导酶阳性株则无此倾向，104株菌对多种怀素高度耐药，产超广谱β－内酰胺酶株的耐药率明显高于非产酶株，产诱导酶株的耐药率反而低于非产酶株。结论：阴沟肠杆菌产酶情况和耐药性均十分严重。多重耐药的主要原因是由于菌株产生超广谱β－内酰胺酶，产酶株对三代头孢的体外敏感试验不能正确反映临床的治疗效果。实验室应加强阴肠杆菌产酶情况的检测，治疗产酶阴沟肠杆菌引起的感染，首选亚胺培南，其次为舒普深，任何情况下应避免使用三代头孢。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的药敏情况与耐药机制

目的：探讨44株耐亚胺培南铜绿假单胞菌的药敏情况和产金属β-内酰胺酶的类型。方法：采用K-B法测定抗菌药物对细菌的体外抗菌活性，双纸片协同试验进行金属β-内酰胺酶筛选，PCR法进行金属β-内酰胺酶耐药基因IMP和IMP的检测。结果：阿米卡星敏感性最高为27．3％，其次为环丙沙星（20．5％）和头孢吡肟（15．9%）；44株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中，扩增出IMP型阳性株4株，未检测到VIM型金属β-内酰胺酶基因。结论：对耐亚胺培南铜绿假单胞菌引起的感染，阿米卡星、环丙沙星和头孢吡肟可以考虑使用。北京天坛医院耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药机制中，产IMP型金属β-内酰胺酶起着重要作用。     

重症监护病房产ESBLs肠杆菌科细菌医院感染与耐药分析

目的:了解重症监护病房产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的医院感染和耐药现状。方法:对重症监护病房2001年6月至2004年6月临床标本中分离的肠杆菌科细菌的产超广谱β内酰胺酶株的药敏试验进行回顾性分析。结果:117株肠杆菌科细菌检出产ESBLs菌共54株,产酶率为46.1%,产酶株分别为大肠埃希菌(14株),肺炎克雷伯菌(20株),阴沟肠杆菌(10株),产气肠杆菌(4株),产酸克雷伯菌(3株),普通变形杆菌(2株)和粘质沙雷菌(1株)。亚胺培南和阿米卡星对产ESBLs的肠杆菌科细菌有较好的活性。产ESBLs菌对18种抗菌药物的耐药率均显著高于非产ESBLs菌。结论:重症监护病房肠杆菌科细菌产ESBLs的阳性率高,应动态监测其耐药性变迁,防止产ESBLs肠杆菌科细菌的局部流行。