肺癌患者外周血癌胚抗原、细胞角蛋白19mRNA水平与肿瘤分期、近期疗效及预后的关系

目的探讨肺癌患者治疗前后外周血癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋向19（CKl9）mRNA的表达水平．及其与肿瘤分期、近期疗效、监测预后的关系。方法应用Taq Man定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测78例肺癌患者（鳞癌28例、腺癌40例、小细胞肺癌9例、大细胞肺癌1例）治疗前后、30例肺部良性疾病患者及30例健康对照者外周血癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19（CK19）mRNA的水平；同时采用酶联免疫吸附测定法检测肺癌患者治疗前血清CEA和细胞角蛋白19片段（CYFRA21—1）水平。患者随访2年。结果肺癌患者外周血CEA、CK19mRNA阳性率分别为69．2％（54／78）、62．8％（49／78）．显著高于肺部良性疾病患者及健康对照者，3者差异有统计学意义（χ^2值分别为37．65、41．54；27．41、30．84，p〈0．01）。鳞癌组CK19mRNA阳性率最高，腺癌组CEAmRNA阳性率晟高。不同分期患者问CEA、CK19mRNA阳性率差异无统计学意义（χ^2值分别为3．63、3．81）。肺癌患者外周血CEA、CK19mRNA的阳性率显著高于血清CEA、CYFRA21—1水平；手术后CEA、CK19mRNA阳性率显著下降；化疗后阳性率下降不明显。化疗前CEAmRNA阳性患者的中位生存期明湿低于阴性患者（分别为8．5月、11．7月）、化疗前CK19mRNA阳性患者的中位生存期明显低于阴性患者（分别为8,9月、12．3月）：术前CEAmR—NA阳性患者肿瘤复发或转移率（29．4％）高于术前阴性患者（7．7％），术前CK19mRNA阳性患者肿瘤复发或转移率（18．8％）高于术前阴性患者（7．1％）。结论CEA、CK19mRNA对于检测肺癌患者肿瘤细胞微转移有一定的临床意义．有助于评估手术疗效及预测预后；CEA、CK19mRNA表达水平与肿瘤分期无关；CEA、CK19基因的检测敏感性优于蛋白水平的检测．可有助于肺癌的辅助诊断。     

CK19与CEA在非小细胞肺癌外周血微转移中的对比研究

目的检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血细胞角蛋白（CK19）及癌胚抗原（CEA）的表达,探讨对检测NSCLC微转移的可行性。方法应用RT—PCR技术检测48例NSCLC患者、15例肺良性疾病（BLD）患者和10例健康人外周血CK19及CEA mRNA的表达。结果NSCLC患者外周血中CK19及CEA mRNA的阳性表达率分别为68．75％、58．33％,在BLD组中表达率分别为13．33％、6．67％,而对照组外周血中均无表达,NSCLC组CK19及CEA表达均高于BLD组及对照组（P〈0．05）。外周血CK19及CEA的表达与临床分期及淋巴结转移密切相关,与病理类型及分化程度无关。结论CK19与CEA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物,联合检测有助于提高检测的阳性率。     

实时定量RT-PCR检测大肠癌病人外周血CK-20mRNA、CEA mRNA的研究

目的 研究大肠癌病人外周血CK20mRNA、CEA mRNA的表达，并探讨其临床意义。方法采用实时定量RT-PCR方法，检测大肠癌病人术前外周血CK20mRNA、CEA mRNA，并与临床分期进行相关分析。结果47例大肠癌病人外周血中CK20mRNA的阳性率为36．17％，CEAmRNA的阳性率为40．43％。统计结果显示CK20mRNA、CEA mRNA的拷贝数与Dukes分期无相关性(P分别为0．532及0．964)。结论单次采血定量CK20mRNA、CEAmRNA尚不能作为术前临床分期的一个参考指标，不同病人术前的CK20mRNA、CEAmRNA值不具备可比性。     

动脉化疗对进展期胃癌CEA mRNA及CK19 mRNA表达的影响

目的:探讨外周血细胞CEAmRNA,CK19mRNA水平与胃癌EAP方案介入化疗近期疗效相关意义.方法:选择30例中晚期胃癌患者(Ⅱ期3例,Ⅲ期15例,Ⅳ期12例),于EAP(VP-16 ADM CBP)介入化疗前2-3d及化疗后2-3wk取外周血,全自动发光免疫法检测血清CEA及TPA,逆转录聚合酶链反应检测CEA及CK19mRNA.用超声内镜(EUS)结合CT测量肿块对化疗的有效率(CR PR)情况.结果:介入化疗前后外周血CEA及CK19mRNA均有显著差异[CEA:60.0%(18/30)vs33.3%(10/30),χ2=4.29,P<0.05;CK19:73.3%(22/30)vs46.7%(14/30),χ2=4.34,P<0.05].CEA及CK19mRNA联合检测阳性率在介入化疗前后也有显著差异[90.0%(27/30)vs50.0%(15/30),χ2=8.52,P<0.05].影像学诊断显示,外周血CEAmRNA,CK19mRNA联合检测阳性患者治疗前后分别为16例及5例(χ2=8.86,P<0.05).结论:外周血细胞CEAmRNA、CK19mRNA水平在EAP方案介入化疗后阳性率显著下降,CEAmRNA、CK19mRNA联合检测的敏感性高于血清CEA、TPA联合检测,可反应EAP方案介入化疗后肿瘤体积的变化情况.     

结直肠癌患者外周血中癌胚抗原-mRNA的表达及其临床意义

目的：肿瘤复发转移仍是威胁患者生存的重要原因，及早检出外周血中的循环肿瘤细胞并进行有效的综合治疗有着重要的临床意义。检测结“直肠癌患者外周血中癌胚抗原（CEA）－mRNA的表达及血清CEA蛋白的含量，并分析其临床价值。方法：35例有明确临床肿瘤病灶存在的结直肠癌患者、9例根治术后患者和37例健康志愿者，分别以逆转录PCR（RT－PCR）检测其外周血中CEA－mRNA的表达，时间分辨荧光方法测定其血清CEA蛋白的含量。结果：35例结直肠癌患者CEA－mRNA阳性率为45．7％，而健康对照组阳性率为2．7％，两者比较差异有显著性（P＜0．05）；9例术后患者CEA－mRNA仅2例阳性；CEA－mRNA阳性表达率与肿瘤分期相关，与肿瘤细胞分化程度并不相关。CEA－mRNA阳性组血清CEA蛋白阳性率（72．2％）显著高于CEA－mRNA阴性组（42．3％）。结论：外周血细胞中CEA－mRNA的表达与肿瘤分期相关，有可能作为结直肠癌微转换的一个监测指标。长期的随访有助于评价其临床价值。     

检测老年胃癌患者腹腔灌洗液CK19、CEA mRNA的临床意义

目的 观察细巢式逆RT-PCR检测老年胃癌患者腹腔冲洗液瘤细胞胞角蛋白19(CK19)、癌胚抗原(CEA)的临床价值.方法 收集45例进展期老年胃癌和8例胃良性病变患者腹腔冲洗液200 ml,其中100 ml行RT-PCR检测CK19、CEA mRNA,另100 ml用于HE染色细胞学检查,胃癌细胞SGC7901为阳性对照.结果 45例老年胃癌病人腹腔冲洗液中CK19 mRNA的阳性表达率为55.6%(25/45);CEA mRNA的阳性表达率为51.1%(23/45);CK19、CEA mRNA的联合检测阳性率为62.2%(28/45).细胞病理学检查45例胃癌病人有8例腹腔冲洗液中发现肿瘤细胞,阳性率为17.8%(8/45),且此8例CK19、CEA mRNA检测结果均为阳性.CK19、CEA mRNA阳性率与肿瘤胃壁浆膜受侵、淋巴结转移和胃癌分期明显相关(P＜0.05).结论 腹腔冲洗液中CK19、CEA mRNA检测胃癌细胞敏感性高.初步临床观察显示此方法对于早期诊断胃癌患者腹腔种植有一定价值.     

食管癌患者外周血中CK19mRNA、CYFRA21—1、TPS联合检测的临床意义

目的 评价食管癌患者外周血中微转移基因标记物细胞角蛋白19(CK19)mRNA和细胞角蛋白片段21-1(CYFRA21-1)、组织多肽特异性抗原(TPS)联合测定的临床价值. 方法 取48例食管癌患者术前外周血标本,应用巢式逆转录聚合酶链反应法(nested-PCR)检测外周血单个核细胞CK19 mRNA的表达,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定患者血清CYFRA21-1和TPS水平. 结果 食管癌患者外周血中CK19 mRNA和血清CYFRA21-1和TPS的阳性检出率分别为 52.1% 、83.3%和66.7%.联合检测CK19 mRNA 、CYFRA21-1和 TPS在食管癌患者中的阳性表达,发现其与患者肿瘤细胞分化程度、浸润深度、临床分期及有无淋巴结转移和远处转移等有相关性(P＜0.05或P＜0.01). 结论 在食管癌患者的随访中开展外周血中CK19 mRNA和血清CYFRA21-1和TPS的联合检测可提高食管癌微转移的检出率,以及时监控患者的病情.     

CEA mRNA在乳腺癌患者外周血中的表达及临床意义

目的以套式RT—PCR方法检测癌胚抗原（CEA）mRNA在乳腺癌患者外周血中的表达,并探讨其在乳腺癌诊断与治疗中的意义。方法收集乳腺癌患者52例（乳腺癌组）、乳腺增生性病变患者40例（增生组）、健康查体者20例（对照组）,采集外周血样本。分别用套式RT—PCR法检测其外周血中CEAmRNA的表达。结果乳腺癌组外周血CEAmRNA阳性率为40．4％,增生组及对照组分别为5．0%和0,两两比较均有显著差异（P均〈0．01）;乳腺癌组TNMⅢ期、Ⅳ期患者CEAmRNA阳性表达率明显高于Ⅰ期、Ⅱ期患者,外周血CEAmRNA阳性表达与淋巴结转移密切相关。结论外周血CEAmRNA表达可作为乳腺癌转移的一个辅助监测指标。     

结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的检测及意义

采用RT-PCR技术检测60例结直肠癌患者和10例健康志愿者骨髓、门静脉和外周血中的细胞角蛋白（CK）20 mRNA。10例志愿者三种标本中均未检测到CK20 mRNA。60例结直肠癌患者骨髓、门静脉血CK20 mRN阳性率分别为78.3%（47/60）、75.0%（45/60）;单次外周血采样CK20 mRNA阳性表达率为45.0%（27/60） 44.8%,两次采样总阳性表达率为70.0%（42/60）;外周血总阳性率略低于骨髓和门静脉血（P〉0.05）;外周血重复采样阳性率高于单次采样的阳性率（P〈0.05）;外周血CK20 mRNA阳性表达者1a内局部或远处转移率明显高于阴性表达者（P〈0.05）。认为结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的检测与骨髓、门静脉血有相似的敏感性和特异性,可以作为结、直肠癌微转移的判断指标并指导其治疗和预后判断。     

CYFRA21—1、NSE、CA125、CEA联合检测在肺癌诊断中的应用

目的评价外周血细胞角蛋白19片段（CYFRA 21-1）、神经特异性烯醇化酶（NSE）、糖类抗原（CA125）和癌胚抗原（CEA）联合检测对肺癌的临床诊断价值。方法采用化学免疫发光法测定100例肺癌（肺癌组）、50例良性肺部疾病（良性组）患者和50例健康人（对照组）外周血中的CYFRA21—1、NSE、CA125、CEA。结果肺癌组CYFRA21—1、NSE、CA125、CEA阳性率分别为57％、28％、54％、58％,良性组分别为8％、10％、12％、18％,对照组分别为6％、8％、6％、8％。4项联合检测灵敏性、特异性和准确性分别为72．0％、90.0％、78．0％。结论血清CY—FRA21—1、NSE、CA125、CEA联合检测有利于肺癌的临床诊断。     

血清肿瘤标志物CEA、CA125、CYFRA21-1在支气管肺癌诊断、病理类型及TNM分期中的价值分析

目的探讨癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA125)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)在肺癌诊断、病理类型及TNM分期中的应用价值。 方法收集2017年1月至2018年4月入住唐都医院的288例患者的临床资料,采用电化学免疫荧光发光法检测血清肿瘤标志物的浓度,分析CEA、CA125、CYFRA21-1与肺癌诊断、病理类型及TNM分期的关系。 结果肺癌组CEA、CA125、CYFRA21-1血清表达水平高于肺部良性病变组,P<0.05。单个肿瘤标志物在区分肺癌不同病理类型时,CYFRA21-1诊断价值最高。在肺癌不同TNM分期中,CEA、CA125阳性率随着肿瘤分期逐渐升高,各分期之间阳性率存在统计学意义,P<0.05。CYFRA21-1其阳性率随分期变化逐渐升高,但各组间无统计学意义,P>0.05。 结论CEA、CA125、CYFRA21-1在肺癌诊断价值中有意义,在不同病理类型中CYFRA21-1诊断价值较大,CEA、CA125、CYFRA21-1在肺癌TNM分期中诊断价值不同,利用血清肿瘤标志物进行TNM分期,可为病理TNM分期提供参考。     

肿瘤标志物在肺癌诊断、病理分型和临床分期中的价值

目的研究血清肿瘤相关抗原125（CA125）、199（CA199）、癌胚抗原（CEA）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21—1）在肺癌诊断、病理分型和临床分期中的价值。方法选取郑州大学第一附属医院2011年6月至2012年9月入院患者309例血清标本,采用电化学免疫荧光发光法检测血清肿瘤标志物的浓度。结果肺癌患者5种血清肿瘤标志物水平均高于肺部良性病变组。单项检测,腺癌、鳞癌、小细胞肺癌（SCCL）敏感度最高者分别为CYFRA21—1和CEA、CYFRA21—1、NSE。联合检测CA125＋CEA＋NSE＋CYFRA21—1敏感度达87．26％。CA125、CEA、CYFRA21—1在肺癌不同TNM分期的表达阳性率及表达高度不同。结论血清5种肿瘤标志物诊断肺癌价值较高,其中CYFRA21—1诊断价值最大,联合检测可以提高肺癌诊断敏感度。CA125、CEA、CYFRA21—1在肺癌临床分期中价值较大。     

Diagnostic utility of serum and pleural fluid carcinoembryonic antigen, neuron-specific enolase, and cytokeratin 19 fragments in patients with effusions from primary lung cancer

STUDY OBJECTIVES: To assess the diagnostic values of carcinoembryonic antigen (CEA), neuron-specific enolase (NSE), and cytokeratin 19 fragments (CYFRA 21-1) as markers of pleurisy in primary lung cancer. DESIGN: Prospective case-control study. SETTING: A tertiary university hospital. PATIENTS: Thirty-four patients with lung cancer and 16 patients with tuberculous pleurisy. MEASUREMENTS AND RESULTS: Levels of CEA, NSE, and CYFRA 21-1 were measured by immunoassay in the serum and pleural fluid of patients with lung cancer and of patients with tuberculous pleurisy. Patients with lung cancer were found to have significantly higher serum and pleural fluid levels of CEA and CYFRA 21-1 than patients with tuberculous pleurisy. Using cutoff values of 5 ng/mL, 20 ng/mL, and 3.3 ng/mL for serum CEA, NSE, and CYFRA 21-1, respectively, the sensitivities and specificities of these tumor markers were as follows for differentiating malignant effusion from benign: CEA, 68% and 93%; NSE, 34% and 93%; and CYFRA 21-1, 45% and 100%. Using cutoff values of 5 ng/mL, 20 ng/mL, and 45 ng/mL for pleural fluid, the sensitivities and specificities were as follows: CEA, 82% and 94%; NSE, 36% and 94%; and CYFRA 21-1, 61% and 81%. A combination of pleural fluid CEA and NSE increased sensitivity and specificity. CONCLUSIONS: In the diagnosis of malignant effusion associated with lung cancer, the determinations of CEA and NSE in pleural fluid could enhance diagnostic yield better than those of all three tumor markers.     

Detection of circulating gastric cancer cells in peripheral blood using real time quantitative RT-PCR

BACKGROUND/AIMS: Detection of occult cancer cells in peripheral blood or bone marrow has recently received a great deal of attention regarding the prediction of postoperative recurrence of the cancer, and for novel strategies of adjuvant therapy. This study addresses the detection of circulating tumor cells in peripheral blood in patients with gastric cancer using Quantitative RT-PCR. METHODOLOGY: Common mRNA targets for RT-PCR for detection of small numbers of cancer cells in gastric cancer are CK18, CK19, CK20, and CEA. Ten milliliter of peripheral venous blood was taken from 14 healthy Japanese volunteers and 101 patients with gastric cancer. Samples were analyzed using real-time TaqMan technology and a Model 7700-sequence system. The group of gastric cancer patients included 69 individuals with curative disease on preoperative diagnosis and 32 individuals with a non-curative operation or recurrence of the disease. RESULTS: The number of CK19 and CK20 mRNA copies was significantly increased in patients with a non-curative operation or recurrence of gastric cancer (CK19; p=0.0087, CK20; p=0.0022) compared with healthy volunteers. Cut-off levels of CK19 or CK20 copy numbers were determined by the maximum value of healthy volunteers. For CK19, there were 61 (88.4%) negative cases and 8 (11.6%) positive cases in 69 individuals with curative gastric cancer. There was a significant difference in tumor stages between CK19 positive and negative patients with curative disease on preoperative diagnosis. For CK20, there were 59 (85.5%) negative cases and 10 (15.5%) positive cases. There was no statistical difference between CK20 positive and negative cases for all clinicopathological factors. On postoperative day 14, there was a significant difference between positive and negative cases regarding tumor size, tumor stage, and lymph node metastasis for CK19, and tumor stage and lymph node metastasis for CK20. Five-year survival rates of patients with CK19 positive or negative cases were 50.0% or 79.0%, respectively (p=0.0347). While, for CK20, 5-year survival rates for positive cases was 51.9%, and for negative cases 78.9% (p=0.0490). CONCLUSIONS: Micrometastases of gastric cancer can be detected in circulating peripheral blood using quantitative real-time RT-PCR. CK19 is a better marker than CK18, CK20 and CEA, and could be clinically useful to estimate prognosis or to make a postoperative strategy of adjuvant treatment.     

肿瘤标志物联合检测在肺癌早期诊断中的应用

目的：探讨外周血肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角质蛋白19片段（CYFRA21-1）、糖链抗原125（CA125）、糖链抗原19-9（CA19-9）、糖链抗原15-3（CA15-3）联合检测在肺癌早期诊断中的应用价值。方法：采用Elecsys2010电化学发光仪检测80例肺癌患者,55例肺部良性疾病患者,40例健康人血清中CEA、NSE、CYFRA21-1、CA125、CA19-9、CA153等肿瘤标志物的水平。结果：肺癌患者中CEA、NSE、CYFRA21-1、CA125、CA19-9、CA153等6种标志物显著高于正常对照组及肺部良性疾病组,差异有统计学意义（P〈0.01）。6项标志物不同组合对不同分期肺癌检出的敏感性均高于单项标志物。其中第6种CY-FRA21-1＋CA125＋NSE和第7种CYFRA21-1＋CA125＋NSE＋CEA组合的敏感性较其他组合均高,特别是对早期患者检出率明显提高,但第7种方式成本较高且6、7两种方式检出率差异无统计学意义。结论：CYFRA21-1＋CA125＋NSE联合检测能提高肺癌的早期诊断率。     

巢式RT-PCR技术检测肺癌患者外周血及淋巴结中微量转移癌细胞

目的　建立检测肺癌患者外周血及淋巴结中微转移癌细胞的敏感分子检测方法 ,并探讨其临床应用价值。方法　采用巢式反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)技术特异引物扩增细胞角蛋白 19(CK19) m RNA,检测76例肺癌患者外周血及淋巴结中 CK19m RNA的表达情况。结果　 76例肺癌患者中 39例外周血 CK19m RNA阳性 ,阳性率为 5 1.3% (39/ 76 ) ,2 7例肺良性病变中仅 1例阳性 ,阳性率 3.7% ,15例健康对照者均为阴性。全部肺癌患者 15 7枚淋巴结中 CK19m RNA阳性率 38.9% (6 1/ 15 7) ,常规病理方法检测淋巴结阳性率 14 .6 % (2 3/15 7) ,两者相比 ,P<0 .0 5 ;HE染色阴性的 134枚淋巴结中 ,经巢式 RT- PCR技术检测证实存在癌转移的阳性率为 2 8.3% (38/ 134) ,两者相比 ,P<0 .0 5。结论　巢式 RT- PCR技术是一种特异性和敏感性均较高的微量癌细胞转移检测方法 ,可能有助于肺癌微转移的早期诊断