白血病细胞TGFβ1及其受体基因表达与白血病患者血清TGFβ1测定及其意义

目的:研究转化生长因子β_1(TGFβ_1)对白血病细胞增殖抑制作用的机制及急性白血病患者血清TGFβ_1变化及意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应方法检测白血病细胞的细胞因子及其受体基因表达;应用白血病细胞集落试验测定TGFβ_1对HL-60、DAMI、K562细胞增殖的作用;应用ELISA方法测定33例急性白血病患者血清TGFβ_1水平。结果:TGFβ_1对HL-60、K562、DAMI细胞增殖具有明显的抑制作用;白血病细胞系(HEL、HL-60、K562、U937、DAMI、MEG-01、HUT78)及CA均表达TGFβ_1及其受体mRNA。外源性TGFβ_1抑制DAMI细胞IL-6、IL-6R、GM-CSFR及IL-3的基因表达,上调DAMI细胞本身TGFβ_1表达,并诱导DAMI细胞凋亡。白血病患者血清TGFβ_1水平明显减低;患者达完全缓解时,该水平恢复正常;复发时,该水平又趋减低。结论:TGFβ_1是白血病细胞抑制性自泌因子;其抑制作用与其调控白血病细胞的细胞因子与受体表达有关;血清TGFβ_1水平是监测白血病病情转归的一项有价值指标;TGFβ_1作为负调控因子在白血病发病机制中可能起重要作用。     

转化生长因子β与细胞凋亡

转化生长因子β是一大类对许多细胞与组织都有作用的多功能细胞因子,包括调控细胞分裂周期、早期发育、分化、细胞外基质产生、造血、血管生成、细胞趋化、免疫功能及诱导凋亡.转化生长因子β介导的细胞生长抑制和凋亡的能力已在多种类型细胞中被发现.体外细胞培养和体内实验说明在转化生长因子β诱导细胞凋亡过程中,有多种细胞因子协同参与并有多种效应分子发挥作用.本文主要就转化生长因子β诱导细胞凋亡的机制、效应分子的作用以及与其他细胞因子的协同作用进行综述.     

胃癌患者血清TGF—α和TGF—β的水平变化及临床意义

目的探讨了胃癌患者血清转化生长因子α（TGF-β）和转化生长因子β1（TGF-β1）水平的变化及意义。方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）测定了32例胃癌患者血清中TGF-α和TGF-β1水平的变化,并与12例正常健康人作比较,同时分析TGF—α和TGF-β1。与临床病理的关系。结果胃癌患者血清TGF—α和TGF—β。水平均非常显著地高于正常人（P〈0．01或P〈0．05）,且TGF—α与胃癌的病理分期有关（P〈0．05）。结论胃癌患者血清TGF-α和TGF-β1的高表达与胃癌的发生发展有关。     

TGF-β1、TβRⅡ、c-myc在急性白血病中的表达及其意义

为了探讨转化生长因子β（transforming growth factor—beta，TGF-β）信号转导途径失活与急性白血病的关系，用S—P免疫细胞化学法检测急性白血病患者骨髓单个核细胞中TGF—β1及其Ⅱ型受体（TβRⅡ）和信号下游靶基因蛋白C-myc的表达。结果发现，白血病患者骨髓单个核细胞中TGF—β1的表达水平与正常对照无显著性差异（P〉0．05），TβRⅡ的表达水平明显低于正常对照（P〈0．05），c-myc的表达水平明显高于正常对照（P〈0．05），但以上各指标在急性淋巴细胞白血病与急性非淋巴细胞白血病之间无显著性差异（P〉0．05），TβRⅡ和c-myc表达率有负相关关系（r=-0．474，P〈0．01）。结论：TGF-β信号转导途径失活使细胞逃逸了TGF-β的生长抑制，TGF-β信号转导途径失活的一个重要机制就是通过TGF-βⅡ型受体的下调使c-myc失去抑制而高表达，促进白血病发生。     

大鼠液压冲击脑损伤TGF—β1及其受体TβR ImRNA的表达

目的：研究脑损伤后转化生长因子-β1（TGF-β1）及其I型受体（TβRI）mRNA表达及其时序性变化，为脑损伤的分子病理诊断、法医学鉴定及临床治疗提供依据，进一步研究脑损伤的分子机制。方法：用原位杂交和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术观察大鼠液压冲击脑损伤后TGF-β1及TβRImRNA在伤后不同时间（30分钟，1、3、6、12小时及1、3和7日）的表达情况，以正常大鼠及手术大鼠作为对照。结果：正常及手术对照组大鼠脑组织内有低水平的TGF-β1及TβRImRNA表达；脑损伤后1日，大脑皮质和脑干TGF-β1/TβRImRNA水平显著增加，3日达峰值，并至少维持达1周时间；海马冲击后12小时即显著增加，1-3日达高峰，7日时已开始下降。结论：脑损伤可诱导TGF-β1/TβRI基因表达，提示机体对脑损伤存在自身保护机制，其表达的时序性改变可望用于法医学脑损伤的时间推断。     

肺癌患者血清TGF—β1水平的检测及临床意义

目的探讨肺癌患者血清转化生长因子-β1（TGF-β1）的水平变化和临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测60例肺癌患者及30例健康者血清TGF-β1水平。结果肺癌组血清TGF-β1水平（30．073±13．790）ng／ml明显高于正常对照组（15．787±12．863）ng／ml（P〈0．01）;小细胞肺癌（SCLC）组血清TGF-β1水平（31．671±15．172）ng／ml与非小细胞肺癌（NSCLC）组的（28．766±12．635）ng／ml比较,差异无显著性（P〉0．05）;Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者血清TGF-β1水平均明显高于Ⅰ～Ⅱ期肺癌患者（P〈0．01）。结论肺癌患者血清TGF-β1水平显著高于健康对照组,与肺癌病理类型无关,随TNM分期进展而升高,TGF-β1可能是肺癌的一种血清肿瘤标志物,并可作为病情监测指标。     

白血病患者WT1基因表达及其临床意义观察

目的：观察WT1基因在白血病细胞中的表达及其临床意义，初步探讨WT1基因表达与白血病疗效关系。方法：采用逆转录～聚合酶链法(RT-PCR)检测治疗前47例各类型和白血病患者WT1基因的表达，并观察缓解后患者WT1基因表达的变化，并对33例WT1表达阳性者进行单链构象多态性分析(SSCP)分析。结果：急性白血病37例中30例(81．08％)WT1表达阳性，其中急性髓细胞白血病16／19例(84．21％)阳性，急性淋巴细胞白血病14／18例(77．78％)阳性；慢性粒细胞白血病(CML)急变期3／5例阳性，CML慢性期5例均阴性。WT1表达阳性对治疗缓解率无明显影响。对WT1表达阳性的21例急性白血病治疗后WT1表达动态观察，当获得完全缓解时，WT1表达转阴性；在白血病复发前及复发时，WT1表达转阳性。SSCP分析33例WT1阳性表达者第7～10外显子区PCR产物，未发现泳动异位条带。结论：WT1在急性白血病中表达阳性率较高；慢性粒细胞白血病慢性期未见WT1表达，急变期阳性率增高；WT1表达阳性对治疗完全缓解无明显影响。WT1基因作为泛白血病标志用于白血病微小残留病灶的检测有重要实用价值。     

急性白血病患者WT1基因的表达及其与预后的关系

WT1基因是对遗传性肾胚胎肿瘤( Wilm s tumor)的分子遗传学进行研究时而发现的 ,研究表明 11p13的基因缺失与 Wilms肿瘤相关。1990年 Call等克隆了此相关基因的 c DNA并命名为Wilms瘤基因 1( WT1)〔1〕。WT1基因已被认为在肿瘤的发生中起一定的作用。近年的研究集中于 WT1基因在白血病发病中的意义 ,但其在急性白血病 ( AL)预后方面的作用研究尚不多见。我们就此进行探讨 ,报告如下。1　对象和方法1.1　研究对象 :患者组选择 1999年9月— 2 0 0 2年 7月收治的住院及门诊AL 者 ,79例中男 34例 ,女 45例 ;年龄4～ 6 9岁 ,平均 37.78岁…     

急性B淋巴系白血病细胞CD271表达和血清神经生长因子水平的临床意义

本研究检测惠性B淋巴系白血病( B-ALL)患者血清神经生长因子(NGF)水平及骨髓白血病细胞群表面NGF低亲和性受体CD271的表达,并探讨两者的临床意义.应用酶标记免疫吸附分析法测定B-ALL患者血清NGF水平,应用流式细胞术测定患者骨髓白血病细胞群表面CD271的表达水平.结果表明,病例组患者NGF水平与对照组比较明显升高(t=4.191,p＜0.05),而白血病细胞表面CD271表达与对照组比较明显降低(t=4.898,p＜0.05).25例初治B-ALL患者经CVAD方案化疗1个周期后完全缓解(CR)率为64％( 16/25).未缓解(NR)组患者化疗后NGF水平和CD271表达与对照组比较差异均有统计学意义(t=3.976,p＜0.05和t=5.052,p＜0.05),而CR组化疗后NGF水平和CD271表达与对照组比较差异均无统计学意义(t=1.102,p＞0.05和t=l.150,p＞0.05).CR组和NR组患者化疗前CD271表达比较差异有统计学意义(t=3.889,p＜0.05),但NGF水平比较差异无统计学意义(t =0.476,p＞0.05).CR组和NR组患者化疗后NGF水平及CD271表达比较差异均有统计学意义(t =3.751,p＜0.05和=4.678,p＜0.05).50％ (8/16)例患者在随访过程中复发,复发患者NGF水平和CD271表达分别为( 168.00 +61.66) pg/ml和(52.29±13.00)％,与对照组比较差异均有统计学意义(t=5.284,p＜0.05和t=6.073,p ＜0.05),余8例患者在缓解期NGF水平和CD271表达分别为(81.13 ±25.32) pg/ml和(78.45±7.12)％,与对照组比较差异无统计学意义(t=1.228,p＞0.05和t＝1.144,p＞0.05).B-ALL患者NGF高水平组和低水平组生存时间比较差异无统计学意义(p =0.750),同时CD271高表达组和低表达组生存时间比较差异无统计学意义(p =0.170).结论:B-ALL患者血清NGF水平升高和骨髓白血病细胞CD271表达降低与白血病发生发展有关,这两项指标可能对疗效和预后判断具有一定的参考价值.     

急性白血病患者血清白细胞介素-6白细胞介素-8的变化

目的　探讨血清IL- 6、IL -8水平变化与急性白血病(AL)发生、发展及预后的关系。方法　采用放射免疫法检测5 6例AL患者血清IL- 6、IL- 8水平,2 8例正常健康者血清IL- 6、IL- 8水平。结果　AL患者血清IL- 6、IL -8水平明显增高,完全缓解后,IL- 6、IL -8恢复正常。结论　血清IL- 6、IL- 8的异常升高在急性白血病的发生、发展中可能起一定作用,检测AL患者血清IL- 6、IL- 8水平对判断疗效、估计预后、监测复发有一定意义。     

逆转录-聚合酶链反应银染分析IRF-1基因在白血病中的表达

目的：初步分析白血病细胞中ＩＲＦ－１基因表达水平的变化。方法：采用逆转录－聚合酶链反应，银染分析检测２４例白血病患者和３种白血病细胞系中ＩＲＦ－１基因表达水平。结果：３例白血病患者未检测到ＩＲＦ－１基因表达，５例患者及ＨＬ－６０、ＨＩＭｅｇ细胞系ＩＲＦ－１基因表达明显降低。结论：部分白血病患者的发病机制可能与ＩＲＦ－１基因表达缺失或下降有关；ＩＲＦ－１基因表达水平的变化可能对部分白血病患者的疗效观察及预后有参考价值。     

白血病患者WT1基因的表达及其与预后及多药耐药的关系

目的探讨ＷＴ１基因与白血病的预后、多药耐药性及细胞凋亡之间的关系。方法应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）方法测定６８例白血病患者及２３名正常人的ＷＴ１、ＭＲＰ及ｍｄｒ１基因的表达,同时采用免疫荧光流式细胞术（ＦＣＭ）观察了３２例急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者抗凋亡基因ｂｃｌ２的表达。结果６８例白血病患者中３７例ＷＴ１基因表达阳性,２３名正常人ＷＴ１基因表达阴性。ＷＴ１基因表达阳性患者的完全缓解（ＣＲ）率低于表达阴性者（分别为５９．４６％和８７．１０％,Ｐ＝００１１）。ＷＴ１表达阳性患者的ＭＲＰ阳性率高于ＷＴ１表达阴性者（分别为５８．３３％和３２．２６％,Ｐ＝００３３）。联合ＷＴ１及ｂｃｌ２表达情况将ＡＭＬ患者分为高危、中危、低危三组,其ＣＲ率分别为３３３３％、４７．３７％及１００％,三组间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论ＷＴ１基因的表达与白血病患者的化疗效果及预后密切相关,是影响白血病患者ＣＲ率的重要危险因素之一。ＷＴ１基因及ｂｃｌ２的共同表达情况可作为预测ＡＭＬ患者预后的重要指标     

肿瘤抑制基因P16和UBAP1在慢性粒细胞白血病的表达研究

目的探讨肿瘤抑制基因P16和UBAP1表达水平与慢性粒细胞白血病(CML)病程进展的关系。方法纳入93例CML初诊患者,其中慢性期(CP)76例、加速期(AP)及急变期(BC)17例(急髓变12例、急淋变5例),以22例非恶性血液病患者作为对照组,分别提取外周血单个核细胞总RNA,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测UBAP1和P16的表达情况。结果 PCR产物电泳图及熔解曲线均显示实时荧光定量PCR法扩增P16和UBAP1基因具有较好的特异性。CML-CP组、急髓变组P16mRNA表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);急淋变组,P16基因mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。CML-CP组UBAP1mRNA表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),CML-AP与CML-BC组表达水平降低(P<0.05);急髓变和急淋变组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同CML病程患者具有不同的UBAP1和P16基因表达水平;UBAP1与P16基因表达水平与CML疾病进展存在一定的关系。     

bcl—x和bcl—2基因在急性白血病患者的表达及其临床意义

观察凋亡调控基因ｂｃｌ－ｘ和ｂｃｌ－２在急性白血病患中的表达,探索ＡＬ的病理和化疗反应的分子机制。方法应用半定量逆转录－聚合酶链反应技术检测ｂｃｌ－ｘ和ｂｃｌ－２在３４例ＡＬ患中ｍＲＮＡ水平的表达。结果抑凋亡基因ｂｃｌ－ｘＬ和ｂｃｌ－２在ＡＬ细胞中的表达比在完全缓解和正常对照组骨髓细胞中的表达明显增高（Ｐ〈０．０１）,同时在复发患ＡＬ细胞中的表达水平分别是初治患的１．８倍和１．９倍（Ｐ〈０     

急性髓系白血病相关逆转录病毒基因表达的研究

目的 探索急性髓系白血病（AML）逆转录病毒病因的可能性。方法 运用已获得的逆转录病毒6#11克隆为探针和引物,通过Northern blot和RT-PCR技术检测AML患者白血病细胞中相关逆转录病毒基因的表达情况。结果 以6#11为探针,Northern blot杂交的阳性条带在9.4kb和4.6kb左右,19例AML患者白血病细胞中18例出现了阳性条带;RT-PCR设计的引物扩增片段长度为790bp,14例AML患者白血病细胞中阳性表达11例。结论 AML患者白血病细胞中相关逆转录病毒基因呈特异性表达。     

Autocrine stimulation of interleukin 1 beta in acute myelogenous leukemia cells

A significant increase in CD25 antigen-positive cells by IL-1 was observed in cells of a patient with M7 acute myelogenous leukemia. Basal proliferation and expression of CD25 antigen by the M7 leukemic cells were inhibited by addition of anti-IL-1 beta antibody in a dose-dependent manner, but not by rabbit anti-IL-1 alpha antibody. Culture supernatants of these leukemic cells contained IL-1 activity, which was specifically inhibited by addition of anti-IL-1 beta antibody, and Northern blot analysis detected intracellular IL-1 beta mRNA. These results indicated that autocrine secretion of IL-1 beta was involved in proliferation of some myelogenous leukemic cells.