诱生型一氧化氮合成酶在庆大霉素所致肥胖症鼠耳蜗损伤中的表达

目的 检测诱生型一氧化氮合成酶在庆大霉素所致豚鼠耳蜗损伤中的表达。方法 实验组豚鼠皮下注射庆大霉素造成耳蜗损伤，对照组豚鼠皮下注射等量生理盐水。用免疫组织化学的方法检测诱生型一氧化氮合成酶在耳蜗中的表达。结果 诱生型一氧化氮合成酶在实验组耳蜗的表达呈阳性，在对照组耳蜗的表达呈阴性。结论 诱生型一氧化氮合成酶在庆大霉素所致耳蜗损伤中呈阳性表达，提示一氧化氮在耳蜗损伤中起重要作用。     

诱生型一氧化氮合酶在豚鼠庆大霉素损伤后内耳前庭中的表达

目的 检测庆大霉素损伤后诱生型一氧化氮合酶在豚鼠内耳前庭中的表达。方法 实验组豚鼠皮下注射庆大霉素造成前庭损伤，对照组豚鼠皮下注射等量生理盐水。用免疫组织化学的方法检测诱生型一氧化氮合酶在前庭中的表达。结果 诱生型一氧化氮合酶在实验组前庭的表达呈阳性，在对照组前庭的表达则为阴性。结论 诱生型一氧化氮合酶在庆大霉素损伤的豚鼠前庭中呈阳性表达，提示一氧化氮在前庭损伤中起重要作用。     

顺铂对耳蜗单离听觉细胞一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨顺铂对耳蜗单离听觉细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS／NOSⅡ)表达的影响。方法 以单离毛细胞和单离螺旋神经节神经元为模型,用免疫组化方法(ABC法)研究顺铂对细胞内NOSⅡ表达的影响。结果 在1mM顺铂平衡盐溶液中室温下培养两小时的外毛细胞及培养半小时的单离螺旋神经元与对照组相比显示了对NOSⅡ抗体较强的免疫反应。结论 提示顺铂诱导了单离外毛细胞及单离螺旋神经元内NOSⅡ的合成增加,NO可能参与了顺铂的耳毒作用。     

大鼠耳蜗一氧化氮合酶的分布和表达

目的 本实验先用组织化学法，通过观察还原型辅酶Ⅱ－黄递酶（NADPH－黄递酶）的性了解一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）在大鼠耳蜗内分布。再用亲合免疫细胞组织化学技术，研究大鼠耳蜗内神经元型NOS（neuronal NOS,nNOS）与内皮型NOS（endthelial NOS,eNOS）的表达。方法 组化组大鼠耳蜗切片用辅酶Ⅱ孵育液在37℃条件下孵育1小时。免疫组化组大鼠耳蜗切片经消除内源性过氧化物酶，3％山羊正常血清封闭非正常结合点后，用兔抗nNOS抗体、兔抗eNOS抗体，室温下孵60发钟，再用生物素标记的山羊抗兔第二抗体孵育、滴加ABC试剂，以DAB试剂显色。结果 大鼠耳蜗血管球内皮细胞有明显NADPH－黄递酶活性，血管纹及螺旋神经节细胞也有NADPH－黄递酶活性反应。大鼠耳蜗内、外毛细胞、螺旋神经节细胞nNOS、eNOS的表达呈阳性。血管纹细胞处有阳性nNOS、eNOS的表达。耳蜗血管球的内皮细胞无nNOS的表达，但eNOS的表达呈强阳性。结论 由nNOS及eNOS合成的NO在维持耳蜗正常神经传导及耳蜗毛细血管张力和正常血液供应中起着重要作用。     

诱生型一氧化氮合成酶在庆大霉素所致豚鼠耳蜗损伤中的表达

目的检测诱生型一氧化氮合成酶在庆大霉素所致豚鼠耳蜗损伤中的表达.方法实验组豚鼠皮下注射庆大霉素造成耳蜗损伤, 对照组豚鼠皮下注射等量生理盐水.用免疫组织化学的方法检测诱生型一氧化氮合成酶在耳蜗中的表达.结果诱生型一氧化氮合成酶在实验组耳蜗的表达呈阳性, 在对照组耳蜗的表达呈阴性.结论诱生型一氧化氮合成酶在庆大霉素所致耳蜗损伤中呈阳性表达,提示一氧化氮在耳蜗损伤中起重要作用.     

豚鼠耳蜗一氧化氮合酶的分布

目的 用组织化学法,通过观察NADPH-黄递酶的活性了解一氧化氮合酶在豚鼠耳蜗内分布。方法 经4％多聚甲醛心脏灌注固定后,取出耳蜗,经3％依地酸脱钙后,作厚10μm冰冻切片,用辅酶Ⅱ孵育液在37℃条件下孵育l小时。结果 发现在耳蜗内、外毛细胞底部与耳蜗神经末梢接头处及毛细血管球内皮细胞有明显NADPH-黄递酶活性,此外在内、外柱细胞、支持细胞、血管纹及螺旋神经节细胞也有NADPH-黄递酶活性反应。结论 NO在维持耳蜗正常神经传导及毛细血管张力中起着重要作用。     

诱生型一氧化氮合酶在慢性上颌窦炎黏膜的表达

目的 观察诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)在慢性鼻窦炎病人鼻窦粘膜中的表达。方法 将实验分为两组：对照组为正常成人，无鼻窦病变。实验组为确诊为慢性上颌窦炎的病人。在局麻鼻内镜下行鼻窦黏膜活检，石蜡包埋、切片，用免疫组织化学的方法观察iNOS在两组上颌窦黏膜中的表达。结果 iNOS在正常上颌窦炎黏膜呈阴性表达，在慢性上颌窦炎黏膜呈阳性表达，阳性区域主要在黏膜上皮细胞。结论 iNOS在慢性上颌窦炎黏膜呈阳性表达，提示一氧化氮在慢性上颌窦炎的发病机制中起重要作用。     

一氧化氮合酶和心钠素在豚鼠耳蜗的分布

目的 观察豚鼠耳蜗局部心钠素（atral natruretc peptde，ANP）和一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）免疫组化反应产物的分布，为研究ANP和NOS在豚鼠耳蜗局部血流、淋巴以及神经调节中的相互作用提供形态学依据。方法 采用免疫组织化学双标法检测ANP和NOS在正常豚鼠耳蜗的分布特征。结果 在耳蜗各转螺旋动脉和血管纹．螺旋缘、螺旋韧带和Corti器显示双阳性染色，螺旋神经节细胞及囊斑神经上皮细胞膜及轴突NOS阳性染色，胞质ANP阳性染色；盖膜、前庭膜阴性染色。结论 ANP和NOS在内耳血 流调节，内、外淋巴平衡调节以及神经信号传递等方面可能具有重要作用，二者之间可能存在密切的相互作用机制，其分布特点与功能密切相关。     

iNOS在链霉素耳中毒豚鼠耳蜗血管纹的表达

目的探讨链霉素（streptomycin,SM）耳中毒过程中豚鼠耳蜗诱生型一氧化氮合霉（inducible nitric oxide synthase,iNOS）的表达.方法 20只豚鼠随机分为正常对照组、SM组,每组10只,SM组每日腹腔注射硫酸链霉素150 mg/kg,正常对照组每日腹腔注射等量生理盐水,用药10天后处死.以听性脑干反应（ABR）为监测指标,结合电镜、免疫组化及图像分析技术,检测链霉素耳中毒过程中耳蜗血管纹iNOS的表达及形态学改变.结果用药10天后,SM组ABR阈值明显高于正常对照组,有统计学差异（P〈0.01）,电镜下可见SM组血管纹损伤严重;免疫组化结果表明,SM组血管纹iNOS的表达明显高于正常对照组.结论 SM耳中毒时ABR阈值升高,血管纹iNOS表达增强.     

蒙古沙鼠耳蜗一氧化氮合酶的胆碱能调节

目的　通过检测乙酰胆碱对蒙古沙鼠耳蜗中一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)的影响 ,初步探讨耳蜗中NOS的调节机制。方法　蒙古沙鼠耳蜗经还原型辅酶Ⅱ -黄递酶 (NADPH -黄递酶 )染色后行耳蜗铺片 ,分别以同一动物两侧耳蜗为实验组和对照组进行对比观察 ,检测乙酰胆碱 (ACh)对耳蜗NOS活性的影响 ,其染色深度的差异通过HPIAS - 10 0 0高清晰度彩色病理图像免疫组化测量系统判断。结果　蒙古沙鼠耳蜗外毛细胞基底部传出神经末梢呈现NADPH -黄递酶染色阳性反应 ,ACh处理后染色深度明显增强 ,其平均灰度值从 74.2 8± 11.71减低至 46 .5± 7.78(P <0 .0 1)。结论　蒙古沙鼠耳蜗外毛细胞基底部的传出神经末梢可见NOS分布 ,ACh能增强其活性 ,提示ACh通过第二信使分子一氧化氮在耳蜗生理调控机制中起重要作用     

丹参注射液对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗一氧化氮生成的影响

目的　研究丹参注射液对庆大霉素 (GM)耳中毒豚鼠耳蜗一氧化氮 (NO)生成的影响 ,探讨丹参注射液对GM耳蜗毒性的防护作用及其作用机制。方法　豚鼠随机分成正常对照组、GM组、GM +丹参组和丹参组 ,应用改良镀铜镉还原法测定豚鼠耳蜗组织中NO含量 ,同时结合听性脑干反应 (ABR)测试 ,观察用药前后听阈变化。结果　GM +丹参组豚鼠耳蜗NO含量和ABR阈值均明显低于GM组 (P <0 .0 1) ;且各组NO含量变化与ABR阈值高度相关 (r正常对照 =0 .96 5 ;rGM=0 .990 ;rGM +丹参 =0 .880 ;r丹参 =0 .980 ;P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论　丹参注射液可通过抑制GM引起的NO过量生成 ,以减轻GM的耳毒性损伤 ,从而改善听功能。这可能也是丹参注射液拮抗GM耳蜗毒性的作用机制之一。     

ATP对噪声暴露豚鼠耳蜗一氧化氮合酶活性的影响

目的 探讨ＡＴＰ对噪声暴露听力损伤的保护八月作用及对耳蜗一氧化氮合酶活性的影响。方法 制备豚鼠稳态噪声暴露听力损伤模型,应用ＮＡＤＰＨ－ｄ酶组织化学及免疫组化技术ＡＢＣ法,结合听性脑干反应（ＡＢＲ）阈值检测,研究ＡＴＰ对噪声暴露致聋豚鼠耳蜗一氧化氮合酶（ＮＯＳ）及诱生型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）活性的影响。结果 ＡＴＰ对噪声暴露豚鼠的ＡＢＲ阈移有明显的抑制作用;ＡＴＰ对噪声暴露豚鼠耳蜗ＮＯＳ、ｉＮＯ     

灯盏花素对顺铂所致豚鼠耳蜗损伤的拮抗作用

目的探讨灯盏花素对顺铂致豚鼠耳毒性的拮抗作用。方法将30只豚鼠分为三组:正常对照组(A组)、实验对照组(B组)、实验组(C组),每组10只。B组和C组一次性腹腔注顺铂10 mg/kg,同时C组连续10天腹腔注射灯盏花素15 mg.kg-1.d-1,B组等时程腹腔注等量生理盐水。每组豚鼠在实验前后均行听性脑干反应(ABR)检测。在豚鼠顺铂致耳毒性模型完成并检测ABR反应阈后,用免疫组织化学方法检测4-羟基-2-壬烯醛(4-HNE)在各组动物耳蜗的表达,同时用扫描电镜观察各组豚鼠耳蜗形态。结果实验前三组豚鼠ABR反应阈差异无统计学意义(P>0.05),实验后B组和C组豚鼠ABR反应阈分别为50.12±18.45、36.32±15.63 dB SPL,均明显高于实验前,且B组显著高于C组(P<0.05),B组豚鼠听功能损伤明显重于C组。4-HNE在A组表达呈阴性,在B组和C组耳蜗表达呈阳性,且在B组的表达明显强于C组。B组耳蜗外毛细胞的损伤明显较C组重。结论 4-HNE在顺铂所致豚鼠耳蜗损伤中呈阳性表达。灯盏花素对4-HNE的形成有明显抑制作用,且能拮抗顺铂对豚鼠的耳蜗毒性,表明活性氧(ROS)在顺铂所致豚鼠耳蜗损伤中起重要作用。     

Localization of Nitric Oxide Synthase Isoforms in the Human Cochlea

The location of nitric oxide (NO) in the structures of the cochlea is a topical issue. Nitric oxide synthase (NOS) has been detected previously in mammalian cochleae, but information on its presence in the human cochlea is still sparse. The location of NOS isoforms I, II and III in substructures of the human cochlea was studied by immunohistochemistry (fluorescein isothiocyanate technique) using monoclonal antibodies to NOS I, II and III. NOS I was the predominant isoform and staining could be observed in cells of the spiral ganglion (SG), in nerve fibres and in the outer hair cells (OHC). Furthermore, the supporting cells of the organ of Corti and the stria vascularis showed a fluorescent reaction to NOS I. Staining for NOS III was less intense and was located in the OHC, supporting cells and SG cells, while the stria vascularis remained unstained. By contrast, NOS II showed weak staining in a few neuron fibres only. The results imply that NO in the human cochlea could act as a neurotransmitter/neuromodulator at the level of neural cells and may be involved in the physiology of the supporting cells and stria vascularis. Moreover, because NO is both a mediator of excitotoxicity and a non-specifically toxic radical, it may also play a role in neurotoxicity of the human cochlea.     

离体豚鼠耳蜗灌流一氧化氮供体对耳蜗组织中环磷酸鸟苷含量的影响

目的 通过对离体的豚鼠耳蜗即刻灌流一氧化氮供体（DEA－NO）及可溶性鸟苷酸环化酶（sGC)抑制剂（ODQ），来改变耳蜗组织中环磷酸鸟苷（cGMP）含量，以便进一步研究一氧化氮／环磷酸鸟苷（NO／cGMP)途径在耳蜗中的调节作用。方法 24只纯种白色雄性豚鼠完全随机分为三组，分别灌流人工外淋巴基础液、DEA－NO／人工外淋巴基础溶液、ODQ＋DEA－NO／人工外淋巴基础溶液，收集耳蜗组织标本；用放射免疫的方法测定耳蜗组织中cGMP的含量。结果 向离体耳蜗中灌注1mM DEA-NO溶液可以引起耳蜗组织中cGMP含量的显著增加，先灌注ODQ，后灌注1mM DEA-NO，耳蜗组织中cGMP合成量明显少于单独灌注1mM DEA-NO，但仍高于对照组。结论 对离体的豚鼠耳蜗即刻灌流一氧化氮供体（DEA－NO）及可溶性鸟苷酸环化酶（sGC)抑制剂（ODQ），可以作用于NO／cGMP途径，改变耳蜗组织中cGMP含量，同时用放射免疫测定耳蜗组织中cGMP含量的方法是可行的。