缺氧诱导因子-1α在门静脉高压患者肝内外血管的表达

目的研究缺氧诱导因子-la(HIF-la)在门静脉高压患者肝内外血管的表达,探讨其在门静脉高压形成机制中的作用。方法对34例门静脉高压患者的肝内外血管与30例对照组织行HIF-1a免疫组织化学染色。测定门静脉高压患者肝内血管和脾静脉血管平滑肌细胞(VSMC)中HIF-la的表达。结果正常肝内外血管HIF-1a免疫组织化学染色呈阴性或弱阳性,平均吸光度为0．021 7±0．0048,门静脉高压患者的肝内血管和脾静脉呈强阳性,平均吸光度为0．0591±0．007 4,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论HIF-1a过度表达可能改变其血管舒缩活性物质的合成及敏感性,增加门静脉血流量,促进并加重门静脉的高压状态。     

门静脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增生与c-myc基因表达的相关性研究

目的　研究门静脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增生与c mycmRNA表达的关系。方法　应用RT PCR和免疫组化法对 2 8例门静脉高压症患者的脾静脉、12例正常血管分别进行c mycmRNA和增殖细胞核抗原 (PCNA)的检测。结果　门静脉高压症患者脾静脉PCNA蛋白表达阳性指数为 (2 9 8± 4 2 ) % ;c mycmRNA在PCNA蛋白表达阳性组和阴性组分别为 (7.6 1± 1 0 4 ) %和(3 82± 0 92 ) % ,正常对照组血管中PCNA蛋白无表达、c mycmRNA表达为 (1 0 4± 0 2 1) % ,两者同时与对照组比较 ,差异有显著意义 (P <0 0 1)。结论　c myc基因是门静脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增殖的起动基因 ,门静脉血流动力学紊乱激活脾静脉壁平滑肌细胞中原癌基因 ,促使血管平滑肌细胞增殖、迁移和表型改变 ,导致脾静脉血管重塑 ,使血管对缩血管物质反应降低。     

门静脉高压症患者肝外血管平增肌细胞凋亡及其相关基因表达的研究

目的 观察门静脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞凋亡及相关基因表达,探讨其对门静脉高压症时内脏高动力循环形成的作用。方法 采用原位DNA片断末端标记(TUNEL)法和免疫组织化学法,检测28例门静脉高压症患者脾静脉和12例正常血管的平滑肌细胞凋亡及其相关基因bax、bcl-2的表达。结果 门静脉高压症患者脾静脉平滑肌细胞TUNEL阳性细胞数为(24.3±2.6)％,正常对照组仅为(0.8±0.2)％,差异有非常显著性(P<0.01),bax与bcl-2阳性表达率分别为(22.06±3.20)％和(18.61±2.00)％,与对照组比较差异有非常显著性(P<0.01)。结论 门静脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞可产生凋亡,bax和bcl-2蛋白参与血管平滑肌细胞凋亡的调节,凋亡与增殖失衡导致血管结构重塑,促进门静脉高压症时内脏高动力循环的形成和发展。     

门静脉高压性血管病变

近年来，我们在门静脉高压症(portal hypertension，PH)的病理生理学研究过程中，提出了“门静脉高压性血管病变”(portal hypertensive vasculopathy，PHV)^[1]的概念，认为门静脉增高的压力和内脏高动力循环的直接性机械刺激和继之而来的细胞因子、血管活性物质、生长因子以及蛋白酶类等激素性刺激是导致门静脉高压性血管病变的主要原因。     

血管内皮生长因子在门静脉高压脾血管病变中的表达及意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在肝硬化门静脉高压症患者脾脏及脾血管病变中的表达及意义.方法:2017年6月至2019年3月,手术治疗的肝硬化门静脉高压症脾肿大患者(门静脉高压组)及同期行脾切除的外伤脾破裂患者(对照组)手术切除的脾静脉及脾脏标本,比较免疫组化方法染色脾静脉及脾脏组织中VEGF的表达情况.结果:门...     

门静脉高压症大鼠断流术后胃黏膜缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子的表达

目的 观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）在断流术前后肝前性门静脉高压症（PHPH）大鼠胃黏膜的表达，探讨HIF-1α和VEGF在门静脉高压胃病（PHG）的发生发展的作用。方法 取Wistar大鼠制备PHPH模型80只，设假手术组（SO）60只，在术后3周施断流术。检测HIF-1α、VEGF和CD34在大鼠胃壁组织中的表达。结果 断流术前PHPH组大鼠胃壁中HIF-1α（5．8±1．3）和VEGF（12．0±3．0）的表达均明显高于SO组[HIF-1α（0．03750±0．05175），VEGF（0．7±0．1），P〈0．01]。术后HIF-1α、VEGF和MVD均有升高趋势。结论 HIF-1α和VEGF可能参与了PHG的发生发展，断流术本身能通过某种机制影响HIF-1α和VEGF的表达，加重PHG。     

内皮型一氧化氮合酶、内皮素-1、蛋白激酶C、核因子-κB在门静脉高压血管内皮细胞的表达及意义

目的 探讨门静脉局部内皮源性血管活性物质异常与内皮细胞应力信号转导通路激活的关系.方法 用免疫组织化学和免疫荧光激光扫描共聚焦显微镜技术检测18例门静脉高压症、10例外伤性脾破裂患者脾静脉和15例门静脉高压、10例对照组大鼠门静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素-1(ET-1)、蛋白激酶C(PKC)、核因子-κB(NF-κB)的表达,探讨门静脉高压时其血管内皮细胞eNOS、ET-1表达改变与信息分子PKC、NF-κB的关系.结果 实验组内皮细胞PKC表达呈阳性或强阳性,对照组则呈阴性或弱阳性表达.其平均吸光度分别为实验组0.068 2±0.009 2(人)/0.059 3±0.005 7(鼠),对照组0.025 7±0.008 2(人)/0.022 4±0.006 5(鼠),差异有统计学意义(P＜0.01).eNOS、ET-1与NF-κB在门静脉高压患者脾静脉和实验组大鼠模型门静脉内皮的荧光信号强度均显著高于对照组ET-1107.359±30.147比56.441±18.874,P＜0.01(人);91.017±32.517比51.065±19.018,P＜0.01(鼠).eNOS95.610±28.333比57.872±27.374,P＜0.01(人);88.712±28.159比50.897±16.546,P＜0.01(鼠).NF-κB90.098±30.964(人)/90.348±32.852(鼠)比48.358±19.326(人)/48.070±19.065(鼠),P＜0.01(人)/P＜0.01(鼠).脾/门静脉内皮细胞ET-1、eNOS的表达与PKC、NF-κB的表达呈正相关(P＜0.05).结论 门静脉血中ET-1和NO的增高是由于门静脉系统内皮细胞合成增多所致,内皮细胞合成NO的增多与其eNOS表达上调有关.门静脉高压时其血管内皮细胞的机械应力信号通路被激活,内皮细胞ET-1和eNOS表达上调与该通路激活有关.     

内皮素在肝外型门静脉高压症发病机制中的作用

目的 探讨内皮素在门静脉高压症发病机制中的作用及其可能的机制。方法 参照Benoit方法建立大鼠门静脉高压症模型,应用放射免疫学方法分别测定门静脉高压症组、正常对照组和假手术组大鼠血浆及肝组织中ET－1的含量,并观察ET－1和ETA受体拮抗剂对门静脉高压症大鼠FPP以及体外培养的门静脉血管平滑肌细胞（VSMC）增殖和蛋白质合成的影响。结果 ①门静脉高压症大鼠血浆和肝组织ET－1含量显著高于正常对照组和假手术组（P＜0．01）;②静脉注ET－1可以显著提高门静脉高压症大鼠的自由门静脉压（P＝0．002）,静注ETA受体拮抗剂则可以显著降低门静脉高压症大鼠的FPP（P＝0．047）;③ET－1可以显著剂量依赖性地促进门静静脉VSMC对^3H-TdR和^3H-Leu的掺入,这种作用可以被ETA受体拮抗剂所抑制。结论 ①ET－1可以通过ETA受体介民垢缩血管作用,增加肝内门静脉系统血流阻力的功能性部分;②ET－1可以显著促进体外培养的大鼠门静脉血管平滑肌细胞的增殖和蛋白质合成,参与门静脉系统的血管增生－血管重构,并影响门静脉系统血流阻力的器质性部分;③门静脉高压症大鼠体内ET－1的过量表达通过影响门静脉系统血流阻力的功能性部分和器质性部分,在门静脉高压症的发病机理中具有重要作用。     

门静脉高压症病人肝内血管内皮细胞凋亡的研究

目的　研究门静脉高压症病人肝组织内血管及肝窦壁内皮细胞的凋亡及其对肝微循环的影响。方法　对 37例门静脉高压症病人、10例正常人肝组织 ,用TUNEL法检测血管内皮细胞及肝窦壁内皮细胞凋亡 ,免疫组化法检测Bax和Bcl 2基因的蛋白表达。结果　肝硬化门静脉高压症病人 ,门管区血管内膜破坏、断裂 ,内皮细胞脱落。管腔内血栓形成。血管壁和肝窦壁内皮细胞TUNEL 阳性细胞数为 (2 9 2 9± 4 15 ) % ,与对照组仅 (0 5± 0 2 ) % ,有显著性差异 (P <0 0 0 1) ;门管区血管内皮细胞和肝窦壁内皮细胞Bax和Bcl 2强阳性表达率分别为 (33 5 1± 5 6 9) %和 (2 4 6 4± 5 87) % ,对照组均为阴性 (P <0 0 0 1)。结论　肝硬化门静脉高压症病人门管区内皮细胞和肝窦壁内皮细胞凋亡和坏死明显增加 ,内皮细胞的凋亡和坏死激活凝血系统 ,促使血栓形成 ,从而破坏了肝脏微循环。     

肝硬变门静脉高压症患者肝体积测量研究及其临床意义

目的探讨用个人电脑及自行开发的软件对肝脏CT断层图像进行三维重建和测量及其在肝硬变门静脉高压症患者中的临床意义.方法术前对46例行原位肝移植的肝硬变门静脉高压症患者和30例正常对照者的肝脏CT断层图像进行三维重建和测量,术后与肝硬变门静脉高压症患者切除的受体实测肝体积进行对比分析.结果46例肝硬变门静脉高压症患者用本方法测得平均肝脏体积为(983.33±206.11)cm3,同组实测平均肝脏体积为(904.93±209.56)cm3,二者之间呈高度正相关(r=0.969,P＜0.01),本方法测定值的平均误差为8.66%.正常对照组用本方法测得平均肝脏体积为(1 287.00±96.18)cm3,与其身高、体重和体表面积之间均存在着正相关关系(r值分别为0.845、0.833和0.932,P＜0.01).肝硬变门静脉高压症患者肝脏体积与Child-Pugh分级有关,C级患者肝脏体积明显小于B级者;也与血浆白蛋白水平呈显著正相关(r=0.496,P＜0.01),与总胆红素水平(r=-0.493,P＜0.01)及凝血酶原时间(r=-0.517,P＜0.01)呈显著负相关,与ALT值(r=0.206,P＞0.05)、门静脉压力(r=-0.093,P=0.539)及门体自然分流指数(r=0.044,P=0.769)无明显相关关系.结论运用该方法对肝脏CT断层图像进行三维重建和测量准确性较高.肝脏体积大小与肝功能有密切关系,肝脏体积可较敏感地反映肝脏储备功能状况.     

门静脉高压症患者脾动静脉病变的形态学研究

我们采用光镜和电镜的方法对门静脉高压症患者的内脏血管进行观察，探讨门静脉高压症和内脏高动力循环以及内脏血管病变之间的相互关系，现将结果报道如下。     

门静脉高压症基础研究的近展与方向

简单历史回顾　　正常成年人肝脏约占其体重的 2 .5 % (1 5 0 0～1 80 0 ｇ) ,但是流经肝脏的血流量却占心输出量的2 5 % ,也就是说平均每克肝脏每分钟有 1～ 1 .2ｍｌ血流通过。肝脏丰富的血流量固然与其重要的生理功能有关 ,但从血流调节角度来看肝脏非常独特 ,在生理情况下内脏血流动力学波动尽管很大 ,但肝静脉回流量却基本稳定。处于内脏循环与体循环之间 ,肝脏本身特殊的结构和调节机制在血流动力学方面表现出极大容量和顺应性。现有证据表明 ,肝脏血管这种顺应性并非仅是被动地扩张与塌陷。肝脏调节血液循环的机制历来引起人们极大的…     

肝外型门静脉高压症的外科治疗

目的 探讨肝外型门静脉高压症的诊断和治疗方法。方法 自１９９３年１月￣１９９９年９月,本所收治肝外型门静脉高压症４１例。男１８例,女２３例,年龄８￣５８岁,平均２４．６岁,病因为门静脉血栓形成３４例,腹腔内脏动静脉瘘４例,门静脉终末支纤维化２例,肝动脉瘤压迫门静脉１例。根据不同病变分别施行肠－腔静脉分流,脾－肾静脉分流,经导管溶栓及栓塞,动静脉瘘切除等治疗。结果 术后２例死亡,并发肝脓肿和肠坏死各     

内皮型一氧化氮合酶、内皮素-1、蛋白激酶C、核因子-кB在门静脉高压血管内皮细胞的表达及意义

目的探讨门静脉局部内皮源性血管活性物质异常与内皮细胞应力信号转导通路激活的关系。方法用免疫组织化学和免疫荧光激光扫描共聚焦显微镜技术检测18例门静脉高压症、10例外伤性脾破裂患者脾静脉和15例门静脉高压、10例对照组大鼠门静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素-1(ET-1)、蛋白激酶C(PKC)、核因子-_κB(NF-_κB)的表达,探讨门静脉高压时其血管内皮细胞eNOS、ET-1表达改变与信息分子PKC、NF-_κB的关系。结果实验组内皮细胞PKC表达呈阳性或强阳性,对照组则呈阴性或弱阳性表达。其平均吸光度分别为实验组0．068 2±0．009 2(人)/0．059 3±0．005 7(鼠),对照组0．025 7±0．008 2(人)/0．022 4±0．006 5 (鼠),差异有统计学意义(P＜0．01)。eNOS、ET-1与NF-_κB在门静脉高压患者脾静脉和实验组大鼠模型门静脉内皮的荧光信号强度均显著高于对照组：ET-1：107．359±30．147比56．441±18．874．P＜0．01(人)；91．017±32．517比51．065±19．018,P＜0．01(鼠)。eNOS：95．610±28．333比57．872±27．374,P＜0．01(人)；88．712±28．159比50．897±16．546,P＜0．01(鼠)。NF-_κB：90．098±30．964(人)/90．348±32．852(鼠)比48．358±19．326(人)/48．070±19．065(鼠),P＜0．01 (人)/P＜0．01(鼠)。脾/门静脉内皮细胞ET-1、eNOS的表达与PKC、NF-_κB的表达呈正相关(P＜0．05)。结论门静脉血中ET-1和NO的增高是由于门静脉系统内皮细胞合成增多所致,内皮细胞合成NO的增多与其eNOS表达上调有关。门静脉高压时其血管内皮细胞的机械应力信号通路被激活,内皮细胞ET-1和eNOS表达上调与该通路激活有关。     

门静脉高压症患者脾血管内皮素-1 mRNA的表达

门静脉高压症的具体病理生理过程尚不清楚，我们研究了局部缩血管活性物质内皮素-1(ET-1)mRNA在内脏血管中的表达，探讨其在门静脉高压症血管病变中的意义。     

血管活性物质在门静脉高压症发病中的作用

在肝硬变门静脉高压症(PHT)的形成和发展过程中,肝内阻力增加是始动因素,其后由血管扩张物质增多引起的高动力循环在维持和加重PHT中起重要作用。近年,更令人关注的是肝硬变时血管活性物质水平的变化对肝内阻力的影响以及血管扩张物质在引发高动力循环中所占地位。     

蛋白激酶 C信号通道在阻塞性黄疸肝损害发生发展中的作用

目的 探讨阻塞性黄疸肝损害的调控机理。方法（1）采用胶原酶原位肝灌注法获取大鼠肝细胞，行原代培养，用蛋白激酶C（PKC）激动剂帕斯酶埃（PMA）、拮抗剂切勒埃（cheleryhrine)作用于肝细胞，再用50μmol/L甘氨鹅脱氧胆酸钠（GCDC）作用后行流行细胞术（FCM）及用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT)介导的脱氧核苷酸（dUTP)缺口末端标记技术（TUNEL）检测肝细胞凋亡情况。（2）分别于结扎大鼠胆总管后3d、7d、14d及21d处死大鼠，用TUNEL技术及免疫组织化学方法检测阻塞性黄疸大鼠肝脏组织细胞凋亡状态及PKC蛋白的表达。结果（1）随PMA浓度的增加，肝细胞的凋亡明显增加，随Chelerythrine的增加，肝细胞的凋亡明显减少。（2）大鼠胆总管结扎后随结扎时间的延长细胞凋亡指数（AI）增加，结扎14d后AI达高峰。PKC蛋白表达越强，AI就越高。结论 蛋白激酶C信号通道参与了阻塞性黄疸肝细胞凋亡的调节，并在阻塞性黄疸肝损害的发生和发展中起重要作用。     

肝星状细胞中蛋白激酶C活性改变对其表达血小板源生长因子及增殖的影响

目的观察蛋白激酶C（PKC）活性改变对肝星状细胞（HSC）表达血小板源生长因子（PDGF）的影响及对HSC增殖和激活的作用。方法将肝星状细胞系rHSC-99随机分为3组：对照组（A组）；PKC激动剂PMA0．5μmol／L组（B组）；PKC抑制剂Calphostin C100nmol／L组（C组）。加药后0、3、6、12、24h分别检测各组细胞PKC活性的变化；作用24h后，采用Westernblot方法检测各组细胞PDGF和胞外信号调节激酶（ERK）的表达；采用免疫荧光化学方法检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的表达；采用MTT法检测细胞的增殖情况。结果PMA作用后PKC的活性显著增强，而Calphostin C则抑制PKC的活性。PKC活性增强后，与对照组比较HSC的PDGF表达升高了1．4倍（P〈0．01），ERK表达升高了1．2倍（P〈0．05）；n—SMA的表达升高了1．3倍（P〈0．01），并促进HSC的增殖；PKC活性抑制后则能抑制以上的作用。结论PKC活性的改变能调控HSC中PDGF的表达，在HSC的增殖和激活中发挥调节作用。     

磁共振血管造影在门静脉高压症外科中的应用

本研究应用磁共振血管造影 (ｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅａｎｇｉｏ ｇｒａｐｈｙ ,ＭＲＡ)对肝硬化门静脉高压症患者进行门静脉系统及肝动脉血管成像 ,以评价ＭＲＡ在门静脉高压症外科中的应用价值。对象与方法1.临床资料 :自 1998年 5月至 2 0 0 0年 1月期间 ,对 35例肝硬化门静脉高压症患者进行研究。其中男性 2 4例 ,女性11例 ,年龄 15～ 76岁。肝炎后肝硬化 30例 ,血吸虫性肝硬化 3例 ,肝炎后肝硬化合并血吸虫性肝硬化 2例。根据Ｃｈｉｌｄ Ｐｕｇｈ肝功能分级 :Ａ级 16例 ,Ｂ级 15例 ,Ｃ级 4例。在肝硬化门静脉高压症患者中 ,…