用小鼠单位法检测河豚毒素

本市发生一起由烤鱼片引起的食物中毒。经流行病学调查 ,从进食情况、发病时间及临床表现 ,疑似河豚毒素(TTX)中毒。追查到销售商店及生产厂家证实本批白色鱼片是用河豚鱼为原料加工制成的。我们用小鼠单位法对烤鱼片内河豚毒素进行了测试。1　检测方法〔1〕1.1　样品及前处理     

铅对家兔慢性毒性的研究

铅是一种毒性较大的重金属元素,在工业铅污染地区,环境中铅的浓度较高,大量的铅经饲料富集后由消化道进入动物体内,作用于各个系统和器官而产生危害。我们研究了铅对家兔一些系统功能的慢性毒性影响。     

双酚A对小鼠生殖和发育毒性的研究

目的研究双酚A(BPA)对小鼠的生殖和发育毒性。方法选择健康性成熟清洁级、体重22～26g昆明种小鼠128只,随机分为48、120、240mg/kgBPA染毒组和花生油溶剂对照组,每组雌、雄各16只,实验方法及观察指标按美国国家环境保护署(EPA)推荐大小鼠生育力试验的标准方法进行。结果从染毒120mg/kgBPA组始,小鼠附睾精子计数、活精率、生育指数和妊娠率随染毒剂量增加而下降,而精子畸形率随染毒剂量增加而升高(均P<0.05或0.01),交配指数仅240mg/kgBPA组下降(P<0.05),从染毒剂量48mg/kg组始,着床前死亡率、吸收胎率、死胎率均随染毒剂量增加而升高,而活胎率随剂量增加而下降,与对照组比较差异均有显著性或极显著性(P<0.05或0.01)。结论结果表明BPA可能对小鼠具有生殖和发育毒性。     

用ICR小鼠生物法测定烤鱼片河豚毒素的研究

[目的]用ICR小鼠测定引起食物中毒的烤鱼片中河豚毒素的毒力。[方法]根据日本药学会推荐的河豚毒素检验方法,在小白鼠下腹腔注射烤鱼片提取液,测定鼠单位（MU）。[结果]烤鱼干样品河豚毒素的小鼠单位为4.68MU/g。[结论]应科学和规范烤鱼片加工程序,严格监督管理,否则仍存在食物中毒的可能。     

四氯乙烯对小鼠的行为畸胎毒性研究

四氯乙烯作为一种有机去脂溶剂,广泛应用于干洗行业,纺织品加工、金属清洗及化工合成过程,鉴于目前四氯化烯在其应用行业中使用规模的扩大,其潜在危害日益引起人们重视,四氯乙烯在毒理学和流行     

邻甲苯胺对小鼠的免疫毒性研究

用邻甲苯胺对小鼠亚急性染毒，观察对免疫功能影响。研究发现：脾脏是邻甲苯胺作用的一重要靶器官。免疫系统受到抑制，表现为１９ｍｇ／ｋｇ以上染毒引起脾脏增大，且呈剂量－反应关系；３８ｍｇ／ｋｇ以上引起白细胞计数和淋巴细胞比例升高，中性细胞比例下降；７６ｍｇ／ｋｇ引起Ｔ淋巴细胞百分比、抗体生成细胞和吞噬细胞吞噬功能下降。     

锂对小鼠生殖毒性的研究

锂对小鼠生殖毒性的研究宋旭红刘继文黄贤仪赵效国锂属低毒的轻金属［１］，可作用于机体各器官系统而产生损害［２］。目前有关锂的生殖毒性研究尚少见报道。本研究以小鼠为模型，初步探讨氯化锂对其生殖功能的影响。１材料与方法１．１氯化锂（ＬｉＣｌ），上海试剂二厂...     

十溴联苯醚对雌性小鼠免疫毒性的初步研究

目的探讨十溴联苯醚(decabromodiphenyl ether,BDE-209)对小鼠免疫系统的毒性作用。方法将120只健康SPF级未妊娠雌性BALB/c小鼠分为三批,每批按体重随机分为4组,分别为阴性对照(花生油)组和低(20 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(500 mg/kg)剂量BDE-209染毒组,每组10只。采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为0.01 ml/g,每天1次,连续染毒30 d。测定淋巴细胞增殖情况、NK细胞活性、血清半数溶血值(HC50)、腹腔巨噬细胞吞噬功能。结果与阴性对照组比较,仅100、500 mg/kg BDE-209染毒组小鼠T淋巴细胞增殖功能明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);各剂量BDE-209染毒组小鼠NK细胞活性、血清HC50、吞噬百分率和吞噬指数均无显著变化。结论 BDE-209可降低小鼠T淋巴细胞增殖能力,对小鼠细胞免疫功能具有抑制的作用。     

苦瓜水提取物对小鼠的急性经口毒性和遗传毒性实验研究

目的了解苦瓜水提取物的急性经口毒性和遗传毒性，为苦瓜的开发利用提供实验依据。方法按照GB15193—2003《食品安全性毒理学评价程序和方法》进行急性经口毒性实验、Ames实验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验及小鼠精子畸形实验。结果苦瓜水提取物的急性经口LD50〉21500mg/kg bw；三项遗传毒性实验结果均为阴性。结论苦瓜水提取物对小鼠的急性经口毒性属无毒，未见遗传毒性作用。     

氯化氰对小鼠的亚慢性毒性研究

目的 研究氯化氰对小鼠的亚慢性毒性影响.方法 将40只小鼠随机分成对照和低、中、高剂量组,即0.3、3.2、6.5μg/L.每日染毒1次,连续4周.用氯化氰染毒后测定血清、脑、肝、肾中相关生化指标及脂质过氧化指标并观察肺病理变化.结果 在不同剂量染毒组血清肝功能指标中γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ST)水平呈不同程度升高,白蛋白(Alb)、总蛋白(TP)降低.肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平明显增高,尿酸(UA)水平降低.肝、肾、脑中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活力均有不同程度降低.并且染毒组小鼠肺组织出现肺泡隔增厚、炎细胞增多、毛细虹管扩张充血等病理变化.结论 氯化氰对小鼠的呼吸系统及肝、脑、肾等脏器都有损伤作用.     

家兔静脉注射羟基磷灰石纳米粒子的反应研究

目的探讨纳米羟基磷灰石微晶体(HAP)对家兔静脉应用的急性毒性反应及剂量。方法对50只新西兰大白兔经耳缘静脉快速推注不同浓度的纳米HAP混悬液,观察家兔用药前后的反应,死亡情况;并检测纳米HAP对家兔肝肾功及酶等指标的影响。结果纳米HAP静脉应用对家兔的最小致死剂量(LD1)为180mgkg,半数致死剂量LD50为200mgkg,全死剂量LD99为260mgkg。AST,LDH,CKC及P在用药后2h呈一过性增高,而于24h内即恢复正常。BUN,ALP则在24h时增高达最高峰,随后迅速下降至正常范围,其余指标均基本维持在正常值范围内。结论纳米HAP在家兔无明显蓄积毒性,提示当用量远远小于最小致死剂量时,纳米HAP可作为药物载体,甚至在将来可能作为一种新型的抗癌药物,经静脉安全应用。     

纳米氧化铜对小白鼠的急性毒性及蓄积毒性试验研究

目的:观察纳米氧化铜对小白鼠的急性毒性及蓄积毒性,为临床提供依据。方法:1.急性毒性试验:给试验小鼠灌服不同浓度的纳米氧化铜混悬液,观察14 d内小鼠的活动情况及死亡情况,测定小鼠灌胃的LD50,采用改良寇氏公式计算LD50及可信限;2.蓄积毒性试验:依据20 d蓄积毒性试验法设计,取20~22 g小白鼠,共设5组,每组10只,雌雄各半,第1组为空白对照组,给试验小鼠灌服不同浓度的纳米氧化铜混悬液分别为28.90(1/20LD50)、57.81(1/10LD50)、115.62(1/5LD50)和298.05(1/2LD50)mg/(kg.bw)剂量,每日灌胃1次,连续灌胃20 d,通过对小白鼠灌服纳米氧化铜进行了蓄积毒性试验。结果:1.急性毒性试验:纳米氧化铜对小白鼠的LD50为578.09 mg/(kg.bw),其95%可信限343.92~971.63 mg/(kg.bw)。2.蓄积毒性试验:试验结果表明0和1/20LD50剂量组小白鼠全部存活,1/2LD50剂量组10只小白鼠全部死亡;1/5LD50剂量组小白鼠死亡5只,存活5只;1/10LD50剂量组小白鼠死亡2只,存活8只。结论:高剂量纳米氧化铜可对小鼠的肾脏、小肠、肝脏等组织器官造成广泛性损伤,并引起严重的淤血、出血等病理变化。依据判定标准,证明纳米氧化铜对小白鼠有中等蓄积毒性作用。     

东海加工用河鲀鱼种毒性研究

应用酶联免疫方法，对分布于中国东海，应用地加工河豚鱼干制品的五种主要河鱼种毒性进行了调查研究。毒素含量范围为＜４．０×１０－２＞１．０×１０４ＭＵ／ｇ。即使处于繁殖期，暗鳍、淡鳍腹刺仍均属无毒或弱毒级。头纹宽吻和横纹东方则具有相当大的毒性。毒素含量随其生活的环境、海域及季节变化。建议在监督控制下，批准部分具备条件的企业进行河鱼干制品的加工生产，但应明确限制允许加工的腹刺属鱼种     

抗河豚毒素单克隆抗体的制备及其特性的初步研究

将用合成的匙孔形虫戚血蓝蛋白－甲醛－河豚毒素（ＫＬＨ－ＨＣＨＯ－ＴＴＸ）连接物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Ｓｐ２／０融合，经３～４次亚克隆，建立了３个稳定分泌抗河豚毒素的杂交瘤细胞株，分别命名为１Ｇ３、４Ｇ３、６Ｄ９。其中１Ｇ３和４Ｇ３分属ＩｇＧ２ｂ亚类，６Ｄ９属ＩｇＧ１亚类。腹水的抗体稀释度为１∶１０５～１：５×１０６。用竞争抑制性酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定三种抗体的最低反应浓度为１×１０－３ｍｇ／Ｌ。     

河豚毒素单抗ELISA检测试剂盒的研制

目的研制快速检测河豚鱼类中的河豚毒素（tetrodotoxin,TTX）试剂盒.方法在生产的抗TTX单克隆抗体基础上,利用间接竞争酶联免疫吸附方法研制TTX快速检测试剂盒.结果该试剂盒的最低检出浓度为5ng/ml,标准曲线的线性范围为5～500ng/ml,回归方程为Y＝-0.3546x＋1.1006,r=0.99（P〈0.05）;河豚鱼25和100ng/ml 2个水平的加标回收率为72.45%～111.24%;试剂盒常温下可保存225d;与牛血清白蛋白（BSA）无交叉反应;实验室内的变异系数和实验室间的变异系数均〈20%.结论该试剂盒快速、简单、灵敏,可满足实际工作需要.     

低剂量苯45d染毒致小鼠的生殖毒性

目的研究低剂量苯(50 mg/kg.d)45 d染毒对成年雌性小鼠生殖系统的影响,探讨苯的生殖毒性。方法清洁级昆明种雌性成年小鼠24只随机分为苯处理组与溶剂对照组,苯处理组用苯(50 mg/kg.d)灌胃,溶剂对照组用植物油灌胃,连续灌胃45 d,第15~21 d用清洁级昆明种雄性小鼠按1:2与雌鼠进行合笼交配,之后分笼饲养,持续染毒,期间孕鼠陆续分娩胎仔,直至染毒结束后剖杀动物,检测生殖毒性指标。结果与对照组相比,苯处理组动物的体重增长速度减慢,在第21 d和第45 d差异有统计学意义(P均<0.05);与对照组相比,苯处理组的肝脏脏器系数明显降低(P<0.05),胎仔的体重、身长和尾长减小,差异均有统计学意义(P均<0.05);苯处理组的卵巢组织镜下可见病理改变。结论低剂量苯(50 mg/kg.d)45 d连续染毒对雌鼠生殖系统具有损伤作用。     

漂白剂亚硫酸钠对小鼠生殖毒性的影响

[目的]研究亚硫酸钠(Na2SO3)对小鼠精子畸形及胚胎生长发育的影响。[方法]①取25只雄性昆明种小鼠随机分成阴性对照组、阳性对照组和3个剂量组,每组5只。分别按高、中、低剂量(130,65,32．5mg/kg)Na2SO3灌胃,阴性对照组用等量生理盐水灌胃,阳性对照组用20mg／kg的环磷酰胺腹腔注射。每天灌胃(注射)4次,连续5d,第35天处死动物,取两侧附睾液涂片,观察小鼠精子畸形。②将成年昆明种小鼠按雌雄2:1同笼交配。检出受精鼠,随机分成4组,在孕期第6天分别经口灌服高、中、低剂量Na2SO3(162．5,40．63,10．16mg/kg),连续9d,每天1次;阴性对照组用等量生理盐水;每3天称重一次,记录孕鼠体重变化。③在分娩前1天取出胎鼠,记录其体重、活胎数、吸收胎数、身长、尾长、胎鼠外观畸形和内脏畸形等指标。[结果]与对照组相比,各剂量组小鼠精子畸形率明增加(P<0．05),并有剂量-反应关系;孕鼠体重和胎鼠身长、体重均明显减少(P<0．05)。[结论]亚硫酸钠对小鼠精子畸形、胎鼠身长和体重具有明显影响,表明亚硫酸钠具有一定生殖毒性。     

高效液相色谱-串联质谱法测定烤鱼片中的河豚毒素

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定烤鱼片中河豚毒素(TTX)的检测方法。方法样品经1%乙酸超声振荡提取15min,提取液加入4倍量的甲醇沉淀水溶性大分子化合物,离心后将上清液挥干,残留物加1mL甲醇复溶,高速离心后取上清液进行HPLC-MS/MS分析检测。色谱分离于HILIC柱上进行,梯度洗脱。采用电喷雾离子源正离子多反应监测(MRM)模式进行定性和定量检测。结果 TTX在5~1 000ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.999 3,检出限为16μg/kg,回收率为84.6%~98.1%,相对标准偏差(RSD)3.9%~13.7%。结论该方法选择性强、灵敏度高、处理方法简单,适用用于烤鱼片中河豚毒素的测定。     

原花青素对氨基脲致雄性小鼠生殖毒性的拮抗作用

目的观察原花青素(PC)对氨基脲(SEM)致雄性小鼠生殖毒性的拮抗作用及作用机制。方法 50只KM雄性小鼠随机等分为5组:溶剂对照组、SEM染毒组、低、中、高剂量PC保护组。溶剂对照组灌胃去离子水;SEM染毒组先按56.25 mg/kg.bw SEM溶液灌胃染毒2周,再继续灌胃去离子水4周;3个剂量PC保护组,先分别灌胃PC 100、200、400 mg/kg.bw 4周,继续分别灌胃同剂量SEM溶液2周;以上各组动物均按10 ml/kg.bw体积灌胃每日1次,连续灌胃6周剖杀,取其血液和组织器官检测生殖相关指标。结果 PC保护组睾丸形态较SEM染毒组有所改善,且随PC剂量的加大改善较明显;低、中、高剂量PC组小鼠精子数、精子活动度较SEM组增加,畸形率降低;血清T、LH、FSH含量均高于SEM染毒组,SOD、GSH-PX活力上升、MDA、GSH含量下降与SEM染毒组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论适量PC可保护SEM对雄性小鼠亚慢性生殖系统的损伤;抗氧化损伤是PC保护SEM致生殖损伤的重要机制。     

基于不同载体免疫原制备河豚毒素抗体的研究

目的比较牛血清白蛋白(BSA)和匙孔型血蓝蛋白(KLH)两种载体蛋白合成的河豚毒素人工抗原的免疫原性,并对其制备的抗体进行研究。方法用曼尼希法将半抗原河豚毒素(TTX)分别与大分子载体BSA和KLH偶联合成人工抗原TTX-BSA及TTX-KLH,免疫6~8周龄Balb/c雌性小鼠,制备多抗;以卵清白蛋白(OVA)为载体蛋白,同样用曼尼希法制备包被抗原TTX-OVA。TTX-KLH多抗血清同时采用TTX-OVA和TTX-BSA作包被抗原检测,抗血清经间接酶联免疫吸附法(iELISA)以及间接竞争酶联免疫吸附法icELISA)检测。结果经TTX-KLH免疫获得的多抗血清较TTX-BSA免疫获得的多抗血清特异性高。两种包被抗原的检测效价一致:均为1∶64000,而以TTX-OVA为包被原的检测值稍高,与TTX进行竞争酶联免疫检测,其IC50值波动范围为10~20ng/ml。结论TTX-KLH具有更好的免疫原性。