滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究

目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果　对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论　DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。     

McAb检测囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病试剂盒的研制

本文报道了McAb(4F_2)ELISA检测囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病试剂盒的研制。实验对227例脑囊虫病患者脑脊液进行检测,循环抗原阳性率为84.58％,其中活动型脑囊虫病患者171例,循环抗原阳性率为93.57％。56例非活动型脑囊虫病患者,循环抗原阳性率为57.14％,前者的循环抗原强度也明显高于后者。83例患有其它中枢神经系统疾病的患者,1例阳性,阴性符合率为98.80％。本试验方法简便,结果客观,对脑囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高、特异性强。     

金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫…

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针，以抗猪囊尾蚴抗原的ＭｃＡｂ为联桥，建立了非常规Ｄｏｔ－ＩＧＳ用于检测脑囊虫病患者ＣＡｇ的方法，用４Ｇ２ＭｃＡｂ检测８４例脑囊虫病人，１３例检出ＣＡｇ，阳性率为９２．８６％。检测其他疾病患者３６例，均为阴性。用４Ｇ２与１Ｆ１１株ＭｃＡｂ可分别检出最小抗原量为１ｎｇ／ｍｌ和０．２５ｎｇ／ｍｌ。本法敏感、特异、操作简单，可用于脑囊虫病的诊断。     

Dot-IGSS检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的研究

应用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测96份确诊为脑囊虫病患者脑脊液(CSF)中的循环抗原(CAg),阳性率分别为94.79%和92.71%.检测51例非囊虫病者和62例其他脑部疾病患者的CSF,两种方法均为阴性.诊断指数分别为194.79%和192.71%,检测CAg的最小量Dot-IGSS为244ng/ml,Dot-ELISA为488ng/ml.试验表明两法诊断脑囊虫病均具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行,有希望用于脑囊虫病的临床诊断.     

检测血清、脑脊液中循环抗原用于脑囊虫病诊断及疗效评估的研究

以猪囊尾蚴囊液抗原免疫家兔制备抗体,用常规ELISA法和斑点ELISA法(Dot-ELISA分别检测脑囊虫病人血清和脑脊液(CSF)中循环抗原(CAg),结果两法用于检测的敏感性与特异性相近。以Dot-ELISA法检测,脑囊虫病人血清和(CSF中CAg检出率分别为72.2％和77.7％,特异性为93.7％。吡喹酮治疗后,CSF中循环抗原消失较血清中明显缓慢,2疗程治疗后CSF中CAg检出率仍达74％,而血清中CAg检出率为40.7％,说明常规吡喹酮治疗后脑囊虫较外周组织中囊虫死亡缓慢,因此治疗后检测CSF中CAg更能判定疗效。     

应用特异单克隆抗体测定猪囊尾蚴病人血清和脑脊液中的循环抗原

我们应用特异的抗猪囊尾蚴抗原的单克隆抗体(CCy1),建立了单克隆抗体抑制性ELISA方法以测定囊尾蚴病患者的循环抗原(CAg)。测定灵敏度为ng水平。83例囊尾蚴病患者血清的CAg阳性率为71.1％。其范围为0.16-128μg/ml。对41例囊尾蚴病患者,同时测定了血清和脑脊液中的CAg。单项或两项阳性的总阳性率为90.2％。114例正常人血清、107例其它寄生虫病患者(包括30例包虫病患者)的血清及10例非寄生虫病患者的脑脊液的CAg量均为零。有23例囊尾蚴病患者治疗半年到1年后,有21例抗原浓度为零。另2例分别为0.64μg/ml和1.6μg/ml。表明测定CAg不仅可以确定活动性囊尾蚴感染,而且可考核疗效。     

应用胶体金探针技术IGSS进行猪囊尾蚴与抗猪囊尾蚴囊液抗原McAb特异性结合的定位研究

本文报道将IGSS应用于抗猪囊尾蚴囊液抗原的McAb与猪囊尾蚴特异性结合的定位研究。用猪囊尾蚴囊液抗原免疫BALB/C小鼠的脾细胞与胃髓瘤细胞系NS-D融合,经克隆化获得三株分泌抗猪囊尾蚴囊液抗原的McAb杂交瘤细胞A_(91)、G_(11)、F_(3),用ELISA检测证实杂交瘤细胞分泌特异性抗体。对其诱生腹水经ELISA、IHA检测显示腹水中高效价特异性的McAb,     

ELISA检测脑囊虫病人脑脊液循环抗原

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑囊虫病人循环抗原(CAg)一些学者已做了不少工作。我们于1990年用 ELISA 检测瞄囊虫病人脑脊液 CAg 获得了较好的效果。一、材料与方法(一)抗原制备自新鲜病猪肉摘取囊尾蚴,抽取囊液,经离心和上清液透析后为抗原,保存于-20℃备用。(二)兔抗囊尾蚴抗体制备取囊尾蚴囊液抗原多点注射健康兔,效价在 ELISA 1∶5000时,取血分离血清,分装冰冻干燥,置于-20℃备用。(三)脑脊液(CSF) 脑囊虫病患者的 CSF 均采自本所根据临床症状、皮下结节活检及头颅 CT 扫描等确诊的住院病人,共68份。其他脑部疾病(病毒性脑炎、脊     

应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原的研究

为探讨应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原（CAg）诊断囊虫病的价值，应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人及非囊虫病人血清中的CAg，并将该方法与ELISA作了比较。检测78份囊虫病患者血清，56例显示为阳性，阳性率为71．79％。其中52份活动型脑囊虫病人血清的阳性率为80．77％；20份非活动型脑囊虫病人血清的阳性率为55％；6份单纯皮肌型囊虫病血清的阳性率为50％。检测40份健康人血清，阴性符合率为87．5％。检测10份包虫病患者血清、10份吸虫病患者血清的交叉反应率分别为20．00％和10％。10份毕支睾吸虫病人血清均为阴性反应。23例其他脑疾患（脑肿瘤、脑脓肿、脑结核、脑外伤）患者血清的交叉胍应率为11．32％。本方法的敏感性和特异性与ELISA相似。应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人血清CAg具有较高的敏感性和特异性，操作简便快速，无需特殊仪器设备，具有较好的应用前景，值得进一步研究。     

ELISA检测脑囊虫病患者脑脊液中囊尾蚴抗原

应用酶联免疫吸附实验(ELISA),以38例脑囊虫病人脑脊液(CSF)和26例脑部其它疾患的CSF为对照,用兔抗囊尾蚴抗血清进行了囊尾蚴抗原检测,28例呈阳性反应,阳性率73.68％;对照组26例全部为阴性。本方法特异性强,重复性和敏感性较好,简单迅速,有希望用于脑囊虫病的临床诊断。     

231例脑囊虫病患者脑脊液中循环抗原检测分析

本文报告应用抗猪囊尾蚴单克隆抗体４Ｆ８－ＥＬＩＳＡ对２３１例脑囊虫病患者脑脊液中循环抗原检测的结果。经与患者病史、临床分型和脑ＣＴ检查结果比较，发现脑脊液中ＣＡｇ与有无绦虫史无关。脑型合并皮下结节患者脑脊液中ＣＡｇ的阳性率明显高于单纯型脑囊虫病和皮下结节消失组的患者。ＣＡｇ检测的结果与囊尾蚴和脑部寄生的数量，病灶的新旧与部位等病理情况有关。表明ＭｃＡｂ（４Ｆ８）－ＥＬＩＳＡ不仅可用于脑囊虫病的诊断     

脑囊虫病患者脑脊液常规和生化检查与循环抗原检测的比较

本文对408例脑囊虫病患者脑脊液循环抗原检测与脑脊液常规检查和生化分析进行了比较.研究发现循环抗原强阳性组和弱阳性组脑脊液中出现嗜酸粒细胞者所占的比例高于阴性组(分别是50.43%、41.26%和17.65%).274例进行脑脊液生化分析,氯化物基本正常.循环抗原强阳性组葡萄糖含量降低的发生率(14.71%)高于阴性组(3.85%).脑脊液蛋白增高者所占的比例明显高于弱阳性组,弱阳性组又明显高于阴性组(分别为89.70%、71.43%和50.00%).23例原发性癫痫患者脑脊液中CAg均阴性,脑脊液常规和生化分析结果正常.     

McAb4F8、McAb1F11与囊尾蚴抗原作用免疫印渍分析

将猪囊尾蚴囊液抗原（ＣＣＦＡ）和脑囊虫病病人脑脊液（ＰＣＳＦ）进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析，发现在ＣＣＦＡ中有１４条蛋白带，范围在２８～７６ｋＤａ。脑囊虫病病人ＣＳＦ中有６条蛋白带，范围在３３～８３ｋＤａ。用ＣＣＦＡ和ＰＣＳＦ与ＭｃＡｂ４Ｆ８和ＭｃＡｂ１ＦＩ１１免疫印迹试验，证明ＣＣＦＡ中５０、５３、６３和７０ｋＤａ蛋白带与两株ＭｃＡｂ均有反应，另一条蛋白带３３ｋＤａ仅能被ＭｃＡｂ１Ｆ１１识别。ＰＣＳＦ中的６条蛋白带中有３条（５３，６３和７０ｋＤａ）与２株ＭｃＡｂ均有反应，另一条蛋白带３３ｋＤａ仅与ＭｃＡｂ１Ｆ１１反应。２例对照脑脊液中未出现反应带。结果显示ＭｃＡｂ４Ｆ８和ＭｃＡｂ１Ｆ１１均抗ＣＣＦＡ和ＰＣＳＦ中的主要蛋白带。     

脑囊虫病患者脑脊液氨基酸含量的变化

目的观察脑囊虫病患者脑脊液氨基酸含量的变化.方法采用全自动氨基酸分析仪检测30例脑囊虫病患者和13名对照组受检者脑脊液中氨基酸含量.结果脑囊虫病患者脑脊液中苏氨酸、酪氨酸及苯丙氨酸含量与对照组差异有非常显著性(P＜0.01);丝氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、亮氨酸含量与对照组差异有显著性(P＜0.05).结论脑囊虫病患者脑脊液氨基酸含量发生改变,这可能与虫体的生长、发育及脑部的病理变化有关.     

Dot-IGSS,Dot-IGS和Dot-ELISA检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的比较研究

应用自制的直径２０ｎｍ的胶体金标记ＧＡＲ－ＩｇＧ，以斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）、斑点免疫金染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种方法，同时检测９９例脑囊虫病人脑脊液（ＣＳＦ）中循环抗原（ＣＡｇ），阳性率分别为９４．９５％、９３．９４％和９２．９３％。检测５１份非囊虫病患者和６２例其他脑部疾病患者的ＣＳＦ，三种方法均为阴性。诊断指数分别为１９４．９５％、１９３．９４％和１９２．９３％。检出ＣＡＳ的最小量Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为２４４ｎｇ／ｍｌ．Ｄｏｔ－ＩＧＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为４８８ｎｇ／ｍｌ。试验表明三种方法诊断脑囊虫病具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行．有希望用于脑囊虫病的临床诊断。     

DOT-ELISA for detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in human cerebrospinal fluid using a new solid-phase (resin-treated polyester fabrics). Preliminary report

A dot enzyme-linked immunosorbent assay (DOT-ELISA) was developed to detect specific antibodies in cerebrospinal fluid (CSF) for human neurocysticercosis immunodiagnosis, with Cysticercus cellulosae antigen dotted on a new solid-phase. This was represented by sheets of a synthetic polyester fabric impregnated with a polymerized resin (N-methylol-acrylamide). A very stable preparation was thus obtained, the antigen being covalently bound by cross-linking with free N-methylol groups on the resin. Since robust, no special care was necessary for handling the solid-phase. The test could be performed at room-temperature. From 30 CSF samples assayed, 14 were positive, from a group of 15 cases of neurocysticercosis, with titers from 1 to 128; 15 other samples, from normals or other neurological diseases, were all negative. Test characteristics seem to indicate it as adequate for epidemiological surveys. A more detailed study on sensitivity, specificity, reproducibility and the use in serum samples is being conducted.     

中药灭囊灵对体外猪囊尾蚴损伤作用的扫描电镜观察

应用扫描电镜观察了药物体外作用于猪囊尾蚴的结果。２０％中药灭囊灵和０．０４％吡喹酮作用后均未见脱囊,二者对猪囊尾蚴的囊壁具有明显破坏作用,表现为囊壁萎缩,皮层外质膜受损,微毛结构不清或脱落,表面布满颗粒状物。１％阿苯达唑组有４６．７％囊尾蚴已脱囊,对脱囊囊尾蚴的颈节上皮有一定损伤作用。表明中药对猪囊尾蚴具有明显杀伤作用     

小鼠脾内注射日本血吸虫病患者尿液循环抗原制备单克隆抗体

目的： 探讨用一种快速免疫方法制备抗人尿液日本血吸虫循环抗原的单克隆抗体。方法： 将日本血吸虫病患者尿液用１５％ 三氯醋酸提取循环抗原后采用脾内直接注射法免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ小鼠制备单克隆抗体。结果： 建立了 ２ 株分泌抗人尿日本血吸虫循环抗原的单克隆细胞株２ Ｅ６ 及２ Ｂ１１,两者免疫球蛋白鉴定均属 Ｉｇ Ｍ 类, Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ测得单抗对尿液循环抗原（ Ｉ Ｈ Ｕ Ｃ Ａｇ）,效价分别为２．５６×１０５ 和６．４×１０４ 。琼脂双扩散试验显示２ 株单抗与正常人尿三氯醋酸提取物均不能形成沉淀线,而２ Ｅ６ 与日本血吸虫病患者尿液循环抗原能产生沉淀线。分别用２ Ｂ１１ 和２ Ｅ６ 腹水为捕捉抗体, Ｈ Ｒ Ｐ Ｈ１１ 为酶标抗体检测 １２ 例急性血吸虫病患者尿液,依次为６ 例和３ 例阳性,８ 例正常人尿液均为阴性。结论： 用血吸虫病患者尿液提取的循环抗原经脾脏注射免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠制备单克隆抗体用于检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原是可行的。