人子宫内膜基质细胞及上皮细胞的分离

为获得供人胚胎联合培养的人子宫内膜上皮和基质细胞标本，必须进行人子宫内膜上皮和基质细胞的分离和培养。为此，我们对传统的Ｋｅｖｉｎ［１］方法进行改进，现介绍如下。一、材料及方法１．标本来源：选自１９９６年１０月～１９９７年１２月在山东省立医院妇产科因子宫肌瘤做子宫切除术病例１０例，年龄３６～４８岁，月经周期规律（２８～３２天），术前３个月未用激素，病理检查为增殖期至早分泌期子宫内膜。２．子宫内膜上皮细胞及基质细胞的分离：参照Ｋｅｖｉｎ等［１］方法加以改良：术后立即刮取子宫内膜，置于含无菌Ｄ－Ｈａｎ…     

白介素-1β对髓核细胞MMP-1、2、9、13表达的影响

目的探讨IL-1β对人椎间盘髓核细胞表达基质金属蛋白酶MMP-1、2、9、13的作用。方法分离人椎间盘髓核细胞进行单层培养并利用甲苯胺蓝、番红O染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色进行鉴定,而后分别用10ng／ml和50ng／ml重组人IL—1β刺激体外培养的髓核细胞,RT-PCR检测基质金属蛋白酶-1、2、13的表达,定量PCR检测基质金属蛋白酶-9的表达。结果10ng／ml和50ng／ml重组人IL-1β均可促进髓核细胞基质金属蛋白酶-1、2、9、13的表达（P〈0．05）;基质金属蛋白酶-9、13表达随IL-1β浓度升高而升高（P〈0．05）。结论IL—1β可以促进人椎间盘髓核细胞表达基质金属蛋白酶-1、2、9、13,其加速了椎间盘基质分解的作用亦可能通过上述细胞因子的介导。     

尿中基质金属蛋白酶-9及组织金属蛋白酶抑制剂-1在慢性肾脏病中的临床意义

目的：探讨尿液中基质金属蛋白酶-9（MMP -9）和组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP -1）水平及其与尿蛋白、肾功能的关系。方法：将69例慢性肾脏病（CKD）分为小量蛋白尿（〈1．0 g/24 h）、中等量蛋白尿（〉1．0 g,〈3．5 g/24 h）、大量蛋白尿组（≥3．5 g/24 h）;20例健康体检者作为对照组者。用酶联免疫吸附法（ELISA 法）测定尿液中 MMP -9和 TIMP -1的水平,同时测定血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）,分析它们之间的关系。结果：（1）CKD 各组尿 MMP -9及 TIMP -1水平均显著高于健康对照组（均 P 〈0．01）,3组间 MMP -9差异无统计学意义（P 〉0．05）;大量蛋白尿组 TIMP -1显著高于中、小蛋白量组（P 〈0．01）,但中、小蛋白尿组之间差异无统计学意义（P 〉0．05）。（2）大、中量蛋白尿组血 BUN、Scr 均显著高于小量蛋白尿组（P 〈0．01）。（3）尿 TIMP -1与尿蛋白（r =0．412,P 〈0．01）及 Scr（r =0．263,P 〈0．05）均呈正相关。尿 MMP -9与尿蛋白、Scr 均无相关性（均 P 〉0．05）。结论：CKD 时肾内促进 ECM 降解和抑制降解酶均增高,但抑制降解作用大于促进降解作用。尿中 TIMP -1明显增高且与尿蛋白量、Scr 均成正相关,故尿中 TIMP -1可以间接反映 ECM 聚积和纤维化。     

不同负压吸引装置对小鼠皮肤分泌胶原蛋白和基质金属蛋白酶1及转化生长因子-β的影响

目的:比较圆拱形装置和敷料型装置对吸引区皮肤的胶原蛋白、基质金属蛋白酶(MMP-1)、转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响,探讨受吸引区皮肤的改变方式及机制。方法:2018年3—5月,在广州南方医院动物实验中心用已建立的动物模型,将54只小鼠均分为3组：对照组、圆拱形装置组、敷料装置组。分别在负压吸引处理后1、3、...     

大肠癌组织中基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达及对微血管生成和肿瘤转移的影响

目的　探讨基质金属蛋白酶 -9(MMP -9)与基质金属蛋白酶抑制剂 -1(TIMP -1)在大肠癌中的表达及其与血管生成 ,侵袭转移之间的关系。方法　采用免疫组化S -P法 ,检测 46例大肠癌组织中MMP -9,TIMP -1的表达和微血管密度之间的关系。结果　MMP -9的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移明显相关 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;TIMP -1的表达与Dukes分期、淋巴结转移明显相关 ( P <0 .0 5或 P <0 .0 1) ;MMP -9表达阳性的大肠癌组织微血管密度 (MVD)值明显高于表达阴性者 (P <0 .0 1)。结论　MMP -9、TIMP -1的表达和微血管生成与大肠癌侵袭转移密切相关     

人基质金属蛋白酶1组织抑制剂转基因小鼠肾小管间质炎症的改变

目的观察基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)过表达对肾小管间质炎症反应的影响。方法采用人TIMP-1转基因小鼠和野生型小鼠(n=8)构建单侧输尿管梗阻(UUO)模型。以3 d和14 d为时间点,Masson染色观察肾组织形态学变化,间接免疫荧光法观察肾组织内F4／80阳性细胞的表达;Western印迹检测TIMP-1、TIMP-2、MMP-2、MMP-9和ICAM-1的蛋白表达,明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性,反向酶谱法检测TIMP-1的活性。结果UUO术后肾小管间质病理损伤加重[肾间质纤维化面积(46．24±6．58)％比野生型(36．33±5．12)％．P< 0．05],F4／80阳性细胞数目增加[(68．9±15．6)个／视野比野生型(52．4±13．3)个／视野,P< 0．05],ICAM-1蛋白表达显著上调,术后14 d上述改变在转基因组中更为显著(P<0．05)。UUO术后TIMP-1蛋白表达及活性上调,在术后14 d达高峰,在转基因组中增加更为显著(P< 0．05)。MMP-2和MMP-9的蛋白表达及活性在术后逐渐下降,UUO术后14 d转基因组降低更为显著(P<0．05)。结论TIMP-1过表达可通过增强炎症加重肾小管间质损伤。     

人白介素-13对牛主动脉内皮细胞表达黏附分子的影响

目的研究人白介素-13（hIL-13）对牛主动脉内皮细胞（BAECs）表达细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和E-选择素的影响，为hIL-13应用于诱导异种移植免疫耐受、减轻异种移植排斥反应提供实验依据。方法用不同浓度的hIL-13（2、5、10、20及40ng／ml）孵育BAECs2h后，再与肿瘤坏死因子-α（TNF-α．4ng／ml）共孵育6h或18h；应用细胞-酶联免疫吸附分析方法（Cell—ELISA）检测BAECs表面的E-选择素和ICAM-1的表达；用MTT方法测定hIL-13对BAECs活性的影响。结果用hIL-13在5～20ng／ml浓度内预处理BAECs后，能明显抑制TNF-α诱导的E-选择素与ICAM-1的表达，并呈现一定的剂量依赖性（P〈0．01）。经不同浓度hIL-13处理的BAECs活性与未经hIL-13处理者相比差异无统计学意义。结论hIL-13能明显抑制BAECs表达E-选择素与ICAM-1，诱导异种移植的免疫耐受，且hIL-13对BAECs无损伤作用。     

细胞外基质蛋白-1与基质金属蛋白酶-9在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨细胞外基质蛋白-1 (ECM1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肝细胞癌组织中的表达及其与肝癌侵袭、转移及预后的关系.方法 采用免疫组织化学法检测120例肝癌组织及17例正常肝组织中ECM1和MMP-9的表达情况.结果 ECM1和MMP-9在肝癌组织中的表达阳性率分别为73.3％和65.0％,明显高于正常肝组织中的23.5％和11.8％.ECM1和MMP-9在肝癌组织中的表达与肿瘤血管侵犯及TNM分级相关,而且MMP-9还与肿瘤的大小、结节数、分化程度和肝硬化程度有关(P＜0.05).两者均与患者的年龄、性别、AFP水平、HBsAg、Child分级及肿瘤包膜无关(P＞0.05).ECM1和MMP-9阳性表达患者的总生存率和无瘤生存率明显低于阴性表达患者.ECM1与MMP-9两者在肝癌中的表达显著正相关(r=0.585,P＜0.001).结论 ECM1和MMP-9的表达与肝癌的侵袭特性相关,与肝癌术后复发密切相关,可作预测肝癌患者手术预后及复发的指标.     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶9、转化生长因子β1表达的影响

目的 探讨霉酚酸酯（MMF）对糖尿病（DM）大鼠肾脏的保护作用及其机制。 方法 将实验动物分为正常对照组、DM组及MMF治疗组。MMF组给予MMF(15 mg/kg,口服,1次/d) 治疗。8 周后检测各组大鼠尿蛋白量（24 h）、内生肌酐清除率（Ccr）、血糖;HE染色观察肾脏病理改变;免疫组化及RT-PCR法检测肾组织中基质金属蛋白酶9（MMP-9）、转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。 结果 DM组大鼠血糖[（22.18±3.36） mmol/L比（6.40±0.87）mmol/L]、尿蛋白量（24 h）[（26.80±0.82） mg比（6.64±1.42） mg]、Ccr[（0.220±0.380） ml/min比（0.098±0.015） ml/min]显著高于对照组（P ＜ 0.05）。MMF组的尿蛋白量（24 h）[（16.17±1.15） mg]、Ccr[（0.220±0.380） ml/min比（0.207±0.377） ml/min]均显著低于DM组（P ＜ 0.05）。与DM组比较,MMF组肾小球肿大、系膜细胞增生显著减轻。肾组织中MMP-9在对照组表达较多,主要在肾小球系膜细胞胞质内及肾小管上皮细胞,DM组表达较弱,MMF组介于两组之间,组间差异均有统计学意义（P < 0.05）。TGF-β1在正常对照组大鼠肾组织有少量表达,在DM组表达较强,在MMF组介于两组之间,组间差异亦均有统计学意义（P < 0.05）。 结论 MMF可降低DM大鼠尿蛋白排泄、Ccr,减轻早期肾小球肥大,此作用可能与MMF上调肾组织中MMP-9表达、下调TGF-β1的表达、减少系膜外基质的沉积有关。     

子宫内膜异位症子宫内膜及输卵管细胞对鼠胚胎发育的影响

目的探讨子宫内膜异位症(内异症)子宫内膜及输卵管上皮细胞对小鼠胚胎体外发育的影响。方法小鼠2细胞期胚胎202个与卵巢巧克力囊肿患者术中切除的子宫内膜及输卵管上皮细胞共培养(实验组),314个与非卵巢巧克力囊肿患者子宫内膜及输卵管上皮细胞共培养作为对照。结果体外培养72~96h后,与对照组输卵管上皮细胞及子宫内膜共培养时有25.7%和26.2%的2细胞期胚胎发育到扩张期囊胚,与实验组输卵管上皮细胞共培养有25.9%发育到扩张期囊胚,二者无显著差异(P>0.05),而子宫内膜仅为11.1%,二者有显著差异(P<0.05)。结论内异症患者的输卵管上皮细胞对鼠早期胚胎体外发育无影响;子宫内膜对胚胎发育有明显的抑制作用,这可能与内异症的生育率降低有关。     

转化生长因子-β1对人软骨细胞基质金属蛋白酶-1mRNA及其阻滞剂mRNA表达的影响

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对人透明软骨细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其阻滞剂T(IMP-1)mRNA表达的作用及相关意义,更好地理解骨关节炎软骨损伤的相关机制。方法TGF-β1作用于传代培养的人软骨细胞12h,浓度分别为1ng/mL、10ngm/L、100ng/mL;上述不同浓度TGF-β1与白介素-1β(IL-1β)10ng/mL组成联合作用组,继续培养12h。应用逆转录PCRR(TP-CR)方法及实时荧光定量方法(FQP-CR),检测TGF-β1及其与IL-1β联合作用于传代培养的人透明软骨细胞MMP-1、TIMP-1mRNA表达的含量。结果正常对照组透明软骨细胞可见MMP-1、TIMP-1mRNA扩增产物,而实验组TGF-β11ng/mL、10ng/mL、100ngm/L作用于透明软骨细胞12h后,MMP-1mRNA表达逐渐降低,TIMP-1mRNA表达逐渐增高;TGF-β1与IL-1β联合作用后,随着TGF-β1浓度的升高,MMP-1mRNA表达逐渐降低,TIMP-1mRNA表达逐渐增高,各组之间差异有显著性意义(P<0.05)。提示TGF-β1与MMP-1、TIMP-1mRNA表达之间存在剂量依赖关系。结论不同浓度TGF-β1按照剂量依赖方式抑制人软骨细胞MMP-1mRNA基因的表达,刺激人软骨细胞TIMP-1mRNA基因表达;TGF-β1具有对抗IL-1β对人软骨细胞MMP-1、TIMP-1mRNA表达的作用,也呈现剂量依赖关系。研究结果对揭示骨关节炎的发病机理,指导其治疗具有积极意义。     

基质金属蛋白酶-9在临床上的应用

肿瘤细胞的侵袭和转移过程是一个复杂多步骤过程，其中金属蛋白酶-9起着一个重要作用。本文从它的结构、基因表达、检测、功能和金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）的关系及在各肿瘤中的表达作一综述。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1在青年特发性气胸肺组织中的表达及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及其抑制物-1(tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)在青年特发性气胸肺组织中的表达及临床意义.方法 随机选取我科2009年1月至2010年5月治疗的30例青年特发性气胸患者肺大疱组织标本作为实验组,同期获取10例青年正常肺组织标本(因肺裂伤行局部楔形切除肺组织)作为对照组,采用EVG染色法和免疫组织化学SABC法分别观察肺弹力、胶原纤维结构变化及MMP-9与TIMP-1在两组肺组织中的表达状况.结果 实验组中肺弹力、胶原纤维密度稀疏,正常结构伴有明显断裂、萎缩,局部肺泡壁中有纤维缺失;对照组肺组织纤维结构基本完整.MMP-9在实验组肺组织中阳性表达率为76.7%(23/30),在对照组中阳性表达率为30%(3/10);TIMP-1在实验组中阳性表达率为66.7%(20/30),在对照组中阳性表达率为10%(1/10)(P＜0.05).与对照组相比MMP-9 及TIMP-1在实验组中表达明显增多、增强,以TIMP-1表达升高更为显著,且存在MMP-9/TIMP-1表达比例失衡.结论 MMP-9、TIMP-1在局部肺组织中的表达增多、增强及其比值的失衡与肺大疱的形成以及青年特发性气胸的发生、发展有着密切的关系.     

IgA肾病患者血清基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制物-1的表达及意义

IgA肾病（IgA nephropathy,IgAN）是我国最常见的原发性肾小球疾病,发病率409／6～47．29／6[1,2]。本病以肾小球系膜IgA沉积为主要特征,以细胞外基质（extracellular matrixc,ECM）大量积聚为主要病理改变,ECM积聚导致系膜基质扩张、滤过面积减少,最终发展为肾小球硬化和肾间质纤维化,引起肾衰竭。     

基质金属蛋白酶及其抑制物与子宫内膜异位症的研究进展

子宫内膜异位症是妇科的常见疾病,其发病机制至今未明。近年来研究发现,基质金属蛋白酶（MMPs）及其抑制物（TIMPs）在该病的发生及发展中起了重要作用,现就MMPs及其抑制物TIMPs在子宫内膜异位症中的研究进展做一综述。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制因子在肾细胞癌组织中的表达和意义

目的　探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)和金属蛋白酶组织抑制因子 1(TIMP 1)在肾细胞癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法　采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶 (SP)法检测 5 5例肾细胞癌中MMP 9和TIMP 1的表达情况。结果　MMP 9、TIMP 1蛋白在肾细胞癌和正常肾组织中的阳性表达率各为 63 .63 %和 10 .0 0 % (P <0 .0 5 ) ;60 .0 0 %和10 .0 0 % (P <0 .0 5 )。在肾癌中 ,MMP 9蛋白表达与肿瘤Robson分期、肾包膜侵袭和淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 ) ,而与组织学类型无关 (P >0 .0 5 ) ;TIMP 1蛋白表达与肾细胞癌的临床病理参数无关 (P >0 .0 5 )。结论　MMP 9蛋白高表达参与了肾癌的发展 ,MMP 9和TIMP 1的平衡失调可能在肾癌的侵袭转移中发挥重要作用。     

基质金属蛋白酶-9及组织抑制剂-1与肾间质纤维化

肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis，RIF）几乎是所有肾脏疾病发展的最终结果，其形成涉及到细胞、细胞因子和细胞外基质（ECM）等多种因素、多个环节相互作用和相互调节的复杂过程，最终结局是大量ECM的过度积聚。近年来对肾间质纤维化研究转向ECM的降解方面，其中基质金属蛋白酶（matrix metallopmteinases，MMPs）是最重要的一种，它是一组结构及功能同源的Zn^2＋依赖型肽链内切酶的总称，现已发现的MMPs有20多种，可分为几大类。基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of matrix metalloproteinases，TIMPs）是其内源性的一组特异性抑制因子肾小管间质纤维化主要是Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型间质胶原及Ⅳ型膜胶原、糖蛋白和蛋白多糖的堆积,MMPs／TIMPs平衡失调肾间质纤维化发病的关键，而MMP-9及TIMP-1为最重要的一对。     

β1转化生长因子对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌相关的基质金属蛋白酶的影响

目的探讨β1转化生长因子(TGF-β1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的调节作用,及TGF-β1与瘢痕的关系。方法培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞经TGF-β1处理,采用酶联免疫法(ELISA)测定瘢痕疙瘩成纤维细胞上清液中MMP-1、MMP-2和TIMP-1的水平。结果瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1、MMP-2和TIMP-1的生成量显著高于正常皮肤(P<0.01);加TGF-β1处理后,瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1的分泌量显著降低(P<0.01),MMP-2的分泌量显著升高(P<0.01),而TIMP-1的分泌量无显著改变(P>0.05)。结论培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞显示MMP-1、MMP-2和TIMP-1增加,TGF-β1在生成调节过程中起重要作用。     

胃癌患者血清选择素-E和整合素-β1及细胞间黏附分子-1表达水平的临床意义

目的研究血清选择素-E(E-selectin)和整合素-β1(integrin β1)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达水平的临床意义.方法应用酶联免疫吸附法 (ELISA)技术检测 47例健康人(对照组)和 57例胃癌患者(胃癌组)术前及术后7d血清 E-selectin、integrin β1和 ICAM-1含量,并进行对照.结果胃癌组患者术前血清E-selectin、ICAM-1及integrin β1均高水平表达,阳性率分别为 24.6%、33.3%和 28.1%. ICAM-1和 integrin β1显著高于对照组(均 P< 0.01);但 E-selectin水平两组比较无统计学意义(P=0.64).其术前的表达水平与胃癌分期、胃壁浸润、淋巴结转移和远处转移存在显著相关性(P<0.05或P<0.01).肿瘤根治性切除的患者3个黏附分子的血清浓度显著降低;而无法手术切除的患者,其水平几乎保持不变;其高水平表达是患者预后的显著预测因子,但不能单独评估肿瘤分期.结论血清 E-selectin、ICAM-1和Integrin β1表达水平可以反映肿瘤的病理进展及转移情况.     

基质金属蛋白酶9及组织型基质金属蛋白酶抑制因子1在大鼠外伤性脑水肿中的表达及意义

目的 探讨大鼠脑损伤中基质金属蛋白酶9(MMP9)及组织型基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)的表达变化规律及意义.方法 采用Feeney自由落体法制作大鼠轻度脑损伤模型,采用干湿重法测定脑组织含水量;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对大鼠脑损伤模型中MMP9及TIMP1 mRNA进行检测并分析两者比值.结果 实验组脑组织含水量(BWC),MMP9mRNA及TIMP1 mRNA表达量及两者比值均明显高于对照组,P值分别为0.013、0.000、0.000及0.011,差异有统计学意义(P<0.05),MMP9 mRNA与TIMP1mRNA表达量及两者比值与BWC均呈正相关,r值分别为0.654、0.355(P<0.05).结论 MMP9/TIMP1的比例失衡可能在外伤性脑水肿的发生发展过程中起重要作用.