Jagged1基因敲除小鼠血管内皮发育异常

目的:探讨Jagged1基因敲除小鼠模型中,胚胎血管发育异常和血管重塑严重缺陷。方法:通过基因型鉴定确认纯合子Jagged1基因敲除小鼠(Jag-/-),分析9.5天小鼠胚胎血管发育状态和血管内皮超微结构;分离胚胎内皮细胞培养于I型鼠尾胶中,观察环样结构生成。结果:与正常野生型小鼠相比,纯合子Jagged1基因敲除小鼠血管内皮延伸段薄弱,内皮连接以点状连接为主,存在明显的结构缺陷;分离获得的胚胎内皮细胞鼠尾胶培养时,环样结构生成能力下降。结论:Jagged1基因敲除可导致小鼠血管内皮发育异常,内皮结构的脆弱,成环能力下降,是纯合子基因敲除小鼠胚胎广泛出血现象的发育结构基础。     

国人胎儿脊柱发育宽度的X线照相研究

目的：对胎儿脊柱发育进行X线研究，为诊治脊柱先天性疾病提供形态学依据。方法：用X线摄片的方法，在正位片上，选择存在于整个胎生期内椎弓两个骨化中心间的距离为标志，对120例正常胎儿（胎龄12周60例，24周60例）脊柱宽度的发育进行了观测，结果：两组脊柱宽度发育的形式表明，在12周内，与胸，骶段椎骨宽度相比较，颈椎和腰椎的增大不明显；至24周，胎儿颈椎和腰椎宽度发生了明显的增大，两组C1椎弓两个骨化中心间的距离 ，总是比其它椎骨大，在第12周，脊柱的宽度自C2-T7有一个逐减的趋势，而T8-L1宽度逐增，直至L1宽度约达与T2等值的水平，从L1-S1宽度大致保持不变，在第24周，脊柱的宽度有一完全不同的形成，C2比C1的宽度大为减小，C3-C6迅速增宽，T1较C7有明显减小，T2-T7逐减，T8-S1逐增，宽度几乎恢复到T1水平，自S2开始，宽度又迅速降低，至S5成为最窄部分，结论：某些椎骨有着相似的生长类型，说明脊柱的发育与脊髓存在着复杂的相关性。     

脊髓与脊柱长度的相关发育

所测116例脊髓长度与脊柱长度、身长之比,都随年龄增长而逐渐减少,这说明脊髓长度的生长慢于身长和脊柱长度的生长。成人组脊髓长度所占坐高之百分比大于儿童组,这可能是因为儿童头长占坐高的比值比成人大的缘故。脊髓各段占相应脊柱各段长度之百分比,以颈段最大,这可能与脊髓颈段有8节而脊柱颈段仅7节有关,也可能与脊髓颈段增长较多而脊柱颈段增长较少有关。脊髓腰、骶段所占相应脊柱段长度之百分比较小,说明该部脊髓生长速度明显慢于相应脊柱段,     

同源盒基因Msx在颅颌面发育中的作用

脊椎动物Msx基因为非连锁,包含果蝇肌节同源盒基因相关的一系列基因.在脊椎动物胚胎发育过程中,这些基因在组织间相互作用的多发位点表达.基因敲除鼠和人类的畸形表现型的研究显示, Msx基因介导的诱导组织间的相互作用,对正常颅颌面、肢体和外胚层器官的形态发生至关重要.该文就Msx基因在胚胎发育过程中的作用,以及该基因突变所致的颅颌面发育异常等方面的研究进展,进行综述.     

同源盒基因Msx在颅颌面发育中的作用

脊椎动物Msx基因为非连锁,包含果蝇肌节同源盒基因相关的一系列基因。在脊椎动物胚胎发育过程中,这些基因在组织间相互作用的多发位点表达。基因敲除鼠和人类的畸形表现型的研究显示,Msx基因介导的诱导组织间的相互作用,对正常颅颌面、肢体和外胚层器官的形态发生至关重要。该文就Msx基因在胚胎发育过程中的作用,以及该基因突变所致的颅颌面发育异常等方面的研究进展,进行综述。     

Osterix对成骨细胞分化影响的研究进展

Osterix(OSX)是最近由Nakashima等[1]发现的成骨细胞特异性转录因子,只在发育的骨组织中特异性表达,是成骨细胞分化和骨形成过程中所必需的转录因子[2]。骨髓基质干细胞分化为表达典型的成骨性标志基因的成骨细胞需要OSX的作用。OSX自身的突变或缺失也可导致骨形成的迟滞或停止。本文就OSX的结构组成,对成骨细胞生物活性的影响及其调节机制进行综述。1OSX的结构与生化特性OSX是一种具有锌指基序结构域的转录因子,由428个氨基酸组成。在其氨基酸序列的C末端存在的3个C2H2锌指结构为DNA结合域,此锌指结构与转录因子Sp1、Sp3和Sp4…     

HEY基因家族在哺乳动物心血管发育中的作用

哺乳动物的HEY基因家族与果蝇Hairy基因具有相似的螺旋-环-螺旋结构,二者均为转录因子,是目前发现的Notch信号通路中为数不多的靶基因之一。本文旨在通过对HEY基因家族结构与功能的特点分析,阐释它们在心血管发育中的重要作用,从而为揭开HEY基因家族对心血管发育的作用机制及分子调控机制提供理论基础。     

Dlx基因调控颌面部发育的研究进展

远端较小同源盒(Dlx)基因属于同源盒基因家族的一员,在脊椎动物生物学的各个方面发挥着重要的调节作用,包括控制肢体的形成、神经元亚群的分化及与神经嵴相关的各种功能。大量研究表明,Dlx基因可以通过调控成牙、成骨过程,影响上下颌骨、腭和牙等的发育,在颌面部发育中发挥至关重要的作用。本文就Dlx基因家族对颌面部发育的调控作用与机制的最新研究进展进行综述,以期为口腔医学领域组织工程再生的研究提供新思路。     

Osterix和脂联素与骨代谢的关系

正常骨代谢周期中,破骨细胞（OC）的骨吸收与成骨细胞（OB）的骨形成相互偶联,维持一种动态平衡,不断进行骨重建。当OC的骨吸收相对增强或OB的骨形成相对减弱,骨吸收大于骨形成导致骨质丢失时,将导致骨质疏松。近年来,随着细胞生物学和分子生物学研究的不断深入,细胞因子在骨代谢过程中的作用越来越受到人们的重视。细胞因子调控骨代谢过程中OB和OC的分化,增殖与功能活性,并通过自分泌、旁分泌和细胞黏附方式在骨重建中发挥重要作用。Osterix和脂联素便是新近发现的二种因子。     

Isll在后肢发育过程中的表达及作用

目的研究Isll在后肢发育过程中的表达及作用。方法使用Isll—nLacZ、Isll-Cre、HoxB6-Cre和Isllvt小鼠模型,以及X—gal染色、骨染色、组织分析方法研究Isll在后肢发育过程中的表达及作用。结果随着小鼠后肢开始发育,在胚胎期第10．5天,Isll在后肢原基高表达。在胚胎逐渐发育至胚胎期第12．5天的过程中,Isll在后肢的表达逐渐下调。在胚胎期第12．5天,Isll仅在后肢的最后部表达。但在胚胎期第13．5、15．5天,Isll在后肢的后半部表达明显升高,主要在后肢骨骼肌细胞中表达。Isll—Cre谱系研究显示,Isll参与后肢的骨和骨骼肌细胞的形成。利用HoxB6．Cre在后肢中敲除Isll可导致突变鼠后肢发育严重异常,伴有坐骨,耻骨,腓骨和跟骨及脚趾骨发育不良或缺失,突变鼠5号脚趾缺失最多见,而1号脚趾缺失累及较少。突变鼠后肢骨骼肌细胞的中央核比例远高于对照组。结论Isll在小鼠后肢发育过程中动态表达,参与后肢骨骼肌细胞和骨细胞的发育,对后肢发育过程中近一远和前后轴的建立起重要作用。     

LIGHT在低氧性肺动脉高压形成中的作用及机制

目的 初步探讨LIGHT在低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)形成中的作用及其机制.方法 将20只8周龄雌性C57BL/6J小鼠[体质量(17.90 ±0.91)g]和20只8周龄雌性LIGHT-/-C57BL/6J小鼠[体质量(17.55 ±0.93)g]分为4组(n=10):①野生小鼠常氧组(WT-C组)、②野生小鼠低氧组(WT-H组)、③LIGHT KO小鼠常氧组(LIGHT KO-C组)、④HGHT KO小鼠低氧组(LIGHT KO-H组).WT-H组和LIGHT KO-H组小鼠置于模拟6000 m低压舱内连续低氧饲养30 d,WT-C组和LIGHT KO-C组小鼠舱外(海拔308 m)常规饲养.检测右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)和右心肥厚指数(right ventricular hypertrophy index,RVHI);HE染色观察肺小动脉结构;免疫组化检测LIGHT及其受体HVEM、LTβR表达;荧光定量PCR和Western blot检测肺组织LIGHT、HVEM和LTβR、IL-6的mRNA和蛋白水平.流式细胞术检测肺组织中各类炎症细胞的比例.结果 与WT-C组相比,WT-H组肺组织中LIGHT的mRNA和蛋白水平均显著增高(P＜0.05),WT-H组RVSP和RVHI明显升高(P＜0.05),肺小动脉明显增厚;与HGHT KO-C组相比,LIGHT KO-H组小鼠的RVSP、RVHI和肺小动脉厚度显著增加(P＜0.05),但与WT-H组相比,LIGHTKO-H组的RVSP、RVHI和肺小动脉增厚程度明显降低(P＜0.05).与WT-C组相比,WT-H组LIGHT受体HVEM表达增加,LTβR表达降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).LIGHT KO-H组与WT-H组相比,肺组织IL-6mRNA和蛋白水平显著降低(P＜0.05).流式细胞检测发现,与WT-C组相比,WT-H组小鼠肺组织中单核细胞比例降低[(3.88±0.87)％ vs (11.03±1.71)％,P ＜0.05],间质巨噬细胞比例升高[(15.56±2.69)％ vs (8.57±2.17)％,P ＜0.05];与WT-H组相比,LIGHT KO-H组的肺组织单核细胞增加[(6.55±1.01)％ vs (3.88±0.87)％,P ＜0.05],而间质巨噬细胞的比例降低[(10.87±1.68)％vs.(15.56±2.69)％,P ＜0.05].结论 慢性低氧诱导肺组织中HGHT表达增加与HPH发病机制密切相关.LIGHT可能通过HVEM信号途径促进细胞增殖、上调肺组织IL-6表达、促进肺间质巨噬细胞产生,参与HPH的形成.     

淫羊藿甙对大鼠成骨细胞功能及Osterix表达的影响

目的观察淫羊藿甙对体外培养成骨细胞功能及Osterix（Osx）表达的影响,探讨淫羊藿抗骨质疏松的作用机制。方法分别用酶消化法获得新生SD大鼠成骨细胞,在培养液中分别加入不同浓度的淫羊藿甙,观察成骨细胞的增殖功能和分化功能。用RT—PCR法测定成骨细胞OsxmRNA表达。结果增殖率测定淫羊藿甙从1ng／ml起光密度值均较对照组增加,且呈剂量依赖关系。但仅有浓度为100ng／ml时差异才有显著意义（P〈0．01）;碱性磷酸酶活性从1ng／ml起均较对照组增加,也呈剂量依赖关系,且浓度≥10ng／ml差异有显著意义;1ng／ml,10ng／ml,100ng／ml淫羊藿甙均可促进OsxmRNA表达（P〈0,05）,以10ng／ml组作用最显著。结论淫羊藿甙能通过影响成骨细胞增殖、分化、提高成骨细胞Osx基因表达水平,从而促进骨形成,发挥抗骨质疏松的作用。     

丙帕他莫在腰椎术后多模式镇痛中的应用

目的观察丙帕他莫复合芬太尼对腰椎术后镇痛的应用效果。方法 60例接受腰椎手术患者随机分成2组,每组30例。Ⅰ组手术结束前15 min给予丙帕他莫2 g,术后予芬太尼患者自控镇痛(PCA)泵静脉镇痛,Ⅱ组术后给予芬太尼PCA泵静脉镇痛。两组泵中芬太尼都按0.4μg.kg-1.h-1配置,使用48 h。观察两组患者术后拔除气管导管时间,术后48 h内各时间点的镇痛镇静评分、呼吸循环指标以及术后呕吐发生情况。结果两组患者术后拔管时间、术后各时间点镇静评分、呼吸频率、平均动脉压、心率及呕吐发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术后30 min和1、2、4、6及12 h时间点,Ⅰ组镇痛评分优于Ⅱ组(P<0.05),其余时间点两组镇痛评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论丙帕他莫复合芬太尼用于腰椎术后患者镇痛安全有效。     

Osterix和核结合因子在成骨样细胞系分化过程中的表达

目的观察小鼠前成骨细胞MC3T3E1的诱导成骨过程中,Osterix(OSX)和核结合因子(Cbfa1)及其两种亚型Cbfa1/P56、Cbfa1/P57表达的变化,了解OSX和Cbfa1表达与成骨细胞分化的关系,探求与OSX变化趋势一致的Cbfa1亚型。方法在小鼠前成骨细胞MC3T3E1培养的不同时间(0、4、10、14、18、22 d),用半定量RT-PCR法检测OSX、Cbfa1、Cbfa1/P56、Cbfa1/P57 mRNA的表达;用Western-blot法检测Cbfa1蛋白的表达;Van Gie-Son苦味酸酸性复红染色法染色细胞Ⅰ型胶原;茜素红染色观察矿化结节形成。结果MC3T3E1在诱导成骨的培养条件下,从培养第18天开始出现矿化,第22天观察到明显的矿化结节形成。OSX mRNA、Cbfa1 mRNA和Cbfa1蛋白的表达量随MC3T3E1的成熟矿化逐渐增高,而Cbfa1/P56 mRNA表达量无变化,但Cbfa1/P57 mRNA在培养第18天和第22天的表达量明显增高。结论在MC3T3E1分化过程中,OSX和Cbfa1的表达量随成骨细胞的成熟逐渐增高。在Cb-fa1的亚型中,Cbfa1/P57的表达与OSX表达趋势一致。     

小鼠成骨转录因子Osterix的克隆及其功能的初步研究

Osterix是成骨细胞分化终末期一种重要的转录因子,决定多种骨细胞标志蛋白的表达,但其作用的具体分子机制至今尚不清楚.用BMP-2诱导小鼠成肌细胞C2C12向成骨细胞分化,RT-PCR的方法是从分化了的C2C12中克隆到小鼠Osterix基因,并插入动物细胞表达载体pCDNA3.1中,用脂质体法转染C2C12细胞,发现能够促进该细胞的骨化.这证明已经成功克隆到Osterix基因,为进一步研究其分子作用机制打下基础.     

P物质在成骨细胞分化过程中对转录因子Osterix表达的影响

目的:在成骨细胞分化过程中检测转录因子Osterix的表达,探讨P物质调控成骨细胞分化及骨形成的分子机制.方法:原代培养大鼠骨髓基质干细胞(rMSCs),并诱导其向成骨细胞定向分化.采用RT-PCR法检测转录因子Osterix在P物质和/或P物质NKI受体拮抗剂L732138干预下的表达.结果:在诱导成骨细胞定向分化的过程中,与空白对照组相比,P物质组转录因子Osterix的表达增强(LSD-t=0.117,P<0.01),P物质NK1受体拮抗剂L732138组转录因子Osterix的表达差异无统计学意义(LSD-t=0.008,P>0.05);与P物质组相比,P物质与P物质NK1受体拮抗剂L732138组转录因子Osterix的表达降低(LSD-t=-0.172,P<0.01).结论:P物质可以促进转录因子Osterix的表达,其受体拮抗剂L732138具有拮抗作用;P物质可通过促进转录因子Osterix的表达,促进成骨细胞分化及骨形成.     

HBx在原发性肝癌发生中的作用研究进展

肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,而乙型肝炎病毒感染是引起肝癌的最主要原因.作为乙肝病毒X基因的表达产物HBx蛋白具有广泛的反式激活功能,其能通过直接或间接的蛋白质间相互作用参与感染肝细胞的信号转导、细胞凋亡和细胞周期调控.鉴于HBx蛋白在乙型肝炎病毒复制和在感染肝细胞中的重要作用,HBx蛋白在肝癌发生中扮演的角色及其作用机理研究,一直是HBV和肝癌研究的热点内容.