^99mTc—PYM的制备,动物实验及临床研究

研制适于临床肿瘤阳性显像的标记产品＾９９Ｔｃ－ＰＹＭ。方法：在原工作基础上，提高＾９９ｍＴｃ－ＰＹＭ的放射性强度，并通过注射前往产品中加入维生素Ｃ，提高肿瘤对＾９９ｍＴｃ－ＰＹＭ的摄取百分率。结果：定量判断肺部恶性病灶的灵敏度，特异性和准确性分别为９２％，１００％和９３％。＾９９ｍＴｃ－ＰＹＭ显像可用于肺癌诊断及分期，具有对疗效评价及预后判断的能力，该方法简便，安全，值得临床进一步推广应用。     

99Tcm标记VPAC1配体TP1724及其在动物体内分布与显像研究

目的 制备同位素99Tcm标记血管活性肠肽受体(vasoactive intestinal peptide receptor,VIPR)结合肽TP1724(标记率＞90％),鉴定其理化性质,并探讨其在正常动物体内的生物分布特点、示踪动力学及显像表现.方法 制备G(D) AGG-Aba-VP2 (TP1724);99Tcm间接标记TP1724(SnCl2·2H2O还原法),纸层析法测定标记率和比活度;稳定性实验(体外)、人血浆蛋白结合实验、半胱氨酸置换实验及脂/水分配实验等鉴定标记多肽的理化性质;35只正常小鼠分成7组,每只尾静脉注射3.7 MBq99Tcm-TP1724后于不同时间处死,收集9种组织器官并称取质量、分别测定各种组织器官的放射性,换算为％ ID/g(每克组织百分注射剂量);9只健康家兔各静脉注射37 MBq 99Tcm-TP1724后不同时间取血,测定血液放射性并换算为kBq/L,经DAS 3.1.6软件处理判断最佳房室模型,并得出动力学参数;5只健康家兔分别静脉注射37 MBq 99Tcm-TP1724,SPECT动态显像观察体内放射性分布变化.结果 99 Tcm-TP1724的标记率(96.57±0.71)％,比活度(25.52±0.29) TBq/mmol.室温下隔绝空气放置4h,放化纯度为(93.64±2.25)％;Sephadex G-50柱层析示,99Tcm-TP1724血浆蛋白结合率约为6.61％;99Tcm-TP1724与不同浓度半胱氨酸37℃温育1h后,未结合99Tcm含量无明显变化;脂/水分配系数lg P为-(1.99 ±0.02).99Tcm-TP1724在健康家兔体内的动力学符合权重为1的二室模型,分布半衰期t1/2α为(2.64±1.32) min,消除半衰期t1/2β为(78.36±13.38) min.体内生物分布和/或动态显像示:血液放射性清除迅速;颈部及胃区未见异常放射性聚集,脑部显示低放射性分布;放射性大部分通过肾脏排泄,少量经肝胆分泌.结论 99Tcm-TP1724标记方法简便、标记率和比活度高、稳定性好、体内动力学性质优良.     

99mTc-PDGFR-β AODN的制备及其生物分布

目的:寻求一种理想的99mTc标记大鼠血小板衍化生长因子受体-β(PDGFR-β)反义脱氧寡核苷酸(AODN)的方法,并观察标记产物的生物学分布以探讨其用于防治冠状动脉再狭窄的可能性. 方法: 先使长度为18个碱基的单链PDGFR-β AODN与双功能螯合剂NHS-MAG3耦联,然后进行99mTc标记,测定不同条件下标记率,分析确定最佳标记条件.常规测定放化纯度和比活度,并对标记物进行稳定性和正常小鼠体内分布实验. 结果: ①最佳标记条件下平均标记率达70%(最高为73.2%),经P4层析柱纯化后放化纯度>95%,比活度7.4～11.1MBq(200～300μCi)/ μg;② 99mTc-MAG3-AODN在室温下生理盐水中及37℃下新鲜人血清中稳定性良好,与血清蛋白结合率为6%～8%;③ 99mTc-MAG3-AODN在正常小鼠体内稳定性良好,在肾、肝中摄取较高. 结论: 以NHS-MAG3为鳌合剂标记得到的99mTc-MAG3-AODN具有良好的稳定性,为下一步进行细胞和动物实验提供了基础.     

99Tcm-RGD-4CK在健康家兔体内的示踪动力学研究

目的 探讨99Tcm-RGD-4CK在健康日本大耳兔体内的示踪动力学.方法 采用预锡化法99Tcm直接标记RGD-4CK.静脉注射99Tcm-RGD-4CK 37 MBq(0.5 ml),在注射后1.5～240 min时间内分10个时相点采血并称重,测定血样品放射性计数,结果经参考源衰减校正,最后换算为kBq/ml血液.血样放射性活度数据应用DAS软件处理,结合αvβ3受体在正常体内实际表达情况进行室模型判断,并得出相应的示踪动力学参数.结果 99Tcm-RGD-4CK的标记率为(96.86±1.24)%,比活度为(13.01±0.17)TBq/mmol.99Tcm-RGD-4CK在正常家兔体内符合二室模型示踪动力学过程(权重数为1/C).分布相半衰期(T1/2α)为(4.19±2.17)min,消除相半衰期(T1/2β)为(69.32±0.00)min,转运速率常数K10、K12与K21分别为(0.013±0.002)、(0.138±0.139)、(0.095±0.063)/min,清除率(CL)为(2.00±1.00)ml/min.结论 99Tcm-RGD-4CK制备方法简便,标记率高,无需分离纯化而直接应用;99Tcm-RGD-4CK在正常家兔体内的示踪动力学符合权重数为1/C的二室模型.     

99mTc-octreotide的动物体内分布、药物动力学和临床初步应用研究

为研究99mTc-octreotide作为肿瘤生长抑素受体显像剂的可能性,在无菌、无热原及安全实验的基础上,经动物体内分布、正常人药物动力学一系列实验后,进行临床受体显像.结果:动物体内分布实验显示血、心放射性呈"双峰"现象,99mTc-octreotide经泌尿系统排泄,正常人药物动力学拟合方程符合二室开放模型,t1/2 α=21分钟,t1/2 β=170分钟;4例临床受体显像结果图像清晰,病灶放射性浓聚明显.上述结果提示,99mTc-octreotide是一种良好的肿瘤生长抑素受体显像剂.     

~(99m)Tc-PYM的制备、动物实验及临床研究

目的：研制适于临床肿瘤阳性显像的标记产品99mTC-PYM。方法：在原工作基础上，提高99mTc-PYM的放射性强度，并通过注射前往产品中加入维生素C，提高肿瘤对99mTc-PYM的摄取百分丰。结果：定量判断肺部恶性病灶的灵敏度、特异性和准确性分别为92％、100％和93％。结论：99mTC-PYM显像可用于肺癌诊断及分期，具有对疗效评价及预后判断的能力，该方法简便、安全，值得临床进一步推广应用。     

多发性骨髓瘤患者血浆肿瘤坏死因子及其可溶性受体测定的临床意义

肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)根据来源和结构不同可分为ＴＮＦ α和ＴＮＦ β ,分别由激活的单核 /巨噬细胞和Ｔ、Ｂ淋巴细胞产生。ＴＮＦ的功能发挥主要是由肿瘤坏死因子受体 (ＴＮ ＦＲ)介导的。ＴＮＦＲ存在于几乎所有类型的正常细胞与肿瘤细胞表面 ,现已证明多种肿瘤细胞 ,如细胞株Ｋ5 62、ＨＬ60及新鲜采集的毛细胞白血病和Ｂ细胞慢性淋巴细胞白血病细胞表面都有ＴＮＦＲ ,且较非肿瘤细胞更易脱落。ＴＮＦＲ有两种类型 :ＴＮＦＲ α和ＴＮＦＲ β,分子量分别为 75ｋＤ和5 5ｋＤ ,ＴＮＦ α和 β都能与两型受体结合 ,但亲和力不同。两型ＴＮＦ…     

肿瘤坏死因子受体p55、p75在创伤患者体内的表达及其临床意义

目的探讨创伤患者体内肿瘤坏死因子受体p55、p75的表达及其意义。方法用流式细胞仪和ELISA法检测不同创伤程度患者外周血中肿瘤坏死因子受体p55、p75的表达情况,以健康献血者为对照。结果创伤患者较健康献血者血浆和血白细胞中p55、p75的表达明显增高(P<0.05),而且创伤程度愈严重者,其p55、p75的表达愈增高。结论创伤导致肿瘤坏死因子受体p55、p75表达增高,而且与创伤严重程度存在一定相关性(P<0.05)。     

99Tcm标记Gd-DTPA-DG及其在裸鼠体内的生物分布

目的 探讨锝(99Tcm)标记顺磁性脱氧葡萄糖类MRI对比剂二乙三胺五乙酸-脱氧葡萄糖钆盐(Gd-DTPA-DG)的稳定性及在荷瘤裸鼠体内的生物分布,寻找一种核素与磁共振双模式影像探针.方法 对 Gd-DTPA-DG进行99Tcm标记,并对需要的Gd-DTPA-DG、氯化亚锡(SnCl2·2H2O)用量,pH,温度采用正交实验设计,确定最佳标记条件.采用薄层纸层析法(TLC)分析标记率,体外放置6 h,观察标记物的稳定性.将标记的99Tcm -Gd-DTPA-DG注入裸鼠体内,10、30 min及1、2、4、24 h后断头处死裸鼠,测定血液、心脏、脑、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、肌肉、肿瘤中的每克组织百分注射剂量率(%ID/g).结果 取10 mg Gd-DTPA-DG、0.6 mg SnCl2·2H2O,在pH值小于2时加入新淋洗的Na99TcmO4洗脱液(37 MBq),沸水反应30 min所得99Tcm -Gd-DTPA-DG放化纯度最高,可达98.5%,体外放置6 h,放化纯度仍大于96%.尾静脉注射99Tcm -Gd-DTPA-DG 2 h后,裸鼠肿瘤组织的摄取率约为(1.48±0.12)%ID/g,肿瘤与肌肉的放射性摄取比(T/NT)达2.91.结论 采用放射性核素99Tcm标记顺磁性对比剂Gd-DTPA-DG 简单易行;荷瘤裸鼠模型显示其具有良好的肿瘤靶向性,有望成为一种极具发展潜力的新型单光子发射计算机断层显像(SPECT)-MRI双模式影像探针.     

99m锝标记多西他赛脂质体的制备及其在兔体内的组织分布研究

目的 考察多西他赛脂质体(DTX-LP)在兔体内的生物分布及其在各主要脏器的靶向参数.方法 通过固体分散与泡腾组合技术,使用放射性同位素锝(99mTC)对DTX-LP进行标记(DTX-LP-99mTC).考察DTX-LP-99m TC的外观、粒径、Zeta电荷、包封率、载药量以及放射化学纯度及稳定性.将DTX-Lp-99mTC或游离锝(99mTC-Free)经耳缘静脉注射入兔体内,经SPECT/CT静态采集数据及计算机融合显像获得DTX-LP-99mTC及99mTC-Free在兔体内的放射性影像.另将注射DTX-Lp-99mTC或99mTC-Free的兔分别于给药后1、2、4、8、12 h处死,使用甲状腺功能测定仪采集兔各离体器官的放射性计数,并计算各脏器的相对摄取率(Re)和靶向效率(Te).结果 DTX-LP-99mTC平均粒径为726 nm,Zeta电荷为-35.6 mV,包封率及载药量分别为(90.27±1.15)％和(1.30±0.20)％.在室温放置或兔血清中37 ℃温育1、4、12 h后,DTX-LP-99m TC的放射化学纯度分别为98.45％、96.32％、94.28％及96.78％、93.45％、91.56％.放射性影像显示DTX-LP-99mTC在兔肺浓聚;每克兔组织的放射性计数由高到低排列,在DTX-LP-99mTC组为肺、脾、肝、肾、心、脑,在99mTC-Free组为肝、脾、肾、心、肺、脑,同一时间点相同脏器的放射性计数在两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).Re值表明,DTX-LP-99mTC组在肺、脾和脑的放射性计数分别是99mTC-Free组的64.41、1.62倍和1.57倍,而心、肝、肾的放射性计数较99m TC-Free组明显减少.Te值表明,DTX-Lp-99mTC在兔肺的放射性计数是脑的64.01倍,心的40.73倍,肾的14.01倍,肝的3.22倍.结论 DTX-LP主要浓集在兔肺,具有高度的肺靶向性.     

碘标双峰驼诱导排卵因子的生物分布及代谢动力学

目的 :研究碘 12 5标记的双峰驼诱导排卵因子在母驼体内的生物分布特性及药代动力学模型 .方法 :采用高效碘标法 (NBS法 )进行12 5I OIF的标记 ,并于标记后不同时间测定其标记率以观察标记物的稳定性 .将12 5I OIF经母驼阴道输入给药 ,给药后不同时间采血 ,测定其放射性计数 ,用3P97药代动力学软件求取药代动力学参数 ;给药后处死骆驼 ,分别取主要脏器 ,经物理衰变校正后计算每克组织的放射性百分注射量 (%ID·g-1) .结果 :12 5I OIF的标记率 80 % ,放化纯度 95 % .将标记物室温下放置 96h ,测得其标记率为70 % ;12 5I OIF在母驼体内的生物学分布在肝中的浓集较高(肝脏代谢 ) ,在脑组织中以垂体的放射性浓聚最高 ;12 5I OIF的药代动力学参数分别为T1/ 2 (ka) 11.8h ,T1/ 2 (ke) 2 6 .4h ,AUC 11.0 6 1× 10 12 Bq·L-1.结论 :采用NBS法碘标的标记率高 ,稳定性好 ,操作简便 .12 5I OIF的药代动力学最佳数学模型符合一级吸收二室开放模型 ,主要经肠道排出体外     

~(99)Tc~m-MAG_3-K237的制备及其在健康动物体内的药代动力学和分布研究

目的探讨99Tcm标记血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2,KDR)小分子拮抗肽K237的方法,研究标记物在健康动物体内的药代动力学特性及体内分布特点。方法化学方法合成制备MAG3-K237,并用99Tcm标记;鉴定标记物的理化性质;测定标记物经新西兰大白兔静脉注射后不同时相血液放射性浓度,得出最佳房室模型与药代动力学参数;分别测定经尾静脉注射7.4MBq标记物后的昆明小鼠各器官质量和放射性计数,经参考源校正后计算各脏器每克组织百分注射剂量率(%ID/g);经耳缘静脉注射37MBq标记物,在SPECT下观察其在兔体内的动态分布。结果99Tcm-MAG3-K237的放化纯度为(97.98±0.76)%,比活度为(3.54±0.03)TBq/mmol;室温(25℃)下保存8h后放化纯度为(96.15±0.37)%;半胱氨酸置换率为0.2%～0.37%;不与血清蛋白结合;兔体内动力学过程符合权重为1/c2的三室模型,快分布相半衰期(t1/2α)、慢分布相半衰期(t1/2β)及消除相半衰期(t1/2γ)分别为(4.00±3....     

99Tcm-ASON-EGF的制备及其药代动力学研究

目的 研究^99Tcm-ASON-EGF药物的制备及其在健康兔体内的药代动力学特征。方法 制备^99Tcm-ASON-EGF,用放射性计数法测定兔血药浓度变化;采用3p97软件处理数据,根据AIC值、R^2值、1／c与F检验,判断药物客观符合的房室模型;随后,求出其分布半衰期、消除半衰期、中央室分布容积、总表观分布容积、总清除率;最后用三氯醋酸法测定其血浆蛋白结合率。结果 ^99Tcm-ASON-EGF的最佳房室模型是二室模型,其分布半衰期是5．28min;消除半衰期是89．23min;中央室分布容积是67．8ml;总表观分布容积是915．6ml;总清除率是7．1ml／min。与人血浆孵育1．5h后,血浆蛋白结合率为10．69％。结论 ^99Tcm-ASON-EGF在健康兔体内的转运过程符合二室模型,具有良好的药代动力学特征。     

99mTc标记的新型肺癌多肽分子探针及其生物学分布

目的探讨99mTc标记特异性靶向肺癌小分子多肽的标记方法,观察99mTc-多肽在正常动物体内的动力学特性及体内生物学
分布特点。方法采用NHS-MAG3双功能螯合法进行99mTc标记小分子多肽（cNGQGEQc）,纸层析法测定标记率,通过体外稳定
性实验、半胱氨酸置换实验及血清蛋白结合实验评价99mTc-多肽的放化特性,测定标记物静脉注射后在新西兰大白兔不同时相
血液放射性清除曲线;分别测定经尾静脉注射7.4 MBq标记物后的小鼠体内各脏器质量数和放射性计数,计算各脏器每克组织
百分注射剂量率（%ID/g）;经耳缘静脉注射37 MBq标记物,应用SPECT显像法观察标记物在大白兔体内的放射性动态分布
变化。结果99mTc 标记多肽的标记率>90%,室温下和血清中37 ℃下放置12 h 放化纯度分别为91%和85%;半胱氨酸置换率
<7%;血清蛋白结合率<5%。99mTc标记多肽在兔体内血放射性清除迅速;在小鼠体内清除较快,主要通过肾脏排泄,其余脏器内
放射性均较低（P<0.05）。结论99mTc标记基于肺癌特异性靶向多肽的标记方法简单,标记率高,具有良好的体内外稳定性,具有
比较理想的体内分布动力学特性。
     

庆大霉素重组合异种骨复合体的制备及其药物的体内释放特性

目的：研制庆大霉素重组合异种骨复合体,为开放性骨折合并骨缺损、感染性骨缺损清创后一期植骨提供理想的骨移植材料．方法：采用具有高效骨诱导及骨传导能力的重组合异种骨作为载体,复合庆大霉素制备庆大霉素重组合异种骨复合体,并对药物体内释放特性进行研究．结果：庆大霉素浸泡的复合体于３ｄ内骨粒及其周围组织有高的药物浓度,并可在１２ｈ于软组织中产生１８７．２ｍｇ／Ｌ的高浓度．浸泡后明胶包裹的复合体具有较强的缓释功能,可在１０ｄ内产生高于金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度的局部浓度,并可在１２ｈ于软组织中产生１４４．５ｍｇ／Ｌ的高浓度．结论：庆大霉素重组合异种骨复合体有良好的体内缓释作用,有望成为临床开放性骨折合并骨缺损、感染性骨缺损一期植骨治疗的理想骨移植材料．     

无菌动物的生物学特性及其在人类疾病研究中的应用

 微生物学已开始从致病性研究为主转向了生理功能研究为主。正常菌群可促进机体代谢与肠道免疫系统的发育和成熟,也具有保护宿主对抗病原微生物入侵的作用。而研究肠道菌群的生理病理功能对动物模型提出了更高的要求。无菌(germ free,GF)动物的微生物背景清晰,且在解剖与形态学、代谢生理及免疫系统方面与常规实验动物相比有明显的特点,现已成为研究肠道菌群的生理病理功能的最佳动物模型。本文就GF动物在肠道微生态、免疫系统发育、代谢性疾病、药物代谢及肿瘤学等方面的研究进展作一综述。     

丙酸氟替卡松鼻喷雾剂的研制及喷雾特性

采用高压均质工艺对丙酸氟替卡松原料进行微粒化,应用Box-Behnken效应面设计对微粒化工艺中均质压力、循环次数、混悬液药物浓度等3项参数进行了优化,得到的优化微粒化工艺为均质压力50 MPa、循环6次、混悬液药物浓度10%。在此基础上制备的丙酸氟替卡松鼻喷雾剂雾滴粒径分布及喷射模式均符合美国药典的要求,具有良好的喷雾特性。     

复方总黄酮聚乳酸-羟基乙酸共聚物微囊的制备及体外释药特性

目的：以聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）作为载体材料制备复合骨碎补总黄酮（TFRD）和野菊花总黄酮（TFC）的TF-PLGA缓释微囊,探讨微囊的最佳制备工艺及其体外缓释特性。方法：以PLGA、TFRD和 TFC为原料,采用复乳-溶剂挥发法制备TF-PLGA缓释微囊;以包封产率（EE）为评价指标,通过单因素实验及正交实验进行工艺优化,筛选最佳的工艺参数;光学显微镜（LM）和扫描电子显微镜（SEM）下观察微囊的形态特征、粒径大小和分布情况;采用提取法测定TF-PLGA微囊的体外累计释药率并绘制累计释放曲线。结果：单因素实验和正交实验优化的最佳制备工艺,PLGA浓度为140 g·L^-1,油相体积为1.4 mL,乳化速度为1500 r·min^-1,乳化时间为5 min。优化后微囊平均EE为（83.89±2.30）%,平均实际载药量（DL）为（5.90±0.07）%;LM和SEM下观察,微囊形态圆整,平均粒径为（44.34±14.68）μm,粒径分布较窄;体外释放实验检测,24h累计释药率达40%,第50天后累积释药率超过90%。结论：TF-PLGA缓释微囊具有优良的载药及缓释效果,制备工艺简单,重复性良好。     

盐酸左布比卡因原位凝胶注射剂的制备及其在动物体内的药代动力学和药效学

采用磷脂为基质的新型原位凝胶作为盐酸左布比卡因缓释注射剂的载体。通过筛选磷脂类型、磷脂/乙醇比例、水分比例确定稳定载药的处方。制备的处方进行了初步表征,符合原位凝胶的特点。进行了比格犬药代动力学考察,上述处方的tmax滞后,t1/2延长,缓释特征明显。在豚鼠中进行了药效学评价,上述处方局部麻醉效果显著,相对于市售注射液,可维持长达48~72 h的局麻效果。该新型原位凝胶具备良好的开发潜力。