丹参对克隆化成骨细胞株MC3T3—E1细胞影响的实验研究

了解丹参对体外培养的成骨细胞生长，分化与代的影响。选择克隆化成骨细胞株ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞，采用细胞培养方法，观察细胞内ＤＮＡ合成及碱性磷酸酶活性。丹参明显增强ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞内ＡＬＰａｓｅ活性，丹参浓度为５．０ｇ／Ｌ时，对ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞内ＡＬＰａｓｅ活性影响最大，比对照组强约１３５％     

伤科接骨片对MC3T3-E1细胞成骨能力的影响

目的观察伤科接骨片对MC3T3-E1细胞成骨能力的影响。方法取BALB/c小鼠30只,随机分为药物+细胞组:伤科接骨片及饲料喂养+MC3T3-E1+明胶海绵;细胞组:单纯饲料+MC3T3-E1+明胶海绵;阴性对照组:单纯饲料+生理盐水+明胶海绵。每组10只。在小鼠右侧股部臀大肌下方制成肌袋,药物+细胞组和细胞组用无菌明胶海绵吸附MC3T3-E1细胞悬液、阴性对照组用无菌明胶海绵吸附生理盐水后植入肌袋内。术后3天,药物+细胞组将伤科接骨片(0.35g/片)用蒸馏水配制成浓度为20mg/m L的混悬液,按2.0mg/(g·d)剂量灌胃给药,细胞组和对照组均灌胃给予2.0mg/(g·d)的蒸馏水。分别于建模后第4、8周每组各处死小鼠5只,取材后分别作大体、切片HE染色光镜,以及扫描电镜下观察。结果术后4周,药物+细胞组和细胞组肌袋内均可见新骨出现,术后8周两组均形成松质骨样结构的板层骨,药物+细胞组形成的板层骨结构较细胞组更为成熟,成骨细胞数量更多,胶原纤维分泌量也更多,并有更多的钙化结节形成。阴性对照组内未见有明显骨化现象。结论伤科接骨片可以促进MC3T3-E1细胞在动物体内的成骨作用。     

重楼皂苷I对成骨细胞MC3T3-E1增殖及分化的实验研究

目的:研究重楼皂苷I (PPL I)对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1增殖的作用及其机制。方法:采用MTT比色法、EdU试剂盒、碱性磷酸酶(ALP)活性检测法、茜素红染色法,观察加入PPL I (1、3、10、30μmol/L)后,MC3T3-E1的增殖、成熟与矿化情况;采用免疫印迹法,观察PPL I (3、10μmol/L)对细胞中β-连环素(β-catenin)和骨形成蛋白-2 (BMP-2)的表达影响。结果:PPL I可以有效地促进成骨样细胞MC3T3-E1增殖,并浓度依赖性地升高β-catenin与BMP-2蛋白的水平。结论:PPL I能促进MC3T3-E1细胞的增殖与分化,可能与其调节β-catenin与BMP-2的表达有关。     

L-NMMA对过量氟暴露引起的小鼠MC3T3E1成骨细胞中NO/iNOS表达的影响

目的 探讨L-单甲基-精氨酸(L-NMMA)与过量氟化钠(NaF)共培养对小鼠颅顶前成骨(MC3T3E1)细胞中一氧化氮(NO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法 将MC3T3E1成骨细胞分为空白组(只含培养基)、NaF染毒组(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)及L-NMMA染毒组(0、5、10、20、40、80 mol/L),采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK8)检测细胞存活率,并筛选最佳染氟浓度和最佳L-NMMA用药浓度;再将MC3T3E1成骨细胞分为对照组(0.0 mmol/L NaF)、低氟组(1.0 mmol/L NaF)、高氟组(4.0 mmol/L NaF)、低氟+L-NMMA组(1.0 mmol/L NaF+20μmol/L L-NMMA)、高氟+L-NMMA组(4.0 mmol/L NaF+20μmol/L L-NMMA)、L-NMMA组(20μmol/L L-NMMA),处理24 h,采用硝酸还原酶法检测细胞中NO含量,蛋白免疫印迹法及实时荧光定量PCR法分别检测iNOS蛋白及mRNA表达水平。结果 与对照组相比,1.0、2....     

杜仲叶提取物对MC3T3-E1细胞增殖作用的实验研究

目的研究杜仲叶提取物（Euec）对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1细胞生长、增殖的影响及其分子机制。方法采用Euec与MC3T3-E1细胞体外共同培养,MTT法检测不同浓度Euec处理MC3T3-E1细胞24、48、72h后的细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果4．0～125．0μg／ml的Euec能促进MC3T3-E1细胞增殖,其中7.8μg／ml的Euec对MC3T3-E1细胞增殖的促进作用最强。流式细胞仪检测显示,6.25μg／ml的Euec作用MC3T3-E1细胞48h后,G0/G1期成骨样细胞显著减少,S期成骨样细胞增多,G2/M期成骨样细胞显著增多。结论Euec可促进MC3T3-E1细胞向G2／M期转换,使G1期的成骨样细胞减少,G2期的成骨样细胞显著增加,从而促进细胞的有丝分裂和细胞的增殖。     

温度对过氧化氢抑制前成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖和成骨分化的影响

目的 探讨温度对过氧化氢(H₂O₂)抑制前成骨细胞增殖和成骨分化的影响。方法 取对数生长期MC3T3-E1细胞,随机分为0、450、500、550、600、650μmol·L^-1H₂O₂干预组,分别给予0、450、500、550、600、650μmol·L^-1H₂O₂溶液干预2 h。另取对数生长期MC3T3-E1细胞,随机分为对照组、模型组、低温组和高温组。对照组细胞置于37℃、含体积分数5%CO₂培养箱中孵育24 h;模型组细胞置于37℃、含体积分数5%CO₂培养箱中孵育24 h,并给予H₂O₂刺激2 h;低温组细胞置于32℃、含体积分数5%CO₂培养箱中孵育24 h,并给予H₂O₂刺激2 h;高温组细胞置于40℃、含体积分数5%CO₂培...     

磷酸肌酸对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及矿化的影响

目的 探讨磷酸肌酸(phosphocreatine,PCr)对体外培养的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的增殖、成骨分化及矿化的影响.方法 在体外培养的MC3T3-E1细胞中,分别加入含不同浓度(5,10,20 mmol·L-1)的PCr进行培养,并以不给予PCr药物处理的组为空白对照组.采用MTT法检测MC3T3-E1细胞的增殖情况;使用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性试剂盒检测MC3T3-E1细胞内ALP的活性;采用Western Blot法检测MC3T3-E1细胞内ALP、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)的蛋白表达情况;利用茜素红染色法检测MC3T3-E1细胞形成矿化的能力.结果 PCr可以促进MC3T3-E1细胞的增殖且具时间依赖性,当处理12 h时,PCr对细胞无明显促增殖作用(P＞0.05);然而当处理48 h时,PCr(5,10,20mmol·L-1)对细胞的促增殖作用可分别达到137％、146％、153％.PCr(10,20 mmol·L-1)使MC3T3-E1细胞内ALP的活性分别增加到空白对照组的1.37和2.14倍(P ＜0.05,P＜0.01),并且显著上调ALP蛋白表达(P＜0.01,P＜0.01).PCr(5,10,20 mmol·L-1)还可明显上调MC3T3-E1细胞内BMP-2的蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),并使MC3T3-E1细胞形成的矿化结节数增加(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 PCr可以促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化与矿化,具有促成骨作用.     

MC3T3-E1细胞成骨模型的建立及局部黏着斑激酶表达的研究

目的:通过化学诱导手段建立MC3T3-E1细胞成骨模型,探讨局部黏着斑激酶(FAK)基因表达与成骨细胞形成的关系,了解FAK对成骨分化的影响。方法:观察MC3T3-E1细胞成骨诱导前后细胞形态,茜素红化学染色检测矿化情况,实时荧光定量PCR检测成骨标志物Runx2、ALP的表达,同时分析FAK在成骨过程中的表达情况。结果:MC3T3-E1细胞成骨诱导3 d后细胞呈长梭形或多角形;第21、28 d时,茜素红染色可见矿化结节;成骨标志物Runx2、ALP的表达呈持续升高的趋势,FAK的表达总体呈升高趋势,在第7 d时略有下降。结论:FAK的表达与成骨相关基因的表达趋势基本一致,提示FAK可能在MC3T3-E1细胞成骨过程中发挥一定作用。     

柚皮苷对H_2O_2处理小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的影响

目的 :研究柚皮苷对体外培养过氧化氢(H_2O_2)处理的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的作用及抗氧化机制。方法:在体外培养的MC3T3-E1s细胞培养基中分别加入不同浓度(0.01 mmol·L-1、0.02 mmol·L-1、0.04 mmol·L-1)的柚皮苷作用48 h,接着加入0.5 mmol·L-1H_2O_2作用4 h,采用CCK-8法检测柚皮苷对成骨细胞活力的影响;采用碱性磷酸酶(ALP)、细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测MC3T3-E1成骨细胞内ALP、SOD活性和MDA、GSH含量及细胞上清LDH活性;用茜素红S染色法检测矿化结节数目;用Real time RT-PCR的方法检测成骨细胞内I型胶原(COL-I)、骨钙素(OCN)、转录因子Osterix和骨形态发生蛋白2(BMP-2)m RNA表达。结果:柚皮苷可增加H_2O_2损伤后MC3T3-E1细胞ALP活力(P0.05,P0.01)和矿化结节数目(P0.05,P0.01),促进骨形成相关指标COL-I、Osterix、BMP-2和OCN m RNA表达(P0.01);柚皮苷提高H_2O_2损伤后MC3T3-E1细胞活力(P0.05,P0.01),上调细胞内SOD活性和GSH含量并降低细胞中MDA含量和上清中LDH活性(P0.01)。结论:一定浓度(0.01,0.02,0.04 mmol·L-1)的柚皮苷可以促进H_2O_2处理后MC3T3-E1细胞的骨形成,这种促进作用可能是通过降低氧化应激发挥抗氧化作用实现的。     

含枸杞多糖血清对MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化和矿化的影响

目的研究含枸杞多糖血清对MC3T3-E1成骨细胞细胞增殖、分化和矿化的影响。方法含枸杞多糖血清分别加入MC3T3-E1成骨细胞培养液中,使其终浓度为5%、10%、20%3种体积浓度,通过MTT法,碱性磷酸酶活性测定,骨钙素检测和Von kossa矿化染色法观察含枸杞多糖血清的促细胞增殖、分化、矿化作用。结果含枸杞多糖血清在5%、10%浓度促进MC3T3-E1成骨细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05);10%、20%浓度提高MC3T3-E1成骨细胞内碱性磷酸酶的活性,差异有统计学意义(P<0.01)。含枸杞多糖血清在20%浓度培养7及11 d时能明显促进MC3T3-E1成骨细胞骨钙素合成和分泌,20%浓度培养18 d时MC3T3-E1成骨细胞的矿化结节数目增多,差异有统计学意义(P<0.01)。结论含枸杞多糖血清可以促进MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化和矿化能力。     

Effects of Salvia Miltiorrhiza Bung on the formation of osteoclastlike cells in mouse bone marrow culture

SalviaMiltiorrhizaBung(SMB),akindoftradi-tionalChinesemedicine,hasbeenusedinthetreat-mentofthebonefractureinrecentyears[1－2].SomestudiesaboutthemechanismofSMBonboneremod-elingindicatedthatSMBcannotonlyimprovemi-cro-circulation,butalsopromotenewboneformation,suchasstimulatingthedifferentiation,proliferation,andAlkalinephosphataseactivityofosteoblast-likecells[3－5].ButtheeffectsofSMBonosteoclastsandboneresorptionisstillunclear.WeinvestigatedtheeffectsofSMBonosteoclast-likecellsformatio…     

中药丹参对哮喘大鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-9的影响

目的：研究丹参对哮喘大鼠气道重塑和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量的影响。方法将SPF级SD成年雄性大鼠70只随机分为正常对照组、哮喘模型组(哮喘2周组、哮喘4周组、哮喘8周组)、丹参干预组(丹参2周组、丹参4周组、丹参8周组)3个大组和7个小组。卵蛋白(OVA)-氢氧化铝混悬液致敏激发大鼠复制哮喘气道重塑模型,分别持续2、4、8周。观察哮喘大鼠肺组织病理形态变化,采用ELISA检测大鼠肺组织MMP-9含量。结果丹参能改善哮喘大鼠气道炎症细胞的浸润及支气管平滑肌的增厚。与正常对照组[(1.99±0.29)ng/mL]比较,哮喘4周组[(2.43±0.40)ng/mL]、哮喘8周组[(3.01±0.31)ng/mL]肺组织中MMP-9含量升高(P<0.05、P<0.01);与哮喘2周组[(2.29±0.51) ng/mL]、哮喘4周组[(2.43±0.40) ng/mL]比较,哮喘8周组[(3.01±0.31) ng/mL]肺组织中MMP-9含量升高,差异有统计学意义(P<0.05);与哮喘8周组[(3.01±0.31) ng/mL]比较,丹参8周组[(2.10±0.20)ng/mL]肺组织中MMP-9含量显著降低(P<0.01)。结论丹参能够抑制哮喘大鼠肺组织MMP-9的分泌,改善哮喘大鼠气道重塑状态。     

丹参抗犬感染性休克的机理研究

目的：探讨丹参对抗感染性休克的作用机制。方法：建立犬感染性休克的模型。将15只休克犬分为丹对 庆大霉素组（A组）；地塞米松 庆大霉素（B组）；NS 庆大霉素（C组）。结果：①丹参注射液能使大肠杆菌所致感染性休克犬24h成活率显著提高并具有稳定血压，减慢心率，增加尿量的作用。②丹参抗感染性休克的可能机制是：减少内毒素；清除氧自由基；抗DIC，纠正休克时血液流变学异常，改善微循环；稳定细胞膜、亚细胞膜；保护内脏功能，对抗MODS或MOF。结论：本实验为丹参注射液在感染性休克的应用提供了理论基础。     

复方丹参与硫普罗宁抗肝纤维化的临床研究

[目的 ]观察复方丹参、硫普罗宁单用及合用对肝纤维化的影响。 [方法 ]复方丹参 +硫普罗宁治疗组、复方丹参治疗组、硫普罗宁治疗组各 4 0例 ,分别静滴复方丹参 2 0ml和 /或硫普罗宁 0 2g ,qd ,共 8周。对照组 30例 ,予一般护肝治疗。[结果 ]各组治疗后肝功能、肝纤维化指标均有不同程度好转 ,含丹参治疗组肝纤维化指标好转与硫普罗宁组及对照组比较差异显著 (P <0 0 5 ) ,且联合用药组优于单用组。 [结论 ]复方丹参与硫普罗宁均有抗肝纤维化的作用 ,且两者合用能提高抗肝纤维化的效应。     

丹参对抗内毒素体外实验研究

目的：探讨丹参抗感染性休克的机制。方法：对丹参抗内毒素（ＬＰＳ）进行体外实验。分别在不同浓度的丹参液和生理盐水中加入１０Ｅｕ的ＬＰＳ,Ⅰ组０．５ｍＬ丹参,Ⅱ组５ｍＬ丹参,Ⅲ组为生理盐水。置入３７℃恒温箱进行孵育。观察在相同时点,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组ＬＰＳ浓度的变化。结果：Ⅰ、Ⅱ组比Ⅲ组ＬＰＳ浓度下降幅度大,有显著性差异（Ｐ〈０．０５）;且Ⅱ组与Ⅰ组比相同时点ＬＰＳ的浓度下降幅度大,也有明显差异（Ｐ〈０．０     

Effects of salvia miltiorrhiza bung （SMB） onosteoblast－like cell lin （clonal MC3T3－E1 cells）

Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａｂｕｎｇ（ＳＭＢ）ｏｎｏｓｔｅｏｂｌａｓｔ－ｌｉｋｅｃｅｌｌｌｉｎ（ｃｌｏｎａｌＭＣ３Ｔ３－Ｅ１ｃｅｌｌｓ）￥（丁寅）ＤｉｎｇＹｉｎ；ＳｕｉｃｈＳｏｍａ；Ｔ．ＴａｋａｎｏＹａｍａｍｏｔｏ；Ｓ．Ｍａ...     

复方丹参合剂对高脂血症大鼠血脂和骨的影响

目的:探讨复方丹参合剂对高脂血症大鼠血脂和骨的影响。方法:将27只SD大鼠随机分成普通饲料组、脂肪乳剂组和复方丹参合剂组,每组9只。普通饲料组予普通饲料及生理盐水处理,脂肪乳剂组予普通饮食加脂肪乳剂灌胃,复方丹参合剂组予脂肪乳剂和复方丹参合剂灌胃,连续20周,实验结束后取血和胫骨检测。结果:脂肪乳剂灌胃使大鼠血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)水平升高和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)下降(P<0.01),胫骨上段骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、数量(Tb.N)、厚度(Tb.Th)明显下降(P<0.01),骨小梁分离度(Tb.Sp)增加(P<0.01),骨量显著丢失,荧光标记减弱,骨形成减少;而复方丹参合剂可使HDL-c含量增加(P<0.01),%Tb.Ar、Tb.N、Tb.Th增加,Tb.Sp减少(P<0.01),骨形成增加(P<0.05)。结论:长期脂肪乳剂灌胃建立的高脂血症大鼠有明显的骨质疏松,复方丹参合剂有升高HDL-c和预防高脂血症骨质疏松的作用。     

丹参促创伤修复机制的研究进展

通过大量临床实践证明,丹参是皮肤愈合,创伤修复的良药。随着丹参的运用范围不断扩大,人们对其作用机制,特别是对其促进创伤修复的机制有了更深入广泛的研究。现将近年来国内外学者对丹参及其药理活性成分关于促进创伤组织修复机制的研究进展,从促进微循环、免疫调节作用、抑制过再生、减轻组织缺血-再灌注损伤、促进创伤组织再生、抑制炎症反应及细胞凋亡及其与生长因子的关系等方面进行综述。     

Experimental Study of Salvia Miltiorrhiza on the Prevention of Restenosis after Angioplasty

Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａ　Ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ＡｎｇｉｏｐｌａｓｔｙＺＨＯＵＸｉａｏ－ｍｉｎｇ，ＬＵＺａｉ－ｙｉｎｇａｎｄＷＡＮＧＤａｏ...     

西洋参与丹参配伍对大鼠颈动脉血栓形成的影响

目的 探讨西洋参、丹参配伍对三氯化铁(FeCl3)诱导的大鼠颈动脉血栓形成的干预作用.方法 50只SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、阿司匹林组(ASA组),西洋参、丹参配伍水煎剂低剂量组(PSDL组)、高剂量组(PSDH组),每组10只,灌胃给药14 d后,应用含20μl 30％FeC...