TLR3c.1377, TLR9-1486)和TLR9 2848基因多态性与多发性硬化易感性的关系

目的:探讨中国南方汉族人群Toll样受体(Toll like receptor, TLR)3和9单核苷酸多态性与多发性硬化(multiple sclerosis, MS)遗传易感的相关性.方法:以123名临床及实验室确诊的中国南方汉族MS患者和126名与入组病人种族、年龄、性别相匹配健康志愿者为研究对象,利用聚合酶链-限制性长度多态性分析(PCR-RFLP)技术检测TLR3和TLR9基因多态性.结果:TLR3c.1377基因型、等位基因频率MS组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),携带T等位基因可降低MS患病危险性((OR=0.532, P=0.014).TLR9-1486基因型、等位基因频率在MS组与对照组间分布差异无统计学意义;TLR9 2848 A等位基因频率MS组较对照组增高(39.8% vs. 30.6%,P=0.037),A+等位基因携带者明显高于A-携带者患病危险性 (OR=1.837,P=0.020).关联分析未发现TLR3c.1377与(TLR9-1486)和TLR9 2848有联合作用.TLR9-1486和TLR9 2848处于强连锁不平衡状态;MS组与对照组间单倍体型频率分布差异无统计学意义.结论:TLR3c.1377基因型频率、等位基因频率及TLR9 2848等位基因频率可能与中国南方汉族人群MS发病相关,两基因位点可能均是MS的易感基因或与易感基因相(连锁.)     

TLR9-1486和TLR9-2848基因多态性与胃癌易感性关系

目的 探讨Toll样受体9(TLR9)编码基因TLR9-1486和TLR9-2848位点多态性以及EB病毒(EBV)感染与胃癌易感性的关系。方法 选取131例胃癌病人为研究对象,包括43例EBV相关胃癌(EBVaGC)和88例EBV阴性胃癌(EBVnGC),同时随机抽取66例健康人外周血标本作为对照。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测TLR9基因-1486位点T/C和-2848位点G/A多态性。结果 TLR9-1486T/C位点多态性分析显示,胃癌组和对照组3种基因型分布和等位基因频率比较差异无显著性(P>0.05);EBVaGC组和EBVnGC组中各基因型分布和等位基因频率差异也无显著性(P>0.05);与携带T等位基因者相比较,C等位基因携带者胃癌和EBVaGC发病风险无明显升高趋势。TLR9-2848G/A位点多态性分析显示,胃癌组和对照组3种基因型分布和等位基因频率差异无显著性(P>0.05);EBVaGC组和EBVnGC组中各基因型分布和等位基因频率差异也无显著性(P>0.05);与G等位基因携带者比较,A等位基因携带者胃癌和EBVaGC易感性无明显升高。结论 TLR9-1486和TLR9-2848位点多态性与胃癌易感性无关,且在EBVaGC发生中与EBV感染无协同关系。     

TLR4、TLR9基因多态性与浅表性膀胱癌复发的关系

目的 探讨Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）、Toll样受体9（Toll-like receptor 9,TLR9）基因多态性与浅表性膀胱癌肿瘤复发之间的关系。方法 选取2013年3月~2017年3月笔者医院收治的300例膀胱癌患者为研究对象,其中初发膀胱癌150例、复发膀胱癌150例,同期选取100例体检健康者作为对照组,利用限制性内切酶片段长度多态性PCR （polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP）技术检测TLR4、TLR9基因多态性,分析TLR4 rs10759932、TLR9 1486T/C、C2848T基因多态性与浅表性膀胱癌肿瘤复发之间的关系。结果 3组TLR4 rs10759932、TLR9 1486T/C、C2848T基因多态性分布均符合Hardy-Weinberg平衡。与对照组比较,初发膀胱癌组及复发膀胱癌组TLR4rs10759932基因多态位点T/C、C/C基因型频率及C等位基因频率明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）,T/T、T等位基因明显升高（P<0.05）,且复发膀胱癌组TLR4rs10759932基因多态位点T/C、C/C基因型频率及C等位基因频率明显低于初发膀胱癌组（P<0.05）,T/T、T等位基因明显高于初发膀胱癌组（P<0.05）。3组TLR9 1486T/C、C2848T基因多态性比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 TLR4基因rs10759932多态性与浅表性膀胱癌肿瘤复发密切相关,该基因位点T/C、C/C基因型及C等位基因可能会降低浅表性膀胱癌复发风险。     

TLR9基因rs187084位点多态性与子宫内膜异位症的相关性研究

目的：探讨Toll样受体（Tol- like receptors/TLRs）9基因rs187084位点多态性与子宫内膜异位症（EMs）发病风险的关系。方法采用DNA直接测序法检测104例EMs患者（EMs组）和100例非EMs患者（对照组）的TLR9基因rs187084位点的多态性,比较各基因型和等位基因的分布情况。结果 EMs组和对照组中,TLR9基因rs187084位点的AA、AG、GG3种基因型频率分别为42.30%、28.85%、28.85%和52.00%、34.00%、14.00%,两组比较差异有统计学意义（P=0.036）;A、G等位基因频率分别为56.73%、43.27%和69.00%、31.00%,两组比较差异有统计学意义（P=0.01）;携带GG基因型明显增加EMs的发病风险（OR=1.911,95％CI 1.113～3.282）。结论 TLR9基因rs187084位点多态性与EMs的发病风险相关。     

Toll样受体2基因T597C多态性与中国南方汉族人群结核性脑膜炎的易感相关性

目的探讨Toll样受体2(TLR2)基因T597C单核苷酸多态性与中国南方汉族人群结核性脑膜炎的易感相关性。方法结核性脑膜炎组为2009年9月至2011年5月南方医院收治的确诊结核性脑膜炎患者9例,肺结核组为广州市胸科医院收治的肺结核患者20例,另选20例健康人作为对照组,各组均符合相应的纳入及排除标准。采用聚合酶链式反应及基因测序方法对TLR2基因T597C单核苷酸多态性与中国南方汉族人群结核性脑膜炎易感性进行相关分析。结果在结核性脑膜炎组中变异基因型(TC和CC)和597C等位基因的频率明显高于对照组,但变异基因型在对照组、肺结核组及结核性脑膜炎组间的频率分布差异无统计学意义(χ2=3.560,P=0.169),597C等位基因在各组间的频率分布差异无统计学意义(χ2=5.108,P=0.078)。结论尚不能证明TLR2基因T597C单核苷酸多态性与中国南方汉族人群结核性脑膜炎及肺结核的易感性相关。     

TLR-9 基因多态性与膝骨关节炎的易感性研究

目的研究Toll样受体9(TLR9)基因rs187084和rs5743836位点单核苷酸多态性,探讨其与膝骨关节炎易感性之间的联系。方法采用直接测序法分析145例膝骨关节炎患者和145名健康对照组的TLR9基因rs187084-1486TC和rs5743836-1237CT位点单核苷酸多态性。结果rs187084位点C等位基因是膝骨关节炎发生保护因素(OR=0.599,95%CI=0.424-0.847,P=0.002)。rs5743836位点基因型频率在研究组和对照组之间差异无统计学意义(χ~2=5.14,P=0.08)。TLR9基因rs187084位点单核苷酸多态性与年龄、膝骨关节炎严重程度相关,rs5743836位点单核苷酸多态性与年龄、膝骨关节炎严重程度不相关。结论 TLR9基因rs187084-1486TC位点单核苷酸多态性与膝骨关节炎易感性相关,rs5743836-1237CT位点单核苷酸多态性与膝骨关节炎易感性不相关。     

用PCR-SSCP方法检测TLR9基因多态性

目的探讨用多聚酶链反应-基因单链构象(PCR-SSCP)方法研究Toll样受体基因多态性。方法用PCR-SSCP方法检测82例肿瘤患者和82例健康对照人群的TLR9基因-1486、-1237、1174、2848位点的单核苷酸多态性。结果164例人群样本中,TLR9基因多态性频率分布分别是:1486、1174、2848位点在对照组和病例组的比例为0%和1.2%,1.2%和7.3%,0%和3.7%;-1237在对照组和病例组中均未发现多态性。在病例组中出现4种多态性的比例为12.2%,在对照组中为1.2%,P=0.0092,OR=11.25,95%CI为1.41~90.05。结论TLR9多态性在人群中与癌肿有一定的关系,基因突变可能导致癌肿危险度增加。     

内蒙古地区汉族新生儿呼吸窘迫综合征与SP-B 1580位点基因多态性的相关性研究

目的 研究肺表面活性物质蛋白B（SP-B）基因1580位点与内蒙古地区汉族新生儿呼吸窘迫综合征（NRDS）的关系.方法 采用前瞻性研究方法,选择100例汉族NRDS患儿（病例组）与100例汉族正常新生儿（对照组）作为研究对象,应用PCR基因分析技术检测SP-B 1580位点基因多态性,分析多态性与NRDS的关系.结果 内蒙古地区汉族SP-B 1580位点基因型均可检出3种基因型：即TT、CT及CC型.汉族NRDS组此3种基因型频率分别为：9.0％、27.0％和64.0％,T等位基因频率为19.5％,C等位基因频率为80.5％.汉族正常对照组3种基因型分别为13.0％、40.0％和47.0％,T等位基因频率为33.0％,C等位基因频率为67.0％.汉族NRDS组SP-B 1580位点基因型以C等位基因分布频率显著增高,关于SP-B 1580位点基因多态性汉族NRDS组与汉族正常对照组相比有统计学差异（x2=5.499,P=0.019）.结论 内蒙古汉族新生儿SP-B基因型及等位基因频率在不同性别、出生体质量、胎龄、生产方式等无明显关联;SP-B 1580C等位基因可能是内蒙古地区汉族新生儿患RDS的易感基因之一.     

广东汉族人群脂联素基因多态性与2型糖尿病相关性研究

目的探讨脂联素基因外显子2基因多态性与广东地区汉族人群2型糖尿病的关系。方法以聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性（PCR-RFLP）技术观察200名健康人与200例2型糖尿病基因外显子2基因多态性。结果2型糖尿病组G/G基因型频率明显高于正常对照组（P〈0.01）,G等位基因频率明显高于正常对照组（P〈0.01）,T等位基因频率明显低于正常对照组（P〈0.01）。结论脂联素基因可能是广东地区汉族人群中2型糖尿病的易感候选基因。     

宁夏回汉族人群脂联素基因SNP＋276G/T单核苷酸多态性与代谢综合征的相关性

目的 探讨宁夏回、汉族人群脂联素基因SNP＋ 276G/T单核苷酸多态性与代谢综合征（MS）的相关性.方法 收集回、汉族MS患者（MS组）207例和136例以及回、汉族健康体检者（对照组）98例和102例,采用PCR-RFLP技术检测SNP＋ 276G/T单核苷酸多态性,用ELISA法检测血清脂联素的浓度.结果 汉族MS组GG基因型频率及G等位基因频率均高于汉族对照组（P＜0.05）,回汉族2组间基因型频率及等位基因频率差异均无统计学意义（P＞0.05）.回、汉族MS组血清脂联素水平均低于其对照组（P＜0.05）,回、汉族TG ＋TT基因型血清脂联素水平低于GG基因型者.Logistic回归分析显示SNP＋ 276基因多态性是汉族MS的危险因素.结论 脂联素基因SNP＋ 276G/T多态性可能与宁夏汉族MS相关,与宁夏回族MS无相关性.     

TLR4基因内含子区rs12377632T／C位点多态性研究

目的：通过对TLR4（tolllikereceptor4）基因内含子区单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism,SNP）基因型和等位基因的研究,旨在了解其在中国广西地区人群的频率分布及其在不同地区、种族之间分布是否存在差异。方法：使用单碱基延伸PCR技术和DNA测序方法来检测中国广西地区人群TLR4基因内含子区rsl2377632T／c多态性,并比较中国广西地区人群与人类基因组计划研究的4个人群（欧洲、中国北京、日本、非洲）的SNP分型数据,以分析TLR4基因内含子区rsl2377632T／C位点基因型和等位基因在不同地区、人群之间的差异。结果：中国广西地区人群的TLR4基因内含子区rsl2377632T／C位点SNP分型数据在男性、女性之间分布差异无统计学意义（P〉0．05）。其sNP分型数据与日本、中国北京地区人群相比较,分布差异无统计学意义（P〉0.05）;而与欧洲、非洲地区人群比较,分布差异有统计学意义（P〈0．001）。结论：TLR4基因内含子区rs12377632T／c位点SNP,在不同地区、种族人群之间存在明显差异。     

TLR9 基因及-1237T/C 位点多态性与心血管疾病关联研究

目的：通过生物信息学分析 Toll 样受体 9（ toll-like receptor 9，TLR9） 基因及检测 -1237T/C 位点多态性，探究TLR9 基因与心血管疾病的关联性。方法：利用生物信息学方法对TLR9 进行理化性质、单核苷酸多态性 （single nucleotide polymorphism，SNP）位点、关联基因互作和GO 功能注释等分析。提取189 份血浆标本外周血基因组DNA（包括心血管疾病组68 例，健康对照组121 例），经基因扩增后对扩增产物进行酶切、分 型、测序，并统计分析与心血管疾病的相关性。结果：TLR9为亲水性碱性蛋白质，有4 个核定位信号和多个潜在的线性B 细胞表位，其编码蛋白的二级结构以α螺旋为主。TLR9 作为中心节点蛋白，与MYD88、TBK1 和CD40 等10 个蛋白发生互作，且主要富集在Toll 样受体信号通路和炎症反应等信号通路。TT 和TC 基因型分布频率在健康对照组中分别为71.90% 和28.10%，在疾病组分别为47.06% 和52.94%，两组比较有统计学意义，心血管疾病患者TC 基因型分布频率增高。结论：TLR9 基因及其-1237T/C 多态性与心血管疾病关系紧密。     

广西人群TLR4基因内含子区基因多态性的研究

目的探讨人类Toll样受体4（TLR4）基因内含子区单核苷酸多态性在广西人群中分布情况及其与不同人群的差异。方法采用单碱基延伸PCR技术和DNA测序方法检测196例健康广西人群（男115例,女81例）TLR4基因内含子区rs11536879A/G位点多态性,并与人类基因组计划研究的4个人群（欧洲、北京、日本、非洲）单核苷酸多态性分型数据进行对比。结果广西人群TLR4基因内含子区rs11536879A/G位点存在AA、GA、GG 3种基因型,其基因型及等位基因频率在男性、女性组间分布差异无统计学意义（P〉0.05）;广西人群TLR4基因内含子区rs11536879A/G位点基因型及等位基因频率与欧洲、非洲、日本人群比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,而与北京人群比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论广西人群TLR4基因内含子区基因多态性的基因型及等位基因频率分布在男女性之间无明显差异,在不同地区人群之间存在明显差异。     

载脂蛋白B、载脂蛋白E及血管紧张素原基因多态性与冠心病的关系

目的探讨载脂蛋白B、E（ApoB、ApoE）基因及血管紧张素原基因（AGT）多态性与冠心病（CHD）的相关性。方法采用基因芯片技术分析89例CHD患者和78例非CHD患者的ApoBXbaI、ApoEl12／158及AGTM235T基因多态性及等位基因频率。结果CHD组ApoBXbaI、ApoEl12／158及AGTM235T基因型分布与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。CHD组的Apo BXba I的X^＋ X^＋基因型及等位基因X’频率显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,ApoE112／158的ε^4/、ε^4/4基因型及等位基因￡。频率高于对照组,差异有统计学意义（P〈O．05）;CHD组AGT—TT基因型频率及T等位基因频率均明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论ApoBXbaI、ApoEll2／158和AGTM235T的基因多态性可能是中国人CHD的危险因素。ApoB Xba I等位基因X^＋;ApoE112／158的等位基因ε^4和AGT M235T基因的T等位基因是CHD的重要遗传标记。     

子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中TLR4的表达及意义

目的 检测Toll样受体4（TLR4）在正常子宫内膜、子宫内膜异位症（EMs）患者在位内膜和异位内膜中的表达情况,探讨TLR4在EMs发病中的作用.方法 选择EMs患者的卵巢异位内膜45例（EMs异位内膜组）和相对应的在位子宫内膜32例（EMs在位内膜组）,32例非EMs患者子宫内膜组织为对照组.采用免疫组织化学二步法检测各组内膜组织中TLR4的表达情况,以及TLR4在EMs不同临床分期的异位内膜组织中的表达,作半定量分析后进行组间比较.结果 EMs患者异位内膜、在位内膜及对照组子宫内膜中,TLR4蛋白均有不同程度表达,主要表达于子宫内膜腺上皮和腔上皮.TLR4蛋白在EMs患者异位内膜、在位内膜的表达均低于对照组子宫内膜,差异均有统计学意义（均P＜0.01）,但在异位内膜中表达要高于在位内膜的表达,差异有统计学意义（P＜0.01）.TLR4蛋白在Ⅰ～Ⅱ期EMs患者异位内膜的表达与Ⅲ～Ⅳ期患者异位内膜的表达比较,差异无统计学意义（P ＞0.05）.结论 EMs患者在位和异位内膜组织中的TLR4表达下降,但在异位内膜表达高于在位内膜,TLR4可能参与了EMs的发生、发展.     

IL-8基因多态性与慢性HBV感染结局的相关研究

目的研究IL-8基因启动子区-251A/T多态性及血清IL-8水平与慢性HBV感染结局的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（PCR-RFLP）检测60例慢性HBV感染者（其中轻度感染25例,中度17例,重度18例）和40例急性自限性HBV感染者（对照组）IL-8基因启动子区-251A/T位点多态性,同时采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组血清中IL-8的水平。结果①IL-8基因启动子区-251A/T多态性中各基因组频率（AA、AT、TT）和等位基因频率在病例组与对照组相比,差异均有统计学意义（P=0.002,0.000）。相对危险度分析,A等位基因携带者患慢性HBV感染的风险性是T等位基因的3.080倍（OR=3.080,95%CI：1.697-5.590）。②IL-8基因启动子区-251A/T多态性中各基因型和等位基因频率在慢性HBV感染轻度、中度和重度差异无统计学意义（P=0.463,0.209）。③慢性HBV感染者血清中IL-8水平显著高于对照组（P〈0.01）,且在慢性HBV感染轻度、中度和重度三组之间,IL-8的水平差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 IL-8基因启动子区-251A/T与慢性HBV感染的发病相关,但与疾病的严重程度无明显的关系;A等位基因可能是慢性乙肝发生的易感基因之一;慢性HBV感染患者血清IL-8水平明显增高,且与病情的严重程度相关。     

HLA-E基因多态性和川崎病并冠状动脉损害易感性的相关性研究

目的探讨HLA-E基因多态性与中国汉族儿童川崎病（KD）及KD并冠状动脉损害（CAL）之间的关系。方法应用聚合酶链反应——限制性内切酶片段长度多态性分析,对150例中国汉族健康儿童（对照组）及85例KD患儿组的HLA-E基因多态性进行检测。并同时采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆可溶性HLA-E浓度（sHLA-E）。结果1.KD患儿组血浆sHLA-E浓度明显高于对照组（P〈0.05）。2.KD患儿组中基因型为AA和GA的血浆HLA-E水平较对照组显著增高（P〈0.05）,而基因型为GG的血浆HLA-E水平和对照组比较,差异无显著性（P=0.135）。3.KD患儿组G型等位基因频率较对照组显著增高（P〈0.001,OR=2.133,95%C I=1.452-3.132）。KD患儿组未并发CAL（NCAL）者中G型等位基因频率和对照组比较,有统计学差异（P〈0.001,OR=2.599,95%C I=1.719-3.929）,且GG型等位基因频率较对照组显著增高（P〈0.05,OR=2.973,95%C I=1.432-6.173）,而GA型等位基因频率和对照组比较,无统计学差异（P=0.053）。结论川崎病的发病受遗传背景的影响,与HLA-E基因多态性密切相关。