巢蛋白在不同发育阶段人胚胎脊髓中的表达变化

目的:研究人胚胎脊髓生长发育过程中巢蛋白(nestin)的变化趋势。方法:采用免疫组织化学方法对不同发育时期(3周～8个月)的人胚胎脊髓中巢蛋白(nestin)的表达及变化进行了研究。结果:Nestin阳性细胞在神经上皮贯穿整个发育过程,5周基板、翼板形成后即可见到阳性物,而边缘层6周出现。中央管、基板、翼板、边缘层内nestin阳性细胞达高峰的时间分别是6周、7周、8周、9周,而表达明显减少的时间分别是8周、9周、10周、11周。随着脊髓的发育成熟,灰、白质内nestin阳性产物逐渐减少,而中央管的阳性细胞数至3月后较为稳定。结论:在脊髓不同部位神经干细胞出现时间和达到高峰的时间均不同,提示在脊髓的不同部位神经干细胞增殖、分化并不同步。     

巢蛋白在人胚胎肺中的表达

目的:研究不同时期人胚胎肺中巢蛋白的表达变化,探讨巢蛋白在肺发育过程中的作用.方法:取3～8月人胚胎肺组织,常规石蜡切片,采用免疫组织化学法检测巢蛋白在胚胎肺中的表达及分布.结果:各胎龄段(3～8月)肺均有巢蛋白的表达,巢蛋白阳性细胞主要分布于肺内支气管旁和血管中,而在支气管上皮中未发现阳性细胞.结论:正常人胚胎肺中有...     

巢蛋白在成年大鼠海马神经元的表达及巢蛋白阳性神经元的生后发育

本文采用免疫组织化学方法对成年大鼠海马巢蛋白阳性神经元及其出生后的发育变化进行了研究。结果显示 ,在成年大鼠海马 CA1、CA2和 CA3区锥体层某些特定部位的神经元呈巢蛋白阳性反应。巢蛋白阳性神经元出生后 3周开始在海马中出现 ,并且到 12月龄大鼠海马内仍有存在。双重反应结果显示 ,巢蛋白与 GABA在海马神经元内无共存。成年大鼠海马锥体层神经元表达巢蛋白的生物学意义尚不清楚     

巢蛋白在人胚胎消化管的表达

目的　通过研究不同时期人胚胎消化管巢蛋白的表达及其变化探讨巢蛋白在消化管发育过程中的作用。 方法　取3~8月人胚胎食管、胃和小肠,常规石蜡切片,采用免疫组织化学法检测巢蛋白在胚胎消化管中的表达及分布。 结果　各胎龄段（3~8月）消化管均有巢蛋白的表达。巢蛋白在消化管主要表达在固有层、黏膜下层和肌层内的微血管和毛细血管壁上,且巢蛋白的表达随胎龄的增加而减少。与发育早期组相比,发育中期、晚期胚胎食管、胃和小肠组织中巢蛋白的表达显著减少（P<0.05）,差异有统计学意义。而在发育中期和发育晚期巢蛋白的表达无显著性差异（P>0.05）。 结论　巢蛋白在胎儿消化管壁的微血管和毛细血管的管壁上表达,且随着胎儿发育,其表达逐渐减少,提示巢蛋白在这些器官组织的血管形成过程中起作用。     

人胚胎视皮质神经元发育的体现学分析

实验取自１４例产后死亡的胎儿,胎龄１２～４０周,对其视皮质神经元进行电镜观察及立体计量分析。结果表明：（１）视皮质神经元在发育早期（１２周胎龄）时,可依细胞大小、核及胞质中的细胞器鉴别神经元和神经胶质细胞,（２）视皮质神经元发育过程中,核经例逐渐减少,细胞核体密度逐渐减少,核仁与胞质的体密度呈上升趋热（３）线粒体、粗面内质网、核糖体的体密度呈明显上升趋势,滑面内质网、高尔基复合体及溶酶体的体密度也     

生长抑素在胚胎早期胰及胃肠道发育中的表达及分布

目的:探讨人胚胎早期发育中生长抑素在胰及胃肠道的表达及分布.方法:采用免疫组织化学SABC法对30例7～14周人胚胎胰及胃肠生长抑素阳性细胞进行定位.结果:胚胎7周时胰导管上皮及小肠均未见有生长抑素阳性细胞;9周时,胰导管上皮可见较少的生长抑素阳性细胞,14周时生长抑素阳性细胞增多并开始聚集参与形成胰岛;11周时小肠内才出现生长抑素阳性细胞,阳性细胞分布在小肠黏膜上皮及固有层内,14周时生长抑素阳性细胞明显增多.结论:胚胎早期发育中,分布于胰导管上皮的D细胞其生长抑素的表达早于小肠的D细胞;生长抑素不仅参与胰岛细胞的分化发育,还与胃肠道的内分泌功能形成密切相关.     

人胚胎视皮质神经元发育的体视学分析

实验取自１４例产后死亡的胎儿,胎龄１２～４０周,对其视皮质神经元进行电镜观察及立体计量分析。结果表明：（１）视皮质神经元在发育早期（１２周胎龄）时,可依细胞大小、核及胞质中的细胞器鉴别神经元和神经胶质细胞;（２）视皮质神经元发育过程中,核质比例逐渐减小,细胞核体密度逐渐减少,核仁与胞质的体密度呈上升趋势（３）线粒体、粗面内质网、核糖体的体密度呈明显上升趋势,滑面内质网、高尔基复合体及溶酶体的体密度也有不同程度的上升。     

大鼠脑干一氧化氮合成酶阳性神经元的分布及发育

实验用依赖还原型辅酶Ⅱ的黄递酶酶组织化学方法。研究了一氧化氮合成酶阳性神经元在大鼠脑干的分布及发育。结果；一氧化氮合成酶阳性神经元在各日龄大鼠的分布上没有明显差别。一氧化氮合成酶阳性神经元主要集中在上丘浅灰质层，中脑水管周围灰质背外侧部，中缝背核，被盖背外侧核，中缝大核，三叉神经脊束核等部位。     

微管相关蛋白2和巢蛋白在人胚胎小肠中的表达

目的: 探讨微管相关蛋白2(MAP-2)和巢蛋白(nestin)与人胚胎小肠壁组织发育的关系。 方法: 应用免疫组织化学PV法和图像分析(NIS-DR)软件检测第2、3、4个月龄段,人胚胎小肠组织内MAP-2和nestin的表达分布规律,数据的组间比较采用单因素方差分析。 结果: 第2、3、4个月龄段,MAP-2主要表达于人胚胎小肠壁黏膜下和肌间神经丛内神经细胞和纤维,随胎龄的增大,肌间神经丛内神经细胞的阳性强度增强, 两两比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。Nestin蛋白在小肠壁各层均有阳性表达,其黏膜下层和肌间神经丛内阳性细胞数量随胎龄增大而呈先增高再降低的趋势,两两比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: MAP-2和nestin参与调节人胚胎小肠壁组织的生长发育过程。     

Nestin及P53在早期胚胎组织中的表达

Nestin(巢蛋白)为神经干细胞的表面标志,在其他组织的前体细胞中也有表达。Nestin作为一种细胞骨架蛋白,在细胞分化结束时表达下降。P53基因具有特异的转录激活作用和肿瘤抑制作用,与生长发育有关。在胚胎发育尤其是早期胚胎发育过程中,Nestin及P53的作用还未见相关的报道。本研究采用免疫组织化学的方法对胚胎早期肝、肾上腺,椎间盘器官组织中Nestin及P53的表达情况进行了研究。     

Differentiation of embryonic stem cells conditionally expressing neurogenin 3

Expression of the proendocrine gene neurogenin 3 (Ngn3) is required for the development of pancreatic islets. To better characterize the molecular events regulated by Ngn3 during development, we have determined the expression profiles of murine embryonic stem cells (mESCs) uniformly induced to overexpress Ngn3. An mESC line was created in order to induce Ngn3 by adding doxycycline to the culture medium. Genome-wide microarray analysis was performed to identify genes regulated by Ngn3 in a variety of contexts, including undifferentiated ESCs and differentiating embryoid bodies (EBs). Genes regulated by Ngn3 in a context-independent manner were identified and analyzed using systematic gene ontology tools. This analysis revealed Notch signaling as the most significantly regulated signaling pathway (p = .009). This result is consistent with the hypothesis that Ngn3 expression makes the cell competent for Notch signaling to be activated and, conversely, more sensitive to Notch signaling inhibition. Indeed, EBs induced to express Ngn3 were significantly more sensitive to gamma-secretase inhibitor-mediated Notch signaling inhibition (p < .0001) when compared with uninduced EBs. Moreover, we find that Ngn3 induction in differentiating ESCs results in significant increases in insulin, glucagon, and somatostatin expression.     

微管相关蛋白2、巢蛋白与人胚胎食管肌层发育的关系

目的: 探讨微管相关蛋白2(MAP-2)和巢蛋白(nestin)与人胚胎食管肌层发育关系。方法: 应用免疫组织化学PV法检测第2、3、4月龄段人胚胎食管组织内MAP-2和nestin的表达分布规律。结果: 第2、3、4月龄段,MAP-2在食管肌层的肌细胞呈阴性表达,肌间神经丛内神经细胞处呈阳性表达;nestin在第2-3月龄食管肌层的肌细胞处呈阳性表达,到第4月龄转阴性表达;而在食管肌间神经丛内大部分神经细胞,第2-4月龄段呈弱阳性或阴性表达。结论: MAP-2和nestin可能参与调节人胚胎食管肌层的形成过程。     

转录因子Nkx2.5、ISL-1表达与小鼠胚胎心的早期发育

目的:探讨转录因子Nkx2.5和ISL-1的表达与小鼠胚胎早期心发育的关系.方法:胚龄7.5～13d小鼠胚胎连续石蜡切片,用抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、抗心肌肌球蛋白重链(MHC)、抗转录因子ISL-1、抗Nkx2.5抗体,进行免疫组织化学显色.结果:转录因子Nkx2.5在胚龄7.5d生心板表达早于心肌特异性蛋白MHC及SMA.随心外形建立,Nkx2.5在心各部表达逐渐增强.胚龄9d, Nkx2.5阳性表达从原始心管动脉端延伸至心包腔背侧脏壁中胚层及咽周围轴旁中胚层.Isl-1开始表达于胚龄8d原始心管心背系膜及前肠腹侧脏壁中胚层间充质,阳性细胞数量在11～12d达顶峰,形成前肠腹侧连接流出道远端和心房背侧壁的ISL-1阳性细胞带.11～12d,流出道远端出现Nkx2.5和MHC阴性,ISL-1、SMA阳性表达区.胚龄13d后,Nkx2.5和ISL-1在心和前肠腹侧间充质的表达强度下降.结论:Nkx2.5是原始生心区心肌前体细胞早期分化的标记蛋白,在第2生心区表达限于胚龄9d、咽周脏壁和轴旁中胚层心肌前体细胞亚群.第2生心区标记蛋白ISL-1主要表达在胚龄8～12d前肠腹侧脏壁中胚层心肌前体细胞,并向心管添加心肌细胞,参与流出道发育及心管成襻.11d后,第2生心区间充质细胞开始分化为升主动脉和肺动脉干平滑肌.     

哺乳动物早期胚胎发育研究进展和伦理

早期胚胎发育关乎生命健康本源。解析人类早期胚胎发育调控机制可从源头提升人口健康,提高人口素质,从而促进经济社会可持续发展。然而,受限于技术和伦理,人类早期胚胎发育调控机制尚未得到全面解析。近年来,随着哺乳动物胚胎体外培养和“类胚胎”等技术的发展,人类进入解开自身早期胚胎发育之谜的最好时代,同时也迎来了新一轮伦理挑战。本文系统地回顾了以啮齿类和灵长类为主的哺乳动物早期胚胎发育领域的研究进展,探讨了人类胚胎研究相关的伦理争议,展望了早期胚胎发育研究的发展方向,希冀为人类认知早期胚胎发育事件和出生缺陷及多种发育源性疾病的发病机制与诊疗提供新思路和新手段。     

细胞生长因子微环境与早期胚胎发育

BACKGROUND: Early mammalian embryonic development and implantation is a very complex process, which is regulated by a variety of cytokines. Moreover, epidermal growth factor, transforming growth factor, leukemia inhibitory factor, insulin-like growth factor and vascular endothelial growth factor play an important role in this regulation process. OBJECTIVE: To introduce cytokines related to early embryonic development, including types, structural features and molecular mechanisms, and meanwhile to review the effects of epidermal growth factor, transforming growth factor, leukemia inhibitory factor, insulin-like growth factor and vascular endothelial growth factor in the early embryonic development. METHODS: A literature retrieval was performed to search relevant articles published from 1989 to 2015 using the keywords of “embryos development, epidermal growth factor, transforming growth factor, leukemia inhibitory factor, insulin-like growth factor, vascular endothelial growth factor”. Active effects of these five kinds of cytokines in overcoming the mammalian embryonic development block were reviewed and summarized to provide theoretical and experimental basis for further optimization of the embryonic culture system in vitro. RESULTS AND CONCLUSION: Cell growth factors involved in embryonic development is the focus of the study. Insulin-like growth factor is capable of promoting the embryonic growth; epidermal growth factor exhibits multiform functions in the embryonic development; leukemia inhibitory factor directly affects oocyte cell development, and progesterone increases the expression of leukemia inhibitory factor to provide a good cytokine microenvironment for embryonic development; vascular endothelial growth factor promotes in vitro oocyte maturation, and plays a very important role in various stages of embryonic development. To clarify these regulatory patterns of cytokines cannot only contribute to in vitro embryonic culture, but also reduce embryonic apoptosis, which is of great significance for promoting embryonic development.       

Essential role for Max in early embryonic growth and development

Loss of Max function in the mouse resulted in generalized developmental arrest of both embryonic and extraembryonic tissues at early postimplantation (approximately E5.5-6.5), coincident with loss or dilution of maternal Max stores in the expanding embryo in vivo and in blastocyst outgrowths in vitro. Developmentally arrested embryos were reduced in size and exhibited widespread cytological degeneration and feeble BrdU incorporation. Max and, by extension, the Myc superfamily, serve essential roles in early mammalian development and a maternal reservoir of Max exists in sufficient amount to sustain Myc superfamily function through preimplantation stages of development.