辣椒素对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨辣椒素对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、肾缺血/再灌注损伤组(IRI)和辣椒素组(Capsaicin,CPS)。通过夹闭左侧肾蒂,去除右肾构建肾缺血再灌注损伤模型。ELISA检测血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素(IL)-6的含量;HE染色检测肾脏病理形态;Western blotting检测肾脏JAK2,STAT3、p-JAK2、p-STAT3、p-p65和p65的表达;RTPCR检测IL-6、IL-1β和TNF-α的信使RNA水平。结果:辣椒素预处理可增加p-JAK2和p-STAT3的表达明显,减少肾脏病理形态的改变以及下调Cr、BUN、p-p65、IL-6、IL-1β和TNF-α表达,但对JAK2、STAT3和p65表达无影响。结论:辣椒素对肾脏缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制与促进JAK2/STAT3信号通路激活而抑制NF-κB信号通路激活介导的炎症相关。     

氢吗啡酮预处理对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的影响

目的观察氢吗啡酮预处理对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的影响,并探讨其作用机制。方法SPF级SD大鼠48只,随机分为假手术组(C组)、缺血-再灌注组(IR组)、氢吗啡酮组(H组)和吗啡组(M组),每组12只。采用前房加压灌注的方法制备视网膜缺血-再灌注损伤模型。于缺血前15 min,H组颈内静脉注射氢吗啡酮0.1mg/kg,M组注射吗啡1mg/kg,C组和IR组注射等容量生理盐水。再灌注24 h后,取大鼠视网膜组织,采用HE染色法观察病理学变化,测定视网膜内层厚度及全层厚度;采用TUNEL法计算细胞凋亡指数(AI);采用免疫组化法检测Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白含量;采用ELISA法检测TNF-α、IL-6浓度;采用硫代巴比妥酸及黄嘌呤氧化酶法分别检测MDA浓度和SOD活性。结果与C组比较,IR组视网膜出现病理学损伤,AI明显升高(P<0.05);Bax、caspase-3蛋白含量明显升高,Bcl-2蛋白含量和Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05);TNF-α、IL-6和MDA浓度明显升高(P<0.05),SOD活性明显减弱(P<0.05)。与IR组比较,H组和M组视网膜组织病理学损伤明显减轻,AI明显降低(P<0.05);Bax、caspase-3蛋白含量明显降低,Bcl-2蛋白含量明显升高,Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.05);TNF-α、IL-6和MDA浓度明显降低,SOD活性明显增强(P<0.05)。结论氢吗啡酮可减轻大鼠视网膜缺血-再灌注损伤,其机制可能与改善视网膜细胞凋亡、炎症反应及氧化应激相关。     

氯胺酮对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨氯胺酮对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠24只,随机分为4组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、氯胺酮2 ms/kg组(K_1组)及氯胺酮10 mg/kg组(K_2组).采用无创动脉夹夹闭左肾动脉45 min,再灌注6 h,制备大鼠肾脏缺血再灌注模型.K_(1,2)组于再灌注前5 min分别经尾静脉注射氯胺酮2、10 mg/kg.于再灌注6 h时取右心耳血样2 ml,测定血清肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)的浓度;光镜下观察肾组织病理学结果 ;采用免疫组织化学法测定肾组织Fas或Caspase-3表达水平;采用TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡情况,并计算凋亡指数(AI).结果 与S组比较,其余3组血清Cr、BUN的浓度升高,肾组织Fas、Caspase-3的表达上调,AI升高(P<0.01);与IR组比较,K_(1,2)组血清Cr、BUN的浓度降低,肾组织Fus、Caspase-3的表达下调,AI降低(P<0.01);与K_1组比较,K_2组血清Cr、BUN浓度降低,肾组织Fas、Caspase-3的表达下调,AI降低(P<0.01).K_2组肾组织病理损伤较K_1组明显减轻.结论 氯胺酮可减轻肾脏缺血再灌注损伤,且呈剂量依赖性,可能与其抑制肾小管上皮细胞凋亡有关.     

参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤后肠黏膜细胞凋亡的影响

目的：研究参附注射液对大鼠肠缺血再灌注期间黏膜上皮细胞凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法：采用大鼠肠缺血再灌注模型。24只大鼠随机分为假手术对照组（C组）、缺血再灌注组（I／R组）和参附治疗组（SF组），在规定时间检测小肠黏膜上皮细胞caspase-3、Bcl-2蛋白的表达，凋亡细胞数目，同时观察小肠黏膜病理形态学改变。结果：IR组肠黏膜上皮细胞凋亡指数（apoptosisindex,AI）、caspase-3、Bcl-2蛋白显著高于C组（P〈0．01）。SF组AI、caspase-3蛋白低于IR组（P〈0.01或P〈0．05），而Bcl-2蛋白较IR组上调（P〈0．01）。caspase-3表达与AI呈正相关（r=0，914，P〈0，01）；Bel-2的表达与AI、caspase-3呈直线负相关（r分别=-0．375，-0．367，P〈001）。SF组小肠黏膜病理损伤程度较I／R组明显减轻（P〈0.01）。结论：参附注射液通过抑制caspase-3表达和促进Bcl-2基因表达减少缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡。从而一定程度上减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。     

FK409对大鼠肝脏移植缺血再灌注损伤后JAK2/STAT3信号通路的影响

目的 探讨FK409对人鼠肝脏移植缺血再灌注损伤后细胞凋亡及JAK2,STAT3表达的影响.方法雄性SD 大鼠60只,随机分为假于术组、牛理盐水干预组、FK409干预组,采用Kamada's袖套法建立大鼠原位肝移植模型.干预组于新肝开放前分别鼠尾静脉注射FK409 2 mg/kg或等量生理盐水,于24 h后RT-PCR及免疫组织化学方法检测JAK2,STAT3表达水平的变化;利用原位缺口未端标记法(TUNEL法)研究肝细胞凋亡的变化.结果 与生理盐水干预组相比,FK409干预组JAK2,STAT3表达明显减少(P＜0.05);凋亡细胞也减少(P＜0.05).结论 FK409尚能通过抑制与炎性细胞因子及氧化应激有密切关系的JAK2/STAT3信号转导通路显著减轻大鼠肝移植缺血再灌注损伤后组织损伤.     

促红细胞生成素对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的保护作用研究

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的保护作用及机制。方法将30只雄性SD大鼠随机均分成假手术组、模型组和EPO组,每组10只。EPO组在术前1h给予腹腔注射促红细胞生成素(1 000U/kg),假手术组和模型组则给予等体积生理盐水腹腔注射。EPO组和模型组夹闭左侧肾蒂45min,去除右肾,再灌注24h构建大鼠肾脏IRI模型;假手术组操作同上,但不夹闭左侧肾蒂。恢复肾脏血流灌注24h后收集大鼠肾脏和血清。采用酶联接免疫吸附剂检测血肌酐(SCr),尿素氮(BUN)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、干扰素(inteferon gamma,IFN-γ)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factors-α,TNF-α)以及抗炎细胞因子白介素10(IL-10)和转化细胞生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达;逆转录聚合酶链反应检测肾脏IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-10和TGF-β的mRNA水平;免疫蛋白印记法检测促红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)、磷酸化促红细胞生成素受体(pEPOR)、酪氨酸激酶-2(JAK2)、信号转导及转录激活子3(STAT3)、磷酸化酪氨酸激酶-2(p-JAK2)、磷酸化信号转导及转录激活子3(p-STAT3)表达水平;过雪夫染色检测肾组织病理形态。结果与假手术组相比,模型组p-EPOR、p-JAK2、p-STAT3、SCr、BUN、IL-6、TNF-α、IFN-γ表达水平以及肾组织病理改变均明显增加,而IL-10和TGF-β表达明显减少以及EPOR、JAK2和STAT3表达无差异;与模型组相比,EPO组p-EPOR、p-JAK2、p-STAT3、IL-10和TGF-β表达增加,而SCr、BUN、IL-6、TNF-α、IFN-γ表达水平以及肾组织病理改变明显减少,而EPOR、JAK2和STAT3表达依然无差异。结论 EPO预处理可通过抑制炎症减轻肾脏IRI,其作用机制与进一步促进EPOR/JAK2/STAT3信号途径活化相关。     

JAK2-STAT3通路在舒芬太尼后处理减轻犬心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价Janus激酶2-信号转导与转录激活子(JAK2- STAT3)通路在舒芬太尼后处理减轻犬心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康杂种家犬24只,雌雄不拘,体重10～15 kg,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=6):假手术组(S组);心肌缺血再灌注损伤组(I/R组),结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min;舒芬太尼后处理组(PO组),再灌注前5min时经5 min静脉输注舒芬太尼0.6 μg/kg;舒芬太尼后处理+AG490组(AG组),再灌注前5min时静脉注射JAK2抑制剂AG490 1 mg/kg后经5 min静脉输注舒芬太尼0.6 μg/kg.于再灌注120 min时取缺血部位心肌标本,光镜下观察病理学结果,采用免疫组化法测定心肌细胞caspase-3和磷酸化STAT3(p- STAT3)的表达,采用TUNEL法测定心肌细胞凋亡指数.结果 与S组比较,I/R组、PO组和AG组心肌细胞凋亡指数、caspase-3及p-STAT3的表达均升高(P＜0.05);与I/R组比较,PO组和AG组心肌细胞凋亡指数和caspase-3表达降低,PO组p-STAT3表达升高,AG组p-STAT3表达降低(P＜0.05);与PO组比较,AG组心肌细胞凋亡指数和caspase-3表达升高,p-STAT3表达降低(P＜0.05).PO组心肌病理学损伤较I/R组和AG组减轻.结论 JAK2-STAT3通路参与了舒芬太尼后处理减轻犬心肌缺血再灌注损伤.     

静脉注射含饱和氢气生理盐水减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 研究静脉注射含饱和氢气生理盐水对小鼠肾脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制.方法 健康、雄性的C57BL/6小鼠随机分为3组,每组10只.假手术组(SO组)小鼠仅接受中线开腹、双侧肾蒂游离及关腹操作;缺血再灌注组(IR组)小鼠用无损伤动脉夹同时钳夹双侧肾蒂,阻断45 min,制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射生理盐水,5 ml/kg;实验组小鼠制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射含饱和氢气生理盐水,5 ml/kg.各组小鼠于肾脏再灌注6 h时检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr);检测肾组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的含量;观察肾脏组织形态学变化并检测肾小管上皮细胞的凋亡情况;观察肾组织中巨噬细胞的浸润情况;检测各组小鼠肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和IL-17 mRNA的水平.结果 实验组血清BUN和Scr水平明显低于IR组(P<0.05).实验组肾组织病理改变较IR组明显减轻,其肾小管损伤评分明显低于IR组(P<0.01),肾小管上皮细胞凋亡明显轻于IR组(P<0.05).实验组肾组织内MDA含量低于IR组(P<0.05).实验组小鼠肾组织内中性粒细胞和巨噬细胞的浸润较IR组减少(P<0.05).实验组TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-17mRNA的水平均低于IR组(P<0.05).结论 静脉注射含饱和氢气生理盐水能够在一定程度上减轻肾脏IR损伤,其机制可能与抑制肾脏IR后炎症反应有关.     

PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路在α7nAChR激动剂后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路在α7亚基烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)激动剂后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠60只,体重290～ 320 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=15):缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IPC组)、缺血后处理组(IPOC组)和α7nAChR激动剂后处理组(PNU组).4组采用结扎左冠状动脉前降支30 min时进行再灌注的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型.IPC组进行缺血预处理,缺血5min再灌注5min,共3个循环,IPOC组再灌注前进行缺血后处理,再灌注10 s缺血10s,共3个循环.PNU组再灌注前即刻腹腔注射特异性α7nAChR激动剂PNU282987 2.4 mg/kg.再灌注60 min时取5只大鼠,取心肌组织,测定Akt mRNA、STAT3 mRNA、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化STAT3( p-STAT3)的表达水平.再灌注180 min时取10只大鼠,取心肌组织,测定心肌梗死面积.结果 与I/R组比较,IPC组心肌组织STAT3 mRNA和p-Akt表达上调,IPOC组心肌组织p-Akt和p-STAT3表达上调,PNU组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05),IPC组、IPOC组和PNU组心肌梗死面积缩小(P＜0.05).结论 α7nAChR激动剂后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与PI3K/Akt和JAK/STAT两条信号转导通路无关.