大黄素甲醚调节miR-370诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的：观察大黄素甲醚调节miR-370诱导肝细胞癌（HCC）细胞的凋亡情况,并探讨其作用机制。 方法：将大黄素甲醚作用于SMMC7721和HepG2两组HCC细胞,使用TaqMan探针用实时定量PCR法检测miR-370的表达;用Western blot检测Sp1和DNMT1相应的蛋白表达水平。 结果：大黄素甲醚抑制肝细胞癌细胞增长和诱导凋亡。肝细胞癌细胞中通过上调miR-370造成大黄素甲醚诱导型细胞凋亡。大黄素甲醚处理的细胞中通过miR-370抑制剂抑制miR-370水平能明显降低凋亡细胞的百分比（P<0.01）。大黄素甲醚通过AMPK/Sp1/DNMT1信号调节miR-370的水平（P<0.01）。AMPK/Sp1/DNMT1信号参与大黄素甲醚诱导的HCC细胞凋亡。 结论：大黄素甲醚通过上调miR-370诱导HCC细胞凋亡,通过调节AMPK/Sp1/DNMT1信号通路对miR-370发挥调节作用。     

长链非编码RNA ZFAS1在食管癌中的表达及作用机制研究

目的探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1（zinc finger antisense 1,ZFAS1）在食管癌中的表达及作用机制。方法采用实时荧光定量PCR法分别检测癌旁组织和食管癌组织、正常食管上皮细胞和食管癌细胞的ZFAS1表达水平,通过细胞增殖活性检测、细胞划痕实验及流式细胞仪检测细胞凋亡技术,评价干扰食管癌细胞表达ZFAS1对细胞增殖、迁移及凋亡的影响,采用荧光素酶报告基因验证微小RNA（microRNA,miRNA）miR-302b-3p是ZFAS1的作用靶点,Western蛋白印迹法检测ZFAS1及miR-302b-3p作用下c-Jun氨基末端激酶2（c-Jun N-terminal kinase 2,JNK2）、胰岛素样生长因子1受体（insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R）、白细胞介素-1受体相关激酶4（interleukin-1 receptor-associated kinase 4,IRAK-4）和上皮细胞激酶（epithelial cell kinase 2,EphA2）蛋白的表达变化。结果与癌旁组织相比,食管癌组织表达ZFAS1水平升高（t=19.40,P<0.001）,与正常食管上皮细胞相比,食管癌细胞表达ZFAS1水平增加（t=13.80,P<0.001）,通过抑制细胞表达ZFAS1发现,与NC干扰组相比,显著降低ZFAS1干扰组细胞增殖活性（t值分别=2.933,8.568,10.04,均P<0.05,）及迁移能力（t=13.96,P<0.001）,且细胞凋亡率升高（t=10.68,P<0.001）。ZFAS1可通过靶向miR-302b-3p调节JNK2、IGF-1R、IRAK4和EphA2蛋白的表达。结论ZFAS1在食管癌组织中表达显著增加,具有促进食管癌细胞增殖、迁移,抑制凋亡的能力,且ZFAS1可通过靶向miR-302b-3p激活JNK2、IGF-1R、IRAK4和EphA2,有望成为治疗食管癌的潜在靶点。     

长链非编码RNA肿瘤抑制因子对阿霉素诱导的A549细胞凋亡的影响

目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)对阿霉素（doxorubicin,DOX）诱导的肺癌细胞系A549细胞凋亡的影响。方法 采用高通量lncRNAs基因芯片技术,筛选出2 μmol/L的DOX处理组中差异表达的lncRNAs,同时通过实时荧光定量PCR技术进行复筛,得到差异表达最显著的lncRNA,lnc-ZMYM6-2-1,我们命名为lncRNA肿瘤抑制因子（tumor inhibitory factor,TIF）。进一步比较19对肺癌组织和癌旁组织样本中lncRNA TIF的表达差异。通过MitoTracker线粒体染色法检测lncRNA TIF对细胞线粒体分裂与融合的影响,通过流式细胞仪检测lncRNA TIF对细胞凋亡的影响。结果 ①通过基因芯片与实时荧光定量PCR检测发现,与不做处理的对照组相比,DOX处理组中lncRNA TIF表达显著上调（n=3;t=6.4,P<0.01）;②与癌旁组织比较lncRNA TIF在肺癌组织样本中低表达（n=19;t=18.5,P<0.01）;③敲低lncRNA TIF能够抑制DOX引起的线粒体分裂和细胞凋亡。结论 化疗药物DOX能够诱导lncRNA TIF的表达进而诱导细胞凋亡,其机制可能通过促进线粒体分裂来促进细胞凋亡。     

IL-34对食管鳞癌细胞增殖、凋亡和迁移的作用研究

目的 研究白细胞介素-34(interleukin 34, IL-34)在食管鳞癌中的表达及其对食管鳞癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 采用免疫组织化学染色检测IL-34在食管鳞癌组织标本中的表达情况,采用qRT-PCR法探究IL-34在不同食管鳞癌细胞系中mRNA表达水平。利用慢病毒感染,过表达食管鳞癌细胞系ECA-109中IL-34,高内涵筛选后通过Celigo细胞计数检测细胞增殖能力,通过流式细胞术检测细胞凋亡能力,通过划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力。结果 癌组织中IL-34水平高于正常组织,但由于临床样本过少差异无统计学意义(P>0.05);食管鳞癌细胞系中IL-34的mRNA水平显著高于正常食管上皮细胞(P<0.01)。IL-34过表达可显著减少ECA-109细胞凋亡,促进其增殖和迁移(P<0.01)。结论 IL-34在食管鳞癌中过表达,并与食管鳞癌细胞的增殖、迁移和凋亡显著相关,可能成为食管鳞癌新的标志物。     

PBK/TOPK表达对膀胱癌BIU-87细胞增殖及迁移能力的影响

目的 探讨PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶（PDZ-binding kinase/T-LAK cell-originated protein kinase,PBK/TOPK）在膀胱癌中的表达及其表达对BIU-87细胞增殖及迁移能力的影响。方法 采用实时定量PCR及免疫印迹试验检测40例配对膀胱癌及癌旁正常组织中PBK/TOPK的表达,随后,分别干扰及过表达PBK/TOPK在BIU-87细胞中的表达,检测PBK/TOPK表达对细胞增殖及迁移能力的影响。结果 实时定量PCR及免疫印迹试验检测结果一致表明PBK/TOPK在膀胱癌中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。干扰PBK/TOPK表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力明显下降(P<0.05);而PBK/TOPK过表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力明显增强(P<0.05)。结论 PBK/TOPK在膀胱癌组织中,其表达有助于膀胱癌细胞的增殖及迁移。     

IL-17在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义

目的探讨白细胞介素17（IL-17）在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测25例正常卵巢组织、25例良性卵巢肿瘤与25例卵巢上皮性癌原发灶中IL-17蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测患者术前、术后1周外周血中IL-17水平。结果卵巢癌患者癌组织中IL-17表达强度和外周血中IL-17水平均明显高于正常对照组和卵巢良性肿瘤组（P〈0.01）;卵巢癌患者术后血清IL-17水平比术前显著下降（P〈0.01）。术前血清IL-17水平在卵巢癌组织学类型中无显著性差异（P〉0.05）;Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者术前血清IL-17水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者,差异有统计学意义（P〈0.05）;高中分化卵巢癌患者术前血清IL-17水平显著低于低分化患者,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论上皮性卵巢癌组织中IL-17表达上调,IL-17在上皮性卵巢癌的生长和转移过程中发挥重要作用。     

miR-205在宫颈鳞癌中的表达及其对癌细胞迁移、侵袭能力的影响

目的 筛选宫颈癌中差异表达的微小RNA（miRNA,miR）,探讨关键miRNA对宫颈癌发生发展的作用及其机制。方法 采用生物信息学方法分析并以差异倍数>2.5及_P<0.01为条件筛选宫颈鳞癌中差异表达的miRNA;采用原位杂交和qRT-PCR分别检测miR-205及白细胞介素（IL）-32的表达;采用CCK-8法检测细胞增殖活力;应用Transwell模型评价细胞迁移及侵袭能力;利用Western blotting检测侵袭相关基质金属蛋白酶（MMP）-2及MMP-9蛋白的表达量。结果 生物信息学分析获得宫颈鳞癌中差异表达的miRNA 106个,其中70个上调,36个下调;其中miR-205的表达量变化最大。原位杂交及qRT-PCR结果表明,miR-205在宫颈鳞癌细胞中的表达量明显高于癌旁组织（_P<0.05）。miR-205可明显提升宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力（_P<0.05）。在宫颈癌细胞系HeLa及SiHa细胞中,过表达miR-205可增强IL-32的表达,降低_{miR-205表...}     

乳腺癌缺失基因1对肝癌生物学行为的影响

目的探讨乳腺癌缺失基因1（deleted in breast cancer 1,DBC1）对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法构建pcDNA3.1-DBC1的正义表达载体,转染肝癌细胞SMMC-7721,MTT法检测DBC1对肝癌细胞SMMC-7721生长增殖的影响,采用流式细胞术（FCM）检测DBC1对肝癌细胞SMMC-7721的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果与转染空载体的SMMC-7721细胞相比,pcDNA3.1-DBC1正义表达载体转染上调DBC1的表达,可显著抑制肝癌细胞（SMMC-7721）增殖,升高G1期细胞比例（51.0%vs 64.9%,P=0.002）,降低S期细胞比例（29.7%vs 14.0%,P〈0.001）,诱导细胞凋亡（8.8%vs 24.6%,P〈0.001）。结论 DBC1通过抑制肿瘤细胞增殖,阻滞细胞周期进展,促进细胞凋亡,抑制肝癌的发生和发展。     

石榴籽油抑制乳腺癌细胞恶性生物学行为的研究

目的：研究石榴籽油与乳腺癌细胞增殖、凋亡行为之间的关系。方法使用气相色谱法检测油脂脂肪酸组成成分;使用乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231两种细胞系进行干预,MTT法观察细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western 印迹法检测细胞内相关增殖及凋亡蛋白的表达。结果石榴籽油中主要的脂肪酸为石榴酸（74．41％）;石榴籽油可抑制两种乳腺癌细胞系的增殖,显著导致其细胞凋亡,与对照组相比,差异具有显著性意义;石榴籽油可显著下调细胞中Cox-2、Bcl-2的表达水平,上调Bax、胱天蛋白酶（caspase）-3（酶解）的表达水平,上调MCF-7中P53的表达水平或下调在MDA-MB-231中的表达水平。结论石榴籽油中的石榴酸可能是抑制乳腺癌细胞恶性生物学行为的功能性物质,石榴籽油抑制乳腺癌细胞增殖活性,促进其凋亡作用可能是通过调节细胞中Cox-2、Bcl-2、Bax、胱天蛋白酶-3（酶解）以及P53的表达来实现的。     

肌细胞增强因子2D通过负向调控有丝分裂诱导基因6的表达促进肝癌细胞PLC/PRF5和SMMC7721的增殖和迁移

目的观察肌细胞增强因子2D（myocyte enhancer factor 2D,MEF2D）对肝癌细胞PLC/PRF5和SMMC7721增殖和迁移的影响,并探究其是否通过负调控有丝分裂诱导基因6（mitogen induced gene 6,MIG6）的表达发挥作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应技术分别检测肝癌细胞中MEF2D和MIG6转录水平的表达,以MEF2D mRNA表达量作为横坐标,以MIG6 mRNA表达量作为纵坐标,制作线性相关图;用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）在PLC/PRF5细胞中下调MEF2D和MIG6后,通过细胞增殖与毒性测定试剂盒（7Sea-Cell Counting Kit,7Sea-CCK）和细胞划痕法检测肝癌细胞增殖和迁移能力;用siRNA在PCL/PRF5细胞中下调MEF2D、用MEF2D过表达质粒在SMMC7721细胞系中上调MEF2D后,通过蛋白印迹检测法分别检测MEF2D和MIG6的蛋白质表达水平。根据实验,共分为阴性对照（negative control,NC）组、siMIG6组、siMEF2D组、si2M（同时下调MIG6和MEF2D）组、空白对照组、空载对照组、MEF2D组7组。结果肝癌细胞hcclm3、SMMC7721、PLC/PRF5、HepG2、7703、Huh7、Bel-7402中MEF2D mRNA、MIG6 mRNA表达水平呈现负相关关系（r=-0.78）。细胞增殖实验,24 h和48 h时,下调MIG6或MEF2D后,与NC组比较,siMIG6组或siMEF2D组中PLC/PRF5细胞增殖能力无显著变化;同时下调MIG6和MEF2D后,与siMEF2D组比较,si2M组中PLC/PRF5细胞增殖能力无显著变化。72 h时,各组间方差分析差异有统计学意义（F=20.68、P<0.01）;下调MIG6后,与NC组比较,siMIG6组中PLC/PRF5细胞增殖能力显著增强[光密度（optical density,OD）值为3.73±0.18,t=3.84、P=0.02];下调MEF2D后,与NC组比较,siMEF2D组中PLC/PRF5细胞增殖能力显著下降（OD=1.79±0.22,t=3.95、P=0.02）;同时下调MIG6和MEF2D后,与siMEF2D组比较,si2M组中PLC/PRF5细胞增殖能力增强（OD=2.99±0.03,t=4.83、P<0.01）。细胞划痕实验,各组间方差分析差异有统计学意义（F=42.27、P<0.01）;48 h时,下调MIG6后,与NC组比较,siMIG6组中PLC/PRF5细胞迁移能力显著增强[细胞迁移率为（51±4）%,t=3.22、P<0.05）];下调MEF2D后,与NC组比较,siMEF2D组中PLC/PRF5细胞迁移能力显著下降[细胞迁移率为（19±3）%,t=7.70、P<0.01];同时下调MIG6和MEF2D后,与siMEF2D组比较,si2M组中PLC/PRF5细胞迁移能力增强[细胞迁移率为（46±3）%,t=6.99、P<0.01]。蛋白质印迹检测,下调MEF2D后,与NC组比较,siMEF2D组中PLC/PRF5细胞MIG6蛋白表达水平显著上升（t=7.86、P<0.001）;上调MEF2D后,与空载对照组比较,MEF2D组中SMMC7721细胞MIG6蛋白表达水平显著下降（t=4.61、P=0.004）。结论肝癌细胞PLC/PRF5和SMMC7721中MEF2D和MIG6表达量呈负相关关系,MEF2D很可能通过负向调控MIG6的表达从而促进肝癌细胞PLC/PRF5和SMMC7721增殖和迁移。     

自身低速旋转与背景旋转对视认知早期加工的协同影响:脑事件相关电位的研究证据

目的 研究自身旋转与视觉背景旋转对视认知早期加工的协同影响.方法 受试者为14名大学生.转椅10°/s旋转,利用模拟星空模式作为背景.背景旋转速度为30°/s,45°/s和60°/s,黑色背景作为对照.在自身和背景旋转同时作用下,受试者完成不反应、方位区分和方位区分心算3种任务.记录12导脑电.结果 1)3种认知任务中...     

延肾制剂对系膜细胞产生ICAM-1和VCAM-1的影响

 目的观察中药复方制剂延肾(以下简称延肾制剂,YSH)对重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β)刺激后体外培养的人肾小球系膜细胞产生细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion moleculeI,ICAM-1)和血管细胞粘附分子-1(Vascular cell adhesion molecule,VCAM-1)的影响,冀以从细胞生物学水平探讨延肾防治慢性肾功能衰竭(Chronic renal failure,CRF)的作用机制.方法采用双抗夹心ELISA法,分别加入重组rhIL-1β及rhIL-1β+YSH大鼠血清.观察体外培养的人肾小球系膜细胞在rhIL-1β刺激后,ICAM-1和VCAM-1的生成及YSH对ICAM-1和VCAM-1生成的影响.结果 rhIL-1β可明显刺激人肾小球系膜细胞产生ICAM-1和VCAM-1,YSH大鼠血清对rhIL-1β刺激后人肾小球系膜细胞所产生的ICAM-1和VCAM-1有抑制作用,其抑制程度与药物浓度有一定的量效关系.结论延肾对rhIL-1β刺激后肾小球系膜细胞所产生的ICAM-1和VCAM-1有明显的抑制作用,提示YSH抑制系膜细胞自分泌ICAM-1和VCAM-1是预防肾小球硬化发生发展的重要作用机制之一.     

抗凋亡蛋白BFL1/hA1研究进展

在细胞凋亡的调控过程中，Bcl-2家族蛋白发挥了关键作用。BFL1／hA1是Bcl-2家族中分子结构、作用途径和转录调控研究得比较深入的一个分子。BFL1／hA1通过与Bcl-2家族促凋亡成员Bid的功能形式tBid的BH3结构域紧密结合，阻止了tBid与促凋亡蛋白Bak和Bax相互作用，从而阻止了细胞色素C向胞质中释放，抑制细胞凋亡的发生。佛波酯（phobol ester）和炎症细胞因子如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）等可以有效地诱导BFL1／hA1的表达。包括NF-κB在内的多种转录因子通过蛋白质和蛋白质及蛋白质和DNA相互作用形成一个大的转录调控复合物——增强体结合到BFL1／hA1基因的5’调控区，促进其转录水平的上调。     

Plk1在胰腺癌细胞中的表达及其临床意义

目的探讨胰腺癌细胞系中Plk1表达的意义。方法以胰腺癌细胞株（AsPC-1、PANC1、BxPC3）和正常胰腺细胞株（HPDE6C7,一种永生但非转化的胰腺上皮细胞来源的细胞株）为研究对象,应用RT-PCR检测Plk1 mRNA的表达,用Western blot检测Plk1蛋白的表达。结果 Plk1 mRNA和Plk1蛋白在胰腺癌细胞中均有高表达,而在正常胰腺细胞株中几乎不表达。结论 Plk1在胰腺癌细胞中的表达具有一定肿瘤特异性,有可能成为胰腺癌治疗的新靶标。     

运动性低血色素形成中大鼠十二指肠铁吸收蛋白HCP1、DMT1及FPN1表达的动态变化

目的:研究运动性低血色素形成中大鼠十二指肠铁转运蛋白血红素转运蛋白1(heme carrier protein 1,HCP1)、二价金属离子转运体1(divalent metal transporter1,DMT1)及膜铁转运蛋白1(ferroportin1,FPN1)表达的动态变化,探讨运动性低血色素的发生机制。方法:36只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和运动组。运动组大鼠进行为期5周、6 d/周、坡度为0、速度30 m/min的递增负荷跑台训练。前2周每天训练1次,时间从1 min开始,每次递增2 min。从第3周开始,每天训练2次。分别于运动第3、4、5周末取材,采用血细胞自动分析仪测定血红蛋白(Hb)含量;Western Blot检测十二指肠上皮细胞HCP1、DMT1及FPN1表达。结果:(1)长时间大强度运动后大鼠Hb含量逐渐降低。运动组3周末Hb与其对照组相比有下降趋势,4周和5周末显著低于其对照组(P<0.05,P<0.01)。(2)运动组大鼠3周末小肠上皮细胞HCP1、DMT1及FPN1表达均显著高于其对照组(P<0.01),4周末与其对照组相比均无显著差异(P>0.05),5周末均显著低于对照组(P<0.01)。结论:大强度运动开始阶段,机体通过增加肠铁吸收维持运动机体对铁的需求,随运动时间延长,机体肠铁吸收能力降低,这是引发运动性低血色素的重要原因之一。     

CHK1、RAD51在结肠癌中的表达及意义

目的研究CHK1、RAD51在结肠癌中的表达及其临床病理参数的关系。方法选取45例外科手术切除结肠癌标本及15例距病灶3～5cm的癌旁正常肠粘膜组织,10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,每个标本行连续切片,厚4μm,应用SABC三步法,用CHK1、RAD51单克隆抗体对结肠癌组织切片进行染色,采用χ2检验或Fisher精确检验对CHK1、RAD51在结肠癌中的表达及其临床病理参数的关系进行研究。结果CHK1、RAD51在结肠癌组织及癌旁正常肠粘膜组织中的表达水平增高,在结肠腺瘤恶变及结肠癌的发生发展过程中起重要作用,结肠癌组织中的CHK1、RAD51表达无相关性。结论RAD51的表达与结肠癌的发生发展、浸润转移及预后有密切关系。     

XRCC1单核苷酸多态性与鼻咽癌放疗近期 疗效的相关性分析

目的 探讨XRCC1单核苷酸多态性与鼻咽癌放疗敏感性的关联性。 方法 放疗前采鼻咽癌患者静脉血,用多聚链酶反应-高温连接酶反应(PCR-LDR)进行XRCC1Arg399Gln基因的分型,观察各型放疗中及放疗后3个月的疗效。结果 放疗中期Gln/Gln基因型的肿瘤退缩率为0.855±0.026,显著高于Arg/Gln基因型的0.386±0.183和Arg/Arg基因型的0.377±0.169,差异有统计学意义( F =11.16, P =0.0003);XRCC1 Codon399Gln/Gln型放疗后3个月CR达100%,Arg/Gln型为76.2%,Arg/Arg型为66.7%,三者差异无统计学意义。结论 XRCC1Codon399基因型可以预测鼻咽癌放疗中期的局部疗效。     

KAI1基因外源性过表达对胆管癌细胞层黏素受体的影响

目的研究KAI1基因外源性过表达对胆管癌细胞层黏素受体(LNR)表达的影响。方法体外培养人胆管癌QBC939细胞,分为两组:转染空载体pIRES2-EGFP对照组和转染重组真核载体pIRES2-EGFP-KAI1实验组。采用脂质体转染法分别将空载体和重组真核载体转染到QBC939细胞,经G418筛选,得到阳性克隆细胞株。通过RT-PCR、Western blotting和细胞免疫组化法,分别检测KAI1、LNR的mRNA及蛋白表达水平。结果实验组的KAI1 mRNA、蛋白表达量(分别为0.49±0.071、.06±0.05)均显著高于对照组(分别为0.22±0.02、0.59±0.02,P<0.01);实验组的LNR mRNA、蛋白表达量(分别为0.38±0.04、0.29±0.03)均显著低于对照组(分别为0.73±0.05、0.68±0.02,P<0.05)。与对照组比较,实验组KAI1蛋白在胞质的着色明显增强、LNR着色减弱。结论体外胆管癌QBC939细胞过表达KAI1可导致LNR mRNA和蛋白表达下调。     

低氧诱导体外培养绒毛组织sFlT-1表达的实验研究

 目的 探讨低氧对体外培养的绒毛组织可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlT-1)表达的影响.方法 孕早期的绒毛组织体外分两组培养:常氧照组和缺氧组.应用RT-PCR方法检测sFlT-1基因mRNA表达水平,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养液中sFlT-1蛋白水平.结果 与常氧组相比,缺氧组绒毛组织的sFlT-1基因mRNA表达水平增加,sFlT-1蛋白水平也增加.结论 缺氧可以诱导体外培养的绒毛组织sFlT-1基因表达,产生sFlT-1增加.缺氧可能是子痫前期胎盘组织sFlT-1高表达的原因.     

肺癌A549放射抗拒细胞亚系的建立及抗拒机制的研究

目的 建立肺癌细胞系A549的放射抗拒模型并探讨放射抗拒的机制。方法 应用两种方案对非小细胞肺癌A549细胞系进行X射线照射:一组照射5次,每次剂量600 cGy;另一组照射15次,每次剂量200 cGy。照射完成后对存活细胞单克隆化分别命名为A549-S1和A549-S2,采用克隆形成实验测定两种细胞亚系及亲本A549细胞的放射敏感性,流式细胞术检测细胞周期特征,RT-PCR和Western blot分别测定3种细胞Notch1的表达。结果 与亲本A549细胞相比,A549-S1细胞显示出明显放射抗性,D₀、D_q及N值增大,细胞存活曲线肩区增宽,在SF₂水平上,放射抗性是A549的1.38倍,细胞的S期比例较A549细胞明显增高, G₀/G₁期比例下降(P<0.05),Notch1的表达较A549细胞明显增强。而A549-S2的放射敏感性与亲本细胞相比稍增强,D₀、D_q及N值均减小,细胞存活曲线肩区变窄,在SF₂水平上,放射抗性是A549细胞的0.84倍,细胞S期、G₀/G₁期比例较A549细胞减少,而G₂/M期比例明显增加(P<0.05),Notch1表达与亲本A549细胞相比无明显变化。结论 A549细胞亚系放射抗拒的形成与不同照射方案有一定关系,得出的放射抗拒细胞亚系显示出与亲本不同的细胞周期特征,而细胞特征的变化可能与Notch1的表达增强有关。